细菌的生长和遗传变异.pptx
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1、第三章第三章 细菌的生长和遗细菌的生长和遗传变异传变异主要内容n3-1 细菌的生长及特性细菌的生长及特性n3-2 细菌的遗传与变异细菌的遗传与变异一、生长与繁殖的概念一、生长与繁殖的概念二、细菌生长的测定方法二、细菌生长的测定方法三、细菌的生长特性三、细菌的生长特性四、微生物膜的生长特性四、微生物膜的生长特性3-1-1 生长与繁殖生长与繁殖同化作用大于异化作用时,细胞质的量增加,表现在细胞体积或重量的不断增加,这种现象称生长。生长一定程度后细胞分裂,这就是繁殖。个体的生长和繁殖体现为群体的生长。(微生物重量或数目的增加)。群体生长个体生长个体繁殖群体生长个体生长个体繁殖在微生物学中“只有群体的
2、重复”才有意义,因此“生长”一般指群体生长。3-1-2 细菌的生长测定方法细菌的生长测定方法计数法l直接计数法借助显微镜l间接计数法平板计数生长量测定法l测定重量、体积、含氮量来反映细菌的生长(一)(一)计数法计数法1、直接计数法(显微镜)涂片染色法:一定量样品涂布在载玻片上,染色后计数。滤膜染色法:一定量样品过滤到滤膜上,然后染色计数。比例计数法将已知颗粒浓度的液体与待测菌液按一定比例混合后在显微镜下,测各自的数目。涂片染色法涂片染色法1 1视野菌液视野菌液(ml)(ml)(0.1ml(0.1ml 1cm1cm2 2)*)*视野面积视野面积视野面积视野面积(cm(cm2 2)计数器计数器(血
3、球计数板)血球计数板)测定法测定法1 11010-4-4 mlml菌液菌液数了数了80个小格中有个小格中有120个细菌,样品中的细菌浓度是多少?个细菌,样品中的细菌浓度是多少?(120个个 80)400/110-4 ml=00104个个/ml适用范围:适用范围:测定个体较大的细菌或原生动物细细菌菌个个体体若若太太小小、过过多多,由由于于每每一一小小格格中中细细菌层层叠加,相互遮挡,难以准确计数。菌层层叠加,相互遮挡,难以准确计数。数数数数细菌(或其他微生物或细胞)数目,(一般数细菌(或其他微生物或细胞)数目,(一般数15=80个小格),个小格),折算折算样品细菌浓度;样品细菌浓度;滤膜染色法滤
4、膜染色法l一定量样品过滤到滤膜上,然后染色计数。一定量样品过滤到滤膜上,然后染色计数。l需要知道滤液的体积和滤膜的面积。需要知道滤液的体积和滤膜的面积。l在显微镜下计数,方法相同。在显微镜下计数,方法相同。比例计数法比例计数法n比例比例样品菌液与等体积(或成一定比例)的血液混合,样品菌液与等体积(或成一定比例)的血液混合,观测二者比例观测二者比例如果如果如果如果平均每个视野中细菌数量平均每个视野中细菌数量/红血球的数量红血球的数量比例为比例为5.55.5:1 1,则细菌数量,则细菌数量=?5.54005.5400万个万个/m l=2.210/m l=2.2107 7个个/mLmL样品样品n红红
5、血血球球数数已已知知(男男性性400500400500万万万万个个个个mLmL,女女性性350450350450万万万万个个个个mLmL),平均平均400400万个万个/m/mL L细细细细菌菌菌菌红红红红血血血血球球球球比例计数法将已知颗粒浓度的液体与待测菌液按一定比例混合后在显微镜下,测各自的数目。(特点:不要求记体积)DAPI:4-diamidino-2-phenylindole,dihydrochloride4,-4,-二二脒基基-2-2苯基苯基吲哚DNA2Cl-H2N+NH2CNHH2N-C NH2Measurement of total cell counts全细胞染色法(死活不分
6、):DAPI染色染色,DTAFDAPI:无毒性荧光染料,能够与DAN双链强力结合并产生荧光。采用358nm紫外光照射能发射明亮的蓝色荧光。5-DTAF:5-(4,-dichlorotriazinyl)aminofluoresceinDNAOOHOOHOOHNHNNClNClMeasurement of total cell counts全细胞染色法(死活不分):DAPI染色染色,DTAF有必要区分细菌的死活吗?n饮用水中卫生细菌学标准是TBC 接种量:特别是X0/S0,即初期微生物浓度与基质浓度的比。产生延滞期的原因:缺乏分解新环境中有关基质的酶;缺乏充足的代谢中间产物。总细胞数活细胞数III
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