超滤技术在卡拉胶低聚糖分离纯化中的应用.pdf

2 0 0 0 薹F海洋湖沼通报T r a n s a c t i o n so fO c e a n o l o g ya n dL i n m o l o g yN 0 3文黛缩号：10 0 3 6 4 8 2(2 0 0 0)0 3 0 0 4 0 一0 5超滤技术在卡拉胶低聚糖分离纯化中的应用翔枣酶竭鹚翼长云臂岛海洋走学海襻药斯与食品研究所青岛2 6 6 0 0 3)接要超过滤法定盎学撼擞按过滤羲齄上发展起采的细嫩粒予过滤磁技术，是膜法分离的一种，在化工、制药和食品等工业中蛾厦矗隘学、生物学和环保等壤域中鸯碍到了广泛的应1 I l。本文采臻超过滤法坤卡拉胶低聚糖进行7 分离纯化，结果表明超滤可快遗简便地将高分散性的低聚镳体系分成几个分子量不麟的组分。关键谰：超过滤卡驻胶低聚糖分予量孛圈努类罨：T Q 0 2 8+8文献标识鹅：A卡拉茨C a r r a g e e n a n)是一静天然的硫酸多骧，具凑独黪蛉抗瘸毒，抗要孛瘸活性。融前，其低聚糖的研究受到国内外学糟的关注。低聚糖分离中缀攀使髑昀方法有纸色谱法、桂急谱这、气镧色潜法、电嚣蘧等。超过滤法作为一种操作方便、回收率高的新型技术，在蛋白威纯化中已有较为成功的应用，德用予憾聚壤分离纯化的报道较步见剿，本文应用超过滤法对母控胶低聚糖产物进行了分离纯化，论证了超滤在低聚糖分离踺化应用中的可麓性。材料与方法l 毒|糕I 1 实黢材料两缀卡靛葭低聚糠s l、s 2 壶青岛海洋大学海洋药物与食黯辑炎蒡军挺摸)。i，2 仅嚣设嚣P r o F l u xx 1 2T a n g e n t i a lf l o wf i l t r a t i o ns y s t e m，M i l l i p o r e，超滤貘截褒分子量为I O K，5 K 和3 K；2 方溘2，l 超过滤涵将卡拉胶低聚糖溶于水后用G 3 砂漏抽滤，滤过液分别用截流分子量(球形鼹白分子鼙截流镶)为I O K、5 K、3 K 静怒滤骥超滤，壹至滤过渡臻苯赫骧黢法 D u b i s 簿，1 9 5 6；董群 万方数据3 期超滤技术在卡拉胶低聚糖分离纯化中的应用等，1 9 9 6 检测无糖组分，最后得到 1 0 K，5-1 0 K，3-5 K，1 0 目l3 946 352 4s 1-2(5 1 0 K)3，0 51 01 61 I5 IS ll I 9 71 3 1 5 6S 1 3(3 5 K)35 9S l 一4(3 K)1 84 5l5 06 96 8S 2 一I f)I O K)23 779 18 6 1s 2-2(5 一i O K)38 81 29 21 4 0 6S 2S 2-3(3 5 K)5 7 91 92 72 09 8S 2 4 f 3 K 1 5 5 35 l7 75 63 5(2)端基法所测的各缀分的平均分子量与超滤膜的截流分子量段并不一致(表3)。袭3T a h i e3S l 和S 2 各超滤级分的平均分子量A v e r a g em o l e c u l a rw e i g h to ff r a c t i o n so fS 1a n dS 2I 1 0 K l2 5-1 0 K3 3-5 K 4 3 K S l2 0 9 69 6 07 7 66 9 0S 22 4 1 51 0 0 78 3 67 9 0 万方数据3 期超滤技术在卡拉胶低聚糖分离纯化中的应用站(3)采用高效凝胶渗透色谱法对分子量的分布谶行研究。实验绺果表明，S 1 和s 2 系列的主翳超滤级分都是低聚糖级分(S 1-4 和s 2 4)，丽且分子量分布都较窄(图2)。1 2 0 0l l0 0I O 90 08 0 0 垂n1 0o o9 2 585 077 57；0 0氆o o3 6。9,o o1 2 帮1 5 0 0M m#黼38 a6 椰9 娃钾i s 棚图2S l、s 2 系列超滤级分的分手鼹分布F i 9 2M o l e e u l a r w e i g h tr a n g e so f f r a c t i o n so f S lS 2讨论一般提取的低聚糖体繇太多数为高分散性体系，分子量分布较宽，应用前需要经过分级纯化。匿此首先要采用种种方怯以减少分散度，使分子量在较窄的范围靠分布，墩就是裁备逛一翡撩聚糖。禚蒙璇楚纯戆方毯尽管霰多，翟辫较簿矮，有噩雩遥会引起饔怒。超过滤法是在常规微粒过滤基础上发展起来的细微粮子过滤薪技术，是膜法分离的一种。通过孔径不同的半遴膜，借助于外加压力所造成膜两侧的压力差，截留卜1 0 n m 的粒子。该技术具有设备简单，操作方便，不需加热或低漱操作，不经任何化学物质处理，竣畜籀戆转移等燕点，瑟辍在往工、翻蓊程食品等工燕中瑷及在垂学，垒壤学帮耀绦等领域中都得到了广泛的应用 张惟杰，1 9 9 4 。从实验结果可以看出，当应用具有不同分子量截流德的超过滤膜进行超过滤时，则可快速简便地犍赢分散的低聚糖俸系分成几个分子量不同的组分，初步达到分子量分级的曩静。瞧慧，端基法薪测静各缀分静努予量与超滤壤蠡孽簸藏努子量羧=沣甭一致。这怒由于超滤所用的截流分子量慎是用球形蛋囱标定的，而卡拉胶低聚糖为直链线形因此其实际的截流分子量要比球形蹑白标定的值小得多。由此可豫，超过滤技术可以应用于低聚糖盼分离中，但具体的截流德应根据处理微粒酶电蔫、分子大小及形获等方委静影嚷嚣豸褥定。另辫，超过滤洼霹魏这魏秘分缀静强酶，但精度不可熊很高，分级纯化效率较低，应在使用中垮其它技术联台使用，如亲和超滤技术等，以期取得更为理想的效果。“二 万方数据海洋湖沼通报2 0 0 0 钲参考文黻1 董群，郑丽伊，方税年，改良的苯酚一硫酸法测避多糖和寡糖含量的研究，中国药学杂志，1 9 9 6，3 1(9)：5 5 0 5 5 32 郭立安。蛋白质的商效疏水作用色谱及磁性亲和分离技术研究。上海医药工监研究酶博士学位论文，1 9 9 8：73+张憔杰，穰复台物生佬研究技术，浙江大学出版社，1 9 9 4：1 2 4 1 2 5，1 7 5 1 7 64 D u b i sM，K A G i l l e s，J K H a m i l t o n，e ta l，C o l o r i m e t x i em e t h o df o rd e t e r m i n a t i o no fs u g a r sa n d r e l a t e ds u b s t a n c e s，A n a l C h e m，1 9 5 6，2 8：3 5 05 S o m o g y iM，N o t e so ns u g a rd e t e r m i n a t i o n，B i 0 1 C h e m，1 9 5 2，1 9 5：1 9-2 3A P 毛l C A 罩l o No 爹U 影f R A 攀l r r 嚣装T o 室珏嚣P U R l F l C A 譬I o No Fo L I G o C A R R A G E E N A N SL I UX i a o m i n gZ H O UP a n gW A N GC h a n g y u n(M a r i n eD r u g F o o dI n s t i t u t e，O c e a nU n i v e r s i t yO fQ i n g d a o，2 6 6 0 0 3)A b s t r a c tT h i sp a p e rr e p o r t st h ea p p l i c a t i o no fu l t r a f i l e ri nt h ep u r i f i c a t i o no fo l i g o c a l r a g e e n a n sT h eo l i g o e a r r a g e e n a n sw e r es e p a r a t e di n t os e v e r a lp a r t sw i t hd i f f e r e n tm o l e c u l a rw e i g h t s K e y w o r d s：u l t r a f i l t r a t i o no l i g o e a r r a g e e a a nm o l e c u l a rw e i 痨t 万方数据超滤技术在卡拉胶低聚糖分离纯化中的应用超滤技术在卡拉胶低聚糖分离纯化中的应用作者：刘小鸣，周鹏，王长云，LIU Xiaoming，ZHOU Pang，WANG Changyun作者单位：青岛海洋大学海洋药物与食品研究所,青岛,266003刊名：海洋湖沼通报英文刊名：TRANSACTIONS OF OCEANOLOGY AND LIMNOLOGY年，卷(期)：2000(3)被引用次数：2次 参考文献(5条)参考文献(5条)1.董群;郑丽伊;方积年 改良的苯酚-硫酸法测定多糖和寡糖含量的研究 1996(09)2.郭立安 蛋白质的高效疏水作用色谱及磁性亲和分离技术研究 19983.张惟杰 糖复合物生化研究技术 19944.Dubis M,K.A;Gilles,J.K;Hamilton Colorimetric method for determination of sugarsandrelated substances 19565.Somogyi M Notes on sugar determination 1952 本文读者也读过(9条)本文读者也读过(9条)1.王长云.顾谦群.周鹏.赵晓燕.刘小鸣.管华诗 红藻多糖卡拉胶分子修饰研究.酸降解期刊论文-中国海洋药物2003,22(2)2.赵林果.余世袁.丁艳.ZHAO Lin-guo.YU Shi-yuan.DING Yan 分离制备高纯度中性木低聚糖的研究期刊论文-林产化学与工业2000,20(4)3.迟连利.于广利.任玮娜.管华诗.Robert J.Linhardt-卡拉胶五糖的制备及结构研究期刊论文-中国海洋药物2002,21(3)4.杨雅麟.王建华.张帆.滕达.YANG Ya-lin.WANG Jian-hua.ZHANG Fan.TENG Da 薄层层析法分离菊芋汁中低聚糖期刊论文-理化检验-化学分册2007,43(3)5.钟振声.王文铂 用离子交换树脂祛除低聚糖中的葡萄糖期刊论文-化学与生物工程2004,21(4)6.褚绍霞.潘秋月.孟祥河.孙培龙.Chu Shaoxia.Pan Qiuyue.Meng Xianghe.Sun Peilong 壳聚糖絮凝分离豆腐废水蛋白的研究期刊论文-中国粮油学报2010,25(3)7.马夏军.岑颖洲.邱玉明.许少玉.MA Xia-jun.CEN Ying-zhou.QIU Yu-ming.XU Shao-yu 超声波辅助过氧化氢氧化降解制备相对低分子质量异枝麒麟菜硫酸多糖期刊论文-中国海洋药物2005,24(4)8.周琦.王记成.郭壮.闫丽雅.张青.刘小鸣.陈卫.张和平.Zhou Qi.Wang Jicheng.Guo Zhuang.YanLiya.Qing Zhang.Liu Xiaoming.Chen Wei.Zhang Heping 益生菌Lacwbacillus casei Zhang在马乳中发酵特性及人工消化液耐受性研究期刊论文-乳业科学与技术2009,32(1)9.编辑部信息组.Information Group of Editorial Office 卡拉胶的制备及应用期刊论文-明胶科学与技术2001,21(4)引证文献(2条)引证文献(2条)1.王长云.顾谦群.周鹏.赵晓燕.刘小鸣.管华诗 红藻多糖卡拉胶分子修饰研究.酸降解期刊论文-中国海洋药物 2003(2)2.于广利 系列硫酸寡糖的制备及其结构与序列分析学位论文博士 2004 本文链接：http:/