诊断学血栓与止血检测专家讲座.pptx
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1、第三章第三章 血栓与止血检测血栓与止血检测 Detection of Thrombosis and Hemostasis诊断学血栓与止血检测第1页血管中流动血液为何不凝固?血管中流动血液为何不凝固?血管中流动血液为何不凝固?血管中流动血液为何不凝固?破损血管为何能止血?破损血管为何能止血?破损血管为何能止血?破损血管为何能止血?抗凝血凝血凝血纤溶纤溶纤溶抑制 亢进 减弱 减弱 亢进 血栓形成 出血不止动态平衡诊断学血栓与止血检测第2页正常止血机能正常止血机能两个方面两个方面四个原因四个原因凝血机制凝血机制(coagulation)(coagulation)抗凝机制抗凝机制(anticoagul
2、ation)(anticoagulation)血管壁血管壁(vessel wallvessel wall)血小板血小板(plateletplatelet)凝血系统凝血系统(coagulation systemcoagulation system)抗凝及纤溶系统抗凝及纤溶系统(anticoagulationanticoagulation and fibrinolytic and fibrinolytic)凝血与抗凝机制病理生理基础诊断学血栓与止血检测第3页止血与凝血简明机理1.血管壁:血管收缩、血流减慢血管壁:血管收缩、血流减慢2.血小板血小板:粘附、聚集、释放、促粘附、聚集、释放、促凝、收缩、
3、血小板栓凝、收缩、血小板栓(白色栓子白色栓子)3.凝血系统:内源和外源激活凝血系统:内源和外源激活.(红色栓子)(红色栓子)4.纤溶激活:血块自溶,血管修复纤溶激活:血块自溶,血管修复诊断学血栓与止血检测第4页第一节第一节 血管壁检测血管壁检测诊断学血栓与止血检测第5页1.血管壁完整性血管内皮细胞之间及内皮下胶原血管内皮细胞之间及内皮下胶原(Vitc)(Vitc)2.血管内皮下层 良好弹力纤维-保持血管壁柔韧性 健全神经纤维-维持血管壁舒缩性 带负电荷胶原纤维-开启凝血过程3.血管内皮细胞产生vWF、纤维结合蛋白、组织因子、内皮素诊断学血栓与止血检测第6页正常血管壁抗血栓形成能力血管内皮细胞合
4、成l前列环素(PGI2)扩张血管、抑制plt功效l纤溶酶原激活物(PA)激活纤溶酶、去除小凝块 l血栓调整素(thrombomodulin TM)参加蛋白C系统抗凝作用l肝素或类肝素物质 含有各种抗凝活性诊断学血栓与止血检测第7页创伤、炎症创伤、炎症中毒、缺氧中毒、缺氧管壁抗凝作用管壁抗凝作用病理性血栓形成病理性血栓形成诊断学血栓与止血检测第8页l一、筛检试验l出血时间l束臂试验l二、诊疗试验l血管性血友病因子抗原测定l血管性血友病因子活性测定l6-酮-前列腺素F1测定l血浆凝血酶调整蛋白抗原测定诊断学血栓与止血检测第9页一、出血时间(bleeding time,BT)原 理 测定毛细血管被刺
5、破后至自然止血所需时间。主要反应血管壁和血小板相互作用。筛检试验诊断学血栓与止血检测第10页方 法 用标准弹簧针或刀片刺破皮肤2-3mm深,观察出血自然停顿时间。参考值 BT测定器法 6.92.1min 9min为延长诊断学血栓与止血检测第11页意 义 1.1.BTBT延长延长 血血小小板板数数量量显显著著:5050 10109 9/L/L,如如原原发发性性和和继继发性血小板降低紫癜。(发性血小板降低紫癜。(ITPITP)血血小小板板功功效效异异常常:如如血血小小板板无无力力症症或或药药品品影影响响(如阿斯匹林、潘生丁)(如阿斯匹林、潘生丁)严重缺乏血浆一些凝血因子:严重缺乏血浆一些凝血因子:
6、vWDvWD、DIC DIC 血管壁异常:遗传性毛细血管扩张症(血管壁异常:遗传性毛细血管扩张症(HHT)HHT)诊断学血栓与止血检测第12页意 义2 2BTBT缩短临床意义不大。缩短临床意义不大。一些严重高凝状态或血栓性疾病一些严重高凝状态或血栓性疾病 心梗、脑梗、心梗、脑梗、DICDIC高凝期高凝期诊断学血栓与止血检测第13页二、毛细血管抵抗力试验(capillary resistance Test,CRT)又称毛细血管脆性试验或束臂试验 毛细血管壁完整性毛细血管壁完整性内皮结构与功效内皮结构与功效血小板质与量血小板质与量异常异常脆脆 性性通透性通透性压力压力易出血易出血 原原 理理 筛检
7、试验诊断学血栓与止血检测第14页 方方 法法 血压计袖带血压计袖带上臂加压上臂加压8min 8min 在前臂直径在前臂直径5cm 5cm 圆圈内计数出血点圆圈内计数出血点(收缩压收缩压+舒张压舒张压)2)2诊断学血栓与止血检测第15页 参考值 男性0-5个 女性0-10个 意 义 本试验观察血管壁、血小板综合止血作用 1.异常提醒:毛细血管脆性、通透性 2.常见于:血管壁结构与功效异常 (HHT、过敏性紫癜)血小板质(GT)与量(ITP)异常 血管性血友病(vWD)其它:高血压、糖尿病等诊断学血栓与止血检测第16页三、血管性血友病因子抗原测定三、血管性血友病因子抗原测定(vWF:Ag)原理:在
8、含vWF抗体琼脂凝胶板中加入一定量含vWF抗原受检血浆,在电场作用下,泳动一定时间,出现抗原-抗体反应物,经过计算得出vWF:Ag含量。也能够用Elisa法。诊疗试验诊断学血栓与止血检测第17页【参考值参考值】Laurell免疫火箭电泳法:免疫火箭电泳法:94.1%32.5%。Elisa法:法:70%-150%【临床意义临床意义】血管内皮细胞促凝指标之一。血管内皮细胞促凝指标之一。减低减低:见于见于vWD,是诊疗是诊疗vWD及其分型指标之及其分型指标之 一。一。增高增高:见于血栓性疾病及血栓性前状态见于血栓性疾病及血栓性前状态,如心肌梗塞、如心肌梗塞、心绞痛、脑血管病变、糖尿病等。心绞痛、脑血
9、管病变、糖尿病等。vWFvWD 诊断学血栓与止血检测第18页第二节第二节 血小板检测血小板检测血小板以其数量和功效参加早期止血过程。血小板以其数量和功效参加早期止血过程。数量方面数量方面:血小板计数、血小板平均容积、血小板分血小板计数、血小板平均容积、血小板分布宽度。布宽度。功效方面功效方面:粘附、聚集、释放、促凝、血块收缩。粘附、聚集、释放、促凝、血块收缩。诊断学血栓与止血检测第19页1.粘附功效(adhesion function)指血小板含有粘附于血管内皮下胶原及其它异物表面能力 需要物质lGPIb-lvWF lIII型胶原l纤维结合蛋白(Fn)血小板功效诊断学血栓与止血检测第20页指活
10、化后血小板与血小板之间相互连接特征 参加原因参加原因l lGPIIb/IIIaGPIIb/IIIal l纤维蛋白原纤维蛋白原l l钙离子钙离子l l聚集诱导剂聚集诱导剂:ADPADP、肾上腺素、肾上腺素、TXATXA2 2、花生四烯酸、花生四烯酸2.聚集功效(aggregation function)IIb IIb诊断学血栓与止血检测第21页粘附与聚集结果血小板大量聚集、血小板大量聚集、粘附于血管破损处粘附于血管破损处形成白色血栓形成白色血栓暂时止血暂时止血诊断学血栓与止血检测第22页3释放功效:(release reaction)指血小板在诱导剂作用下,将胞浆内特殊颗粒中内含物释放出血小板反
11、应-颗粒 致密颗粒 溶酶体 与血小板粘附、聚集、炎症反应、创伤修复动脉粥样硬化等作用相关诊断学血栓与止血检测第23页4血块收缩功效血凝块血凝块血小板血小板血栓收缩蛋白血栓收缩蛋白纤维蛋白网纤维蛋白网 收缩收缩血清被挤出血清被挤出血块缩小加固血块缩小加固诊断学血栓与止血检测第24页PFPF3 3提供凝血因子催化表面提供凝血因子催化表面5血小板促凝活性 诊断学血栓与止血检测第25页血小板止血功效(小结)维持血管壁完整性,毛细血管通透性 粘附、聚集在血管破损处,形成白色血栓 释放活性物质,促进血小板聚集,增强 血管收缩 促进凝血过程 血块收缩,形成稳固血栓诊断学血栓与止血检测第26页l筛检试验l血小
12、板计数l血块收缩试验l诊疗试验l血小板相关免疫球蛋白测定l血小板黏附试验l血小板聚集试验l血小板P-选择素测定l血小板促凝活性测定l血浆血栓烷B2测定诊断学血栓与止血检测第27页血凝块血凝块血小板血小板血栓收缩蛋白血栓收缩蛋白纤维蛋白网纤维蛋白网 收缩收缩血清被挤出血清被挤出血块缩小加固血块缩小加固 原理原理 血块退缩试验(clot retraction test,CRT)筛检试验诊断学血栓与止血检测第28页方法 全血标本注入试管中,静置,观察析出血清占原有全血量 百分比 表示血块退缩程度表示血块退缩程度诊断学血栓与止血检测第29页参考值 2h 开始退缩 18h-24h 完全退缩退缩完全:析出
13、血清 全血量 40-50%40-50%诊断学血栓与止血检测第30页意义1主要用于血小板功效测定初筛试验2退缩不良见于:a)血小板功效异常或量(尤其正常对照10s以上者 延长 一、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTTactivated partial thromboplastin time,APTT)筛检试验诊断学血栓与止血检测第42页 延长:1.主要检测内源性路径凝血因子缺点 (如、/血友病甲、乙、丙)2.其次检测第二、三阶段因子,如凝血 酶原、纤维蛋白原 3.严重肝病、DIC 4.循环中抗凝物质增多 5 5普通肝素应用首选
14、监测指标(普通肝素应用首选监测指标(60-100%60-100%)缩短:血栓性疾病和血栓前状态缩短:血栓性疾病和血栓前状态 意 义诊断学血栓与止血检测第43页二、凝血时间(clotting time,CT)原理 观察血液自离体后,到玻璃试管中凝固所需时间观察血液自离体后,到玻璃试管中凝固所需时间血液血液从血管中从血管中抽出抽出与带负电荷与带负电荷表面接触表面接触内源性凝血路径开启内源性凝血路径开启纤维蛋白形成(血液凝固)纤维蛋白形成(血液凝固)XII XIIaXII XIIaXII XIIaXII XIIa 参考值参考值 4-12min4-12min(试管法)(试管法)筛检试验诊断学血栓与止血
15、检测第44页意 义 内源性路径因子测定初筛试验延长:1.因子、严重降低,如血友病 2.凝血酶原严重降低,如严重肝病,阻塞性黄疸 3.纤维蛋白原严重降低,如DIC、纤溶亢进 4、应用肝素、口服抗凝药品等缩短:高凝状态(hypercoagulation state)如血栓性疾病诊断学血栓与止血检测第45页 三、三、血浆凝血酶原时间测定 (Prothrombin time,PTProthrombin time,PT)原原 理理 组织因子组织因子(兔脑、胎盘、肺组织浸液兔脑、胎盘、肺组织浸液)Ca Ca2+2+血浆血浆 参考值参考值 手工法:手工法:11-13s 11-13s 超出正常对照3s以上为异
16、常 凝血酶原时间比值 PTR 1.00.05国际正常化比值 INR1.00.1筛检试验诊断学血栓与止血检测第46页意 义 外源性路径筛选试验延长:1因子、V、X缺乏 2严重纤维蛋白原降低(尤其1g/L时)3Vitk缺乏症、严重肝病 4纤溶亢进(如DIC后期)5循环中抗凝物质增加,如 SLE 6口服抗凝剂首选监测指标:INR 2.0-2.5缩短:高凝状态,如DIC早期、心梗、深静脉血栓形成 诊断学血栓与止血检测第47页四、血浆因子四、血浆因子、和和促凝活性测定促凝活性测定 【参考值参考值】F:C103%25.7%;F:C98.1%30.4%;F:C100%18.4%;F:C92.4%20.7%。
17、【临床意义临床意义】1.增高增高血栓前状态和血栓性疾病、血栓前状态和血栓性疾病、DVT等等诊疗试验诊断学血栓与止血检测第48页2.降低降低F:CF:C减低:减低:见于血友病见于血友病A A、vWDvWD、DICDIC等;等;F:CF:C减低:减低:见于血友病见于血友病B B、肝脏疾病和维生素、肝脏疾病和维生素K K缺乏、缺乏、DICDIC等等F:CF:C减低:减低:见于因子见于因子缺乏症、肝脏疾病、缺乏症、肝脏疾病、DICDIC等;等;F:CF:C减低:减低:见于先天性因子见于先天性因子缺乏症、肝脏疾病、缺乏症、肝脏疾病、DICDIC等。等。诊断学血栓与止血检测第49页五、血浆因子五、血浆因子
18、、促凝活性测定促凝活性测定【参考值参考值】F:C 97.7%16.7%F:C 97.7%16.7%;F:C 102.4%30.9%F:C 102.4%30.9%;F:C 103%17.3%F:C 103%17.3%;F:C 103%19%F:C 103%19%。【临床意义临床意义】1.1.增高增高 血栓前状态和血栓性疾病。血栓前状态和血栓性疾病。2.2.降低降低 分别见于分别见于先天性先天性、因子因子 缺乏;缺乏;取得性取得性见于肝脏疾病,维生素见于肝脏疾病,维生素K K缺乏,缺乏,DICDIC等。等。诊疗试验诊断学血栓与止血检测第50页六、血浆纤维蛋白原定量参考值 Clauss法:2-4g/
19、L 4g/L为异常意 义 降低:1先天性纤维蛋白原缺乏症 2DIC(消耗过多)3严重肝病 增高:1高凝状态:糖尿病 血栓性疾病,急性炎症 手术创伤、恶性肿瘤等 2生理性:部分正常老人,妊娠晚期诊疗试验诊断学血栓与止血检测第51页内源凝血系统试验:内源凝血系统试验:CT、APTT外源凝血系统试验:外源凝血系统试验:PTF:C减低:血友病减低:血友病AF:C减低:血友病减低:血友病BVit K依赖因子:依赖因子:、诊断学血栓与止血检测第52页第四节第四节 抗凝系统检测抗凝系统检测诊断学血栓与止血检测第53页正常抗凝系统(一)细胞抗凝机制单核单核-巨噬细胞巨噬细胞吞吞 噬噬清清 除除凝血过程相关凝血
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