嗜酸性粒细胞和血小板计数.pptx

嗜酸性粒细胞和血小板计数嗜酸性粒细胞和血小板计数医学检验系一、嗜酸性粒细胞计数一、嗜酸性粒细胞计数l目的目的 掌握显微镜手工计数的方法。l原理原理 用稀释液将血液稀释一定倍数，冲入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的嗜酸性粒细胞数量，经换算求出每升血液中的嗜酸性粒细胞数。一、嗜酸性粒细胞计数一、嗜酸性粒细胞计数l器材器材 显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、移液管、洗耳球l试剂试剂 嗜酸性粒细胞稀释液l标本标本 EDTA抗凝血6操作操作l1 加稀释液 取小试管1支，加稀释液0.38ml。l2 加血 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20l，擦去管外余血，轻轻加至红细胞稀释液底部，再轻吸上清液清洗吸管23次，立即混匀。l3 充池 混匀后用微量吸管将红细胞悬液冲入计数池，室温下平放35分钟，待细胞下沉后于显微镜下计数。l4 计数 用低倍镜依次计数两边计数池四角和中央五个大方格（共 计十个大方格）的红细胞数。5计算 细胞/L=N10/1020106=0.02N109 注意事项注意事项 1.嗜酸性粒细胞易于破碎，振荡不宜太猛烈。2.将嗜酸性粒细胞稀释液充入计数池时要一次完成，不能产生满溢、气泡或充池不足的现象。3.计数应在60min内完成。4.每份标本最好计数2次，若计数误差在10%以内，取其均值报告，若计数之差大于10%，应作第3次计数，取2次相近结果的均值报告。二、血小板计数二、血小板计数l目的 掌握显微镜血小板计数的方法。l原理 用血小板稀释液将血液稀释一定倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的血小板数，经换算求出每升血液中的血小板数。l器材 显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、移液管、洗耳球l试剂 血小板稀释液l标本 EDTA抗凝血二、血小板计数二、血小板计数l1.加稀释液加稀释液 用吸管吸取稀释液0.38ml于小试管中。l2.加血加血 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20l，擦去管外余血，轻轻加至血小板稀释液底部，再轻吸上清液清洗吸管23次，混匀。l3.充池充池 混匀后用微量吸管将血小板悬液充入计数池，室温下静置1015分钟，待血小板充分下沉后于显微镜计数。l4.计数计数 用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的血小板数。l5.计算计算 血小板/L=N51010620=N109/L 操作操作l 1.混匀充分，不可过度振荡，以免血小板破坏、聚集或有气泡，引起计数误差。l 2.在充池时要一次完成，不能产生满溢、气泡或充池不足及充液后玻片移动的现象。l 3.时间较长，血小板会失去光泽而不易辨认，应在1h内计数完毕l 4.每份标本最好计数2次，若计数误差在10%以内，取其均值报告，若计数之差大于10%，应作第3次计数，取2次相近结果的均值报告。注意事项注意事项思考题：你的计数结果与同组同学结果有何差别，试分析原因。