老年性痴呆的细胞模型.pptx
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1、老年性痴呆的细胞模型汇报人:赵梦岚1.神经细胞.2.神经嵴源细胞.3.神经胶质细胞.4.非神经细胞.5.基因工程细胞v AD 细胞模型是在体外进行诱导和建立,与 AD 动物模型相比较,具有可避免各种干扰因素,实验条件容易控制等优点。6.杂交组织细胞1.神经细胞神经细胞(1)原代培养的海马神经细胞原代培养的海马神经细胞v海马与学习记忆有关,也是发生衰老变化最早部位。AD病理改变最严重的脑区之一是海马。不同结构片段的A产生不同的神经生物效应:A138的活性与A140及A2535一致;A128的毒性作用小于A140;A116和A1728无神经营养和神经毒性作用。低浓度A(100nmol/L)对成熟的
2、神经元是毒性作用,对于分化早期的神经元,A表现为神经营养作用。A2535和A142诱导培养的海马神经细胞建立AD细胞模型,引起海马神经细胞退变是通过凋亡途径。Loo、WattYanknervA诱导的AD细胞模型表明细胞发生脂质过氧化较严重,自由基生成增加,细胞出现凋亡改变,与AD发病机制中自由机和细胞凋亡学说相符,再则选用此种细胞类型更贴近实际AD受损细胞。但也存在以下缺陷:原代细胞培养难度大,周期长。培养系统不够稳定。只能模拟出AD的部分病理改变。(2)原代培养的大脑皮质神经细胞原代培养的大脑皮质神经细胞v 大脑皮质是人类高级中枢,是构成脑内复杂突触连接的关键脑区。早已明确,大脑额、顶、颞叶
3、参与学习记忆活动。A诱导建立AD细胞模型,A导致大脑皮质细胞凋亡氰化钠诱导原代培养的大脑皮质神经细胞,建立 AD细胞模型,观察内源性神经细胞缺氧引起的损伤v培养的海马神经元对损伤因素较培养的大脑皮质神经细胞敏感,但皮质神经细胞比海马细胞容易分离和获取,二者出现的生物化学、组织病理学及形态学的改变基本相似。(3)原代培养的小脑颗粒细胞原代培养的小脑颗粒细胞此模型表现为细胞凋亡和A产生增加,较符合AD的病理改变,与前两种原代培养的细胞相比,细胞易获取和培养。小脑是参与学习记忆脑区之一,因此小脑神经细胞也是进行AD研究可取的细胞。降低细胞外钾离子的浓度,诱导建立AD模型,检测细胞A水平,提示原代培养
4、的小脑颗粒神经元发生退行性变可导致A过量产生,而A过量产生又可加重神经元的损伤。缺点为:细胞类型不是AD受损最显著细胞,培养系统缺乏稳定性。(4)NG108-15细胞系细胞系vNG108-15细胞系是小鼠成神经细胞瘤和大鼠神经胶质瘤的融合杂交系。在两种不同的培养条件下此细胞系可分别处于分裂生长状态和分化成熟状态。NG108 15细胞系经培养诱导其分化10d后,加入A1-40,继续培养48h,建立AD细胞模型。用此细胞系建立AD模型,培养系统稳定性较好,又具有神经细胞特性,具有一定的代表性。形态学有无改变有待于进一步的研究。2.神经嵴源细胞神经嵴源细胞Step 1Step 2Step 3Titl
5、e in here凋亡凋亡Title in here与凋亡密切相关的p75NGFR 高度表达Title in hereBax 蛋白表达水平上调皮肤内神经嵴源上皮黑素细胞,具有来源、形态、反应方式及许多分子信号与神经细胞相似的特点。当NGF与A同时加入上皮黑素细胞,可预防由A诱导的黑素细胞凋亡,因此,人类上皮黑素细胞可做为体外研究 AD 发生机制有价值的细胞。(1)上皮黑素细胞上皮黑素细胞A处理培养的人上皮黑素细胞(2)PC12细胞株细胞株v前面已提出原代培养神经细胞的缺点,为了克服这些缺点,许多学者早已在寻找一种具有神经细胞特性,又可传代的稳定的细胞株。v1976年Greene和Tischle
6、r成功建立了具有神经特性的PC12细胞株。PC12是从移植的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤单克隆的细胞株。v目前 PC12 细胞株是国际上基本公认在体外进行神经生物,神经化学及神经系统疾病研究理想的模型(3)P19细胞细胞视黄酸(视黄酸(RA)诱导诱导P19细胞作为研究神经分化机制的模型细胞作为研究神经分化机制的模型P19向神经向神经元分化元分化选择性的选择性的APP695表表达增加,并伴随有神达增加,并伴随有神经细胞样的形态分化经细胞样的形态分化神经源性的小鼠胚胎癌细胞株神经源性的小鼠胚胎癌细胞株选择性的诱导其向单纯的神经元分化选择性的诱导其向单纯的神经元分化选择性的诱导其向单纯的神经元分化选择性的诱
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