液相色谱维护基础知识4.pdf

11Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited第四部分维护基础知识22Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited日常维护目的：维持仪器处于正常运作状态，有效的降低仪器发生故障的频率，延长仪器的使用寿命。降低仪器发生故障的频率，延长仪器的使用寿命。准备工作：?使用&维护日志?设备的耗材和备件?维护工具盒?试剂（甲醇、异丙醇、稀硝酸等）?超声波清洗机33Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited液相系统维护流程图吸滤头吸滤头单向阀单向阀柱塞密封圈柱塞密封圈线路过滤器线路过滤器手动进样器手动进样器检测器检测器色谱柱色谱柱44Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited输液系统日常维护部件排液阀吸滤头线路过滤器柱塞清洗流路密封圈保险丝主进口单向阀辅助进口单向阀柱塞密封圈55Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited管线选择?材料不锈钢特氟隆(Teflon)聚醚醚酮(PEEK)?尺寸不锈钢材质管路不锈钢材质管路PEEK材质管路材质管路0.1 mm I.D.x 1.6 mm O.D.0.3 mm I.D.x 1.6 mm O.D.0.5 mm I.D.x 1.6 mm O.D.0.8 mm I.D.x 1.6 mm O.D.0.13 mm I.D.x 1.6 mm O.D.0.25 mm I.D.x 1.6 mm O.D.66Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited管线材料?不锈钢(可用于所有连接)不锈钢(可用于所有连接)?能承受几百能承受几百MPa 压力压力?酸性或高浓度盐环境中易腐蚀(尤其在pH小于2时)酸性或高浓度盐环境中易腐蚀(尤其在pH小于2时)?PEEK(可用于所有连接)PEEK(可用于所有连接)?能承受高达 25 能承受高达 25 MPa压力压力?可在整个可在整个pH范围(范围(pH 1-14)内使用)内使用?不适用高溶解性溶剂如三氯甲烷、四氢呋喃等不适用高溶解性溶剂如三氯甲烷、四氢呋喃等?Teflon(用于柱后阻尼管、反应管和排液管)(用于柱后阻尼管、反应管和排液管)?化学惰性大化学惰性大?仅能承受仅能承受 0.5 MPa压力压力77Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited接头?不锈钢接头不锈钢接头/垫圈垫圈主要用于输液泵、进样器的管路连接主要用于输液泵、进样器的管路连接?能承受能承受 40 MPa以上的压力以上的压力?一旦固定，垫圈不可再动一旦固定，垫圈不可再动?PEEK接头接头主要用于色谱柱、检测器的管路连接主要用于色谱柱、检测器的管路连接?易于安装易于安装?能承受能承受 25 MPa的压力的压力?容易产生死体积容易产生死体积不锈钢接头垫圈PEEK接头88Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited死体积?产生原因：由于管路连接不好产生的额外体积?死体积可能会引起分离度下降和重现性变差等问题好的连接差的连接管线公螺母死体积死体积色谱柱99Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited吸滤头材料：不锈钢烧结(或陶瓷），孔径 10 m功能：防止较大固体不溶物进入液相色谱系统日常维护：定期使用异丙醇（或5稀硝酸）清洗故障：吸滤头堵塞现象：管路中不断有气泡生成措施：用异丙醇（或5稀硝酸）浸泡并进行超声波浴清洗，再用蒸馏水清洗至中性1010Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedLC-20ATLC-20AT选配件支架压力传感器泵头辅助进口单向阀主进口单向阀泵头固定座1111Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedLC-20AD选配件支架进口单向阀出口单向阀进液口泵头固定座泵头压力传感器LC-20AD1212Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited单向阀结构请不要分解阀心A和阀心B重新组装后性能不被保证，输液可能不稳定注意：1313Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited单向阀故障处理故障：宝石球或球座受污导致密封不好表现：系统压力波动大措施：1）打开排液阀，用泵输送或用注射针打入异丙醇进行清洗2）拆下单向阀，放入异丙醇中，超声波浴清洗注意：超声波清洗时开口端向上放置。注意：超声波清洗时开口端向上放置。1414Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited故障：宝石球粘附于垫片表现：泵无法吸液或排液，流路不通措施：1）用针筒抽出口单向阀，利用产生的负压使宝石球与垫片分开2）拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超声波浴清洗单向阀故障处理1515Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited柱塞密封圈柱塞密封圈LC-20ADLC-20ABLC-10ADvp 部件号228-35146柱塞密封圈LC-20ATLC-10ATvp部件号：228-35145取下和安装柱塞密封圈工具1616Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited柱塞密封圈故障处理故障：密封圈磨损导致密封不良现象：系统压力波动大或漏液措施：更换密封圈注意：拆卸泵头前，必须将柱塞杆复位（仪器面板上的P-SET界面）流动相泵头清洗管路柱塞杆密封圈1717Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited线路过滤器故障：堵塞现象：系统压力偏高判断依据：关闭排液阀，断开出口管路，设定流速1mL/min，如压力0.3 MPa，可以判定为线路过滤器堵塞。措施：以异丙醇(或5稀硝酸)为清洗剂，超声波浴清洗。再用水洗至中性。排液阀压力传感器线路过滤器流动相1818Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited过滤器的更换旧过滤器的取出新过滤器的安装?如果清洗无法解决故障，需要更换线路过滤器。1919Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited混合器混合器不同体积的连接方法2020Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited混合器故障处理常见故障：堵塞混合器堵塞往往是由于混合器过滤组件堵塞引起的。处理方法：按图中结构卸下过滤组件，5%稀硝酸或其他溶剂超声波浴清洗或更换新的组件标准或半微量混合器用部件号：228-18872-932121Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited检查检查/维护项目维护项目6个月个月1年年2年年3年年备注备注更换柱塞密封圈清洗并检查（更换）柱塞更换清洗流路密封圈检查（更换）辅助进口单向阀并做超声波浴清洗检查（更换）主进口单向阀并做超声波浴清洗检查（更换）并清洗线路过滤器检查（更换）并清洗吸滤头更换排液阀泵组件润滑请咨询岛津各办事处维修部保险丝更换LCLC-20AT20AT 各部件定期检查和维护清单各部件定期检查和维护清单各部件定期检查和维护清单各部件定期检查和维护清单2222Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited检查检查/维护项目维护项目6个月个月1年年2年年3年年备注备注更换柱塞密封圈清洗并检查（更换）柱塞检查（更换）膜片更换柱塞时同时更换检查（更换）出口单向阀并做超声波浴清洗检查（更换）进口单向阀并做超声波浴清洗检查（更换）并清洗线路过滤器检查（更换）并清洗吸滤头更换排液阀泵组件润滑请咨询岛津各办事处维修部保险丝更换LCLC-20AD20AD 各部件定期检查和维护清单各部件定期检查和维护清单各部件定期检查和维护清单各部件定期检查和维护清单2323Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited手动进样器手动进样器2424Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited手动进样器操作注意事项手动进样器操作注意事项定子定子转子转子针头密封垫针头密封垫弹簧弹簧不锈钢套不锈钢套1.进样请使用液相色谱专用平头进样针2.进样时，进样针应插入针导管到底3.清洗请使用专用进样口清洗器4.样品溶液pH小于10,常用密封垫的Vespel材质（适用pH10）,否则换Tefzel或PEEK材质的密封垫（pH 0-14）5.不使用手动进样器时将针头留在进样器内2525Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited手动进样器维护要点1.将附件进样口清洗器进样口清洗器装在注射器上2.用注射器吸入清洗液(试样溶液或者不含盐的流动相等)3.在进样（INJECT）状态下，将进样口清洗器压接在针导管上，注入清洗液约1mL4.使用缓冲溶液后，用纯化水清洗流路和针导管5.不能使用微型注射器清洗手动进样器6.请缓慢推压注射器，以免引起清洗液反喷进样口清洗器手柄组件针导管针管2626Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited自动进样器2727Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited检查检查/维护项目维护项目1年年2年年3年年6年年备注备注更换针管密封圈在大约40000次进样后更换更换柱塞密封圈更换计量泵柱塞更换低压阀转子在大约60000次进样后更换更换低压阀定子更换高压阀转子在大约100000次进样后更换更换高压阀定子更换定量环在大约40000次进样后更换清洗并检查（更换）溶剂过滤器针管更换在大约40000次进样后更换保险丝更换面板更换（仅适用于SIL-20AC）如果样品冷却器存在过的冷凝则更换润滑油请咨询岛津各办事处维修部清洗泵6年后更换（大约 700000秒）自动进样器各部件定期检查和维护清单自动进样器各部件定期检查和维护清单自动进样器各部件定期检查和维护清单自动进样器各部件定期检查和维护清单2828Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited思考题现象：在分析样品过程中，系统压力不断升高。问题：如何确认压力升高的原因？?如果确认是由色谱柱引起的压力升高，应如何处理？在实验过程中，如何避免这种情况出现？故障根源的确认：分段排除法故障根源的确认：分段排除法2929Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱柱常见故障分类?柱压过高不同色谱柱有差异不同系统有差异不同色谱条件有差异?柱效低?重复性差?回收率低甚至不出峰3030Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited柱压过高解决方法解决方法1.正向冲洗色谱柱2.反向冲洗色谱柱3.超声清洗色谱柱筛板日常使用注意点日常使用注意点1.过滤流动相和样品2.恰当的样品前处理方法3.使用保护柱4.注意冲洗系统原因原因?微粒堵塞微粒堵塞?不可逆吸附不可逆吸附?细菌生长细菌生长3131Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited柱效低解决方法解决方法1.正向冲洗色谱柱2.反向冲洗色谱柱3.超声清洗色谱柱筛板4.柱内死体积增加，需更换新柱日常使用注意点日常使用注意点1.定期冲洗色谱柱2.防止机械震动和柱压急剧变化3.关注色谱柱柱效变化原因原因?色谱柱被污染色谱柱被污染?筛板堵塞筛板堵塞?柱内死体积增加柱内死体积增加3232Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited例子：溶解样品的溶剂选择不当?建议使用流动相溶解样品，不要选择高溶解性的试剂甲醇 作为溶剂20 20 20 20 uLuLuLuLCaffeineCaffeine乙醇 作为溶剂20 20 20 20 uLuLuLuLCaffeineCaffeine乙醇 作为溶剂10 10 10 10 uLuLuLuLCaffeineCaffeine注意：方法开发阶段，请选择合适的进样量3333Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱柱的使用注意点?购买新柱后请务必仔细阅读说明书，确认柱的使用条件以及清洗再生步骤。按照说明书条件测试色谱柱柱效，保留所得色谱图，记录使用压力?定期检测柱压和柱效?不同流动相之间转换时应注意溶剂的互溶性?确认样品在流动相中有好的溶解度；进样前请使用0.45 m或0.2 m的一次性滤膜过滤样品，或者进行其他前处理?为了延长色谱柱使用寿命，请使用保护柱。?定期用合适的溶剂（说明书推荐的溶剂）清洗或再生色谱柱?长期不用色谱柱时，应在彻底清洗后使用说明书中指明的溶剂保存柱子。然后从仪器上卸下色谱柱，用堵头密封保存?定期用合适的流动相清洗保存的柱子，避免干涸3434Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited紫外检测器3535Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited紫外检测器参比池样品池光线硅光电池板3636Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited检测器基线异常?基线噪音异常大?输液泵或检测器内存在气泡?检测器污染?灯老化?出现漂移或波动?系统污染，如色谱柱、管路、检测器和流动相等等?室温变化（如空调出风口直吹检测器）3737Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited性性能能判判断断新的时候ABSMPL EN800100100REF EN900800150A:池子、透镜污染B:灯老化紫外检测器故障判断3838Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited检测池清洗故障：样品池污染表现：样品池和参比池能量相差较大检查方法：设定250 nm波长，通甲醇或水，查看SMPL EN和REF EN，如两者相差较大，则样品池污染措施：用针筒注入异丙醇，清洗样品池；如污染严重，拆开样品池，将透镜等放入异丙醇中清洗。3939Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited紫外灯的保养?氘灯保证寿命为2000小时?保证仪器的使用环境?在分析前、柱平衡得差不多时，再打开检测器紫外灯；?不要频繁的开关紫外灯，同样会损害紫外灯的寿命。一般间隔时间在三小时以上4040Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited更换氘灯?判断氘灯能量：设定220 nm波长，检查参比池能量，如能量低于800，需考虑更换氘灯。部件号：228-34016-02SPD-10A/SPD-10AvpSPD-20A/AV用部件号：228-34016SPD-M10Avp/SPD-M20A用4141Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited更换氘灯4242Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited二极管阵列检测器维护4343Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited光源使用时间检查?D2 灯建议使用时间：2,000小时?W灯最长使用时间：2,000小时?D2达到额定寿命后，如果满足使用灵敏度要求，可继续使用可继续使用?W灯达到额定寿命后，必须进行更换。必须进行更换。4444Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited灯强度检查建议评判标准：?D2：200-260 nm或附近，最大强度 3.5 V?W：400-800 nm或附近，最大强度 2.5 V4545Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited灯强度检查注意事项?排除流通池中的气泡?用水、甲醇或乙腈替换流通池中的溶剂，使用230 nm以上无紫外吸收的溶剂?流通池窗无污染?灯使用寿命检查4646Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited灯强度检查操作步骤1.将水、甲醇或乙腈注入流通池。2.3.4.4747Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited流通池清洗4848Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited氘灯的更换取下灯罩后灯会自动熄灭，无法打开，务必在打开灯前安装灯罩。4949Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited思考题1.如何简单判断脱气机脱气是否正常？如何简单判断脱气机脱气是否正常？打开打开Purge阀，设定泵的流速阀，设定泵的流速2ml/min，提起当前所使用溶剂瓶内的溶剂过滤头，使之脱离液面一小段时间，此时溶剂传送管内会产生一小段气泡，放下过滤头，让此段气泡通过脱气机，如果脱气机正常，气泡应消失或缩小。，提起当前所使用溶剂瓶内的溶剂过滤头，使之脱离液面一小段时间，此时溶剂传送管内会产生一小段气泡，放下过滤头，让此段气泡通过脱气机，如果脱气机正常，气泡应消失或缩小。2.泵压力不正常可能由那些原因引起？泵压力不正常可能由那些原因引起？气泡，入口/出口单向阀故障，密封垫或柱塞杆磨损，渗漏或堵塞，传感器故障，比例阀故障，使用比例阀混合时盐浓度太高气泡，入口/出口单向阀故障，密封垫或柱塞杆磨损，渗漏或堵塞，传感器故障，比例阀故障，使用比例阀混合时盐浓度太高3.基线噪音大可能由那些原因引起？基线噪音大可能由那些原因引起？泵压不稳，气泡，色谱柱污染，系统管路污染，流通池污染，灯强度不足，光学系统老化或污染，参数设置不合理泵压不稳，气泡，色谱柱污染，系统管路污染，流通池污染，灯强度不足，光学系统老化或污染，参数设置不合理5050Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited日常维护小结?保持仪器的工作环境良好（温度，湿度，洁净度等）?填写使用&维护日志，关注耗材寿命?做好泵的保养（使用缓冲盐时要清洗柱塞；水和盐不长期保存在泵里）?经常清洗进样器，防止污染物吸附或管路堵塞?定期清洗色谱柱，保证色谱柱性能，延长使用寿命?定期清洗检测器流路，防止污染物吸附?长时间不使用液相色谱仪，须将所有部分全部更换为70以上的甲醇水溶液，防止管路污染或堵塞。5151Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited小结：遇到故障如何处理？?故障的确定至少要重复出现两次以上?初步判断故障引起的原因方法或硬件?由经验或平时的积累确定故障原因平时做好观察和记录?当不能确认故障原因时采用排除法逐一考察可能引起故障的因素?确定故障能否自行处理不要贸然拆卸不熟悉的部件5252Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited1.HPLC系统中各部分是否开机正常2.溶剂瓶内溶剂是否新鲜且脱气3.泵是否已初始化且工作正常4.系统管路及电路是否连接正常5.检测器是否通过自检且工作正常6.溶剂的pH值是否合适7.对温度敏感的检测器是否被阳光直射或被空调直吹8.溶剂瓶是否被阳光直射9.停机前是否将系统及柱子中的缓冲液置换干净10.较长时间停机之前是否将柱子取下,且系统最后用甲醇冲洗过(系统不能长时间保存有缓冲液或THF)11.样品在流动相中是否具有良好的溶解度12.所选用的过滤膜是否正确13.若用手动进样器，所用的进样针是否正确开关机前想一想，看一看5353Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited1.示差折光检测器/荧光检测器的出口管路堵塞2.直接用甲醇置换缓冲液3.样品会在流动相中产生沉淀4.用水溶性滤膜过滤有机溶剂5.溶剂,特别是缓冲液泄漏在仪器内部6.流速变化率太大7.高温使用下的柱子尚未降温就停泵8.阳光直射溶剂瓶或检测器9.空调直吹检测器10.THF在不密封情况下长期存放切忌切忌下列操作5454Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited故障（压力升高）确认流程图确认环境温度旋松检测器废液出口接头旋松检测器入口接头确认流速、溶剂比例设置正确设置正确的流速、溶剂比例设置正确的流速、溶剂比例旋松色谱柱出口接头旋松色谱柱入口接头使用柱温箱，设置合适的柱温使用柱温箱，设置合适的柱温出口连接管堵塞，更换出口连接管堵塞，更换/清洗清洗流路（检测池）堵塞，清洗流路（检测池）堵塞，清洗出口连接管堵塞，更换出口连接管堵塞，更换/清洗清洗色谱柱堵塞，清洗色谱柱堵塞，清洗/更换新柱更换新柱压力下降压力下降故障依旧故障依旧5555Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited故障（压力升高）确认流程图旋松保护柱/线路过滤器入口接头旋松进样器出口接头旋松进样器入口接头旋松保护柱/线路过滤器出口接头出口连接管堵塞，更换出口连接管堵塞，更换/清洗清洗旋松混合室入口接头旋松泵出口接头保护柱保护柱/过滤器堵塞，清洗过滤器堵塞，清洗/更换更换出口连接管堵塞，更换出口连接管堵塞，更换/清洗清洗进样器进样器/连接管路堵塞，清洗连接管路堵塞，清洗连接管路连接管路/混合室堵塞，清洗混合室堵塞，清洗连接管路堵塞，清洗连接管路堵塞，清洗/更换更换压力下降压力下降故障依旧故障依旧请联系工程师请联系工程师5656Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited故障（保留时间重复性差）流程图确认流动相配制过程是否正确确认流动相是否脱气确认是否使用柱温箱确认流速、溶剂比例设置正确设置正确的流速、溶剂比例设置正确的流速、溶剂比例确认泵流速是否稳定确认管路接头是否密封良好按照正确方式重新配制按照正确方式重新配制(pH 值等值等)排除气泡，流动相脱气排除气泡，流动相脱气保持环境温度恒定保持环境温度恒定/使用柱温箱使用柱温箱联系工程师检修设备联系工程师检修设备拧紧接头拧紧接头否否是是5757Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited确定是否有足够的时间平衡柱子确定色谱柱柱效是否良好是否使用梯度洗脱确认色谱柱是否正确更换正确的色谱柱更换正确的色谱柱梯度延迟时间是否正确设置重新充分平衡色谱柱重新充分平衡色谱柱清洗清洗/更换色谱柱更换色谱柱充分混合流动相充分混合流动相/充分平衡柱子充分平衡柱子设置正确的梯度延时时间设置正确的梯度延时时间否否是是故障（保留时间重复性差）流程图请联系工程师请联系工程师