临检重点.doc

血液样本采集和血涂片制备一、 血液组成：血液由血细胞（红细胞、白细胞、血小板）和血浆组成二、 血液的生理功能：具有运输功能、协调功能、维护机体内环境稳定和防御功能。一、 抗凝剂的选择（1） 乙二胺四乙酸（EDTA）盐 能与血液中钙离子结合成螯合物，使钙离子失去凝血作用，阻止血液凝固（2） 草酸盐 常用草酸钠、草酸钾、草酸铵，溶解后的草酸根例子能与样本中的钙离子形成草酸钙沉淀，是钙离子失去凝血作用，阻止血液凝固。草酸盐对凝血因子V的保护作用差，影响凝血酶原时间测定，而且草酸盐与钙离子结合后形成的沉淀物，影响自动凝血仪检测结果，因此，草酸盐不适用于凝血检查（3） 肝素 加强抗凝血酶（AT）灭活丝氨酸蛋白酶作用，阻止凝血酶的形成，并组织血小板凝集等作用，从而阻止血液凝固（4） 枸橼酸盐 能与能与血液中钙离子结合成螯合物，使钙离子失去凝血作用，阻止血液凝固二、 血液涂片的制备 新载玻片常带有游离碱质，必须用1mol/LHCl浸泡24h，清水冲洗，干燥后备用三、 血液细胞染色（1） 瑞士染色法瑞士染料：酸性染料伊红（E-）和碱性染料亚甲蓝（M+）组成。将适量伊红、没蓝溶解在甲醇中，即为瑞士燃料。甲醇的作用：溶解没蓝和伊红；固定细胞形态染色原理：既有物理吸附作用，又有化学的亲和作用（2） 吉母萨染色法染色原理：有天青、伊红组成瑞士染色法是最经典最常用的染色法，尤其对于细胞质成分、中性颗粒等可获得很好的染色效果，但对细胞核的着色能力略差。吉母萨染色对细胞核、寄生虫赵瑟较好，结构更清晰，对对细胞质成分的着色能力略差。采用瑞士-吉母萨复合然也可使细胞质、颗粒、胞核均获得满意的染色效果。四、 质量控制（1） 血涂片制备：制备涂片时，血滴愈大、角度愈大、推片速度愉快，血膜愈厚，繁殖则愈薄。血细胞比容增高、血液黏度较高时，应采用小血滴、小角度、慢推，可得满意结果；血细胞比容减低、血液较稀时，应采用大血滴、大角度、快推（2） 血液细胞染色：染色深浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、PH值密切相关红细胞检查一、 红细胞计数检测原理：参考值：成年男性（4-5.5）*10*12/L，成年女性（3.5-5.0）*10*12/L；新生儿（6-7）*10*12/L； 医学决定水平：高于6.8*10*12/L，应采取治疗措施；地狱参考值低限，为诊断贫血界限，低于1.5*10*12/L，应考虑输血临床意义：二、血红蛋白测定检测原理：HICN测定法原理：血液中除硫化血红蛋白（SHb）外的各种Hb均可被高铁氰化钾氧化呈高铁血红蛋白，再和CN-结合生成稳定的棕红色复合物氰化高铁血红蛋白，其在540nm处有一吸收峰，用分光光度计测定该处的吸光度，经换算即可得到每升血液中的血红蛋白度，再通过制备的标准曲线查得血红蛋白浓度SDS测定法原理：参考值：男性120-170g/L；女性110-150g/L三、 红细胞形态检查检测原理：将细胞分布均匀的血涂片进行染色（如瑞士染色）后，根据各种细胞核成分各自的呈色特点，在显微镜下进行观察和识别参考值：瑞士染色血图片成熟红细胞形态为双凹圆盘形，细胞大小一致，平均直径为7.2um，淡粉红色，中央1/3为生理性淡然区，胞质内无异常结构。临床意义：（1）红细胞大小改变小红细胞：直径10um的红细胞。见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血恶性贫血巨红细胞：直径15um的红细胞。见于叶酸和维生素B12缺乏所致的巨幼细胞性贫血红细胞大小不均：红细胞间直径相差一倍以上。见于严重的增生性贫血如巨幼细胞性贫血（2） 细胞内血红蛋白含量改变正常色素性：见于正常人、急性失血、再生障碍性贫血和白血病低色素性：红细胞中央生理性浅染区扩大，称为环形红细胞。见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、鉄幼粒细胞性贫血、某些血红蛋白病高色素性：红细胞中央浅染区消失，整个红细胞染成红色，胞体增大，平均红细胞血红蛋白含量增高，平均血红蛋白浓度正常。见于巨幼细胞性贫血（3） 红细胞形态改变四、 血细胞比容测定（Hct）参考值：温氏法：男性0.4-0.5；女性0.37-0.48微量法：男性 0.470.04，女性0.420.05五、 红细胞平均指数检测原理：红细胞平均指数包括红细胞平均体积（MCV），每个红细胞平均体积大小，以飞升(fl)为单位；红细胞平均血红蛋白含量（MCH），每个红细胞内平均所含血红蛋白量，以皮克pg为单位；红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC），平均每升血红细胞中所含的血红蛋白浓度，以g/L为单位MCV=Hct/RBC 80-100 MCH=Hb/RBC 26-34 MCHC=Hb/Hct 320-360六、 红细胞体积分布宽带（RDW）检测原理：红细胞体积分布宽带（RDW）反应红细胞体积大小的异质程度，常用变异系数CV表示，由血液分析仪的红细胞体积直方图导出。作为缺铁性贫血（IDA）筛选诊断和疗效观察指标七、 网织红细胞计数：网织红细胞（RET）是晚红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的国度细胞，属于尚未完全成熟的红细胞，其胞质中残存的噬碱性物质核糖核酸（RNA），经活体染色后，嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒、颗粒与颗粒连缀成线，线练成网，故而得名。参考值：成人：25-85*10*9/L正常时外周血网织红细胞红细胞中的型约占20%-30%，型约占70%-80%，若骨髓增生明显，可出现型和型网织红细胞。八、 红细胞沉降率质量控制：（1） 血浆中各种蛋白比例：小分子蛋白如清蛋白、卵磷脂等使血沉减缓，大分子蛋白如纤维蛋白原、急性反应蛋白、免疫球蛋白、巨球蛋白、胆固醇、甘油三酯等使血沉加快（2） 红细胞数量和形状：数量减少使血沉加快，数量增多使血沉减慢。但数量太少血沉也减慢；红细胞直径，直径越大血沉越快，球形红细胞、镰刀红细胞使血沉减慢（3） 血沉管：若血沉管倾斜3度，沉降率增加30%（4） 血样本：抗凝剂浓度怎讲，、血液凝固时血沉减慢（5） 温度：室温过高血沉加快、室温过低血沉减慢参考值：魏氏法50,男性 0-20mm/h，女性0-30mm/h；85,男性 0-30mm/h，女性0-42mm/h；儿童0-10mm/h。 潘氏法成人：男性0-10mm/h，女性0-12mm/h尿液生成和标本采集及处理一、尿液生成机制：1. 肾小球滤过 当机体的循环血液流经肾小球时，由于肾小球滤过膜的屏障作用，血液中的细胞成分及大部分血浆蛋白无法通过，而其余成分几乎全部被滤入肾小囊腔内，形成肾小球滤过液，称为原尿（1）屏障作用：孔径屏障电荷屏障（2）滤过膜通透性：取决于被滤过物质相对分子质量大小及所带电荷性质，正电荷较易通过，负电荷较难通过滤过膜（3）原尿成分：除无血细胞和含极少量蛋白质外，其他物质如葡萄糖，无机盐，等的浓度几乎和血浆相同2. 肾小管和集合管重吸收：肾近曲小管是重吸收的主要场所，原曲小管、集合管事肾脏最终实现浓缩和稀释尿功能的场所3. 肾小管分泌：肾小管分泌作用包括肾小管和集合管的泌H+，NH4+的作用及Na+-H+交换作用二、 尿标本采集 尿标本需具备最基本内容：患者全名，性别，科别，床号采集日期，时间，标本类别采集方法，尿量，保存条件（1）患者准备：（2）标本容器准备：一般应能荣纳50ml以上尿的容积，干燥无污染无化学物质，材料不与尿发生反应的惰性材料（3）尿标本采集种类：晨尿：推荐采集第二次晨尿代替首次晨尿；随机尿；计时尿；3h尿：一般收集上午6-9点时段内的尿，用于尿有形成分检测，餐后尿通常午餐后至下午2时的尿用于病理性糖尿、蛋白尿测定，24h尿，患者上午8时排尿一次至次8时的全部尿，特殊试验尿如尿三杯试验，多用于男性下尿路及生殖系统疾病定位初步判断，耐受性试验尿如经前列腺按摩后排尿收集尿标本；无菌尿：中段尿（4）尿标本采集质量管理三、尿标本处理（1）尿标本保存：2h内及时送检，最好在30min内完成检验。多保存于2-8冰箱活冰浴中。防腐：常用的防腐剂有甲醛（起固定作用）甲苯（隔绝空气，用于尿糖、尿蛋白的检测），麝香草酚（抑制细菌生长），浓盐酸，冰乙酸（醛固酮等尿防腐），戊二醛（尿沉渣固定与防腐）（2）质量控制：冷藏时间最好不要超过6h；甲醛是一种还原性物质，可产生假阳性，用量过大可与尿素产生沉淀，干扰显微镜检查；甲苯用量必须足够，取样时应插入甲苯液层，吸取尿；麝香草酚用量过多可是尿蛋白加热乙酸法成假阳性反应，干扰尿胆色素检出尿理学检验一、 尿量 一般指24h内排出体外的尿总量，有时也指每小时排出的尿量。尿量的多少取决于肾脏生成尿的能力和肾脏浓缩和稀释功能（1）质量控制：尿量采集必须完全而准确，使用标准量筒测定尿量，精确至1ml（2）参考值：成年人：1000-2000ml/L。儿童按每公斤体重计排尿量，约为成年人的3-4倍（2）临床意义： 多尿：24h尿总量成人超过2500ml者，儿童超过3L者 少尿：24h尿量少于400ml或每h尿量持续少于17ml（儿童0.8ml/kg） 无尿：尿量100ml/24h或5/HPF，称镜下脓尿。上皮细胞:（1） 上皮细胞形态：四、 尿管型检查：尿蛋白质和T-H蛋白时形成管型的基础物质管型种类、形态和临床意义（1） 透明管型：大量出现见于肾小球肾炎（2） 细胞管型;白细胞管型 提示肾实质有细菌感染性病变。（3） 颗粒管型：提示肾脏有实质性病变，慢性肾小球肾炎时颗粒管型大量出现（4） 腊样管型：提示肾小管有严重病变、预后差（5） 脂肪管型：肾小管损伤，肾小管上皮细胞脂肪变性（6） 宽大管型：见于重症肾病五、 尿结晶检查生理性结晶：草酸钙结晶尿酸结晶磷酸盐类结晶尿酸铵结晶：提示膀胱有细菌感染病理性结晶：胆红素结晶胱氨酸结晶亮氨酸与酪氨酸结晶:急性肝坏死胆固醇结晶含铁血黄素药物结晶六、1h尿中有形成分计数操作方法上午6-9点收集3h内的全部尿，计数10个大方格内红细胞、白细胞、管型数。1h排泄率=1000*C*V/10T=33.3CV.C为计数10个大方格的细胞或管型数，V为3h内总尿量，T为留取标本的时间（3h）。1000为微升转换为毫升数。尿液化学检查一、 尿液酸碱度测定（1） 检测方法及评价试带法：采用甲基红和溴麝香草酚兰5.0-9.0指示剂法：溴麝香草酚兰，蓝色为碱性尿，黄色为酸性尿，绿色为中性尿6.0-7.6滴定法：操作复杂PH计法二、 尿液蛋白质检查定义：血浆流经肾小球时，仅有少量小分子两蛋白质通过肾小球滤过膜，中、大分子蛋白质不能滤过。原尿中蛋白质绝大部分被肾小管重吸收，故尿中只含有极微量的蛋白质。常规化学定性为阴性。当原尿中 蛋白质超过150mg/24h或超过100mg/L时，蛋白定性阳性，称为蛋白尿。检测方法及评价尿蛋白定性实验：试带法：PH指示剂的蛋白误差原理。会漏检本周蛋白 磺基水杨酸法：为参考方法 加热乙酸法：尿蛋白定量实验：沉淀法： 比浊法 比色法： 参考值：定性：阴性。定量试验：0.1g/L，或8.88mol/L），或肾小管重吸收能力下降时，尿糖定性试验呈阳性，称为糖尿检测方法及评价：试带法：葡萄糖氧化酶法，vitc使成假阴性薄层层析法：班氏法：vitc使成假阳性参考值：定性：阴性。四、 尿液酮体检查定义：是尿液中乙酰乙酸、-羟丁酸、丙酮的总称检测方法及评价：试带法：亚硝基铁氰化钠法湿化学法：Rothera法，在碱性条件下，亚硝基铁氰化钠可与尿中乙酰乙酸、丙酮起反应，呈现紫色，但不与-羟丁酸反应参考值：定性：阴性。五、 尿液胆红素检查检测方法及评价：重氮法：在强酸介质中结合胆红素与二氯苯胺重氮盐起偶联反应，生成红色复合物氧化法：用氧化剂将胆红素氧化为胆绿素，反应呈绿色为阳性参考值：定性：阴性。临床意义：阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸尿胆红素阳性、先天性高胆红素黄疸、溶血性黄疸尿胆红素阴性类型血清尿液粪便颜色结合胆红素未结合胆红素胆红素尿胆原正常人无或者极微为主（）少量棕黄色溶血性黄疸（）加深肝细胞性黄疸（）变浅梗阻性黄疸（）变浅或无注：表示轻度增加，表示中度增加，表示明显增加，（）表示阴性，（）表示阳性六、尿液尿胆原和尿胆素检查检测方法及评价：尿胆原：湿化学Ehrlich法：尿胆原在酸性溶液中，与对二甲氨基苯甲醛反应，生成樱红色化合物 试带法：原理同上 定性参考值：尿胆原定性：阴性或弱阳性。尿胆素定性：阴性临床意义：尿胆原检查结合血清胆红素、尿胆红素、粪胆原等的检查，主要用于黄疸的诊断和鉴别诊断七、 尿血红蛋白检查检测方法及评价：化学法：氰化血红蛋白氧化酶法试带法：尿液分析仪及其临床应用一、 尿液干化学分析仪（1） 检测原理尿液分析仪组成：机械系统、光学系统、电路系统尿液分析仪检测试带：以滤纸为载体，将各种试剂成分浸渍后干燥，作为试剂层，再在表面覆盖一层纤维膜，作为反射层。尿液侵入试带后与试剂发生反应，产生颜色变化（2） 尿液分析仪检测参数酸碱度：酸碱指示剂法，甲基红和溴麝香草酚蓝，4.5-9.0，橙红经黄绿到蓝色变化比密：多聚电解质离子解离法，溴麝香草酚蓝，尿比密偏高时，尿液中所含盐类成分较多，试剂带中电解质多聚体释放出的H+增多，溴麝香草酚蓝为分子型，呈现黄色；尿比密偏低时，尿中所含盐类成分较少，试带中电解质多聚体释放的H+减低，溴麝香草酚蓝多为离子型，呈现蓝色。这种尿液中所含盐类成分的高低可有试剂块中的酸碱指示剂变化呈现出来，颜色有蓝经绿、茶绿至黄色变化，进而换算成尿液的比密值。尿糖（GLU）：葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法，常用的色素原有邻联甲苯胺，碘化钾蛋白质：PH指示剂蛋白质误差法，溴麝香草酚蓝酮体：亚硝基铁氰化钠法。在碱性条件下，亚硝基铁氰化钠与尿液中乙酰乙酸、丙酮起反应，试剂模块发生由黄色到红色的颜色变化，颜色深浅与酮体含量呈正比胆红素：偶氮反应法尿胆原：全反应法或重氮反应法尿红细胞或血红蛋白：血红蛋白累过氧化物酶法亚硝酸盐：硝酸盐还原法。检测细菌白细胞：白细胞酯酶法，对粒细胞敏感，而单核细胞、淋巴细胞胞质中午酯酶维生素C：还原法。能使GLU氧化酶法、亚硝酸盐、胆红素、尿白细胞、尿隐血产生假阴性、对班氏法GLU产生假阳性（3） 临床应用及注意事项尿蛋白的参比方法为磺基水杨酸法，比密的参比方法为折射仪法，尿葡萄糖的确证实验为葡萄糖氧化酶定量法，尿胆红素确证实验为Harrison法，尿白细胞、红细胞确证实验为尿沉渣显微镜镜检法当干化学尿试带合格、尿液分析仪运转正常情况下，试验结果中白细胞、红细胞、蛋白及亚硝酸盐为阴性时，可以免去红细胞和白细胞的显微镜检查，但如果其中有一项阳性结果，必须同时进行显微镜检查。粪便检验一、 标本采集（1） 标本容器：应清洁、干燥、有盖、无吸水和渗漏。细菌学检查，分百年标本应采集于灭菌、有盖的容器内（2） 标本采集：一般采集指头大小（约3-5g）新鲜粪便，标本采集后一般应于1h内检验完毕（3） 检查阿米巴滋养体时，应于排便后立即检验，冬季还需对标本进行保温处理。（4） 挑去含有粘液、脓血等异常成分粪便，外观无明显异常的，应于粪便内外多点取样。（5） 隐血试验时应嘱咐患者素食3d后留取标本，禁食维生素C及铁剂等药品。应连续查3d（6） 特殊情况无粪便排出又必须检验时，可采用肛门指诊或采便管采集标本。（7） 寄生虫检查蛲虫时需用透明薄膜拭子或棉拭子于清晨排便前拭取肛门四周并立即镜检。（8） 24h标本：检查胆石、胰石、寄生虫体积虫卵计数时，应收集24h内粪便送检二、 理学检查外观：（1） 粘液便：提示倡导受刺激或有炎症，见于各种肠炎、细菌性痢疾及阿米巴痢疾、急性血吸虫病等。小肠炎症时，粘液多混合于粪便中，大肠炎症时，粘液一般附着于粪便表面（2） 鲜血便：提示下消化道有出血，见于肛裂、痔疮、直肠息肉及结肠癌等（3） 脓便及脓血便：见于细菌性痢疾、阿米巴痢疾、结肠癌或直肠癌、溃疡性结肠炎等，其中细菌性痢疾以脓及粘液为主，脓中带血。阿米巴痢疾以血为主，血中带脓，呈果酱样。（4） 柏油样便：上消化道出血，超过50ml时粪便呈黑色或褐色，质软有光泽，柏油样。服用铋剂、活性炭排出黑色便，但无光泽，隐血试验为阴性（5） 胨状便：（6） 稀糊状或稀汁样便：见于各种腹泻，尤其是急性胃肠炎（7） 白陶土样便：呈灰白色，主要见于梗阻性黄疸（8） 米泔样便：呈乳白色淘米水样，多见于霍乱、副霍乱颜色正常粪便为黄色或褐色鲜红色：倡导下段出血，如肛裂、痔疮暗红色（果酱色）：阿米巴痢疾白色或灰白色：肠道梗阻绿色：乳儿粪便中因含有胆绿素而呈现绿色黑色或柏油色：上消化道出血、服用铁剂、动物血、活性炭及某些中药寄生虫与结石：三、 化学检验（1） 隐血试验：化学法：检测原理：利用血红蛋白中含铁血红素有类似过氧化物酶的作用，最用氧化色原物而使之呈色。假阳性：食用动物性食品、大量生食蔬菜；假阴性：服用大量维生素C、血液在肠道停留过久，血红蛋白被细菌降解（2） 脂肪：脂肪占粪便干重约10%-20%，正常范围为2-5g，超过6g为脂肪泻（3） 胆色素：粪便胆红素、粪胆原、粪胆素四、 显微镜检查：（1） 操作方法：最常用的是粪便生理盐水涂片检验。原则上是要观察10个以上的高倍视野（2） 细胞：红细胞、白细胞、大吞噬细胞、上皮细胞五、 病原微生物检查（1） 细菌：主要菌群为大肠埃希菌、肠球菌、厌氧菌。细菌占粪便干重1/3，球菌与杆菌比值为1:10（2） 寄生虫卵：常用饱和盐水飘浮法、离心沉淀法、静置沉淀集卵法来提高阳性检出率（3） 肠道原虫：溶组织阿米巴、蓝氏贾第鞭毛虫、隐孢子虫、人芽孢子虫（4） 酵母菌（5） 真菌六、 质量控制（1） 标本采集与运送：采集部位、5-10g、稀便2ml，1h完成检验、阿米巴标本注意保温（2） 显微镜质量控制（3） 隐血试验质量控制“3d禁食肉、维生素C等药物脑脊液检查一、 标本采集与处理：取脑脊液标本于3个无菌试管中，每个1-2ml，第一管做病原生物学检验、第二管做化学和免疫学检验、第三管做理学和细胞学检验。1h内检验完毕。二、 理学检查：（1） 颜色：正常脑脊液无色透明，新生儿胆红素较多呈黄色无色：正常脑脊液、病毒性脑炎、轻型结核性脑膜炎、脊髓灰质炎、神经梅毒，结核性脑膜炎可呈毛玻璃样浑浊红色：穿刺损伤出血、蛛网膜下腔或脑室出血，穿刺损伤性脑脊液呈轻微的红色浑浊黄色：黄变症，出血、黄疸、淤滞和梗阻，黄色素、胡萝卜素、黑色素、脂色素增高白色：白细胞增高，脑膜炎球菌、肺炎球菌、溶血性链球菌引起的化脓性脑膜炎，化脓性脑膜炎呈脓性或块样浑浊绿色：脓性分泌物增多，铜绿假单胞菌性脑膜炎、急性肺炎双球菌性脑膜炎褐色：色素增多，脑膜黑色素肉瘤、黑色素瘤（2） 透明度：以清晰透明、微浑、浑浊等描述。正常清晰透明。当脑脊液白细胞超过300*10*6/L时呈浑浊；结核性脑膜炎可呈毛玻璃样浑浊，化脓性脑膜炎呈脓性或块样浑浊，穿刺损伤性脑脊液呈轻微的红色浑浊。（3） 凝固性：正常脑脊液放置12-24h后不会形成薄膜、凝块或沉淀。当脑脊液蛋白质含量超过10g/L时，可出现薄膜、凝块或沉淀。化脓性脑膜炎在1-2h内呈块状凝固；结核性脑膜炎在12-24h薄膜或纤细的凝块；神经梅毒可有小絮状凝块；蛛网膜下腔梗阻呈黄色胶样凝固；脑脊液同时存在胶样凝固、黄变症和蛋白质-细胞分离（蛋白质明显增高，细胞正常或轻度增高），称为Froin-Nonne综合症，这是蛛网膜下腔梗阻的脑脊液特点三、 显微镜检查细胞计数时，红细胞、白细胞与新生隐球菌的鉴别：新生隐球菌不溶于乙酸，加优质墨汁后可见未染色的荚膜；白细胞也不溶于乙酸，加酸后细胞核和细胞质更加明显；红细胞加酸后溶解参考值：白细胞极少，成人（0-8）*10*6/L，儿童（0-15）*10*6/L，新生儿（0-30）*10*6/L主要为单个核细胞，淋巴细胞和单核细胞之比为7:3中性粒细胞显著增高，化脓性脑膜炎；红细胞显著增高，蛛网膜下腔出血或脑出血，穿测损失；早期中性粒细胞，后期淋巴细胞轻度或中度增高，结核性脑膜炎；嗜酸性粒细胞轻度或中度增高，寄生虫感染；淋巴细胞正常或轻度增高，浆液性脑膜炎，病毒性脑膜炎，脑水肿；四、 临床应用（1） 诊断与鉴别诊断中枢神经系统感染性疾病（2） 诊断与鉴别诊断血管疾病（3） 辅助诊断脑肿瘤（4） 诊断脱髓鞘病神经梅毒：透明无凝固，蛋白质、葡萄糖正常，氯化物升高，淋巴细胞增多无细菌感染葡萄糖、氯化物正常的只有病毒性脑膜炎、脑肿瘤、脑脓肿。葡萄糖上升的只有脑出血、蛛网膜下腔出血，其他都下降；蛋白质正常的只有神经梅毒，其他都上升；无凝固的有病毒性脑膜炎，流行性乙脑，脑肿瘤，神经梅毒。浆膜腔体液检验浆膜腔：胸腔、腹腔、心包腔、关节腔一、 标本采集与保存：穿刺成功后，留取中段液体于无菌的容器内。理学检查、细胞学检查、化学检查个留取2ml，厌氧菌培养留取1ml，结核杆菌检查留取10ml。及时送检，理学检查和细胞学检查采用EDTA-Na2抗凝，化学检查采用肝素抗凝。另外留取1份不加任何抗凝剂，用于检查积液的凝固性。不能及时送检可加适量乙醇固定细胞成分二、 理学检查（1） 颜色：正常为淡黄色红色：穿刺损伤、结核、肿瘤、内脏损伤、出血性疾病等乳白色：化脓性感染、真性乳糜积液、假性乳糜积液绿色：铜绿假单胞菌感染棕色：阿米巴脓肿破溃进入胸腔或腹腔黑色：曲霉菌感染草黄色：尿毒症引起的心包积液等咖啡色：内脏损伤、恶性肿瘤、出血性疾病及穿刺损伤等（2） 透明的：正常为清晰透明（3） 凝块：正常无凝块。漏出液一般不易凝固或出现凝块，渗出液因含有较多的纤维蛋白原和细菌，细胞破坏后释放凝血活酶，可自行凝固（4） 比密：采用比密计法和折射计法，漏出液比密常小于1.015，渗出液常大于1.018化学检查：粘蛋白定性试验：漏出液阴性、渗出液阳性；蛋白质定量：漏出液30g/L蛋白质：三、 显微镜检查（1） 细胞计数：应1h内及时完成，无凝块，不遗漏：计数10个大方格细胞 参考值：红细胞无，白细胞：漏出液500*10*6/L四、 关节腔积液检查（1）标本采集与保存：分装在3支无菌试管内，第一管做理学和微生物学检查；第二管加适量肝素抗凝做化学检查和细胞学检查；第三管不加抗凝剂用于观察积液的凝固性（2） 物理学检查：量：约0.1-2ml，且很难采集。颜色；淡黄色、曹黄色或无色粘稠液体。透明的：清晰透明粘稠度：与透明质酸的浓度和质量呈正相关凝块形成：不发生凝固现象（3） 显微镜检查：细胞计数参考值：无红细胞，白细胞（200-700）*10*6/L化脓性关节炎细胞总数往往超过50000*10*6/L，急性尿酸盐痛风、类风湿关节炎细胞总数达20000*10*6/L临床意义：中性粒细胞：炎症性积液中性粒细胞增高大于0.75，化脓性关节炎中性粒细胞达0.95，风湿性关节炎、痛风、类风湿关节炎的中性粒细胞大于0.5.非感染性疾病如创伤性关节炎、退变性关节炎、肿瘤、中性粒细胞小于0.3淋巴细胞：增高主要见于类风湿关节炎早期、慢性感染、胶原疾病单核细胞增高见于病毒性关节炎嗜酸性粒细胞：增高见于风湿性关节炎、寄生虫感染精液检查一、 标本采集：禁欲3-5d，保温送检1h，温度低于20或高于40影响精子活动，间隔1-2周检查一次，连续检查2-3次二、 理学检查：（1） 精液外观和气味：正常时为浑浊的灰白色，自行液化后为半透明的乳白色；异常红色为前列腺和精囊腺炎症、结合、肿瘤或结石；黄色为前列腺炎、精囊炎等（2） 精液量：正常为2-6ml，平均3.5ml；少于2ml为精液减少，异常少于1ml或大于8ml为异常不利于生育（3） 精液液化时间：为新排出精液由胶胨状转变为自由流动状态所需的时间。室温下正常精液在排出后30min内自行液化；检查方法常用吸管法，37水浴中，每5min检查一次直至液化，记录凝固精液至完全液化的时间，超过60min仍未液化常见于前列腺炎（4） 精液粘稠度：完全液化后的精液粘度。检查方法：直接玻棒法：将玻璃棒插入精液标本，提棒时刻拉起黏丝。结果判断：正常精液黏丝长度不超过2cm 粘稠度增加时，精液悬滴可形成长于2cm的长丝粘度计法：测定0.5ml精液通过黏度计所需的时间即为精液黏稠度临床意义：粘稠度增加：精液常伴不液化，影响精子活力黏稠度下降：见于先天性无精囊腺及精子浓度太低或无精子症（5） 精液酸碱度检测方法：PH试纸或酸度计测定，应在射精后1h内完成临床意义：正常精液为7.2-7.8. PH7.8，常见于前列腺炎、精囊炎或附睾炎（6） 显微镜检查涂片检查方法：精液液化后，取1滴混匀于载玻片上，通常在低倍镜下粗略观察有无精子，是活动还是不活动。若遇无精子症，应将标本再600g下离心15min后取沉淀物重复检查涂片检查指标：精子活动率：对精子活力的定性检查。正常人30-60min内，精子活动率为80%-90%，精子活动率至少在60%以上精子存活率：对镜子存活率的观察。加等量染色液（伊红Y、台盼蓝）混匀，观察100个精子不着色与着色精子比例，死亡精子易着色；参考值为有生育能力的精子存活率58%、75%(伊红染色法)精子活动力：精子向前运动的能力，直接反映精子质量的一项指标。检查方法：取液化均匀精液1滴置载玻片上，盖上盖玻片放置片刻，在高倍镜下观察5-10个视野，计数100个精子并进行活动力分级，以百分率表示结果判断：a、快速前向运动（级：直线运动）；b、慢或呆滞的前向运动（级：运动缓慢）；c、非前向运动（级：原地运动）；d、不动（0级：不活动）参考值：射精后60min中，级精子应25%；或级、级精子的总和50%临床意义：精子活动率减低，精子存活率减低，0级、级精子在40%以上，见于精索静脉曲张、泌尿生殖系感染如前列腺炎等级使用某些药物如雌激素等三、 精子计数：参考值：精子总数39*10*6/次，精子浓度15*10*9/L四、 精子形态检查参考值：正常精液：异常精子20%。异常精子超过40%影响精液质量，超过50%可导致不孕前列腺液检查一、 标本采集：前列腺液是精液重要组成部分，约占精液30%。二、 物理学检查量：数滴至2ml前列腺液外观：正常为较稀薄、不透明的淡乳白色液体。异常：黄色浑浊呈脓性或脓血性见于严重的化脓性前列腺或精囊炎。红色见于前列腺炎、精囊炎、前列腺结核、结石和恶性肿瘤等或按摩时用力过重酸碱度：弱酸性，PH 6.3-6.5三、 显微镜检查（1） 非染色检查;卵磷脂小体：红细胞：5/HP白细胞：10/HP前列腺颗粒细胞：30/HP，球菌无（+），严重阴道炎三、 病原学检查（1） 阴道毛滴虫：生长最适PH为5.5-6.0，25-42脱落细胞检查一、 正常脱落细胞形态正常脱落上皮细胞：主要来源于复层鳞状上皮（扁平上皮）和柱状上皮（1） 鳞状上皮：复层鳞状上皮，一般有10多层细胞。分为基底层细胞、中层细胞和表层细胞基底层细胞：包括内底层细胞和外底层细胞。内底层细胞胞质呈圆形或卵圆形，直径12-15um；胞质巴氏染色呈深蓝、暗绿和灰蓝色，HE染色呈暗红色；胞核圆形或卵圆形，居中，染色质细颗粒状；核与胞质比约1:0.5-1.外底层细胞：细胞呈圆形或椭圆形，直径15-30um；胞质巴氏染色呈浅蓝色，HE染色呈暗红色；核圆形，居中或偏位，染色质疏松细颗粒状；核与胞质比1:1-2（2） 中层细胞：位于鳞状上皮中部。细胞呈圆形、梭形或多角形，直径30-40um；胞质巴氏染色呈浅蓝色或淡绿色，HE染色呈淡红色；胞核较小居中，染色质疏松呈网状；和与胞质比1:2-3.表层细胞：位于阴道黏膜最表面，细胞扁平，呈不规则多边形，细胞体积增大，直径4060um。根据细胞成熟程度，又分为角化前、不完全角化和完全角化细胞。1） 角化前细胞：细胞核圆而小，直径68um，染色较深，但染色质仍均匀细致呈颗粒状，胞质巴氏染色呈浅蓝色或淡绿色，边缘可卷褶，HE染色呈淡绿色，核胞质比为1：35.2） 不完全角化细胞：细胞核明显缩小，固缩、深染，直径为4um，胞质透明，巴氏染色呈粉红色，HE染色呈淡红色，边缘可卷褶，核胞质比为1:5.3） 完全角化细胞：细胞核消失，胞质极薄，有皱褶，巴氏染色呈杏黄或橘黄色，HE染色呈淡红色，胞质内可见细菌，此种细胞为衰老死亡细胞。（4） 复层鳞状上皮从底层到表层细胞形态的变化规律1. 细胞体积由小到大；2. 胞核由大到小，最后消失3. 核染色质由细致、疏松、均匀到粗糙、紧密、固缩4. 核胞质比由大到小5. 胞质量由少到多，胞质染色有暗红色到浅红色二、 柱状上皮细胞：主要包括涂片纤毛柱状细胞、黏液柱状细胞核储备细胞三、 上皮细胞成团脱落时的形态特点（1） 成团脱落的鳞状上皮：基底层细胞呈多边形，细胞大小一致，核一致，距离相等，呈嵌铺砖装（2） 成团脱落的纤毛柱状上皮：细胞常紧密聚合成堆，细胞间界限不清楚，呈融合体样，可见细胞核互相重叠，形成核团。在核团周围是胞质融合形成的胞浆质带。整个细胞团的边缘有时可见纤毛（3） 成团脱落的黏液柱状上皮：细胞呈蜂窝状结构，胞质内含大量黏液，细胞体积较大表层鳞状上皮常表现为固缩性退变；中、底层细胞常表现为肿胀性退变。柱状上皮细胞较鳞状上皮细胞更易发生退变，多见于肿胀性退变。四、 恶性肿瘤细胞的主要形态特征（1） 细胞核的改变：核增大，核畸形，核深染，核胞质比失调（增大）（2） 细胞质的改变：胞质量异常（相对减少），染色加深，细胞形态畸形，空泡变异（戒指样细胞），吞噬异物（3） 癌细胞团：涂片中除可见单个散在癌细胞，还可见成团脱落的癌细胞。癌细胞团中，细胞大小、形态不等，失去极性，排列紊乱，癌细胞繁殖快，互相挤压，呈堆叠状或镶嵌