柑桔皮渣发酵高蛋白饲料新工艺研究.doc

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重庆市自然科学基金计划项目
立 项 申 请 书

项目名称: 柑桔皮渣发酵高蛋白饲料新工艺研究
所属专项: 其 它
申 请 者: 殷钟意
申报单位: 重庆工商大学( 签章)
联系电话: 62769652
申请日期: 3月

重庆市科学技术委员会
二ΟΟ五年四月制

填 写 说 明

1、 凡申报重庆市自然科学基金计划的项目须填写此立项申请书。
2、 立项申请书由项目的主承担者填写, 经项目主承担者工作单位审查同意后, 一般项目一式三份、 重点项目一式七份并附申报软盘一张报送重庆市科委。
3、 填写申请书前, 请先查阅《重庆市自然科学基金计划项目管理办法》及有关规定, 其中重点项目应围绕当年”项目指南”内容撰写。
4、 立项申请书所列内容都要据实填写, 表示应明确、 完整、 严谨、 扼要( 外文名词要同时用中文表示) 。
5、 项目组主要成员本人应在申请书上亲自签名以示同意合作。
6、 立项申请书一律要求用A4纸张打印, 否则不予受理。
7、 所有申报材料恕不退还, 请注意留底。

一、 基本信息

项目名称
柑桔皮渣发酵高蛋白饲料新工艺研究
所属专项
其 它
承担单位
重庆工商大学
组织部门
科研处
单位地址
南岸区学府大道5公里
邮编
400067
单位性质
1
1.高等院校 2.科研院所 3.企业 4.其它
工商注册登记类型
1
1.国有 2.集体 3.股份合作 4.联营企业 5.有限责任公司 6.股份有限公司7.私营企业 8.港澳台商投资企业 9.外资企业 10.其它企业
单位法定代表
姓名
王崇举
联系
电话
62769362
手机
66776681
单位
传真
62769515
项目负责人
姓名
殷钟意
联系
电话
62769652
手机

E-mail

项目主要合作单位

计划类别
1
1.自然科学基金 2.院士专项
项目主要服务行业
1
1.农业 2.制造业 3.电子信息 4.医药化工 5.交通、 能源 6.建筑建材 7.冶金 8.轻工纺织 9.社会事业 10. 其它
项目所属技术领域
3
1.电子信息 2.生物医药 3.现代农业 4.环境保护 5.新材料 6.光机电 7.交通 8.能源资源 9.社会事业 10.其它
项目研究所属主要学科
一级学科代码及名称
二级学科代码及名称
三级学科代码及名称
代码: 180
名称: 生物学
代码: 180.71
名称: 生物技术
代码: 180.7150
名称: 微生物工程
起止时间
.9- .12
总投资
6万元
申请资助
4万元
主要研究内容
(限100字)

以柑桔皮渣为碳源, 以高氮农业副产品为氮源, 筛选高产蛋白质饲料的菌株, 构建高效复合菌群, 并确定最佳配比; 优化原料粉碎脱水、 发酵及其产物灭菌干燥工艺, 为推广应用打下基础。

预期成果形式或达到的目标
(限100字)

开发一种既能高产蛋白质饲料及氨基酸, 又能缩短发酵时间的优势复合菌群及最优工艺, 使其蛋白质含量达30％以上, 其它指标达到家禽配合饲料国标; 申请国家创造专利1项, 发表核心期刊论文2～3篇。
注: 此简表的选择项均为单选项。学科代码及名称按国家标准( 可在市科委网站上查询) 至少填至二级学科。

二、 项目组主要成员( 含项目负责人)
编号
姓 名
出生年月
学历
专业技术职称
工作单位
联系电话
从事专业
项目中
的分工
每年工作
时间(月)
签 字
1
殷钟意
1966.3
本科
高级实验师
重庆工商大学
62769652
化学
主持, 负责全部研究方案的试验
10

2
郑旭煦
1964.10
博士
教授
重庆工商大学
62768012
生物医学工程
项目策划,研究方案和试验方案设计
5

3
彭洪光
1944.6
本科
副教授
西南大学( 校外聘研究人员)
68252960
微生物工程
发酵菌株筛选与工艺优化技术指导
5

4
王星敏
1976.8
研究生
讲师
重庆工商大学
62769787
应用化学
辅料氮源的选定
7

5
彭 荣
1978.10
硕士
讲师
重庆工商大学
62769785
应用微生物
高产蛋白质饲料的菌株筛选
8

6
崔 榕
1968.9
本科
实验师
重庆工商大学
62769785
化学
菌株筛选与人工诱变
8

7
王 颖
1978.11
研究生

重庆工商大学
62763646
环境工程
发酵菌株筛选与工艺优化试验研究
10

8
吕 靖
1980.04
研究生

重庆工商大学

环境工程
原料脱水、 产物灭菌干燥工艺试验研究
10

9

10

三、 经费预算( 单位:万元)

经费来源预算
经费支出预算
科目
预算数
科目
预算数
其中市科技
计划拨款部分
1、 市科技计划拨款
4.0
1、 小型仪器设备费
1.0
1.0
2、 国家部委拨款
0
2、 能源材料费
2.0
2.0
3、 行业主管部门拨款
0
3、 试验外协费
2.0
0.5
4、 区县科委拨款
0
4、 科研业务费
1.0
0.5
5、 单位自筹
2.0
5、 管理费

6、 其它资金
0
6、 其它费用

来源预算合计
6.0
支出预算合计
6.0
4.0
市科技计划预算拨款
年度

合计
经费
4.0
0
0
4.0
注: 1、 市科技计划资助强度为: 一般项目2-4万元, 重点项目20-40万元。
2、 一般项目不得提取管理费。
四、 申请书正文
参照以下提纲撰写, 要求内容翔实、 清晰, 层次分明, 主题突出。
( 一) 立项依据与研究内容
1、 项目的立项依据( 重点项目须附主要参考文献详细目录)
1.1 目的意义
柑桔是全球的第一大水果, 年产量达到1亿多吨。在柑桔生产方面, 中国柑桔类年产量世界第一, 据农业部统计, 中国柑桔总产量已连续三年稳定在1000万吨以上, 并预计到 将达到1200万吨以上。随着中国经济的快速发展, 人民生活水平也随之提高, 对高品质的柑桔加工产品的需求也将会迅速增加。一些柑桔加工公司在湖南、 江西、 重庆等地建立了大面积的种植基地, 例如, 在重庆市万州区就已建立了与年产柑桔浓缩汁5万吨相配套的原料基地, 预计在未来的几年中重庆市的忠县、 江津、 奉节、 巫山、 长寿等产业基地将不断扩大, 并建成20万亩柑桔现代化生产技术示范基地和年加工处理能力20吨以上的橙汁加工生产线。可是, 随着柑桔原汁产量的不断增加, 柑桔加工的副产品柑桔皮渣的量也随之赠加, 柑桔鲜食和加工下脚料的桔皮数量约占柑桔产量的50%。
国外对桔皮渣的处理主要采用先进设备提取其中的香精油、 α-1-8-萜二烯、 黄酮苷、 果胶等物质, 剩余部分经烘干后作为饲料的添加成分或者加入工程菌发酵生产乙醇。中国柑桔生产基地产量大, 当前尚无配套的大型设备将柑桔皮渣综合利用, 基本上都作为废弃物处理( 需上交60元/吨的垃圾处理费) , 造成柑桔皮渣的大量堆积。这既是有效资源的极大浪费, 又对环境造成极大的污染, 影响生态平衡。
采用微生物发酵方法将柑桔皮渣发酵成高蛋白动物饲料, 是一种解决大量柑桔皮渣利用的有效途径, 既能够将废弃物资源化, 费用低, 无二次污染, 又能为生产商创造经济效益, 市场潜力大, 必将得到广泛的应用。
1.2 柑桔皮渣发酵研究现状及存在的主要问题
当前国内已有柑桔研究所对柑桔皮渣进行了微生物发酵生产高蛋白饲料研究, 建立了以黑曲霉(2281)、 康宁木霉(13016)、 产朊假丝酵母(1807)为出发菌株的复合菌系和相应的工艺, 但没有包括扣囊复膜孢酵母、 白地霉等一些产较高蛋白质的菌种, 其液态发酵的固体产品粗蛋白含量接近10％; 而且发酵过程中呈现胶糊状状态, 影响微生物的自由生长, 不利于后期发酵产品的烘干。其它有关柑桔皮渣发酵菌株的筛选等方面的报道甚少。
柑桔皮含有丰富的营养物质, 其中糖类含量55~65%,粗蛋白含量6.4~8.1%, 粗脂肪的含量为2.3~2.6%, 粗纤维的含量为9.5~10.6%, 钙0.67~0.74%, 磷0.27~0.29%, 赖氨酸0.26%,精氨酸0.63%, 亮氨酸0.37%; 桔皮的微量元素和维生素含量也很丰富, 约含锰8.67 mg/Kg, 铁67.57 mg/Kg, 铜2.43 mg/Kg, 胡萝卜素24.4 mg/Kg, VE61.7 mg/Kg。即柑桔皮渣可提供微生物生长所需要的各种碳源, 但其蛋白质和氨氮量都很低, 在以往的研究中虽可用发酵方法将蛋白质含量提高5~10倍, 但其蛋白总含量仍不能超过18%。若要大幅度提高发酵饲料的蛋白质含量, 就必须在柑桔皮渣中加入一些含氮量较高的物质, 比如: 麸皮、 秸秆、 豆饼粕等作为辅助氮源, 并经过微生物的转化从根本上提高其蛋白质的含量。
1.3 柑桔皮渣发酵的前期试验研究
针对柑桔皮渣发酵实际运行中存在的问题, 课题组进行了以下实验研究:
( 1) 在采用果汁厂产生的柑桔皮渣作原料时, 由于柑桔皮渣中的水分只是部分榨出, 尚有小部分水分与柑桔皮渣一同排出, 致使柑桔皮渣呈现胶糊状状态, 本课题组初步实验研究表明, 这种胶糊状物是柑桔皮渣中的水分混溶柑桔皮中含量为20~30%的果胶造成的。若用这种胶糊状的柑桔皮渣发酵, 不但影响微生物的自由生长、 对发酵产生负面影响, 而且不利于后期发酵产品的烘干。果胶是一种亲水性植物胶, 基本化学结构是D-吡喃半乳糖醛酸1,4-糖苷键连接成的高分子化合物, 其分子由许多α-半乳糖醛酸的1-C和4-C经由氧桥连而成链状。果胶分子量10～40万u, 属直链多糖; 且植物果胶对生物体有较好的药用作用, 如: ①排毒作用——可排除生物体内的铅、 汞离子, ②降糖、 降低胆固醇以及防癌的作用, 由此, 柑桔皮渣在发酵过程中还应保留果胶成分。经过一段时间的实验证明, 采用固态发酵前若将桔皮渣脱除水分并充分粉碎, 在发酵过程中再加入既具有吸水隔离作用、 又含氮量较高的干性农副产品作为添加辅料( 例如, 麦麸和稻草) , 柑桔皮渣胶糊状态明显减少, 发酵产品的粗蛋白含量可接近30%。因此采用脱水-粉碎-外加含氮辅料的固态发酵方法不但能够解决柑桔皮渣胶糊状问题, 而且能为微生物提供可吸收的氮源。因此本项目解决柑桔皮渣脱水－粉碎及辅料的筛选等工艺。
( 2) 课题组同时试验了半液态发酵法( 即固态物质加水稀释成粘稠流质物体) , 经过对最终流质产物的溶解、 超声细胞破碎, 测定其上清液中可溶性蛋白含量约为1.04mg/g, 其残渣中粗蛋白含量接近20%。因此, 我们认为, 若发酵液中氨基酸含量较高并符合健康饮品的标准, 可进一步研究半液态发酵工艺及发酵液的分离与纯化, 为开发健康饮料打下基础。此法不但可得到粗蛋白含量较高的蛋白饲料, 而且又可能开发出一种新型的健康饮料, 既循环利用了资源, 又创造了更高附加值更高的产品。
因此, 本课题拟对已有的发酵工艺及菌种进行改进, 构建高效复合发酵菌群, 考察固液两种发酵方法, 优化整个发酵工艺。
2、 项目的研究内容、 研究目标、 以及拟解决的关键问题
2.1 研究内容
本课题首先以柑桔皮渣作碳源, 其它含氮量较高的物质作氮源( 比如麸皮、 秸秆、 豆饼粕等) , 经过多个单一菌种对柑桔皮渣发酵, 筛选出优势固氮菌种, 并构建高效复合发酵菌群, 使粗蛋白产量增加; 同时, 考察固液两种发酵方法的产蛋白情况及液态发酵液中的氨基酸含量; 其次, 对整个发酵工艺进行研究, 确定最优工艺流程, 包括柑桔皮渣的含水率、 接种量、 pH、 溶氧( DO) 、 C:N、 无机盐添加量、 温度、 发酵时间等; 最后, 对发酵液的分离提纯和发酵固体产品的灭菌干燥工艺进行研究, 经过对成品中霉菌含量及营养物质的测定, 确定一套最优灭菌干燥工艺。
2.1.1 高效发酵菌群的构建
( 1) 生产高蛋白饲料的菌株筛选。对米曲霉( Aspergillus oryzae) 、 黑曲霉( Aspergillus ficuun) 、 扣囊复膜孢酵母(Endomycopsis fibuligera)、 啤酒酵母、 酿酒酵母等进行单一菌株以及混合菌株的发酵试验, 分别确定适合液态和固态发酵的最佳菌群。
( 2) 将已筛选出的菌种以不同的比例混合, 得到最佳的混合比, 并以此比例培养发酵种子液。
( 3) 经过使用固态及液态发酵两种方法, 比较此种子液的发酵产物的蛋白质及氨基酸含量, 同时测定各菌种的酶活力情况。
2.1.2 柑桔皮渣发酵工艺研究
( 1) 原料粉碎脱水。以柑桔果汁厂榨汁后的废料为原料, 拟采用螺旋式压榨机将原料粉碎并脱水, 得到适宜粒径和含水率的柑桔皮渣。
( 2) 发酵辅料的筛选。由于柑桔皮渣本身含氮量很低, 需借助外加氮源。选择氮源辅料, 包括麸皮、 秸秆、 米糠、 豆饼粕、 玉米芯等农业副产品, 最终得到柑桔皮渣与辅料的最佳配比。
( 3) 固态发酵工艺参数优化。将已培养好的种子液, 接种到配制好的原料中, 在不灭菌的条件下发酵, 经过单因素试验及SAS软件的分析, 确定发酵最优工艺( 包括菌株接种量、 培养基含水率、 pH、 DO、 温度、 发酵时间、 发酵深度等参数) 。
( 4) 液态发酵工艺优化。将已培养好的种子液, 接种到配制好的已稀释的原料中在不灭菌的条件下发酵, 主要考察发酵液中氨基酸的含量及固态残渣中的粗蛋白含量, 并经过SAS的RSREG( 响应面回归) 过程进行数据分析, 建立二次响应面回归模型, 进而寻求最优相应因子水平, 从而对发酵工艺进行优化。
( 5) 发酵液的分离及纯化。借鉴酿酒加工的工艺流程, 使发酵液与固体残渣充分分离, 并对发酵液脱色、 纯化, 以达到饮用标准。
( 6) 灭菌干燥工艺研究。发酵固体产品的最后一道工艺是灭菌和干燥, 为了节约投资、 减小能耗, 拟将上述两个步骤合二为一。由于一般灭菌法的温度较高, 可能影响饲料中的热敏性营养物质的品质, 因此, 需经过进一步试验研究, 确定一套有效的灭菌干燥工艺。
2.2 研究目标
本实验的研究目标是, 开发出一种具有既能高产蛋白质及氨基酸, 又能够缩短发酵时间的优势复合菌群; 并对整个发酵工艺优化, 获得生产高蛋白饲料及发酵饮料所需的最优工艺条件( 包括柑桔皮渣的粒径和含水率、 菌株接种量、 pH、 DO、 C:N、 温度、 发酵时间、 发酵深度及烘干过程中的参数) , 最终确定一套柑桔皮渣发酵的最优工艺, 达到无二次污染、 节能、 提高经济效益的目的。
2.3 拟解决的关键问题
( 1) 用于提高蛋白质含量的菌群含有黑曲霉、 绿色木霉等其孢子颜色较深的菌种, 在发酵过程中, 发酵底物可能会出现黑色或绿色, 这将严重影响发酵产物的品质及外观。调节各菌种的混合比例及发酵参数,得到品质佳、 外观好的发酵产物。
( 2) 因为在构建复合微生物菌群时, 各种菌种之间存在着交互作用, 例如某些菌种可能产生一些抑制性的代谢产物, 例如乙酸或其它物质, 这将严重抑制复合菌系的生长。菌种之间的这种作用将会严重影响其发酵结果, 因此在培养种子液时一定要采用科学的手段确定菌种的最佳混合比例, 并严格控制发酵参数。如其结果还是不尽如人意, 可采用人工诱变的方法得到变异菌种, 但要对变异菌种所产生的中间产物进行测定及对其稳定遗传的菌株进行生化检测, 确保不产生有毒物质。
( 4) 为提高产品的粗蛋白量, 需添加一些天然的含氮量较高的干性辅料, 如豆饼粕、 麸皮、 米糠类天然食品废渣。但在添加过程中, 可能出现辅料含有毒性物质, 需要对拟添加的辅料作除毒预处理。
( 5) 寻找一套既经济、 又有效的固液分离方案, 使固液完全分离, 减少后续液体产品的纯化工艺步骤。
3、 拟采取的研究方案及可行性分析
3.1拟采取的研究方案
( 1) 选定米曲霉、 黑曲霉、 扣囊复膜孢酵母、 啤酒酵母、 酿酒酵母等菌种。在相同外界条件下进行单一菌株和混合菌群的对比发酵试验, 采用凯氏定氮法( GB5009-1985) 、 考马斯亮兰分光光度法测定发酵产物的粗蛋白、 可溶性蛋白含量, 确定产蛋白质最高的菌株或混合菌群, 以此作为研究发酵工艺的出发菌群。
( 2) 根据大多数文献及已有的实验经验, 最佳的发酵菌群应该是多菌混合的复合菌液, 由于各菌种之间的交互影响, 需对菌群中各菌种的比例进行优化, 经过多组菌种比例的混合实验得到一种最好的比例, 以此种比例为基准, 采用中心组合设计法, 经SAS的RSREG( 响应面回归) 过程进行数据分析, 建立二次响应面回归模型, 进而寻求最优相应因子水平, 得到科学的最佳混合比例及响应值。并以此比例的混合菌液作为发酵种子液培养, 此后需对混和菌群的蛋白酶和纤维素酶的活性测定( 蛋白酶活力的测定采用福林-酚比色法, 纤维素酶活力的测定采用3, 5—二硝基水杨酸比色法) , 以明确混合菌群中的各个菌株之间的相互抑制作用最小。
( 3) 若各种比例的混合菌的发酵效果均不佳, 则需确定一种自身蛋白质较高的菌株进行诱变。方法如下, 将此菌株接种到无菌液体培养基中, 在恒温摇床中培养48h( 扩大培养) ; 然后将扩大培养后的菌株在不同功率的UV光下照射不同时间, 进行人工诱变; 接着继续在LB培养基中接种培养三代以上, 获得较稳定的遗传子, 最后将此诱变菌种保存并鉴定。
( 4) 辅料的确定。拟采用5种重庆地区较丰富的农作物废料即豆饼粕、 米糠、 麸皮、 玉米皮、 玉米心等作辅料。将5种辅料分别以不同的比例与柑桔皮渣混合, 在相同外界环境下( 包括温度、 pH、 接种量、 含水率、 时间、 发酵层深度) 接入种子液发酵, 根据测定的粗蛋白质含量高低确定所用含氮辅料。
( 5) 发酵工艺参数优化。采取单因素试验及SAS软件的RSREG分析数据, 确定柑桔皮渣的粒径、 含水率、 菌种接种量、 pH、 C:N、 DO、 温度、 发酵时间、 发酵层厚度等参数, 以达到优化整个发酵工艺的目的。
( 6) 对液态发酵的发酵液进行成分分析, 包括: 20种常见基本氨基酸, 可溶性蛋白质及一些长链大分子物质, 并对其进行脱色, 纯化处理。为中试打下基础。
( 7) 用实际饮料厂的柑桔皮渣进行发酵试验, 确定螺旋式压榨机工艺参数。考察不同功率、 不同螺旋轴齿距对柑桔皮渣粒径、 含水率的影响。
( 8) 灭菌干燥工艺参数确定。采取不同温度烘干和不同温度及风速风干发酵产物, 经过对干燥成品中的粗蛋白、 可溶性蛋白、 纤维素的检测、 霉菌含量及经济评价, 确定最佳干燥方法。同时, 确定使营养成分保留最完整的、 灭菌效果最佳的灭菌方法及工艺。
整个工艺流程如下:
蛋白质高产混合菌
复合菌群液体, 二级种子液
柑桔皮渣压榨脱水
调节pH
调节C:N
接 种
发 酵
灭菌干燥
成 品
过 滤
纯 化
成品
灭菌干燥
固态

发酵
粉 碎
成 品
粉 碎
滤渣
滤液
液态发酵

3.2 可行性分析
中国柑桔研究所获得过柑桔皮渣发酵生产高蛋白饲料的研究成果, 她们的开创性工作为本课题的研究打下了基础。本课题主要是针对柑桔研究当前的阶段性成果中存在的不足所作的必要改进, 因此本课题拟选取的研究方案可行, 拟采取技术路线合理。
课题组成员专业技术覆盖面广, 技术研究力量强, 聘请了重庆市微生物发酵技术方面的资深专家, 在发酵方面积累了丰富的研究和实践经验。填写本申报书之前, 我们已对此领域的国内外研究进展和应用现状进行了深入调研, 而且着手开展了前期的基础性实验( 如高蛋白复合菌群筛选及其发酵工艺研究) , 为今后课题的全面开展奠定了基础。另外, 重庆工商大学环境与生物工程学院、 药物化学与化学生物学研究中心拥有先进的实验仪器和分析仪器, 能为我们的试验研究提供良好的技术平台。因此我们能够圆满地完成本课题的研究任务。
4、 本项目的特色与创新之处
( 1) 本项目的首要研究内容是筛选能高产蛋白质的单一菌种或复合菌群, 并针对柑桔皮渣本身氮源不足的缺陷, 辅以高氮食品废渣作氮源, 从发酵菌种和原料两个方面保证了发酵饲料的高蛋白品质。
( 2) 采用螺旋式压榨机脱水, 降低和控制发酵原料的含水率, 解决胶糊状柑桔皮渣引起微生物不能自由繁殖以及含水率高不易烘干等问题;
( 3) 继固态发酵法后, 又研究半液态发酵方法, 同时获得较好品质的发酵饮料和蛋白饲料, 将柑桔皮渣充分利用, 一次性开发出两种经济效应较好的产品。
( 4) 对整个发酵工艺流程及运行参数进行优化, 为中试研究打下基础。
5、 预期研究成果及项目的考核内容与指标( 1、 主要技术指标: 包括形成的新技术、 新工艺、 新装置、 新产品、 专利、 标准( 技术标准、 企业标准) 、 论文专著数量及其水平等; 2、 经济考核指标; 3、 项目实施中形成的实验室、 研究室等; 4、 人才培养指标。)
5.1 主要技术指标
获得生产高蛋白饲料的复合发酵菌群, 优化整个工艺流程和参数。使发酵产品蛋白质含量提高到30%以上, 复合发酵菌群的发酵时间缩短到25～30小时; 达到GBT5915-93仔猪、 生长肥育猪配合饲料、 GB8961-88奶牛精料补充料等中华人民共和国国家标准或行业标准。
申请国家创造专利1项, 在核心期刊上发表论文2－3篇。
5.2经济指标
将柑桔皮渣资源化, 不但可节省废渣的处理处理费用( 60元/吨) , 而且能够60～100元/吨的价格出售饲料, 提高厂家的经济效益。
5.3 人才培养
( 1) 经过本项目研究, 使1～2名教师晋升高一级职称;
( 2) 培养环境工程专业硕士研究生1～2人; 化学工程与工艺、 生物工程专业3～4名本科生以本项目相关研究为题完成毕业设计( 论文) 。
6、 年度研究计划及年度考核指标
.01~ .06 复合菌群的筛选, 得到蛋白质高产菌株的最佳配比; 同时, 筛选辅料, 确定最佳C:N比。
.06~ .12 发酵工艺与参数优化研究, 发酵液的纯化技术的研究, 发酵产物灭菌干燥工艺研究。
.01~ .07 整理资料, 申请专利, 发表论文, 项目结题验收。
( 二) 研究基础与工作条件
1、 工作基础
( 1) 根据相关文献选定黑曲霉、 米曲霉、 扣囊复膜孢酵母三种菌株作为出发菌株, 并作了复合菌群的优化, 经过不同菌种的混合实验, 确定了三菌混合的发酵样品中的粗蛋白含量最高。
( 2) 已初步确定了三菌混合的最佳比例, 并得到了30%的左右的粗蛋白含量的发酵样品。
( 3) 探讨了在混菌比例为1: 1: 1情况下的工艺条件, 其中包括菌液接种量、 时间、 温度、 pH等, 为进一步的研究打下基础。
( 4) 建立了柑桔皮渣发酵饲料蛋白质及有关营养成分的分析方法。这些实验研究为本项目的开展奠定了坚实的基础。
2、 工作条件
( 1) 重庆工商大学环境工程学院、 药物化学与化学生物学研究中心有先进的实验仪器和分析仪器, 能为本课题研究提供良好的技术平台。
( 2) 课题组成员专业技术覆盖面广, 技术研究力量强。聘请了重庆市微生物发酵技术方面的资深专家, 在发酵方面积累了丰富的研究和实践经验。
( 3) 课题组对微生物发酵等技术已有较好的前期研究基础。
3、 申请人简历
项目申请人殷钟意于1990年毕业于渝州大学化学系化学教育专业, 获本科, 评为高级实验师, 主要从事实验教学和科研工作, 主要研究方向是应用化学、 环保技术。
近5年发表的主要论文有:
( 1) 固定相络合萃取剂处理水中苯酚的性能研究, 重庆环境科学, .24( 5)
( 2) 聚丙烯型大孔树脂对水中油脂的吸附性能研究, 西南师范大学学报( 自) , .29( 3) 工业含铬废水的络合萃取处理工艺研究, 化学研究与应用, .16( 4)
( 4) 聚丙烯加热改性制备大孔吸附树脂工艺及应用研究, 化学研究与应用, .15( 6)
( 5) 膜厚综合法确定磷化液, 西南师范大学学报( 自) , .29( 4)
( 6) 聚丙烯型大孔树脂的结构、 性能和应用研究, 塑料工业, .32( 6)
( 7) 固定相络合萃取剂处理水中六价铬性能研究与应用, 表面技术, .33( 4)
( 8) 铬盐生产区土壤和农作物中铬含量状况调查分析, 重庆工商大学学报(自), .20(4)
( 9) 从橙皮中提取香精油的工艺条件研究, 天然产物研究与开发, .15( 6)
(10)重庆市郊土壤中锌的调查分析, 重庆工商大学学报( 自) , .21( 3)
(11)包含络合萃取剂的大孔树脂处理水中六价铬研究, 会议论文, .4
4、 承担或完成重庆市科委资助科研项目情况
(1)高浓度难降解工业废水固定床络合萃取技术研究, 重庆市科委( 攻关) , - ,成果登记号: 950 Y0067;
(2)新型吸附光催化复合材料治理难降解染料废水技术研究,重庆市科委(攻关), - , 成果登记号: 950 Y0068;
(3)活性炭纤维负载TiO2光催化降解焦化废水研究, 重庆市科委( 应用基础) , - ;
(4)光催化－SBR处理有机磷农药废水的研究(合同号: CSTC BB7079), 重庆市科委( 应用基础) , .10- .12;
(5)阿尔茨海默病天然活性药物的筛选与物质基础研究, 重庆市科委重点自然科学基金, .9- .12。
( 三) 查新报告( 重点项目需附查新报告)
五、 申请者承诺

我保证上述填报内容的真实性。如果获得资助, 我与本项目组成成员将严格遵守《重庆市自然科学基金计划项目管理办法》的有关规定, 切实保证研究工作时间, 按计划认真开展研究工作, 按时报送有关材料, 按要求做好结题工作。

申请者( 签字) :

年 月 日
六、 申请者所在单位及合作单位的审查与保证
1. 申请者所在单位学术委员会的审查意见( 包括: 对项目的意义、 特色和创新之处及申请者的研究水平与治学态度等签署具体意见) :

该项目在国内同行研究基础上, 对发酵菌种及工艺进行了进一步的优化, 其产品的粗蛋白含量有了显著的提高, 有一定创新性, 采用微生物发酵的方法使废弃物资源化, 不但解决了废弃物的处理问题, 还可创造经济价值, 对现代环保和社会经济发展都具有推动作用。申请者治学严谨并有一定的科研能力, 曾多次参与科研项目, 可承担此项目。

学术委员会主任( 签章)
年 月 日
2. 申请者所在单位审查意见与保证
已按《重庆市自然科学基金计划项目管理办法》的有关规定对申请人进行了资格审查, 对申请书内容进行了审核, 同意学术委员会的审查意见, 并保证在项目获得资助后做到以下几点:
( 1) 保证对研究计划实施所需的人力、 物力和工作时间等条件给予支持。
( 2) 严格遵守重庆市科委有关资助项目管理、 财务等各项规定。
( 3) 督促项目负责人和本单位项目管理部门按重庆市科委的规定及时报送有关报表和材料并按期结题。
( 4) 如项目获批准资助, 本单位将保证对该项目实施中经费不足部分给予配套。
需要说明的其它问题:

单位负责人( 签章) 单位( 签章) 年 月 日

3. 合作单位的审查意见与保证
同意参加合作研究, 保证对参加合作研究人员时间及工作条件的支持、 督促其按计划完成所承担的任务。

合作单位1( 签章) 合作单位2( 签章)
七、 审查意见
市科委业务处审查意见:

( 签章)
年 月 日