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植物组织培养期末复习题
一、填空题（每空0.5分）
1. 植物组织培养按培养对象分为__组织培养__、_器官培养_、_胚胎培养_、__细胞培养_、_原生质体培养__等几种类型.
2. 在分离原生质体的酶溶液内，需要加入一定量的 Cacl2·2H2O 和葡聚糖硫酸钾_其作用是保持原生质体膜的稳定，避免破裂.
3. 1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物__细胞具有全能性_____的理论概念；1943年White提出植物细胞“____全能性_____”学说，并出版了《植物组织培养手册》，从而使植物组织培养成为一门新兴的学科。
4. 用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_80_℃的温度范围内，而若用它高温干燥灭菌则需在__150__℃的温度下1-3小时；烘干植物材料的温度是_60_℃.
5. 细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__全部遗传信息__和___形成完整植株的潜在__的能力。
6. 1962年，Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了__MS_培养基，其特点是_无机盐_浓度较高，且为较稳定的__________。
7. 7.6-BA / NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进_根_的生长，这时_脱分化_ 占主导地位；比值高促进 _芽_ 的生长，这时_分化 占主导地位.
9. 组织培养的特点是：__无菌_、__人工控制_、_离体_.
10. 1962年印度Guha等人成功地培养毛叶曼陀罗花药获得__单倍体植株_，这促进了花药和花粉培养的研究。
11. 在组织培养中，不耐热的物质用__过滤__法灭菌，而培养基常用___湿热灭菌__法灭菌.
13. 在组织培养中，非洲菊是靠_从生芽 的方式进行繁殖的，而蝴蝶兰是以__原球茎_ 的方式进行快繁的。
15. 在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以__0.3-0.5__mm、带__1-2__个叶原基为好。
16. 原生质体的分离有_机械法_和__酶解法_两种方法.
17. 进行植物组织培养最基本的前提条件是__离体 _ 。
18. 植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为___适光_ 培养和___嗜光 培养。
20. 组织培养中有三大不易解决的问题，它们分别是__黄化（污染）、_褐化__、_玻璃化。
21. White培养基_无机盐_浓度低，适合生根培养。
22. 在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成__正比_，而与脱毒效果成__反比__。
23. 一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象称为"__脱分化___"。
25. 茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为__普通茎尖__ 培养和_茎尖分生组织_培养两种类型。
27. 愈伤组织的形态发生有_器官发生__和__体细胞胚发生__两种情况。
28. 植物组织培养按培养的方式分为__液体_ 培养和__固体__培养。
29. 1960年，英国学者Cocking用__真菌纤维素酶酶解_分离原生质体成功，从而创新原生质体的培养技术。
30. 大多数植物组织培养的适宜温度范围是_23-25__℃，培养基的PH值是__5.8_.
32. 在组织培养中，ZT和GA必须用_过滤 _法灭菌，而接种室空间采用_紫外线照射__或_甲醛熏蒸_法灭菌.
33. 不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生_cl离子（ClO-）_来杀菌的；升汞是靠_汞离子_来达到灭菌目的。
34. 幼胚培养时，其发育过程有_早熟萌发___、___胚性发育__、_形成愈伤__三种方式。
35. 植物的胚胎培养，包括__胚胎__培养、幼胚 培养、__胚乳__培养、 胚珠_培养以及子房的培养.
38. 一个已停止分裂的成熟细胞转变为__分生_状态，并形成_愈伤组织_的现象称为"脱分化".
39. 由胚乳培养可以获得__单__倍体植株，经秋水仙素处理可以获得_二_倍体植株.
40. 去除植物病毒的主要方法是_理化法_和_组培法__两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好.
41. 花药培养是_器官__培养，花粉培养属于__细胞__培养，但二者的培养目的一样，都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最后发育成__单倍体植株__.
43. 原生质体的融合可实现_体细胞_的杂交，其融合的方式分为__自然融合_和__人工诱导_两类.

二、不定选择题（每小题2分）
1. 培养室里的湿度一般保持在_C_.
A 30~40%；B 50~60%；C 70~80%；D 80~90%
2. 下列不属于生长素类的是__AD_。
A Kt；B IAA；C NAA；D ZT
3. 影响培养基凝固程度因素有_ABD_.
A 琼脂的质量好坏；B 高压灭菌的时间；C 高压灭菌的温度；D 培养基的PH
4. .活性炭在组织培养中的作用有_ABC_。
A吸附有毒物质；B减少褐变，防止玻璃化；
C创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长；D增加培养基中的养分；
5. 下列具有细胞全能性的细胞是：_ABCD_。
A 成熟的老细胞；B 幼嫩的组织细胞；C 愈伤组织细胞 D 番茄的受精合子
6.第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是_B_：.
A□Morel；B Haberland；C□Schleiden；D□White
7.下列培养基中__C_无机盐的浓度最低。
A MS培养基；B B5培养基；C White培养基；N6培养基
8.高温易被破坏分解的植物激素是__AbD_。
A IAA； B GA； C NAA； D Zt
9.从单个细胞或一块外植体形成典型的愈伤组织，大致经历__ACD三个时期。
A 诱导期；B 潜伏期；C 分化期；D 分裂期
10.下列不属于活性炭在组织培养中作用的是___D_.
A吸附有毒物质；B减少褐变，防止玻璃化；
C创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长；D增加培养基中的养分；
11. 下列不属于细胞分裂素的植物激素是_B_。
A 6-BA；B NAA；C Zt；D Kt
12.植物组织培养的特点是_ABC_ 。
A培养条件可人为控制；B生长周期短，繁殖率高；C管理方便；D产量大
14..下列不属于大量元素的盐是_C_。
A NH4NO3； B KNO3； C ZnSO4.7H2O； D MgSO4.7H2O
15.下面属于处于愈伤组织分裂期的特征是__ABCD_。
A 细胞分裂加快 B 正在分裂的细胞体积小，内无液泡
C 细胞的核和核仁增至最大D 细胞中的RNA含量减少，
16.在原生质体的培养中，渗透稳定剂的作用是： A
A 稳定原生质体的形态而不使其被破坏 B 支持作用 C 提供营养 D 调节PH值
17.能打破种子休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是： AB
A GA；B IAA；C NAA；D Zt
3.下列实验中可能获得单倍体植株的是_BCD_。
A 小麦的茎尖培养；B番茄花药培养；C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养
18.在组培条件下，花粉的发育大致有下列几种途径：cd
A营养细胞发育途径 B生殖细胞发育途径
C营养细胞和生殖细胞同时发育途径 D花粉的均等分裂
19.同一植株下列_B_部位病毒的含量最低.
A 叶片细胞；B 茎尖生长点细胞；C 茎节细胞；D 根尖生长点细胞
20. 第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是__B_：.
A Morel；B Haberland；C Schleiden；D White
21.脱落酸（ABA）需要用__C__法灭菌。
A 灼烧灭菌；B 干热灭菌；C 过滤灭菌；D高压湿热灭菌；
23. 下列实验中可能获得三倍体植株的是__C__.
A 小麦的茎尖培养；B番茄花药培养；C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养
24.原生质体纯化步骤大致有如下几步：
①将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准，一般以500r／min离心15min。用吸管谨慎地吸去上清液。
②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同)，再次离心，去上清液，如此重复三次。
③将原生质体混合液经筛孔大小为40~100um的滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质，收集滤液。
④用培养基清洗一次，最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生质体的培养密度为104~106／ml。
正确的操作步骤是：③①②④ C
A①②③④ B②③①④ C　③①②④ D　③②①④
25. 下列不属于生长素类的植物激素是_A_D_.
A Kt B IAA C NAA D ABA
26.玉米素（ZT）需要用_C_法灭菌.
A 灼烧灭菌 B 干热灭菌 C 过滤灭菌 D 高压湿热灭菌

三、判断题（对的画“√”；错题画“×”，并改正。每小题2分）
1. 一个已分化的细胞若要表现其全能性，首先要经历脱分化过程。 √
2. 由胚乳培养获得的三倍体植株，也一定要进行染色体倍数的检查. √
3. 一般来说，光照强度较强，幼苗容易徒长，而光照强度较弱幼苗生长的粗壮。×
4. 经过花药培养所获得的植株都是单倍体。×
5. 2，4—D可用0．1mol／L的HCl助溶，再加蒸馏水定容. ×
6. 环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发，一般要求80％-90％的相对湿度。√
7. 幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易. √
8. 一般的说，PH值高于6.5时，培养基全变硬；低于5时，琼脂不能很好地凝固。√
9. 在配制6-BA母液时，要先加少量的1mol的HCl溶解，再加蒸馏水定容。√
10. 未成熟胚较小、较嫩、颜色浅，不易培养；成熟胚较大、较硬、颜色较深，易培养. √
11. 花器脱分化比茎叶容易；幼嫩的组织比成熟的老组织脱分化难。 ×
12. 通过子房的培养，即可能得到单倍体植株，又可能得到二倍体植株.. √
13. 在配制NAA母液时，要先加少量的1mol的HCl溶解，再加蒸馏水定容。 ×
15. 环境的相对湿度过低会使培养基丧失大量水分，湿度过高时，易引起棉塞长霉，造成污染。 √
16. White培养基无机盐浓度低，适合生根培养。√
17. 由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚. ×
18. 2，4-D可用0．1mol／L的NaOH或KOH助溶，而后加无菌水定容。 √
20. 二倍体细胞比单倍体细胞容易诱导愈伤组织. ×
21. 在MS的培养基成分中，MgSO4.7H2O属于微量元素. ×
22. 未成熟胚较小、较嫩、颜色浅，易培养；成熟胚较大、较硬、颜色较深，不易培养. ×
23. 固体培养基可加进活性炭来增加通气度，以利于发根。×
24. 兰花可以通过芽丛分离的组培途径快繁，非洲菊通过原球茎增殖的途径快繁. ×
25. 用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大，消毒效果越好. ×
四、名词解释
1. 植物组织培养：是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。
2. 细胞全能性：指每一个植物细胞都携带有该植物的全部遗传信息，在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息，分化出植物有机体所有不同类型的细胞，形成不同类型的器官甚至胚状体，直至形成完整植株的潜在能力。
3. 脱分化：是指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。
4. 母液：在配制培养基之前，为了使用方便、简化操作、用量准确，减少每次配药称量各种化学成分所花费的时间和误差，常常将配制培养基所需无机大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素成分分别配制成比需要量大若干倍的浓缩母液
5. 驯化：指外来植物通过改变其遗传性状以适应新环境的过程
6. 外植体：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体
7. 愈伤组织培养：将一个细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过去分化形成愈伤组织，并在体外培养使之再分化成植株的技术。
8. 单细胞培养.: 亦称游离细胞培养（free cell culfure）。是指酵母菌、细菌等单细胞生物的培养，或取多细胞生物体上的一个细胞的无菌培养。
9. 灭菌：是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之达到无菌保障水平。
10. 玻璃化现象：指试管苗的一种生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。
11. 无病毒苗：指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
12. 胚状体：离体培养条件下，没有经过受精过程，但是经过了胚胎发育过程所形成的胚状类似物，此现象无论在体细胞培养还是生殖细胞培养中均可以看到，因而统称为体细胞胚或胚状体。在离体植物细胞、组织或器官培养过程中，由一个或一些体细胞，经过胚胎发生和发育过程，形成与合子胚相类似的结构
13. 细胞全能性：指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。
14. 指示植物：指示植物与被指示对象之间在全部分布区内保持联系的称为普遍指示植物；只在分布区的一定地区内保持联系的则称为地方指示植物。
15. 消毒：消毒 是指杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法。通常用化学的方法来达到消毒的作用。
16. 植物生长物质：是指一些在低浓度下能调节植物生长发育的微量有机物。植物生长物质包括五大类被公认的植物激素和其他内源植物生长调节物质。
17. 单倍体：只含有配子体染色体组数的植株。
18. 无菌操作：用于防止微生物进入人体组织或其它无菌范围的操作技术称为无菌操作
19. 脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织、细胞，经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。
21. 花粉胚：花粉胚就是用花粉经过人工的组织培养而形成的幼胚，发育成的植株就只有正常胚一半的染色体组，所以由花粉胚发育成的植株不会产生种子。
22. 褐变：饲料在加工过程中或长期贮存于湿热环境下，其所含的氨基化合物如蛋白质、氨基酸及醛、酮等与还原糖相遇，经过一系列反应生成褐色聚合物的现象称为褐变反应，简称褐变。
24. 指示植物法：
25. 再分化：离体培养的植物细胞和组织可以脱分化状态重新进行分化，形成另一种或几种类型的细胞、器官、组织、、甚至完整植株。
26．平板培养：亦称平面培养。将琼脂或明胶等凝胶状固体培养基制成平面状，然后在此平面上培养微生物或多细胞生物的细胞、组织或器官，这种培养称为平板培养
27．次生代谢产物：植物中一大类并排植物生长发育所需的小分子化合物，其产生和分布通常有种属、器官组织和生长发育期的特异性。次生产物在植物中的合成与分解过程称为此生代谢。
28．人工种子：又称合成种子，指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒状。
五、简答题 18627388972
1. 植物组织培养有哪些特点?
答：植物组织培养的主要特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体的器官、组织和细胞。特点：①培养条件可人为控制 ②植物生长周期短，繁殖系数高 ③管理方便，不受季节环境条件影响，有利于工厂化生产和自动化控制。
2. 培养基一般包括哪些基本成分?其作用是什么?如何配制?
答：培养基的构成要素通常可分为：水分、无机盐类、有机营养成分、植物生长调节物质、天然物质、Ph、凝固剂等。水分是一切生物生命活动的物质基础，是很多生物化学反应的原料和代谢产物。无机盐类是构成植物细胞中核酸、蛋白质以及生物膜系统等必不可少的营养元素。有机营养成分为植物生命活动提供必不可少的碳源、氮源、能源等物质。植物生长调节剂可以促进植物组织的脱分化和形成愈伤组织，还可以诱导不定芽、不定胚的形成。天然有机添加剂通常富含有机营养成分或生理活性物质。pH过高时，培养基会变硬；pH过低时，则影响培养基的凝固。凝固剂是在配制固体培养基时使用，使培养基凝固。其他添加物是有时为了减少外植体的褐变，需要向培养基中加入一些防止褐化的物质。
3. 简述愈伤组织细胞分化。
4. 原生质体融合有哪几种主要方法?
答：植物原生质体最大特性是去掉细胞壁的裸细胞无论来源如何都具有彼此融合的能力 1.自发融合 2.诱发融合：a，NaNO?处理 b，高PH值—高浓度钙离子处理 c，聚乙二醇（PEG）处理 d，电融合 3.化学融合
5. 组织培养中，pH值起什么作用?如果pH值过高或过低会有什么后果?
6. 植物组织培养技术主要包括哪些环节?各环节的主要工作内容是什么?
答：（1）培养基配置技术：包括培养基的选择、母液配制、培养基配制、培养基灭菌。
（2）培养材料制备灭菌技术：供体植物材料选择、外植体的选择和处理。
（3）无菌接种技术：包括接种室的消毒、工作人员用工作服、口罩等的消毒、超净工作台的清洁与杀菌、操作工具的灭菌。
（4）培养技术：主要是培养条件的控制，包括温度、光照、湿度等各种物理环境条件及培养基组成、PH、渗透压等各种化学环境条件。
7. 培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌?
答：1）培养基一般采用湿热灭菌，如果培养基中的有些成分高温易分解，则可采用过滤灭菌。（2）培养器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌。（3）植物材料一般采用药剂浸泡灭菌，具体操作如下：A）外植体的预处理，对植物组织进行修整，去掉不需要的部分，并将外植体用流水冲洗干净。B）用70%的酒精浸润材料30s 左右。C）用灭菌剂浸泡灭菌，灭菌时不时搅动，使植物材料与灭菌剂有良好的接触，若灭菌过程中加入数滴吐温，则灭菌效果更好。D）植物材料用无菌水冲洗3--5 次，以除去灭菌剂。
8. 由胚乳培养获得的植株，是否一定要进行染色体倍数的检查?为什么?
9. 花药培养产生的植株染色体倍性如何?其产生的原因是什么?
10.为什么对脱毒处理后产生的植株必须进行病毒鉴定?为什么已通过病毒(特定病毒)鉴定的无病毒苗还须重复鉴定?
11.使用植物生长物质应注意些什么?
12.为什么幼胚比成熟胚培养要求的培养基成分复杂?
13. 胚胎培养技术在育种工作中有哪些应用?
14. 试比较花药培养与花粉培养的异同。
15. 简述酶法分离原生质体的步骤.
答：叶片表面消毒→去除表皮，将叶片切成小块→叶碎片放入含有酶和渗透压稳定剂的溶液中→摇床保温培养→原生质体沉到培养皿底部→除去酶溶液→将原生质体移入CPW清洗→离心→清洗基质两次→重悬浮于培养基
16. 影响马铃薯茎尖培养脱毒的因素有哪些?
17．简述人工种子生产步骤？
答：选取目标植物 →从适合的外植体上诱导愈伤组织→将愈伤组织转移到液体培养基→愈伤组织在液体培养基中增生扩大 →愈伤组织转移至无激素培养基 →产生体细胞胚 →包裹人工种皮→炼苗→温室（大棚）播种 →获得目标植物
18． 愈伤组织的形态发生有哪两种情况?并比较各自由此形成完整植株的不同。
1、答：愈伤组织的形态发生可通过两种途径实现，一种是根芽器官直接分化形成植株，即器官发生途径；另一种是产生具胚芽、胚根的胚状体结构再形成植株，即体细胞胚胎发生途径。在器官发生途径中，芽或芽原基起源于培养组织中比较表层的细胞，即外起源，而根原基则发生于组织较深处，呈现单向极性，所形成植株的维管组织与外植体的维管组织联在一起。而在胚状体发生途径中，绝大多数体细胞胚起源于单细胞，形成的胚状体有双极性，维管组织与外植体没有联系。
19． 简述幼胚和成熟胚的区别。
20． 无病毒原种(母株)的保存及繁殖中最关键的问题是什么?怎样解决?
21． NAA的中文名称是什么？有何作用和特点？
答：NAA的中文名称叫萘乙酸，是一种人工合成的生长素。其在植物体内有促使茎和节间伸长、向性运动、顶端优势、器官脱落和生根的作用。在组织培养中NAA被用于诱导细胞的分裂和根的分化，并能与细胞分裂素互作促进茎芽的增殖。
六、论述题
1. 请你设计一个组培实验室，说明你设计组培实验室各分室的作用及其所需主要仪器设备。
2. 请论述非洲菊的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程。
3. 某地区的一种马铃薯经多年的种植后，植株变的矮小，产量和品质都下降，怀疑是由病毒所至。请你设计一个病毒的鉴定和脱毒的技术方案。
4. 请阐述原生质体的分离、纯化和活力鉴定的技术过程。
5.请分别列出七种仪器设备和七种玻璃器皿的名称，并说明它们的作用。
6.请阐述用大蒜脱毒和快繁的程序。为什么试管苗在经过热处理和茎尖培养等方法脱毒后，还需要进行病毒的鉴定
7.请论述非洲菊的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程。
8. 请论述香石竹的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程。
9. 现在需要你配制3升胡萝卜肉质根愈伤组织诱导培养基，其配方为MS＋2.4-D2mg/L＋KT0.2mg/L＋蔗糖3%＋琼脂0.7%，请你阐述培养基的配制和分装直到灭菌的全部技术过程。

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