--细菌的遗传分析.pptx
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1、第五章第五章 细菌遗传分析细菌遗传分析 第一节、细菌的接合与重组n细菌的突变型nF因子/性因子/致育因子 n中断杂交实验(一)细菌的突变型n合成代谢功能的突变型营养缺陷型n分解代谢功能的突变型n抗性突变型1、合成代谢功能的突变型营养缺陷型n合成代谢功能:原养型/野生型在基本培养基上,具有合成所有代谢和生长所必须的复杂有机分子的功能。n营养缺陷型:合成代谢过程需大量基本基因的表达,当其中某一基因发生突变,将使相应的代谢过程不能进行。n基因型:Met-,Met2、分解代谢功能的突变型n分解代谢的功能突变型:一系列分解代谢功能的实现,也必须有许多有关基因的表达。其中任何一个基因突变,将使相应的生化反
2、应过程不能进行。nLac:不能分解乳糖nLac:能分解乳糖3、抗性突变型q抗药突变型:抗链霉素突变型:Strr,(野生型Strs)抗青霉素突变型:Penr ,(野生型Pens)q抗phage突变型:抗T1-phage突变型Tonr,(野生型Tons)(二)F因子/性因子/致育因子 nF因因子子:环状DNA,含6104个bp,约为大肠杆菌染色体的2。n由原点、致育基因、配对区三个部分组成。环状F因子的模式图组成F因子各部分的功能v原点:是转移的起点。v致育基因:其上一些基因编码生成F纤毛的蛋白质,即F+细胞表面的管状结构,F纤毛与F-细胞表面的受体相结合,在两个细胞间形成细胞质桥。v配对区:此处
3、与大肠杆菌DNA多处核苷酸序列相对应(即同源序列),故可通过交换而使F因子整合到大肠杆菌DNA上。图7-29 塔特姆塔特姆(19091975)图图7-28 莱德伯格(莱德伯格(1925)Lederberg和和Tatum大肠杆菌杂交试验大肠杆菌杂交试验F+F+与F-nF+:细胞质中具有F因子的大肠杆菌(供体)nF-:细胞质中没有F因子的大肠杆菌F+F因子大肠杆菌DNAF-F+F-F因子转移的频率很高,但细菌DNA间的重组率很低,故称F+为低频重组品系(low frequence recombination,Lfr)电镜图Hfr(high frequence recombinvation)F因子的
4、整合和环出附加体n象F因子既可独立存在于染色体之外作为一个独立的复制子,也可整合到大肠杆菌染色体中作为大肠杆菌复制子的一部分的遗传因子,称为附加体。(三)中断杂交实验 n1954年Wollmun与Jacob以大肠杆菌为材料,他们想了解Hfr品系什么时候把它的基因授给F细胞。实验材料 HfrF+:Strs azir tonr lac gal F:Str r azi s tons lac gal HfrF+F-实验方法-中断杂交实验n两品系在液体培养基里,通气混合培养,定时取样,猛烈搅拌以中断杂交,释稀菌液,在含Str的基本培养基上培养。实验结混合时间(min)结果8出现的菌落与 F相同,说明Hf
5、r的基因未进入F9出现少量的azir 菌落,说明azir 己从Hfr 转移到F11出现azir tonr 型的F菌落18 出现azir tonr lac型的F菌落24 出现azir tonrlacgal型的F菌落实验说明:nHfr F的DNA从一端开始,以线性方式逐段进入F,这一端叫原点或O点。nO点 azir tonr lac gal 时间单位法n以转移时间单位(每分钟)作为基因间距单位,可作出Hfr F的“染色体”上的基因分布图(基因连锁图)在选出的thr+leu+str重组子非选择标记频率同杂交时间作图n假如让Hfr FF杂交持续2小时后中断杂交,发现一些F F,这说明Hfr的全部基因转
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