塞替派残留溶剂分析方法验证--药科大学论文.doc

沈阳药科大学本科毕业论文 摘要 沈 阳 药 科 大 学本 科 毕 业 论 文论文题目：塞替派残留溶剂分析方法验证起止时间：2016年2月25日 6月 8日姓名学号： 学院专业：药学院药物分析专业年级班级：2012级药物分析班指导教师： 实习单位：药学院药剂教研室 江苏恒瑞医药股份有限公司(公章) 目录中文摘要1Abstract2第一章 绪论3第二章 塞替派残留溶剂分析方法42.1 色谱条件42.2 溶液配制42.3 样品测定42.4 计算52.5 标准规定5第三章 实验仪器与试剂63.1 仪器与设备63.2 实验试剂6第四章 实验色谱条件及溶液配制74.1实验色谱条件74.2 溶液配制7第五章 实验内容与结果85.1 专属性85.2 定量限95.3 检测限105.4 重复性105.5 线性115.6 线性范围内的方法准确度实验145.7 方法中间精密度165.8 方法耐用性17第六章 结果20第七章 结论21第八章 讨论21参考文献22致谢23沈阳药科大学本科毕业论文 第一章 绪论 中文摘要 目的：验证塞替派残留溶剂测定方法。方法：用DB-624毛细管柱，照毛细管柱顶空进样程序升温法测定，检测器温度：250，柱温：40，保持5min，以20/min程序升温到200，进样量：2l,载气为 N2。结果：专属性、定量限、检测限、重复性、准确度、线性、方法中间精密度、方法耐用性等各项都符合预期标准 结论:该测定方法稳定、正确,可以作为塞替派的残留溶剂测定方法。关键词：塞替派/残留溶剂/方法验证19Abstract Purpose：Verify thiotepa determination of residual solventMethod: Using DB-624 capillary column,according to the capillary column headspace sampling program heating method ，detector temperature :250 degrees Celsius，column temperature:40 degrees ,to maintain 5 minters,with 20 degrees Celsius /min temperature programmed to 200 degrees,sample volume : 2l,carrier gas is N2.Results: Specificity 、Limit of quantitation、.Limit of detection、 Repeatability 、Linearity、Degree of accurate、Intermediate precise、Method durability And other standards are in line with expectations.Conclusion:The assay method is stable, accurate, and can be used as thiotepa determination of residual solventKeyWord: Thiotepa/residual solvent/Method validation第一章 绪论药品中的残留溶剂是指在合成原料药、辅料或制剂生产过程中使用的，但是在工艺中未能完全除去的有机溶剂。从20世纪90年代起,药物中残留下来的有机溶剂的毒性或致癌作用开始引起国际医药界以及相关的管理部门的关心和重视。ChP 中残留溶剂的要求与人用药品注册技术规范的国际协调（ICH）的要求是相一致的1，中国药典规定残留溶剂的检查方法为GC 法，可采用填充柱，也可以采用毛细管柱，检测器一般采用火焰离子化检测器（FID）,采用FID时需加尾吹气2。塞替派残留溶剂二氯甲烷、三氯甲烷属于第二类有机溶剂，对人有一定的毒性，应限量使用，而戊烷属于第三类有机溶剂，对人体健康危险性小，GMP或其他质控要求限制使用。所以对塞替派残留溶剂二氯甲烷、三氯甲烷、戊烷必须进行定量检测，满足GMP或其他质控要求的溶剂残留量限度。按2015版GMP的要求，残留溶剂测定方法应当且必须进行验证3，只有通过了方法验证，才能按照这个方法去检验。按照ICH对药品中残留溶剂含量的要求及本公司塞替派的生产工艺，塞替派生产过程中使用到的溶剂包括戊烷、二氯甲烷、三氯甲烷的残留量必须得到严格的控制。通过查阅相关文献并摸索研究以及实验，确定了塞替派残留溶剂的分析方法，该品种的残留溶剂分析方法为杂质定量方法（外标法）4，对该分析方法进行验证内容包括有专属性、定量限、检测限、重复性、中间精密度、线性、方法准确度、方法耐用性5。以上几项验证结果均需符合验证要求。经过了本次的验证后可以了解塞替派残留溶剂的检测方法是否是合适的正确的以适合于塞替派残留溶剂的限度控制，是否可以用这种方法对塞替派残留溶剂进行检验，从而确保检验数据准确可靠，保证药品质量。第二章 塞替派残留溶剂分析方法2.1 色谱条件色谱柱： DB-624毛细管柱FID检测器，检测器温度：250进样口温度 ：80柱温：40，保持5min，以20/min升温至200。载气为 N2分流比为3：1流速：4ml/min进样量：2 l2.2 溶液配制（1）储备溶液戊烷储备液：取戊烷适量置50ml量瓶中，用DMF稀释至刻度。二氯甲烷储备液：取二氯甲烷适量置50ml量瓶中，用DMF稀释至刻度。三氯甲烷储备液：取三氯甲烷适量置50ml量瓶中，用DMF稀释至刻度。（2）对照溶液精密量取戊烷储备液、二氯甲烷储备溶液和三氯甲烷储备溶液适量置25ml量瓶中，用DMF稀释至刻度，得到含戊烷50mg/ml、二氯甲烷60mg/ml和三氯甲烷6mg/ml的对照品溶液。（3）供试溶液取本品0.5g，2份，精密称定，置5mL的量瓶中，用DMF溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试液（应为1mL中含100mg）。2.3 样品测定1.空白试验，精密量取DMF2l，注入气相色谱仪，进样1次。2.系统适用性试验，精密量取对照液2l，注入气相色谱仪，连续进样5次。对照溶液第一针三氯甲烷峰的信噪比（S/N）应不得低于10。计算5次对照溶液进样中待测溶剂峰面积RSD%应不得超过10%，并用平均值参与残留溶剂含量计算，出峰顺序依次为戊烷、二氯甲烷、三氯甲烷，各相邻峰之间的分离度应大于1.5。3.供试品试验，精密量取供试品溶液2l，注入气相色谱仪，每份进样1次。4.系统确认，供试液进样结束后以及供试溶液连续进样超过6小时的，每隔6小时应追加对照溶液进样1 针，计算6次进样（系统适用性5次+系统确认1次）各待测溶剂峰面积的RSD%应不得超过10%。2.4 计算 按公式：计算，其中，Ai供试品溶液中各待测组分峰面积的平均值 Ci供试品溶液的浓度 As对照品溶液中各待测组分峰面积的平均值 Cs对照品溶液中各待测组分的浓度2.5 标准规定含戊烷应不得过2300ppm ，含二氯甲烷应不得过350ppm，含三氯甲烷应不得过60ppm。第三章 实验仪器与试剂3.1 仪器与设备表1.仪器和设备名称型号编号厂商有效期至气相色谱仪Agilent7890ADQYZ46Agilent2016.07.20气相色谱仪Agilent7890ADQYZ23Agilent2016.11.30色谱柱DB-624 UI(30m0.53mm3m)USF421126HAgilent/色谱柱DB-624(30m0.53mm3m)USD344526HAgilent/色谱柱DB-624 UI(30m0.53mm1m)USB1017070Agilent/电子天平BS224SDTPZ33Sartorius2016.06.203.2 实验试剂表2.实验试剂名称规格批号来源塞替派API105141020公司自制戊烷AR1002008SCRC二氯甲烷AR20140718SCRC三氯甲烷AR20141224SCRCDMFHPLCDI840Honeywell第四章 实验色谱条件及溶液配制4.1实验色谱条件表3.实验色谱条件色谱柱： DB-624毛细管柱FID检测器 检测器温度：250进样口温度 80柱温 40，保持5min，以20/min升温至200。载气 N2分流比 3：1流速 4ml/min进样量 2 l4.2 溶液配制1） 储备溶液 戊烷储备液：精密称量戊烷62mg置于50ml量瓶中，用DMF稀释至刻度，摇匀。 二氯甲烷储备液：精密称量二氯甲烷75mg置于50ml量瓶中，用DMF稀释至刻度，摇匀。 三氯甲烷储备液：精密称量三氯甲烷7.5mg置于50ml量瓶中，用DMF稀释至刻度，摇匀。2）对照溶液 精密量取戊烷储备液、二氯甲烷储备溶液和三氯甲烷储备溶液各1ml置于25ml量瓶 中，用DMF稀释至刻度，摇匀，得到含有戊烷50mg/ml、二氯甲烷60mg/ml和三氯甲烷6mg/ml的对照品溶液。 3)供试品溶液 1.精密称量塞替派0.5g，置于5mL的容量瓶中，用DMF溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试液1。 2.精密称量取塞替派0.5g，置于5mL的容量瓶中，用DMF溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试液2。沈阳药科大学本科毕业论文 第五章 实验内容与结果 第五章 实验内容与结果5.1 专属性 5.1.1操作过程 1)空白试验，精密量取DMF2l，注入气相色谱仪，进样1次。 记录图谱20160204001.D。 2) 移取戊烷储备液、 二氯甲烷储备液、三氯甲烷储备液各量取1ml，分别置于25ml容量瓶中，用DMF稀释定容摇匀,进样量2ul，分别进样1次，记录色谱图20160204002.D、20160204003.D、20160204004.D。 3)取对照品溶液，进样量2ul，进样1次，记录色谱图20160204005.D。 5.1.2 数据与结果 表4.专属性数据与结果名称单独进样RT（min）混合进样RT（min）分离度戊烷3.6963.692/二氯甲烷5.2655.2709.6三氯甲烷7.3937.39711.2DMF10.90210.89511.3图1.专属性实验色谱图v 从以上试验可知，本方法所用溶媒DMF不干扰待测溶剂的测定，且相邻溶剂之间的分离度均1.5，可以被该方法分离，符合验证预期目标，该方法专属性良好。 5.2 定量限5.2.1进样过程 配制储备溶液及对照溶液，连续进样对照溶液5次。计算各待测溶剂峰面积的RSD应10.0%及计算各待测溶剂峰高与噪声的比值(信噪比)，以其信噪比(S/N)在101的样品浓度确定定量限浓度，配制定量限溶液，连续进样3次，其相对于理论样品浓度的比值为定量限。表5.定量限实验数据色谱图号S/N戊烷S/N二氯甲烷S/N三氯甲烷20160404005.D1815.8273.020.320160404006.D1920.3285.520.920160404007.D1908.7282.621.120160404008.D1755.7258.419.220160404009.D1785.0269.320.2平均信噪比1837.1273.820.35.2.2 结果表6.定量限实验结果色谱图号S/N戊烷S/N二氯甲烷S/N三氯甲烷20160405002.D9.99.810.720160405003.D9.310.110.620160405004.D9.99.710.0平均信噪比9.79.910.4定量限浓度(g/ml)0.32.23.0定量限 (ppm)32230v 三次重复进样定量限溶液，S/N均在101范围内。5.3 检测限 5.3.1 操作过程稀释定量限溶液，以其信噪比(S/N)在31的样品浓度确定检测限浓度，稀释定量限溶液，配制检测限溶液，连续进样3次，其相对于理论样品浓度的比值为检测限。其相对于理论样品浓度的比值即为最小检测限。 5.3.2 结果表7.检测限实验结果色谱图号S/N戊烷S/N二氯甲烷S/N三氯甲烷20160405001.D3.33.33.820160405002.D3.33.53.820160405003.D3.43.94.0平均信噪比3.33.63.9检测限浓度(g/ml)0.10.70.9检测限 (ppm)179v 三次重复进样检测限溶液，S/N均在31范围内。5.4 重复性 5 4.1 操作过程按照残留溶剂分析方法对供试品1检测6次，记录色谱图号。5.4.2 结果图2.重复性试验色谱图表8.重复性实验结果数据序号戊烷含量（ppm）二氯甲烷含量(ppm）三氯甲烷含量（ppm）11101171未检出21118170未检出31119171未检出41166174未检出51099172未检出61133172未检出平均含量1123172未检出RSD2.2%0.8%N/Av 6次检测结果的RSD均10.0%，符合预期标准。 5.5 线性 5.5.1 溶液配制戊烷储备液A:精密称量144mg戊烷到25ml容量瓶，用DMF稀释、溶解、定容、摇匀。二氯甲烷储备液A:精密称量22mg戊烷到25ml容量瓶，用DMF稀释、溶解、定容、摇匀。三氯甲烷储备液A:精密称量7.5mg戊烷到50ml容量瓶，DMF稀释、溶解、定容、摇匀。戊烷储备液B:精密称量30mg戊烷到100ml容量瓶，用DMF稀释、溶解、定容、摇匀。二氯甲烷储备液B:精密称量22mg戊烷到100ml容量瓶，DMF稀释、溶解、定容、摇匀。 1mL DMF 50ML DMF 三氯甲烷储备液B:精密称量30mg戊烷到100ml容量瓶，DMF稀释、溶解、定容、摇匀。 1mL DMF 50ML DMF 戊烷储备液C:精密量取戊烷储备液B1mL DMF 20mL容量瓶 50mL容量瓶。二氯甲烷储备液C:精密量取二氯甲烷储备液B1mL DMF 20mL容量瓶 50mL容量瓶。 1mL DMF 50ML DMF 三氯甲烷储备液C:精密量取三氯甲烷储备液B1mL DMF 20mL容量瓶 50mL容量瓶。 线性溶液配制见下表：表9.线性溶液配制表浓 度戊烷储备液A二氯甲烷储备液A三氯甲烷储备液A60%限度0.6ml0.6ml0.6ml100%限度1.0ml1.0ml1.0ml160%限度1.6ml1.6ml1.6ml200%限度2.0ml2.0ml2.0mlLOQ戊烷储备液C二氯甲烷储备液C三氯甲烷储备液C5.5.2操作过程 每个浓度点测定三次，计算每个浓度点的待测溶剂A值的平均值。5.5.3 以溶剂浓度（或相对含量）对相应A值的平均值做回归曲线，计算线性回归系数 r。表10.线性实验数据与结果 线性浓度点色谱图号A戊烷C戊烷A二氯甲烷C二氯甲烷A三氯甲烷C三氯甲烷LOQ20160416001.D1.81730.32.32142.22.14772.920160416002.D20160416003.D60%20160416004.D676.96138.324.24721.02.72193.720160416005.D20160416006.D100%20160416007.D1269.3230.642.97835.34.74356.220160416008.D20160416009.D120%20160416010.D1513.7276.752.44242.95.65357.020160416011.D20160416012.D160%20160416013.D1993.6368.968.03856.27.35039.520160416014.D20160416015.D200%20160416016.D2475.3461.181.36969.69.379611.920160416017.D20160416018.Dr/0.99930.99920.9992回归方程如下图：图3.戊烷线性回归曲线图图4.二氯甲烷线性回归曲线图图5.三氯甲烷线性回归曲线图v 线性回归系数 r均0.999。5.6 线性范围内的方法准确度实验5.6.1 操作过程 1、在待测溶剂的LOQ到标准的（120%）范围内选择3个溶液点（即LOQ，100%限度，120%限度点）。配制上述3个浓度点溶液。 2、选择一批有代表性的药物主成分样品，定量称样12份样品。 3、选择9份样品分别用上述3个浓度溶液稀释，每个溶液添加3份，制成准确度验证的样品溶液。另外3份用空白溶液溶解稀释作为空白对照。 4、每个浓度点最少测定1次，计算每个浓度点每个溶剂的含量。 5、对于每个浓度点，计算相应的加样回收率（用实际溶剂测定含量除以空白溶液中溶剂含量与加样量（相对含量）之和来计算）。 5.6.2 结果表11.戊烷加样回收率数据浓度点称样量（g）添加量（ppm）原有量（ppm）测得量（ppm）回收率（%）空白0.5017N/A1175N/AN/A0.5011N/AN/A0.4995N/AN/ALOQ0.5006311751264107.3%0.505231283108.9%0.502931278108.6%100%限度0.499123151175334195.7%0.49982312340497.6%0.50152304345799.4%120限度0.499427761175378095.7%0.50062770389798.8%0.49992774385097.5%表12.二氯甲烷加样回收率数据浓度点称样量（g）添加量（ppm）原有量（ppm）测得量（ppm）回收率（%）空白0.5017N/A164N/AN/A0.5011N/AN/A0.4995N/AN/ALOQ0.500622164188100.1%0.505222186100.0%0.502922186100.0%100%限度0.499135416449295.0%0.499835349195.0%0.501535249195.2%120限度0.499441616456998.1%0.500641556797.9%0.499941656597.4%表13.三氯甲烷加样回收率数据浓度点称样量（g）添加量（ppm）原有量（ppm）测得量（ppm）回收率（%）空白0.5017N/A0N/AN/A0.5011N/AN/A0.4995N/AN/ALOQ0.50062802796.5%0.5052282692.9%0.5029282692.9%100%限度0.49916105895.1%0.4998615996.7%0.5015615895.1%120限度0.49947306791.8%0.5006736791.8%0.4999737095.9%v 加样回收率的范围是91.8%109.0%，在90%110%间，符合预期标准。5.7 方法中间精密度5.7.1 溶液配制1）供试品溶液配制精密称取塞替派0.50g两份，分别置于5mL的容量瓶中，用DMF溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试液1和供试品2 。每份测试2次。2）储备溶液 戊烷储备液：精密称取戊烷62mg置于50ml量瓶中，用DMF稀释至刻度，摇匀。二氯甲烷储备液：精密称取二氯甲烷75mg置于50ml量瓶中，用DMF稀释至刻度，摇匀。三氯甲烷储备液：精密称取三氯甲烷7.5mg置于50ml量瓶中，用DMF稀释至刻度，摇匀。3）对照溶液精密量取戊烷储备液、二氯甲烷储备溶液和三氯甲烷储备溶液各1ml置于25ml量瓶中，用DMF稀释至刻度，摇匀，得到含有戊烷50mg/ml、二氯甲烷60mg/ml和三氯甲烷6mg/ml的对照品溶液。注：样品与标准品每天重新配制5.7.2测定过程表14.实验测定人员时间安排日期实验人气相色谱仪型号第一天刘来润DQYZ46林鹏DQYZ23第二天刘来润DQYZ23林鹏DQYZ46第三天林鹏DQYZ23刘来润DQYZ46 5.7.3 结果表15.戊烷中间精密度含量(ppm)第一天第二天第三天DQYZ46-刘DQYZ23林DQYZ23-刘DQYZ46林DQYZ46-刘DQYZ23林106810301106112810981112108510221097117510331133RSD4.3%表16.二氯甲烷中间精密度含量(ppm)第一天第二天第三天DQYZ46-刘DQYZ23林DQYZ23-刘DQYZ46林DQYZ46-刘DQYZ23林168164157167174171166161161170173172RSD3.5%表17.三氯甲烷中间精密度含量(ppm)第一天第二天第三天DQYZ46-刘DQYZ23林DQYZ23-刘DQYZ46林DQYZ46-刘DQYZ23林未检出未检出未检出未检出未检出未检出未检出未检出未检出未检出未检出未检出RSDN/A v 两人两台仪器3天12次结果的RSD均10.0%5.8 方法耐用性 5.8.1操作过程 对色谱系统进行微小的变动后，测试样品并计算系统适用性溶液分离度R。观测在微小变动后色谱系统对相邻溶剂的分离情况是否符合系统适应性要求。柱温的改变：柱温36，柱温44.流速的改变：流速2ml/min，流速6ml/min色谱柱的改变: DB-624 UI(30m0.53mm3m) 编号USF421126H DB-624(30m0.53mm1m) 编号USB10170705.8.2 结果 设定柱温为36，44, 仪器平衡后各进对照液5次，记录图谱。表18.柱温实验分离度色谱柱图谱号戊烷二氯甲烷三氯甲烷3620160418001.DN/A11.112.820160418002.DN/A10.912.520160418003.DN/A10.011.420160418004.DN/A9.610.920160418005.DN/A10.312.04420160418001.DN/A8.611.120160418002.DN/A8.410.920160418003.DN/A7.49.420160418004.DN/A8.110.520160418005.DN/A7.39.3 设定柱流速为2.0mL/min,6.0mL/min, 仪器平衡后各进对照液5次，记录图谱。表19.柱流速实验分离度色谱柱图谱号戊烷二氯甲烷三氯甲烷2ml/min20160418001.DN/A10.912.420160418002.DN/A10.611.920160418003.DN/A11.112.520160418004.DN/A10.912.020160418005.DN/A10.812.26ml/min20160418001.DN/A7.111.120160418002.DN/A7.111.620160418003.DN/A6.811.220160418004.DN/A7.412.120160418005.DN/A7.311.8分别使用不同的色谱柱DB-624 UI(30m0.53mm3m) 编号USF421126H和DB-624(30m0.53mm1m)编号USB1017070，仪器平衡后各进对照液5次，记录图谱。表20.色谱柱实验分离度色谱柱图谱号戊烷二氯甲烷三氯甲烷DB-624 UI(30m0.53mm3m) 编号USF421126H20160415005.DN/A9.611.220160415006.DN/A9.511.220160415007.DN/A9.511.020160415008.DN/A9.310.820160415009.DN/A9.511.0DB-624(30m0.53mm1m)编号USB101707020160418001.DN/A6.78.020160418002.DN/A6.57.820160418003.DN/A6.57.920160418004.DN/A5.56.520160418005.DN/A7.08.2 v 方法耐用性实验中，各相邻溶剂之间的分离度均1.5，符合预期要求。第六章 结果 对塞替派残留溶剂分析方法验证，专属性、定量限、检测线、重复性线性、方法准确度、中间精密度、方法耐用性结果及参考标准见下表。表21.整体实验结果验证项目标准结果结论专属性1、空白溶媒对溶剂测试无干扰或无法消除的杂质干扰可以被扣除。无干扰符合标准2、各待测溶剂间无干扰，相邻溶剂之间的分离度应1.5。R=9.6,11.2,11.3定量限S/N在101范围内戊烷9.7（3ppm）符合标准二氯甲烷9.9（22ppm）三氯甲烷10.4（30ppm）检测限S/N在31范围内戊烷3.3（1ppm）符合标准二氯甲烷3.6（7ppm）三氯甲烷3.9（9ppm）重复性同一批样品重复6次的RSD10.0%RSD=2.2%,0.8%符合标准线性相关系数r 0.999r=0.9993,0.9992,0.9992符合标准方法准确度回收率90%110% 回收率91.8%109.0%符合标准方法中间精密度两人两台仪器3天12次样品检验结果RSD10.0%RSD=4.3%,3.5%符合标准方法耐用性R1.5最小分离度为7.0符合标准第七章 结论通过对塞替派残留溶剂的检验方法进行验证，结果表明该方法专属性、定量限、检测限、重复性、线性等各项参数均符合规定并且达到验证的可接受标准，证明塞替派残留溶剂的检测方法是合适的正确的，可以适合于相应的检测要求，可以用这种方法对塞替派残留溶剂进行检验，能够确保检验数据准确可靠第八章 讨论1. 本次验证实验色谱柱选用 DB-624毛细管柱：塞替派残留溶剂的分析要求色谱柱具有良好的分离效能，即具有良好的分离度和检测灵敏度。通常我们一般选用毛细管柱，不选用填充柱口径大，造成溶剂峰扩散，检测的灵敏度低，达不到我们分析所需要的分离效能。而弱极性的DB-624毛细管柱口径非常的小，不会引起熔剂峰的扩散，灵敏度比较的好，相比之前实验使用的色谱柱更加准确，得到结果更加可信。2. 本次验证实验温度选用：色谱柱的初温应该要接近样品中最轻组分的沸点，终温则是根据样品中最重的物质的沸点。本实验初温选择与戊烷沸点最接近的40摄氏度，终温选择大于三氯甲烷沸点的200摄氏度。样品程序升温选用常用的20/min程序升温法，具有适用性，适合于企业药品残留溶剂检验的需求。检测器温度选择的原则是不能让流出色谱柱的物质冷凝，所以FID检测器的温度大于沸点最高的三氯甲烷，防止流出的戊烷、二氯甲烷、三氯甲烷的冷凝。减少因实验条件造成的测定结果误差，使实验的结果更加真实可信。参考文献1何卫民. 有机溶剂残留量测定方法的验证J. 中国药业, 2006, 15(1): 43-44.2国家药典委员会，中华人民共和国药典M（2015版）.北京：中国医药科技出版社，20103陈苏伟,潘勇琴,蔡纪青.中、美、英三国药典中有机溶剂残留量测定法的比较J.海峡药学，2006，18（5）：83844江苏恒瑞医药股份有限公司，QC-017 分析方法验证、验证和转移程序A。连云港：江苏恒瑞医药股份有限公司.2015，1-18页。5杭太俊，药物分析M，第7版.北京：人民卫生出版社，2011，143-169页，475-484页。致谢时光飞逝，日月如梭，转眼间大学四年的学习时期即将结束，回首过往，在沈阳药科大学的学习生活中，认识了众多学识广博的老师和青春活泼的同学，必将是我永远最美好的记忆之一。大学时期，我的知识和综合素质上都得到了全面的提升，这里面固然有我自身的努力，除此之外更离不开老师的谆谆教导，家人以及朋友的支持、鼓励与帮助。论文的写作枯燥艰辛但又富有挑战的，本文的完成过程中，我得到了杨星钢老师和张亮主任的悉心指导。杨星钢老师渊博的知识、一丝不苟的作风、注重培养学生独立自主精神态度让我受益匪浅，在这里表示对其最真挚的感谢。感谢江苏恒瑞医药有限公司给我提供的实习机会，在实习期间我得到了张亮主任和各位同事的关心和指导，教会了我许多书本上学不到的知识。此外，我要感谢沈阳药科大学为我提供的学习机会和学习环境，感谢各位老师对我的敦敦教诲，感谢同学在我完成论文期间给我的建议，还有其他几个在恒瑞一起实习的同学，感谢他们对我的支持和鼓励，感谢家人对我关心和支持。一个人的成长没有别人的帮助与支持是不可能的，在此对所有关心与帮助过我的人表示由衷的感谢。校园里的四年时光教会我们的不仅是知识还有做人的道理，今后我将更加努力的好好学习、好好生活。