PVDF转印膜在WB中的应用.pptx
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1、PVDF转印膜在WesternBlot中的应用OwenOwen,20142014年年年年8 8月月月月PVDF转印膜的概念、特点、应用和市场竞争分析 聚偏二氟乙烯(英文名称:polyvinylidene difluoride,简称PVDF),主要是指偏氟乙烯均聚物或者偏氟乙烯与其他少量含氟乙烯基单体的共聚物。聚偏二氟乙烯分子结构 聚偏二氟乙烯(PVDF)作为一种新型氟碳热塑型塑料,具有极好的耐气候性和化学稳定性,波长为20400nm的紫外灯照射一年,其性能基本不变,室温下不受酸、碱等强氧化剂和卤素等腐蚀。鉴于以上优点,PVDF膜从80年代中期开始得到了大量的应用。聚偏二氟乙烯(PVDF)是由
2、millipore 公司在1985年首创并应用于蛋白质转印。目前国外已经能够生产出各种性能优良的PVDF膜。国内的PVDF微滤和超滤膜也己形成了一定的生产规模,但是对于蛋白质转印方面的PVDF膜的生产几乎为零,而国际上目前也鲜有这方面的文献报道。PVDFPVDF转印膜是疏水性膜,主要有两种孔径形式存在:转印膜是疏水性膜,主要有两种孔径形式存在:0.2 m PVDF转印膜:适用于低分子量蛋白(20KD)、核酸(20KD)、核酸(300bp)0.2m PVDF 膜0.45m PVDF 膜 聚聚偏二氟乙烯(偏二氟乙烯(PVDFPVDF)采用通过)采用通过疏水键和正电荷与靶疏水键和正电荷与靶分子结合分
3、子结合(1)机械强度高,耐腐蚀,保质期长(2)低背景,灵敏度高,优异的信噪比(3)对大范围的化学溶剂具有抵抗性(例如丙酮、DMSO,二甲基甲先胺等)(4)蛋白结合能力强。BSA125g/cm,山羊IgG125g/cm,胰岛素125g/cm。(5)相容染色剂广:考马斯亮蓝染色剂、酰胺黑、印度墨水、丽春红、胶体 金、CPTS、甲苯胺蓝、透射显影和Syproruby等。(6)应用范围广:Western BlotWestern Blot、Northern Blot、Southern Blot、吸附分析、氨基酸分析、N 端蛋白质测序、Dot/Slot blotting、糖蛋白显色等。(7)适用多种显色方
4、:化学发光、常规显色、同位素、标准染色、免疫荧光等。PVDF转印膜特点性能性能性能性能NCNC膜膜膜膜PVDFPVDF膜膜膜膜材料质地易脆机械强度高溶剂耐受性无有背景低低SDS存在下蛋白质结合80-100g/cm2125-300g/cm2操作程序缓冲液润湿,避免气泡使用前100%甲醇润湿检测方式常规染色,可用放射性和非放射性检测常规染色,比较于NC膜,可用考马斯亮蓝染色,可用于ECL检测,快速免疫检测。适用范围0.45m一般蛋白0.2m分子量小于20kD蛋白糖蛋白检测和蛋白质测序 PVDF PVDF膜在几乎所有性能方面都超越了膜在几乎所有性能方面都超越了膜在几乎所有性能方面都超越了膜在几乎所有
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