免疫学技术和临床.pptx

CONFIDENTIALRev.05/07/02免疫学技术和临床免疫学技术和临床免疫学技术和临床免疫学技术和临床美国贝克曼库尔特公司美国贝克曼库尔特公司免疫产品市场部免疫产品市场部洪军洪军 2007.4 2007.4 安徽安徽CONFIDENTIALRev.05/07/022内容摘要内容摘要内容摘要内容摘要什么是免疫分析的表现什么是免疫分析的表现免疫分析的基本概念免疫分析的基本概念如何去设计一个免疫分析试剂如何去设计一个免疫分析试剂免疫分析对临床意义的改变免疫分析对临床意义的改变Access2 Access2 介绍介绍CONFIDENTIALRev.05/07/023什么是免疫分析的表现什么是免疫分析的表现什么是免疫分析的表现什么是免疫分析的表现CONFIDENTIALRev.05/07/024免疫检测的分析表现免疫检测的分析表现免疫检测的分析表现免疫检测的分析表现准确性准确性精密度精密度灵敏度灵敏度特异性特异性检测线性范围检测线性范围试剂稳定性试剂稳定性定标周期定标周期开瓶效期开瓶效期CONFIDENTIALRev.05/07/025免疫分析检测的临床表现免疫分析检测的临床表现免疫分析检测的临床表现免疫分析检测的临床表现临床灵敏度和特异性是分析结果准确性的临床表现临床灵敏度和特异性是分析结果准确性的临床表现:理想状态理想状态健康人群健康人群疾病人群疾病人群灵敏度灵敏度 100%100%特异性特异性 60%60%特异性特异性 100%100%灵敏度灵敏度 50%50%灵敏度增加灵敏度增加 特异性增加特异性增加假阴性假阴性 假阳性假阳性Cut-offCut-off设置设置cutoffcutoff值在此处值在此处用于筛查分析用于筛查分析设置设置cutoffcutoff值在此处值在此处减少错误诊断带来的高花费减少错误诊断带来的高花费设置设置cutoffcutoff值在此处值在此处为了最少化错误结果为了最少化错误结果CONFIDENTIALRev.05/07/026关于分析试剂的检测灵敏度的定义关于分析试剂的检测灵敏度的定义关于分析试剂的检测灵敏度的定义关于分析试剂的检测灵敏度的定义分析及功能灵敏度分析及功能灵敏度分析灵敏度分析灵敏度(Analytical Sensitivity)(Analytical Sensitivity)使用使用A A点标准品点标准品分析内的测试分析内的测试最低可辨别最低可辨别0 0值的功能值的功能分析试剂的理论上的极限分析试剂的理论上的极限功能灵敏度功能灵敏度(Functional Sensitivity)(Functional Sensitivity)一系列不同厚度的标准品一系列不同厚度的标准品分析间的测试分析间的测试,用用20%20%的的CVCV值来分值来分用来描述分析的临床表现用来描述分析的临床表现用人血清分析多于用人血清分析多于2020天天,且用多个试剂批号且用多个试剂批号和仪器和仪器CONFIDENTIALRev.05/07/027分析表现特点分析表现特点分析表现特点分析表现特点:正常人群参考值和正常人群参考值和正常人群参考值和正常人群参考值和10%CV10%CV10%CV10%CV（功能灵敏度）（功能灵敏度）（功能灵敏度）（功能灵敏度）CONFIDENTIALRev.05/07/028免疫分析的基本概念免疫分析的基本概念免疫分析的基本概念免疫分析的基本概念CONFIDENTIALRev.05/07/029免疫分析的经典定义免疫分析的经典定义免疫分析的经典定义免疫分析的经典定义免疫分析（免疫分析（ImmunoassayImmunoassay）是一种技术用于检测和是一种技术用于检测和/或定或定量量 Y Y抗体（抗体（Antibody）通过一个特殊的只能和被分析物结合的抗体通过一个特殊的只能和被分析物结合的抗体抗原（抗原（Antigen）CONFIDENTIALRev.05/07/0210免疫学测定的中心问题免疫学测定的中心问题免疫学测定的中心问题免疫学测定的中心问题作作为为免免疫疫反反应应，抗抗原原抗抗体体的的选选择择是是整整个个免疫分析特异性和总体表现的关键免疫分析特异性和总体表现的关键如如何何选选择择好好一一个个抗抗体体去去检检测测一一个个被被检检物物质质，而而不不与与非非常常相相似似结结构构的的其其它它物物质质有有交交叉叉反反应应，或或漏漏掉掉须须反反应应的的物物质质，这这是是分析设计的重中之重分析设计的重中之重抗抗体体的的量量必必须须恰恰当当，过过多多会会引引起起复复合合物物的溶解的溶解CONFIDENTIALRev.05/07/0211关于抗体的亲合力关于抗体的亲合力关于抗体的亲合力关于抗体的亲合力抗体除了要求纯度外（单价特异性）还必须要求抗体除了要求纯度外（单价特异性）还必须要求亲合力，效价指抗体的量，亲合力指抗体的质亲合力，效价指抗体的量，亲合力指抗体的质在非竞争免疫反应的方式中抗体亲和力比标记物在非竞争免疫反应的方式中抗体亲和力比标记物的最低检测极限更能影响分析的灵敏度的最低检测极限更能影响分析的灵敏度在竞争法免疫反应的方式中抗体亲和力直接关系在竞争法免疫反应的方式中抗体亲和力直接关系到竞争的结果到竞争的结果对于样品中的干扰物质对于样品中的干扰物质,亲合力影响分析的抗干亲合力影响分析的抗干扰的能力扰的能力CONFIDENTIALRev.05/07/0212免疫分析的工作定义免疫分析的工作定义免疫分析的工作定义免疫分析的工作定义免疫分析免疫分析(Immunoassay)(Immunoassay)是一种测试方式是一种测试方式,使用特殊使用特殊的抗体与被检测物质的结合的抗体与被检测物质的结合,此被检测物质不能通过此被检测物质不能通过简单的化学方法所容易检测到的简单的化学方法所容易检测到的.通常在检测系统中会使用到一种叫标记物通常在检测系统中会使用到一种叫标记物（labelinglabeling）的物质）的物质,常标记在抗体上常标记在抗体上通常会有一个分离（通常会有一个分离（separationseparation）的过程在最后读）的过程在最后读取信号前取信号前总是需要去仔细关注一下分析的方式（总是需要去仔细关注一下分析的方式（formatformat）CONFIDENTIALRev.05/07/0213Access Access Access Access 的技术的技术的技术的技术免疫分析免疫分析 -“what-“what检测技术检测技术 化学发光化学发光 分离技术分离技术 磁性颗粒磁性颗粒 分析方式分析方式 灵活灵活 -“how-“how 分析方式分析方式分析方式分析方式检测技术检测技术检测技术检测技术分离技术分离技术分离技术分离技术CONFIDENTIALRev.05/07/0214检测技术检测技术检测技术检测技术免疫分析免疫分析检测技术检测技术(Detection)(Detection)有许多可用的方有许多可用的方法法 应用一些应用一些“标记物标记物 所产生的一些能量所产生的一些能量进行测定进行测定标记物可以或可以不被激活而产生能量标记物可以或可以不被激活而产生能量通过一些相应的检测器对标记物产生的能通过一些相应的检测器对标记物产生的能量进行测定量进行测定分离技术分离技术 分析方式分析方式 CONFIDENTIALRev.05/07/0215放射免疫分析放射免疫分析放射免疫分析放射免疫分析(Radioimmunoassay)(Radioimmunoassay)(Radioimmunoassay)(Radioimmunoassay)优势优势优秀的灵敏度优秀的灵敏度较宽的检测线性范围较宽的检测线性范围局限性局限性标记物的半衰期短标记物的半衰期短试剂效期短试剂效期短检测结果的重现性差检测结果的重现性差每次检测都要做标准曲线每次检测都要做标准曲线分析的反应时间长，半天分析的反应时间长，半天22天天发射性污染有害发射性污染有害很难实现自动化检测很难实现自动化检测CONFIDENTIALRev.05/07/0216荧光荧光荧光荧光荧光素荧光素(Fluorophores)FIA(Fluorophores)FIA，DELFIADELFIA原理原理荧光底物荧光底物,4-MUP,4-MUP，或荧光标记物，镧系元素，或荧光标记物，镧系元素Eu3+,Tb3+,Sm3+Eu3+,Tb3+,Sm3+吸收光为一个短波长的光，而发射光为一个长波长吸收光为一个短波长的光，而发射光为一个长波长的光的光通过荧光计检测通过荧光计检测优势优势与与RIARIA具有相似的灵敏度和检测线性范围具有相似的灵敏度和检测线性范围避免了避免了RIARIA对危害污染物处理的麻烦和半衰期短的对危害污染物处理的麻烦和半衰期短的问题问题局限性局限性可能会有来自样品中的一些自身荧光物质或短寿命可能会有来自样品中的一些自身荧光物质或短寿命的荧光物质的干扰的荧光物质的干扰需用空白对照，速率法或推迟读数来克服需用空白对照，速率法或推迟读数来克服CONFIDENTIALRev.05/07/0217酵酵酵酵-颜色的变化颜色的变化颜色的变化颜色的变化酵酵(Enzymes)-EIA(Enzymes)-EIA原理原理在免疫分析结束后通过催化所加入的酵底物在免疫分析结束后通过催化所加入的酵底物典型的催化反应包括颜色的变化典型的催化反应包括颜色的变化,用分光光度计进用分光光度计进行检测行检测优势优势非常容易使用的技术用于一些定性的分析非常容易使用的技术用于一些定性的分析局限性局限性对定量分析所要求的灵敏度和宽线性难以实现对定量分析所要求的灵敏度和宽线性难以实现ELISAELISA技术必须每次定标技术必须每次定标试剂部分成分要复溶重组试剂部分成分要复溶重组反应时间较长反应时间较长CONFIDENTIALRev.05/07/0218化学发光化学发光化学发光化学发光化学发光物质化学发光物质 -CLEIA-CLEIA原理原理不稳定的分子通过加入一些化学基团变得很稳定不稳定的分子通过加入一些化学基团变得很稳定,而移去这些起稳定作用的化学基团后而移去这些起稳定作用的化学基团后,分子结构分子结构变得不稳定发出光（变得不稳定发出光（pHpH的改变，酵切作用，电激的改变，酵切作用，电激发等）发等）优势优势 具备具备RIARIA所拥有的优势所拥有的优势(灵敏度和宽线性灵敏度和宽线性),),但排除其缺点但排除其缺点用一个简单的光度计读数用一个简单的光度计读数非常低的背景干扰非常低的背景干扰类型类型 闪烁闪烁(flash),(flash),持续持续(glow)(glow)发光发光发光物质的稳定性发光物质的稳定性水溶液中的稳定性水溶液中的稳定性CONFIDENTIALRev.05/07/0219化学发光物质化学发光物质化学发光物质化学发光物质AMPPD,Dioxetane(Lumi-Phos 530TM)-AMPPD,Dioxetane(Lumi-Phos 530TM)-最稳最稳定的化学发光物质（第三代）定的化学发光物质（第三代）第一代：鲁米那第一代：鲁米那第二代：丫啶酯类，三联第二代：丫啶酯类，三联 啶钌啶钌代表性分析系统代表性分析系统贝克曼库尔特贝克曼库尔特 -Access/Access 2/DxI800-Access/Access 2/DxI800终点读数终点读数,更稳定更稳定RLU00 5 10 时间时间(分钟分钟)55 60 CONFIDENTIALRev.05/07/0220 ACCESS ACCESS ACCESS ACCESS化学发光标记物的特点化学发光标记物的特点化学发光标记物的特点化学发光标记物的特点很宽的检测线性范围很宽的检测线性范围可检测到可检测到6 6个数量级个数量级(例如例如:1-100,000:1-100,000 units)units)极高的灵敏度极高的灵敏度可检测到小到可检测到小到10-21 10-21 摩尔摩尔/升升很底的背景干扰很底的背景干扰对于一些超敏分析项目对于一些超敏分析项目,有相当接近零值的背景有相当接近零值的背景信号信号更超强的试剂稳定性更超强的试剂稳定性试剂效期试剂效期开瓶效期开瓶效期定标周期定标周期CONFIDENTIALRev.05/07/0221分离技术分离技术分离技术分离技术免疫分析免疫分析检测技术检测技术分离技术分离技术(Separation)(Separation)有很多方式有很多方式典型的是典型的是,特异性结合的分析物被保留而特异性结合的分析物被保留而未结合物质和无用的反应物被清除未结合物质和无用的反应物被清除 分析方式分析方式 CONFIDENTIALRev.05/07/0222技术的创新技术的创新技术的创新技术的创新微粒子包被微粒子包被珠包被珠包被微孔包被微孔包被管包被管包被CONFIDENTIALRev.05/07/0223磁颗粒包被技术磁颗粒包被技术磁颗粒包被技术磁颗粒包被技术磁颗粒抗体包被技术磁颗粒抗体包被技术磁颗粒均匀的悬浮于整个反应体系磁颗粒均匀的悬浮于整个反应体系分析物在磁颗粒表面捕获分析物在磁颗粒表面捕获磁颗粒在磁场中被清洗磁颗粒在磁场中被清洗磁颗粒重新悬浮十分容易磁颗粒重新悬浮十分容易优势优势快速的反应动力学快速的反应动力学较少的样品量较少的样品量提高检测的灵敏度提高检测的灵敏度极好的批内重显性极好的批内重显性可以探针取放，实现自动化可以探针取放，实现自动化CONFIDENTIALRev.05/07/0224分析方式分析方式分析方式分析方式免疫分析免疫分析检测技术检测技术分离技术分离技术 分析方式分析方式-有很多种方式有很多种方式可定义为分析的可定义为分析的“处方处方设置一个最优化的方式设置一个最优化的方式(可变量可变量)去最优化去最优化项目的临床应用项目的临床应用 CONFIDENTIALRev.05/07/0225分析方式分析方式分析方式分析方式可变量可变量夹心法夹心法(Sandwich)vs.(Sandwich)vs.竞争法竞争法(competitive)(competitive)标记物的放置标记物的放置同步同步(Simultaneous)vs.(Simultaneous)vs.分步分步(sequential)(sequential)试剂试剂/样品加入的顺序样品加入的顺序孵育的次数孵育的次数(步骤步骤)清洗分离的次数清洗分离的次数(步骤步骤)试剂试剂/样品的体积样品的体积/厚度厚度孵育的时间孵育的时间孵育的温度孵育的温度CONFIDENTIALRev.05/07/0226Access Access Access Access 的分析方式的分析方式的分析方式的分析方式基本分析方式基本分析方式夹心法夹心法(Sandwich)(Sandwich)竞争结合竞争结合(Competitive binding)(Competitive binding)试剂的加入，孵育和清洗试剂的加入，孵育和清洗 同步同步(Simultaneous)(1(Simultaneous)(1步步,1,1次清洗次清洗)分步分步(Sequential)(2(Sequential)(2步步,2,2次清洗次清洗)“Piggyback“Piggyback (2(2步步,1,1次清洗次清洗)CONFIDENTIALRev.05/07/0227夹心法分析方式夹心法分析方式夹心法分析方式夹心法分析方式捕捉抗体捕捉抗体(Capture antibody)(Capture antibody)和标记抗体和标记抗体(labeled antibody)(labeled antibody)每个不同的抗体可以针对不同的抗原决定每个不同的抗体可以针对不同的抗原决定簇，或二个在同一个抗原决定簇簇，或二个在同一个抗原决定簇分析更特异因为二个抗体同时反应分析更特异因为二个抗体同时反应适合于检测大分子物质适合于检测大分子物质bhCGbhCG TSH TSHIgEIgEProlactinProlactinFSHFSH LH LH Ferritin FerritinHBsAgHBsAgCONFIDENTIALRev.05/07/0228竞争法分析方式竞争法分析方式竞争法分析方式竞争法分析方式只有捕捉抗体只有捕捉抗体主要针对小分子物质检测主要针对小分子物质检测 没有足够表面积的分析物去符合没有足够表面积的分析物去符合“夹心法夹心法 要求要求T3T3FT3 B12 Digoxin FT3 B12 Digoxin ProgesteroneProgesteroneT4 FT4 Folate CortisolT4 FT4 Folate Cortisol Estradiol EstradiolCONFIDENTIALRev.05/07/02如何去设计一个免疫分析试剂如何去设计一个免疫分析试剂如何去设计一个免疫分析试剂如何去设计一个免疫分析试剂CONFIDENTIALRev.05/07/0230一个免疫分析项目的诞生一个免疫分析项目的诞生一个免疫分析项目的诞生一个免疫分析项目的诞生里程碑里程碑(Milestones)(Milestones)市场调研确定需求市场调研确定需求项目的详细特点要求项目的详细特点要求确定分析方式确定分析方式研发和优化研发和优化证明分析表现符合项目的详细特点要求证明分析表现符合项目的详细特点要求 (beta sites,clinical studies)(beta sites,clinical studies)提交注册提交注册CONFIDENTIALRev.05/07/0231项目临床应用的要求项目临床应用的要求项目临床应用的要求项目临床应用的要求临床应用临床应用(claims)(claims)筛查（筛查（ScreeningScreening）检测（检测（DetectionDetection）诊断（诊断（DiagnosisDiagnosis）分层（分层（StagingStaging）预后（预后（PrognosisPrognosis）监测（监测（MonitoringMonitoring）CONFIDENTIALRev.05/07/0232项目的临床应用与分析表现项目的临床应用与分析表现项目的临床应用与分析表现项目的临床应用与分析表现必须到达的分析表现特徵必须到达的分析表现特徵灵敏度（灵敏度（SensitivitySensitivity）特异性（特异性（SpecificitySpecificity）精密度（精密度（PrecisionPrecision）线性范围（线性范围（Dynamic rangeDynamic range）其它其它CONFIDENTIALRev.05/07/0233分析方式的选择分析方式的选择分析方式的选择分析方式的选择需考虑的因素需考虑的因素分析物的特徵分析物的特徵体积（竞争法还是夹心法）体积（竞争法还是夹心法）厚度（一步法，二步法，反应时间等）厚度（一步法，二步法，反应时间等）潜在的潜在的“钩状效应（钩状效应（hook effecthook effect）-假阴性假阴性解决的方法可以使用解决的方法可以使用2 2步法方式步法方式样品量和试剂量的平衡样品量和试剂量的平衡抗干扰能力抗干扰能力仪器的能力局限性仪器的能力局限性预处理的要求预处理的要求CONFIDENTIALRev.05/07/0234试剂原材料的选择试剂原材料的选择试剂原材料的选择试剂原材料的选择原材料原材料抗体抗体标准品标准品封闭试剂（稀释液）封闭试剂（稀释液）清洗缓冲液清洗缓冲液Y YY YY YY YY YCONFIDENTIALRev.05/07/0235抗体的选择抗体的选择抗体的选择抗体的选择单克隆单克隆(Monoclonal)(Monoclonal)和多克隆和多克隆(polyclonal)(polyclonal)选择的标准选择的标准(criteria)(criteria)特异性特异性(Specificity)(Specificity)灵敏度灵敏度(Sensitivity)(Sensitivity)供应能力供应能力(Supply)(Supply)相关性相关性(Correlation)(Correlation)可制造性可制造性(Manufacturability)(Manufacturability)花费花费(Cost)(Cost)CONFIDENTIALRev.05/07/0236多克隆抗体多克隆抗体多克隆抗体多克隆抗体(Polyclonal Antibodies)(Polyclonal Antibodies)(Polyclonal Antibodies)(Polyclonal Antibodies)免疫动物获得免疫动物获得,如羊或兔如羊或兔 时间长时间长,复杂的制作流程复杂的制作流程注射注射,监测滴度监测滴度(可能反覆注射可能反覆注射)周期性的抽血获得周期性的抽血获得特徵化特徵化(Characterization)(Characterization)和纯化和纯化(purification)(purification)生产出鸡尾酒式的抗体生产出鸡尾酒式的抗体,针对所有抗原决定簇针对所有抗原决定簇适合对临床灵敏度要求较高分析测试适合对临床灵敏度要求较高分析测试Y YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YCONFIDENTIALRev.05/07/0237单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体(Monoclonal antibodies)(Monoclonal antibodies)(Monoclonal antibodies)(Monoclonal antibodies)Y YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY YY Y克隆的结果克隆的结果抗体的产生具有高抗体的产生具有高度的同源性和特异度的同源性和特异性并针对一个抗原性并针对一个抗原决定簇决定簇可以选择最好的抗可以选择最好的抗体体在大量生产时可以在大量生产时可以确保持续的供应确保持续的供应适合对临床特异性适合对临床特异性和批间一致性要求和批间一致性要求较高的分析测试较高的分析测试CONFIDENTIALRev.05/07/0238抗体的选择抗体的选择抗体的选择抗体的选择筛选筛选抗体需经过灵敏度，特异性和稳定性的评抗体需经过灵敏度，特异性和稳定性的评价价许多的抗原决定簇并非一种分子所独有许多的抗原决定簇并非一种分子所独有被测抗原的稳定性不同被测抗原的稳定性不同被测抗原的游离和结合方式被测抗原的游离和结合方式CONFIDENTIALRev.05/07/0239案例案例案例案例:hLH:hLH:hLH:hLH 抗原位点图抗原位点图抗原位点图抗原位点图BetaBetaBetaBetaAlphaAlphaAlphaAlphaB-D 1B-D 1hTSHhTSHhCGhCGB-D 2B-D 2hCGhCGA-D 1A-D 1hCGhCGhFSHhFSHhTSHhTSHB-D 3B-D 3A-D 3A-D 3A-D 2A-D 2hCGhCGhFSHhFSHhTSHhTSHCONFIDENTIALRev.05/07/0240案例案例案例案例:Troponin-I:Troponin-I:Troponin-I:Troponin-I 抗原位点图抗原位点图抗原位点图抗原位点图肌钙蛋白肌钙蛋白 -I-I稳定性的问题稳定性的问题氧化的问题氧化的问题磷酸化的问题磷酸化的问题N-terminalN-terminalC-terminalC-terminal0 0101020203030404050506060707080809090100100 110110 120120 130130 140140 150150 160160 170170 180180 190190 200200P PO OO O_ _Access 1st GenAccess 1st Gen31-3431-3458-70(cross-react)58-70(cross-react)157-160157-160PMPPMP DetectDetect Access AccuTnIAccess AccuTnI _ _24-4024-4041-4941-49PMPPMPDetectDetectCONFIDENTIALRev.05/07/0241抗体的选择抗体的选择抗体的选择抗体的选择等分子等分子(Equimolar)vs.(Equimolar)vs.非等分子非等分子(non-(non-equimolar)equimolar)分析分析依赖于特异性抗体的选择依赖于特异性抗体的选择结合方式结合方式-一些位点被隐藏一些位点被隐藏游离方式游离方式-所有位点都暴露所有位点都暴露PSAPSAACTACTPSAPSACONFIDENTIALRev.05/07/0242嗜异性抗体嗜异性抗体嗜异性抗体嗜异性抗体(Heterophile Antibody)(Heterophile Antibody)(Heterophile Antibody)(Heterophile Antibody)病人样品中可能自然产生一些针对动物免疫病人样品中可能自然产生一些针对动物免疫球蛋白的抗体球蛋白的抗体(通常是鼠或羊通常是鼠或羊)来源于暴露于这些动物或接受过动物血清的来源于暴露于这些动物或接受过动物血清的治疗治疗分析的干扰分析的干扰可以在双单克隆夹心法分析方式中引起假阳可以在双单克隆夹心法分析方式中引起假阳性性可以在单克隆可以在单克隆/多克隆分析方式中出现假阴性多克隆分析方式中出现假阴性CONFIDENTIALRev.05/07/0243嗜异性抗体反应嗜异性抗体反应嗜异性抗体反应嗜异性抗体反应假阳性假阳性 较多见较多见嗜异性抗体在捕捉抗体和检测抗体中搭嗜异性抗体在捕捉抗体和检测抗体中搭桥桥,出现在双单克隆夹心法方式中出现在双单克隆夹心法方式中CONFIDENTIALRev.05/07/0244嗜异性抗体反应嗜异性抗体反应嗜异性抗体反应嗜异性抗体反应假阴性假阴性 较少见较少见嗜异性抗体争夺捕捉或检测抗体的抗原嗜异性抗体争夺捕捉或检测抗体的抗原结合位点结合位点,出现在单克隆出现在单克隆/多克隆分析方多克隆分析方式中式中CONFIDENTIALRev.05/07/0245稀释液稀释液稀释液稀释液封闭剂（稀释液）可以加在反应基质中或整合封闭剂（稀释液）可以加在反应基质中或整合在试剂盒内在试剂盒内动物蛋白（鼠，兔，羊等）动物蛋白（鼠，兔，羊等）各个厂家生产的分析试剂都有可能会不同程度各个厂家生产的分析试剂都有可能会不同程度的受到任何一个病人血清的影响！的受到任何一个病人血清的影响！CONFIDENTIALRev.05/07/0246定标程序定标程序定标程序定标程序厂家产生的主定标曲线厂家产生的主定标曲线感觉节省的校正型感觉节省的校正型 2 2 点定标点定标会增加定标的频率会增加定标的频率对非线性的标准曲线可能会有问对非线性的标准曲线可能会有问题题(大多数的免疫分析产生的是大多数的免疫分析产生的是非线性的标准曲线非线性的标准曲线)多点定标曲线多点定标曲线定量定量 典型的是典型的是6 6个水平个水平,定定性性 典型的是典型的是2 2个水平个水平可以达到最大的灵敏度可以达到最大的灵敏度,准确性准确性和精密度和精密度可以有更长的定标周期间隔可以有更长的定标周期间隔CONFIDENTIALRev.05/07/0247标准品标准品标准品标准品 参比物参比物参比物参比物参比物参比物纯化蛋白纯化蛋白(Purified protein)(Purified protein)通常制作较便宜通常制作较便宜相对较短的稳定时间相对较短的稳定时间,需特殊的存放条件需特殊的存放条件一般需要冻干存贮一般需要冻干存贮可能会有批间的不一致性可能会有批间的不一致性重组重组(Recombinant)(Recombinant)相对昂贵相对昂贵很长的研发时间很长的研发时间更稳定和可靠更稳定和可靠可以以液体的方式供应可以以液体的方式供应CONFIDENTIALRev.05/07/0248分析清洗液分析清洗液分析清洗液分析清洗液清洗液使用的类型和量，在清洗步骤结束后分析物提供的有效保留方式的能力和清洗残留的有效去除能力等，都会影响到分析表现清洗液中加入适当的表面活性剂可以去除不需要的生物活性物质(干扰物质)免疫反应中不能用水进行分析免疫反应中不能用水进行分析内的清洗分离内的清洗分离!CONFIDENTIALRev.05/07/0249试剂的优化试剂的优化试剂的优化试剂的优化需优化参数需优化参数时间时间程序步骤程序步骤各类试剂厚度各类试剂厚度pH/pH/离子强度离子强度需优化的内容需优化的内容扩散的速率扩散的速率结合的速率结合的速率复合物的稳定性复合物的稳定性优化后达到的表现优化后达到的表现灵敏度灵敏度(Sensitivity)(Sensitivity)精密度精密度(Precision)(Precision)线性范围线性范围(Dynamic(Dynamic range)range)准确性准确性(Accuracy)(Accuracy)相关性相关性(Correlation)(Correlation)CONFIDENTIALRev.05/07/0250试验设计选择对临床检测结果的影响试验设计选择对临床检测结果的影响试验设计选择对临床检测结果的影响试验设计选择对临床检测结果的影响临床试验结果反映了试验过程中各种条件的优化临床试验结果反映了试验过程中各种条件的优化CONFIDENTIALRev.05/07/0251免疫分析设计及优化免疫分析设计及优化免疫分析设计及优化免疫分析设计及优化开发免疫分析试剂盒的过程就是选择并优化各种实验条件，达到预期结果并能准确反应临床真实情况的过程抗原抗原/抗体抗体分析方式分析方式分离技术分离技术检测技术检测技术总体分析表现总体分析表现CONFIDENTIALRev.05/07/0252Beckman Access AccuTn-IBeckman Access AccuTn-IBeckman Access AccuTn-IBeckman Access AccuTn-I符合符合NABC/IFCC/ESC/ACCNABC/IFCC/ESC/ACC的导则要求的导则要求最好的最好的10%CV99%99%分位值的比值分位值的比值没有嗜异性抗体没有嗜异性抗体,HAMA,HAMA和和RFRF的干扰的干扰对样品没有抗凝剂（肝素）的要求对样品没有抗凝剂（肝素）的要求周转时间周转时间(TAT)(TAT)小于小于3030分钟分钟(12(12分钟分钟)最宽的检测线性范围最宽的检测线性范围最长的定标稳定时间最长的定标稳定时间最多的临床应用最多的临床应用诊断诊断危险分层（高灵敏度和精密度）危险分层（高灵敏度和精密度）治疗监测治疗监测为什么贝克曼有如此好的结果表现呢？CONFIDENTIALRev.05/07/0253心肌钙蛋白和心脏疾病心肌钙蛋白和心脏疾病心肌钙蛋白和心脏疾病心肌钙蛋白和心脏疾病cTnI的水平已用于AMI的诊断,但随着诊断检测技术的提高cTnI可对病人的短期和长期的心血管事件的风险进行预期CONFIDENTIALRev.05/07/0254免疫分析的未来免疫分析的未来免疫分析的未来免疫分析的未来过去过去症状的处理症状的处理没有标准的准没有标准的准则则现在现在标准化的诊断和标准化的诊断和治疗的步骤治疗的步骤减少操作的可变减少操作的可变性性 和不依从性和不依从性着重单个个体着重单个个体明天明天人群疾病的花费和人群疾病的花费和因果关系因果关系确认一些医学措施确认一些医学措施所带来的益处所带来的益处风险评估风险评估教育项目预防发病教育项目预防发病率率展望展望控制发病率控制发病率(控控制你因某病而制你因某病而死亡死亡)紧急监护紧急监护疾病管理疾病管理人群健康管理人群健康管理更有效合理更有效合理更有效合理更有效合理的管理的管理的管理的管理疾病的有效管理已成为卫生保健系统机制改变的基石，疾病的有效管理已成为卫生保健系统机制改变的基石，同样的将推动所有的决定和因此而产生的行动。同样的将推动所有的决定和因此而产生的行动。CONFIDENTIALRev.05/07/0255Access 2R Access 2R Access 2R Access 2R 免疫分析系统免疫分析系统免疫分析系统免疫分析系统产品特点和优势产品特点和优势产品特点和优势产品特点和优势产品特点和优势产品特点和优势CONFIDENTIALRev.05/07/0256产品特点产品特点产品特点产品特点连续，随机和急诊运行方式连续，随机和急诊运行方式机上冰箱，机上冰箱，即用型试剂，覆膜技术即用型试剂，覆膜技术2424个试剂位个试剂位/1200/1200测试测试60 60 样品位样品位(原试管或样品杯原试管或样品杯)检测速度最高可达检测速度最高可达100 100 测试测试/小时小时最高可达最高可达5656天上机天上机/定标稳定时间定标稳定时间 3 3 小时离机时间小时离机时间出结果时间最快为出结果时间最快为1212分钟分钟吸样针超声波液面感应，清洗和混匀吸样针超声波液面感应，清洗和混匀自动跟踪试剂盒消耗品用量自动跟踪试剂盒消耗品用量第三代化学发光免疫分析技术第三代化学发光免疫分析技术灵活的免疫分析方式灵活的免疫分析方式3 3步旋转缓冲液冲洗微粒子进行分离步旋转缓冲液冲洗微粒子进行分离中文操作系统中文操作系统CONFIDENTIALRev.05/07/0257谢谢谢谢谢谢谢谢