超高效液相色谱-串联质谱法测定豇豆中溴氰虫酰胺等5种农药残留.pdf

农药学学报():/.收稿日期:修回日期:.作者简介:钱程男硕士研究生:.李建国通信作者()男博士研究员主要从事农产品质量安全研究:.基金项目:公益性行业(农业)科研专项().研究论文 超高效液相色谱串联质谱法测定豇豆中溴氰虫酰胺等 种农药残留钱 程 吴 琼 吕岱竹 李建国(.中国热带农业科学院 分析测试中心海口.海南省热带果蔬产品质量安全重点实验室海口.华中农业大学武汉)摘 要:建立了超高效液相色谱串联质谱(/)同时测定豇豆中溴氰虫酰胺、乙基多杀菌素、呋虫胺、噻虫嗪和啶虫脒残留量的方法 豇豆样品经乙腈提取通过 法净化后采用 色谱柱分离在电喷雾正离子模式下以多反应监测()模式检测 结果表明:在 /内 种农药的峰面积与其相应的质量浓度间呈良好线性关系相关系数均大于 在 、和 /个添加水平下回收率为 相对标准偏差为 ()种农药在豇豆中的检出限为 /定量限为 /该方法简单灵敏定量准确可用于分析豇豆中的溴氰虫酰胺、乙基多杀菌素、呋虫胺、噻虫嗪和啶虫脒的残留量关键词:超高效液相色谱串联质谱豇豆溴氰虫酰胺乙基多杀菌素呋虫胺噻虫嗪啶虫脒残留:/.中图分类号:.文献标志码:文章编号:()(.):(/).钱 程等:超高效液相色谱串联质谱法测定豇豆中溴氰虫酰胺等 种农药残留().(/)()().()()/.:(/)豇豆中主要虫害有蓟马、斑潜蝇和豆荚螟等在种植过程中需要频繁使用化学农药而且豇豆属连续开花、结果和采收的蔬菜作物导致其农药残留超标的风险很大 因此低毒易降解农药受到青睐 溴氰虫酰胺、乙基多杀菌素、噻虫嗪、呋虫胺和啶虫脒均为低毒易降解农药 其中呋虫胺和啶虫脒是传统农药而溴氰虫酰胺、乙基多杀菌素和噻虫嗪是近年来才在豇豆上使用 我国食品中农药残留标准规定:乙基多杀菌素在豇豆中的最大残留限量()为 /噻虫嗪和啶虫脒在黄瓜中的 分别为 和 /而在豇豆中未规定其 值对溴氰虫酰胺和呋虫胺尚未规定其在食品中的 值 这 种农药虽属低毒易降解农药但若使用不合理仍有农药残留超标的风险利用超高效液相色谱串联质谱(/)检测豇豆中溴氰虫酰胺等 种农药残留的报道还很少如对乙基多杀菌素、呋虫胺和噻虫嗪残留的研究多采用液相色谱法或高效液相色谱法存在前处理过程繁琐的问题 啶虫脒的检测方法虽相对多样如气相色谱法、液相色谱法等但同样存在前处理步骤繁琐的弊端 国外对于呋虫胺和噻虫嗪的残留检测常采用液相色谱或高效液相色谱法 对动物源性食品中啶虫脒的残留检测采用液相色谱串联质谱法较为常见 等采用 萃取和/法检测了香菜中乙基多杀菌素的残留其最低 检 出 浓 度 为 /相 关 系 数 大 于 等采用 萃取和/检测稻米中溴氰虫酰胺的残留定量限为/关于溴氰虫酰胺的检测方法尚未见报道 本研究采用/方法同时测定了豇豆中 种农药的残留量并且兼顾简化前处理和满足 种农药的限量标准的要求 材料与方法 主要仪器、药剂与试剂 超 高 效 液 相 色 谱 仪(美 国 公司)三重四级杆质谱仪(美国 公司)配电喷雾离子源()电子天平(日本岛津公司)超声波扫频清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司)离心机(上海安亭科学仪器厂)旋涡混合器(江苏海门其林医用仪器厂)超纯水仪(美国 公司)有机系滤膜(天津美瑞泰克公司)乙基多杀菌素(纯度 (乙基多杀菌素)(乙基多杀菌素)、呋虫胺(纯 度)和 噻 虫 嗪(纯度)德国.公司啶虫脒(纯度)农业部环境质量监督检验测试中心(天津)溴氰虫酰胺(纯度 )杜邦公司 乙腈、甲醇(级)美国 公司超纯水、丙基乙二胺吸附剂()和甲酸美国 公司其余试剂均为国产分析纯 样品前处理豇豆样品采自海南省万宁市豇豆种植基地采收前 停用本试验所用农药 称取 豇豆样品于 离心管中加入 乙腈于 下超声萃取 加入 氯化钠涡旋 于 /下离心 取 上清液于 离心管中先后加入 和 无水硫酸镁涡旋 于 /下离心 取上清液过 滤膜待测 基质匹配标准溶液配制取豇豆样品按 节的方法处理用上清液代替甲醇分别溶解各相应的标准品配制成各农药质量浓度分别为 、和 /的混合 农 药 学 学 报.标准溶液涡旋混匀过 滤膜待用 检测条件色谱条件:色谱柱()柱温 进样量 流速 /运行时间 梯度洗脱条件见表 在此条件下溴氰虫酰胺等 种农药的保留时间见表 质谱条件:离子源为()正离子扫描模式离子源温度 气帘气压力 离子源雾化气压力 检测方式为多反应监测扫描模式()各农药的采集数据见表 定量方法在正离子模式测定条件下分别将豇豆样品溶液和基质匹配混合标准溶液(质量浓度分别为、和 /)注入液相色谱串联四极杆质谱仪进行测定 外标法定量以定性离子对为依据定性以定量离子对的峰面积计算样品中待测物的含量表 梯度洗脱条件 时间/流速/(/)流动相 乙腈/乙酸铵 甲酸水 /表 种农药质谱采集参数 农药保留时间/定量离子对/定性离子对/去簇电压/碰撞能量/乙基多杀菌素 /乙基多杀菌素 /溴氰虫酰胺 /呋虫胺 /噻虫嗪 /啶虫脒 /乙基多杀菌素中含有乙基多杀菌素 和乙基多杀菌素 两种成分标准品中二者的质量比为 在计算乙基多杀菌素含量时将这两种成分相加计算 标准曲线的绘制和添加回收试验取 节配制的混合标准溶液按 节的条件测定 以标准溶液的质量浓度()为横坐标以监测离子峰面积()为纵坐标绘制标准曲线向豇豆空白样品中添加 、和 /的 个水平的 种农药混合标准溶液按照 节的前处理方法和 节的条件测定每个水平重复 次计算添加回收率和相对标准偏差 结果与讨论 提取条件和净化方法的选择本试验以乙腈为提取溶剂 采用 净化方法简单易行 样品溶液采用 无水硫酸镁净化无水硫酸镁在吸水的同时会放热可以进一步将农药洗脱下来 离心后得到的上清液即可用于检测 与传统的前处理方法比 方法省去了过柱、旋蒸和定容步骤既简化了前处理方法也降低了农药残留量损失的可能性检测结果更接近真实值 质谱条件选择根据 种农药的化学结构 均采用在()模式下形成的 作为母离子取质量浓度为 /的 种农药的混合标准溶液进行相关参数的优化 先通过母离子扫描确定待用的母离子再进行去簇电压()的优化使待测农药分子离子的丰度达到最佳然后对母离子进行子离子的扫描选择丰度较高的 个特征碎片离子.钱 程等:超高效液相色谱串联质谱法测定豇豆中溴氰虫酰胺等 种农药残留 用于母离子定性和定量的优化优化碰撞能量使这 个特征碎片离子的响应最大最后得到 种化合物相应的 离子对以及质谱参数 色谱条件选择当流动相中的水相使用超纯水时质谱对乙基多杀菌素的灵敏度较低 向水相中加入 的甲酸则可以极大地提高其对乙基多杀菌素的灵敏度(灵敏度为不加甲酸时的 倍)通过试验最终确定流动相为乙腈和 乙酸铵 甲酸溶液可以同时满足 种农药的灵敏度和较好的峰形要求 基质效应的影响采用 的样品前处理方法虽然能够很好地净化样品但不能完全消除基质效应 基质效应主要是基质成分和目标化合物在电喷雾离子源进行离子化时相互竞争的结果包括基质增强效应和基质抑制效应 本研究表明:不采用基质匹配混合标准溶液的方法得到的回收率仅为 不能达到检测要求 采用基质匹配混合标准溶液后添加回收率可达到 可满足检测需要 种农药的 色谱图见图 和图 图 种农药混合标准溶液的 色谱图(/).(/)图 豇豆中分别添加 种农药回收试验的 色谱图(/).(/)农 药 学 学 报.线性范围和检出限结果(见表)表明:在 /范围内 种药剂的线性关系良好决定系数为 定量限(/)为 /表 种农药的标准曲线方程和决定系数 农药名称线性范围 (/)标准曲线方程 决定系数/溴氰虫酰胺 乙基多杀菌素 乙基多杀菌素 呋虫胺 噻虫嗪 啶虫脒 方法的平均回收率和相对标准偏差结果见表 种农药的平均回收率均在 相对标准偏差在 ()符合农药残留检测的要求表 种农药的添加回收率和相对标准偏差()()农药添加水平/(/)平均回收率/相对标准偏差/溴氰虫酰胺 乙基多杀菌素 呋虫胺 噻虫嗪 啶虫脒 实际样品检测于 年 月 日采自海南省万宁市和儋州市豇豆种植基地的 个批次样品采用本研究所建立的方法对样品中的溴氰虫酰胺等 种农药的残留量进行了检测 结果表明:万宁样品中的溴氰虫酰胺、乙基多杀菌素、呋虫胺、噻虫嗪和啶虫脒的残留量分别为 、和 /儋州样品 种农药均未检出 调查发现:万宁市豇豆基地于 月 日施用了这 种农药儋州市豇豆基地未施用溴氰虫酰胺、呋虫胺和噻虫嗪乙基多杀菌素和啶虫脒曾于 个月前施用与检测结果吻合 结论本研究采用 的样品前处理方法操作步骤简单且杂质干扰较小添加回收率均在允许范围内且具有较好的重复性保证了分析的可行性能够准确定性和定量分析溴氰虫酰胺、乙基多杀菌素、呋虫胺、噻虫嗪和啶虫脒在豇豆中的残留量参考文献():阮有宏 朱训永 耿建云 等.秋豇豆主要病害的诊断及防治.湖北植保 ():.():.()食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量.北京:中国质检出版社.:.()张晓燕 邓树华 黄卫 等.乙基多杀菌素的高效液相色谱测定.粮食科技与经济 ():.():.()侯如燕 卞红正 赵秀霞 等.固相萃取液相色谱测定复杂基质蔬菜中 种烟碱类残留.分析测试学报 ():.():.()汤富斌 陈宗懋 罗逢健 等.法测定黄瓜和土壤中噻虫嗪的残留量.农药 ():.钱 程等:超高效液相色谱串联质谱法测定豇豆中溴氰虫酰胺等 种农药残留 .():.()庞民好 康占海 陶晡 等.基质固相分散 高效液相色谱法测定小麦籽粒中吡虫啉和啶虫脒残留量.农药学学报():.():.()李二虎 胡敏 吴兵兵 等.气相色谱法测定黄瓜中啶虫脒农药残留.农药 ():.():.()./.():.():.:.:.():.():.杨桂秋 黄琦 陈霖 等.新型杀虫剂溴氰虫酰胺研究概述.世界农药 ():.():.()张亦冰.新内吸杀虫剂呋虫胺.世界农药 ():.():.()刘宾郭栋梁毛江胜 等.菠菜中噻虫嗪的残留检测与消解动态.农药 ():.():.()周育 庾琴 侯慧锋 等.新型烟碱类杀虫剂啶虫脒研究进展.植物保护 ():.():.()罗辉泰 黄晓兰 吴惠勤 等./液相色谱串联质谱法同时测定鱼肉中 种激素类及氯霉素类药物残留.分析测试学报():.():.()/农药残留试验准则.北京:中国农业出版社./.:.()(责任编辑:曲来娥)