2015细菌感染的检查方法与防治原则.pptx

第第 六六 章章 细菌感染的实验室检查与防治原则细菌感染的实验室检查与防治原则一、细菌学诊断一、细菌学诊断致病菌的检验程序致病菌的检验程序药物敏感试验药物敏感试验直接涂片检查直接涂片检查分离培养分离培养生化试验生化试验血清学试验血清学试验动物试验动物试验明明确确诊诊断断初步诊断初步诊断分子诊断分子诊断其他检测技术其他检测技术(已知抗体已知抗体未知抗原未知抗原)原理原理 双份双份血清标本，恢复期血清中抗体效价比急性血清标本，恢复期血清中抗体效价比急性期期血清血清中抗体效价升高中抗体效价升高4倍者方有意义倍者方有意义种类种类 用用已知的细菌或其特异性抗原检测患者体液中已知的细菌或其特异性抗原检测患者体液中有无相应特异性抗体和其效价的动态变化，可有无相应特异性抗体和其效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断。作为某些传染病的辅助诊断。(抗原抗原未知抗体未知抗体)标本标本凝集试验：凝集试验：沉淀试验：沉淀试验：补体结合试验：补体结合试验：中和试验：中和试验：肥达试验、外斐试验、显微镜凝集试验等肥达试验、外斐试验、显微镜凝集试验等梅毒梅毒VDRL、RPR试验等试验等抗抗“O”试验等试验等Q热柯克斯体抗体检测等热柯克斯体抗体检测等 二、二、二、二、血清学血清学诊断诊断 已知细菌已知细菌已知细菌已知细菌或其特异或其特异或其特异或其特异抗原抗原抗原抗原急性期血清急性期血清急性期血清急性期血清恢复期血清恢复期血清恢复期血清恢复期血清恢复期抗体效价比急性期升高恢复期抗体效价比急性期升高恢复期抗体效价比急性期升高恢复期抗体效价比急性期升高4 4 4 4倍时，有诊断意义倍时，有诊断意义倍时，有诊断意义倍时，有诊断意义血清抗血清抗血清抗血清抗体效价体效价体效价体效价 二二 免疫预防免疫预防 被动免疫被动免疫 Passive immunity 主动免疫主动免疫 Active immunity 临床感染临床感染 亚临床感染亚临床感染 疫苗接种疫苗接种 注射免疫球蛋白注射免疫球蛋白 或抗血清或抗血清 母乳获得抗体母乳获得抗体 胎盘获得抗体胎盘获得抗体 自然产生自然产生 人工获得人工获得 一、人工主动免疫一、人工主动免疫人工主动免疫是将疫苗接种于人体，使之人工主动免疫是将疫苗接种于人体，使之产生获得性免疫力的一种防治微生物感染产生获得性免疫力的一种防治微生物感染的措施的措施Edward Jenner一、人工主动免疫一、人工主动免疫 疫苗疫苗 灭活疫苗灭活疫苗 减毒减毒活活疫苗疫苗 亚单位疫苗亚单位疫苗 非非重组疫苗重组疫苗 基因工程基因工程疫苗疫苗 核酸疫苗核酸疫苗 区别点区别点死疫苗死疫苗活疫苗活疫苗制剂特点制剂特点死，强毒株死，强毒株活减毒株活减毒株接种剂量与特接种剂量与特点点量较大，量较大，23次次量较小，量较小，1次次保存及有效期保存及有效期易保存，约易保存，约1年年不易保存不易保存免疫效果免疫效果较低，较低，维持数月维持数月2年年较高，较高，维持维持35年甚至更年甚至更长长灭活疫苗与活疫苗的区别灭活疫苗与活疫苗的区别一、人工主动免疫一、人工主动免疫 疫苗疫苗 灭活疫苗灭活疫苗 减毒减毒活活疫苗疫苗 亚单位疫苗亚单位疫苗 非非重组疫苗重组疫苗 基因工程基因工程疫苗疫苗 核酸疫苗核酸疫苗 注射含有特异性抗体免疫制剂，使机体即刻获得特异性免疫，作用及时。作用：作用：治疗，紧急预防l l抗毒素抗毒素 Antitoxinl l抗菌免疫血清抗菌免疫血清l l免疫球蛋白免疫球蛋白l l细胞因子细胞因子区别要点区别要点人工主动免疫人工主动免疫人工被动免疫人工被动免疫免疫物质免疫物质抗原抗原抗体或细胞因子抗体或细胞因子等等免疫出现时间免疫出现时间慢（数天慢（数天4 4周）周）快（立即）快（立即）免疫持续时间免疫持续时间长（数月数年）长（数月数年）短（短（2 23 3周）周）主要用途主要用途预防预防治疗或紧急预防治疗或紧急预防人工主动免疫与人工被动免疫的比较人工主动免疫与人工被动免疫的比较第第三三节节 细菌感染的治疗细菌感染的治疗抗生素 VS 细菌第一节 抗菌药物的种类及其作用机制1945年诺贝尔生理学或医学奖授予青霉素的发现者及发现青霉素在治疗感染性疾病中的作用的科学家 亚历山大弗兰明 钱恩 弗洛里 （Alexander Fleming）（Ernst Boris Chain）（Howard Walter Flory）抗菌药物的作用机制抗菌药物的种类按化学结构和性质分类种类种类代表抗生素代表抗生素-内酰胺类青霉素类青霉素G，苯氧青霉，耐酶青霉素和广谱青霉素头孢菌素类一代：头孢唑林，头孢氨苄，头孢拉定；二代头孢：头孢呋新，头孢孟多；三代头孢：头孢他啶，头孢曲松，头孢哌酮头霉素头孢西丁单环-内酰胺类氨曲南，卢卡莫南碳青霉烯类亚胺培南，泰能-内酰胺酶抑制剂舒巴坦，克拉维酸大环内酯类红霉素，螺旋霉素，罗红霉素，交沙霉素，阿奇霉素氨基糖苷类链霉素，庆大霉素，卡那霉素，妥布霉素，阿米卡星四环素类四环素，多西环素，米诺环素氯霉素类氯霉素，甲砜霉素化学合成的抗菌药物磺胺类磺胺嘧啶，磺胺甲噁唑，甲氧苄啶，复方新诺明喹诺酮类诺氟沙星，环丙沙星，氧氟沙星，依诺沙星，培氟沙星其它利福平，异烟肼，多粘菌素，万古霉素等抗菌药物的种类按生物来源分类种类种类代表抗生素代表抗生素细菌产生的抗生素多粘菌素，杆菌肽真菌产生的抗生素青霉素，头孢菌素放线菌产生的抗生素（主要来源）链霉素，卡那霉素，四环素，红霉素，两性霉素B一、干扰细胞壁的合成革兰阳性菌内酰胺酶肽聚糖青霉素结合 蛋白（PBPs）阻碍细胞壁生物合成不能和结构改变的PBPs结合青霉素被内酰胺酶水解细菌存活革兰阴性菌内酰胺酶外 膜周浆间隙PBPs阻碍细胞壁肽聚糖合成青霉素被内酰胺酶水解不能和结构改变的PBPs结合药物不能穿过细胞膜细菌死亡细菌存活细菌死亡二、损伤细胞膜的功能抗真菌的多烯类抗生素抗真菌的多烯类抗生素细胞膜上固醇类物质细胞膜上固醇类物质抗抗G-菌多肽类抗生素菌多肽类抗生素吡咯类抗菌药吡咯类抗菌药细胞膜内磷脂细胞膜内磷脂抑制固醇类合成抑制固醇类合成细胞膜通透性增加细胞膜通透性增加细菌体内重要成分外漏细菌体内重要成分外漏细菌死亡细菌死亡三、影响蛋白质合成氨基糖苷类：与氨基糖苷类：与30S亚基结合，影响蛋白质合成亚基结合，影响蛋白质合成全过程全过程四环素类：与四环素类：与30S亚基结合，阻碍肽链形成亚基结合，阻碍肽链形成氯霉素、林可霉素和红霉素：与氯霉素、林可霉素和红霉素：与50S亚基结合，亚基结合，阻止肽链形成和延长阻止肽链形成和延长四、抑制核酸合成第二节 细菌的耐药机制细菌耐药的遗传机制固有耐药性固有耐药性固有耐药性固有耐药性(intrinsic resistance)细菌对某些抗菌药物的天然不敏感细菌对某些抗菌药物的天然不敏感获得耐药性获得耐药性获得耐药性获得耐药性(acquired resistance)染色体突变染色体突变可传递的耐药性可传递的耐药性1.1.R R质粒的转移质粒的转移2.2.转座子介导的耐药性转座子介导的耐药性3.3.整合子与多重耐药整合子与多重耐药细菌耐药的生化机制抗生素改变药物靶位改变药物靶位减少药物吸收减少药物吸收减少渗透主动外排产生灭活酶产生灭活酶或修饰酶或修饰酶改变自身代谢状态改变自身代谢状态灭活作用靶位改变减少药物吸收增加药物排出-内酰胺酶超广谱-内酰胺酶(extended-extended-spectrum spectrum -lactamase ESBL-lactamase ESBL)AmpC-内酰胺酶氨基糖苷类钝化酶氯霉素乙酰转移酶药物主动外排使菌体内的药物浓度不足，难以发挥抗菌作用细菌改变抗生素作用靶位的结构和蛋白数量，影响药物的结合细胞壁障碍和/或外膜通透性改变钝化酶的产生药物作用靶位的改变主动外排机制抗菌药物的渗透障碍第三节 细菌耐药性的防治控制细菌耐药性策略控制细菌耐药性策略合理使用抗菌药物合理使用抗菌药物合理使用抗菌药物合理使用抗菌药物严格执行消严格执行消严格执行消严格执行消毒隔离制度毒隔离制度毒隔离制度毒隔离制度破坏耐药基因破坏耐药基因破坏耐药基因破坏耐药基因研制新的研制新的研制新的研制新的抗菌药物抗菌药物抗菌药物抗菌药物加强药政加强药政加强药政加强药政管理管理管理管理An unculturable gram-positive microorganism has been visualized in tissue specimens obtained from patients with a previously undescribed disease.Which of the following techniques would be most useful in identifying this organism?(A)Serology(B)PCR amplification and sequencing of rDNA(C)Multilocus enzyme electrophoresis(D)SDS-polyacrylamide gel electrophoresis(E)Pulsed field gel electrophoresis