扬州地区12121例女性H...V感染情况及基因型分布研究_张亚芬.pdf
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1、作者简介:张亚芬,女,主管技师,主要从事临床检验研究。通信作者,E-m a i l:d i n g c h a n g p 1 6 3.c o m。论 著D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-9 4 5 5.2 0 2 3.0 4.0 1 7扬州地区1 2 1 2 1例女性H P V感染情况及基因型分布研究张亚芬,丁昌平扬州大学附属医院检验科,江苏扬州 2 2 5 1 0 0 摘 要:目的 分析扬州地区不同年龄段女性人乳头瘤病毒(H P V)感染情况及基因型分布,为扬州地区防治H P V感染提供临床依据。方法 采用聚合酶链反应体外扩增结合导流杂交技术对1 2
2、1 2 1例女性的宫颈脱落细胞标本进行H P V基因分型检测。分析总体及不同年龄组的H P V感染、H P V单一和多重感染分布情况,以及3种疫苗保护的H P V基因型感染情况。结果 扬州地区H P V总感染率为2 2.7 1%(2 7 5 3/1 2 1 2 1),以单一高危型感染为主,感染率最高的5种基因型依次为H P V 5 2、1 6、5 8、5 3、5 1型;H P V感染率在不同年龄组女性间比较,差异有统计学意义(2=8 3.3 9,P0.0 0 1),2 0岁年龄组感染率最高(4 5.3 7%);H P V九价疫苗覆盖的基因型感染占比为6 5.4 6%。结论 扬州地区女性H P
3、V感染以单一高危型为主,以H P V 5 2、1 6、5 8、5 3、5 1型多见,适龄女性推荐优先选择H P V九价疫苗。关键词:人乳头瘤病毒;基因型;疫苗中图法分类号:R 4 4 6.5文献标志码:A文章编号:1 6 7 2-9 4 5 5(2 0 2 3)0 4-0 5 1 0-0 5P r e v a l e n c e a n d g e n o t y p e d i s t r i b u t i o n o f H P V i n f e c t i o n a m o n g 1 2 1 2 1 f e m a l e s i n Y a n g z h o uZHANG Y
4、 a f e n,D I NG C h a n g p i n gD e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y,t h e A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f Y a n g z h o u U n i v e r s i t y,Y a n g z h o u,J i a n g s u 2 2 5 1 0 0,C h i n aA b s t r a c t:O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e h u m a
5、n p a p i l l o m a v i r u s(H P V)i n f e c t i o n s t a t u s,g e n o t y p e d i s t r i b u-t i o n c h a r a c t e r i s t i c s a m o n g f e m a l e s o f d i f f e r e n t a g e g r o u p s i n Y a n g z h o u,a n d t o p r o v i d e a r e l i a b l e b a s i s f o r g u i d i n g p r o p
6、h y l a c t i c H P V v a c c i n a t i o n a n d c e r v i c a l c a n c e r p r e v e n t i o n.M e t h o d s P o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n a m-p l i f i c a t i o n i n v i t r o a n d f l o w-t h r o u g h h y b r i d i z a t i o n w e r e u s e d t o d e t e c t t h e i n f e c
7、t i o n a n d g e n o t y p e o f H P V i n 1 2 1 2 1 f e m a l e c e r v i c a l e p i t h e l i a l e x f o l i a t e d c e l l s,H P V i n f e c t i o n r a t e s o v e r a l l a n d i n d i f f e r e n t a g e-g r o u p w e r e a n a-l y z e d,a s w e l l a s t h e d i s t r i b u t i o n o f H
8、P V s i n g l e a n d m u l t i p l e i n f e c t i o n s,a n d H P V g e n o t y p e i n f e c t i o n s t a t u s p r o t e c t e d b y t h e t h r e e v a c c i n e s.R e s u l t s T h e o v e r a l l H P V i n f e c t i o n r a t e i n Y a n g z h o u w a s 2 2.7 1%(2 7 5 3/1 2 1 2 1),H P V i n
9、f e c t i o n a m o n g f e m a l e s i n Y a n g z h o u w a s m a i n l y s i n g l e h i g h-r i s k H P V i n f e c t i o n.T h e m o s t c o m-m o n f i v e i n f e c t i o n s u b t y p e s w e r e H P V 5 2,1 6,5 8,5 3,5 1.T h e d i f f e r e n c e o n H P V i n f e c t i o n r a t e s a m o
10、n g d i f f e r-e n t a g e g r o u p s h a d s t a t i s t i c a l s i g n i f i c a n t(2=8 3.3 9,P0.0 0 1),w i t h t h e h i g h e s t p e a k i n t h e y o u n g e r t h a n 2 0-y e a r o l d g r o u p.T h e i n f e c t i o n r a t e o f H P V g e n o t y p e s c o v e r e d b y n i n e-v a l e
11、n t v a c c i n e a c c o u n t e d f o r 6 5.4 6%o f a l l o f t h e i n f e c t i o n s f e m a l e s.C o n c l u s i o n H P V i n f e c t i o n a m o n g f e m a l e s i n Y a n g z h o u i s m a i n l y s i n g l e h i g h-r i s k H P V i n f e c t i o n,a n d w h i c h i s m a i n l y c a u s
12、e d b y H P V 5 2,1 6,5 8,5 3,5 1 s u b t y p e s.N i n e-v a l e n t v a c c i n e w h i c h i n c o r p o r a t i n g m o r e H P V g e n o t y p e s s h o u l d b e a p r i o r c h o i c e f o r f e m a l e s i n Y a n g z h o u.K e y w o r d s:h u m a n p a p i l l o m a v i r u s;g e n o t y p
13、e;v a c c i n e 宫颈癌作为一种常见的女性生殖系统恶性肿瘤,其发病率和病死率在全世界女性肿瘤中居第4位,2 0 1 8年在全球范围内宫颈癌新发病例近5 7万,死亡病例约3 1.1万,对女性的健康和生命构成了严重威胁1-2。近年来,宫颈癌在发展中国家的发病率和病死率不断增加,并趋于年轻化3。而持续性人乳头瘤病毒(H P V)感染是宫颈癌及其癌前病变的主要原因4。迄今为止已经鉴定出2 0 0多种H P V基因型,其中4 0多种与生殖道疾病相关,根据其致病性分为高危型和低危型。H P V疫苗的接种能够预防宫颈癌。但H P V在不同地区和人群中的感染率和基因型分布表现出多样性5,因此,统
14、计不同地区、不同时期的H P V流行病学数据对于H P V疫苗策略制订及疗效的评估尤为重要。本研究回顾性分析了2 0 1 8年1 1月至2 0 2 0年7月本院就诊及体检女性的H P V感染情况,以期为扬州地区H P V防控策略提供依据。1 资料与方法1.1 一般资料 以2 0 1 8年1 1月至2 0 2 0年7月在本院妇科门诊就诊及健康体检中心体检的1 2 1 2 1例女性为研究对象,其中妇科门诊就诊患者9 6 8 4例,健康中心体检女性2 4 3 7例,年龄1 68 8岁。纳入标准:扬州地区常住女性;处于非妊娠状态;未注射过H P V015检验医学与临床2 0 2 3年2月第2 0卷第4
15、期 L a b M e d C l i n,F e b r u a r y 2 0 2 3,V o l.2 0,N o.4疫苗;无全子宫切除史,无宫颈手术史及未接受过盆腔放射治疗。将研究对象按照年龄分为6组:2 0岁组(n=1 0 8),2 03 0岁组(n=2 4 1 0),3 04 0岁组(n=4 3 4 6),4 05 0岁组(n=3 4 6 3),5 06 0岁组(n=1 4 6 7)及6 0岁组(n=3 2 7)。本研究获得本院医学伦理委员会批准。1.2 标本采集 采样避开月经期,采样前2 4 h无性行为,采样前7 2 h内避免阴道冲洗及阴道用药。以窥阴器暴露宫颈,宫颈刷置于宫颈口处
16、轻刷并顺时针旋转35 圈,取出宫颈刷放入加有细胞保存液的标本管中,立即送检。1.3 H P V D NA提取和基因分型 H P V分型检测试剂盒购自潮州凯普生物化学有限公司,采用聚合酶链反应(P C R)体外扩增结合导流杂交技术对2 1种H P V亚型进行检测,包括1 5种高危型H P V(H P V 1 6、1 8、3 1、3 3、3 5、3 9、4 5、5 1、5 2、5 3、5 6、5 8、5 9、6 6和6 8型)和6种低危型H P V(H P V 6、1 1、4 2、4 3、4 4和C P 8 3 0 4型),实验步骤严格按照试剂盒操作规程进行。1.4 统计学处理 采用S P S S
17、 1 8.0统计软件进行数据处理及统计学分析,计数资料以例数或百分率表示,不同分组间H P V感染率的比较采用2检验。以P0.0 5为 差 异 有 统 计 学 意 义。使 用G r a p h P a d p r i s m 8.0绘制百分比构成图。2 结 果2.1 H P V感染率及基因型分布 在1 2 1 2 1例女性中,H P V基因型检测显示2 7 5 3例H P V阳性,H P V总感染率为2 2.7 1%。其中,就诊于妇科门诊的患者H P V感染率(2 4.6 8%,2 3 9 0/9 6 8 4)明显高于健康体检 中 心 体 检 的 女 性H P V感 染 率(1 4.9 0%,
18、3 6 3/2 4 3 7),差异有统计学意义(2=1 0 6.1 9,P0.0 1)。H P V最常 见的5种 基因型依次 为H P V 5 2型(5.0 6%,6 1 3/1 2 1 2 1),H P V 1 6型(3.7 0%,4 4 8/1 2 1 2 1),H P V 5 8型(3.1 4%,3 8 0/1 2 1 2 1),H P V 5 3型(2.6 6%,3 2 2/1 2 1 2 1)和H P V 5 1型(2.2 6%,2 7 4/1 2 1 2 1),均属于高危型H P V亚型;而最常见的3种低危型H P V基因型分别为H P V C P 8 3 0 4型(1.9 4%,
19、2 3 5/1 2 1 2 1),H P V 4 4型(0.6 8%,8 3/1 2 1 2 1)和H P V 6型(0.6 5%,7 9/1 2 1 2 1),见图1。2.2 不同年龄组的H P V感染率 H P V感染率在不同年龄组间呈U型分布,见图2。感染率在2 0岁组达到峰值(4 5.3 7%,4 9/1 0 8),随着年龄的增长逐渐下降,在3 04 0岁组为最低值(2 0.5 2%,8 9 2/4 3 4 6),随后 逐 渐 上 升,在6 0岁 组 出 现 第 二 个 峰 值(3 2.7 2%,1 0 7/3 2 7)。不同年龄组的感染率比较,差异有统计学意义(2=8 3.3 9,P
20、0.0 0 1)。高危型H P V、低危型H P V及高危型+低危型H P V混合感染率与H P V总感染率表现出平行趋势。各年龄组均以高危型H P V感染为主,其中2 0岁组感染率最高的是H P V 1 6型(1 2.9 6%,1 4/1 0 8),而其他年 龄 组,H P V 5 2型均是感染率最高的亚型 按年龄增长依次为5.5 2%(1 3 3/2 4 1 0)、4.7 4%(2 0 6/4 3 4 6)、4.6 5%(1 6 1/3 4 6 3)、5.4 5%(8 0/1 4 6 7)、7.9 5%(2 6/3 2 7)。图1 扬州地区1 2 1 2 1例女性中H P V基因型的感染率
21、图2 不同年龄组的HP V感染率2.3 H P V单一和多重感染分布情况 在2 7 5 3例H P V感染的女性中,单一感染和多重感染的占比分别为7 3.7 0%(2 0 2 9/2 7 5 3)和2 6.3 0%(7 2 4/2 7 5 3)。在多重感染病例中,双重感染最多,随着多重感染基因型数目的增加其构成比明显下降:双重感染5 0 6例(1 8.3 8%),三重感染1 6 3例(5.9 2%),四重感染3 6例(1.3 1%),五重感染1 3例(0.4 7%),六重感染6例(0.2 2%)。在多重感染中,六重感染均为高危型+低危型混合感染,而单纯高危型感染最多为五重感染,单纯低危型感染最
22、多为二重感染。在多重感染中,H P V 5 2、5 3型合并感染占6.9 1%(5 0/7 2 4),其次是H P V 1 6、5 2型(6.3 5%,4 6/7 2 4)、H P V 5 1、5 2型(5.3 9%,3 9/7 2 4)、H P V 5 2、5 8型(5.1 1%,3 7/7 2 4)和H P V 5 3、5 8型(3.7 3%,2 7/7 2 4)。在不同的年龄组中,均以单一高危型感染为主,其次为多重高危型感染,见表1。2.4 3种疫苗保护的H P V基因型感染情况 在2 7 5 3例H P V感染阳性的女性中,根据目前市售的三类H P V疫苗,分析受疫苗保护的H P V基
23、因型感染率:九价疫苗覆盖的基因型(H P V 1 6、1 8、3 1、3 3、4 5、5 2、5 8、6、1 1型)感染占比为6 5.4 6%(1 8 0 2/2 7 5 3),115检验医学与临床2 0 2 3年2月第2 0卷第4期 L a b M e d C l i n,F e b r u a r y 2 0 2 3,V o l.2 0,N o.4而四价疫苗覆盖的基因型(H P V 1 6、1 8、6、1 1型)、二价疫苗覆盖的基因型(H P V 1 6、1 8型)感染占比分别为2 5.6 8%(7 0 7/2 7 5 3)和2 1.6 1%(5 9 5/2 7 5 3),见表2。当按年龄
24、组进行分析时,各年龄组中九价疫苗覆盖的 基 因 型 多 重 感 染 构 成 比 分 别 为4 0.8 2%、2 9.5 3%、1 8.8 3%、1 7.8 9%、2 2.6 1%和3 5.5 1%,而各年龄组中九价疫苗覆盖的单一感染构成比分别为2 8.5 7%、3 9.7 2%、4 4.3 9%、4 4.7 2%、4 4.9 7%和3 8.3 2%。表1 不同年龄组H P V单一和多重感染分布情况n(%)年龄组n单一感染高危型 低危型合计多重感染高危型 低危型 高危型+低危型合计2 0岁组4 92 0(4 0.8 2)7(1 4.2 9)2 7(5 5.1 0)1 3(2 6.5 3)0(0.
25、0 0)9(1 8.3 7)2 2(4 4.9 0)2 03 0岁组5 6 93 3 5(5 8.8 8)4 8(8.4 4)3 8 3(6 7.3 1)1 2 7(2 2.3 2)2(0.3 5)5 7(1 0.0 2)1 8 6(3 2.6 9)3 04 0岁组8 9 26 0 5(6 7.8 3)7 8(8.7 4)6 8 3(7 6.5 7)1 4 3(1 6.0 3)1(0.1 1)6 5(7.2 9)2 0 9(2 3.4 3)4 05 0岁组7 3 85 2 7(7 1.4 1)5 9(7.9 9)5 8 6(7 9.4 0)1 0 9(1 4.7 7)5(0.6 8)3 8(5
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