222-动物细胞融合与单体克隆抗体-高中生物人教版选修3-现代生物科技专题7825ppt-PPT课件.pptx

动物细胞与植物细胞的差别：无细胞壁全能性受限制，不能发育成杂种动物动物细胞融合与植物细胞杂交的不同：不需去除细胞壁不能发育成新的动物个体2.2.2动物细胞融合与单克动物细胞融合与单克 隆抗体隆抗体不同不同DNADNA的两个细胞的两个细胞灭活病毒灭活病毒诱导细胞融合诱导细胞融合融合后的细胞融合后的细胞进行有丝分裂进行有丝分裂一、动物细胞融合（细胞杂交）概念：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。1、结果：形成单核的杂交细胞2、原理：细胞膜的流动性3、诱导方式物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇生物法：灭活的病毒（保留抗原特性，失去感染活性）5、过程：动物细胞A动物细胞B诱导，融合完整的杂交细胞AB（膜融合、质融合）（核融合）注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。7、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段获得杂种细胞获得杂种细胞制备单克隆抗体制备单克隆抗体获得杂种植株获得杂种植株用途用途物理、化学方法物理、化学方法（同左（同左）灭活的病毒灭活的病毒物理（离心、振物理（离心、振动、电刺激）动、电刺激）化学（聚乙二醇）化学（聚乙二醇）诱导方法诱导方法使细胞分散后诱使细胞分散后诱导细胞融合导细胞融合去除细胞壁后诱去除细胞壁后诱导原生质体融合导原生质体融合细胞融合的方法细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、植物细胞全能性植物细胞全能性原理原理动物细胞融合动物细胞融合植物体细胞杂交植物体细胞杂交比较项目比较项目植物、动物细胞融合的比较植物、动物细胞融合的比较二、单克隆抗体传统的抗体生产办法及缺陷是什么？抗体由什么细胞产生？B淋巴细胞每个每个B淋巴细胞只分泌一种化学性质单一、特异性淋巴细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体强的抗体要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群设计方案：设计方案：一个一个B B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体淋巴细胞只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖-化学性质单一、特异性强的抗体。杂种细胞杂种细胞2.2.制备过程：制备过程：诱导其融合的方法有哪些？诱导其融合的方法有哪些？融合后培养液中有几种细胞融合后培养液中有几种细胞怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点瘤细胞有何优点注射抗原的目的是什么注射抗原的目的是什么为何要进行克隆化培养和专为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选一抗体检测，多次筛选大量增殖杂交瘤细胞获得单大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法抗的方法特定抗原特定抗原特定特定B细胞细胞其他抗原其他抗原其他其他B细胞细胞+骨髓瘤细胞融合骨髓瘤细胞融合特定杂交瘤细胞特定杂交瘤细胞-特定抗体特定抗体其他杂交瘤细胞其他杂交瘤细胞-其他抗体其他抗体（所需抗体）（所需抗体）1、原理：杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能迅速大量增殖，又能足够数量的单一抗体。2、过程B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合B-B细胞B-瘤细胞瘤-瘤细胞选择培养杂交瘤细胞（B-瘤细胞）克隆化培养抗体检测，挑选产所需抗体的杂交瘤细胞体外培养小鼠腹腔内增殖，腹水中提取抗体单克隆抗体3.应用：2.2.单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、产量大高、产量大 作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与特异性结合特异性结合 优点：优点：准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速用于用于运载药物：制成运载药物：制成“生物导弹生物导弹”治疗疾病：主要用于癌症治疗治疗疾病：主要用于癌症治疗既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。一种诱导细胞融合的新方法一种诱导细胞融合的新方法一种新细胞一种新细胞灭活病毒灭活病毒杂交瘤细胞杂交瘤细胞一个优势一个优势单克隆抗体特异性强、单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势灵敏度高的优势杂交瘤技术杂交瘤技术