温度对织锦巴非蛤稚贝生存和生长的影响_吴加莹.pdf
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1、DOI:10.12131/20220155文章编号:2095 0780(2023)02 0062 08温度对织锦巴非蛤稚贝生存和生长的影响吴加莹1,戴明姝1,刘志刚1,2,刘晓坤11.广东海洋大学 水产学院,广东 湛江 5240882.广东省海产无脊椎动物科技创新中心,广东 湛江 524088摘要:采用实验生态学方法,观察了温度对织锦巴非蛤(Paphia textile)稚贝生存和生长的影响,以期为该贝中间培育场地的选择提供科学依据。结果表明:1)稚贝的48 h半致死低、高温分别为4.95、33.39;96 h的半致死低、高温分别为8.68、32.49;15 d半致死低、高温分别为12.09、
2、31.02;2)在持续15 d的实验中,10 时,稚贝在第10天全部死亡;32 时,第15天的成活率仅为16.67%;3)以稚贝在15 d内50%个体稳定存活的高、低端温度作为生存临界温度,稚贝适宜生存温度范围为12.0931.02;以成活率最高的一组或几组(组间差异不显著)为依据,稚贝最适生存温度范围为1428;4)以平均日增长达到最佳组的30%所对应的高、低端温度为依据,稚贝适宜生长温度范围为16.6231.14;以平均日增长最高的一组或几组(组间差异不显著)为依据,最适生长温度范围为2428,最适生长温度在适宜生存温度范围内明显偏向高温端。综上,推测织锦巴非蛤稚贝适宜在南方海区潮下带水温
3、不超过31 的海底底播中培。关键词:织锦巴非蛤;稚贝;半致死温度;适宜温度;最适温度;成活率;日增长中图分类号:S 917.4文献标志码:A 开放科学(资源服务)标识码(OSID):Effects of temperature on survival and growth of Paphia textile juvenilesWU Jiaying1,DAI Mingshu1,LIU Zhigang1,2,LIU Xiaokun11.College of Fisheries,Guangdong Ocean University,Zhanjiang 524088,China2.Guangdong
4、Marine Invertebrate Science and Technology Innovation Center,Zhanjiang 524088,ChinaAbstract:In this study,we observed the effects of temperature on the survival and growth of Paphia textile juveniles by us-ing experimental ecological methods,so as to provide references for the selection of the inter
5、mediate breeding site of the juve-niles.The results show that:1)The 48 h semi-lethal low and high temperatures were 4.95 and 33.39,respectively;the semi-lethal low and high temperatures at 96 h were 8.68 and 32.49,respectively;the 15 d semi-lethal low and high temperatureswere 12.09 and 31.02,respec
6、tively.2)At 10,the juveniles all died on the 10th day,and at 32,the survival rate of the ju-veniles on the 15th day was only 16.67%.3)Taking the high and low temperatures of 50%of individuals which survived stablywithin 15 d as the critical temperature for survival,we found that the suitable surviva
7、l temperature range of the juveniles was12.0931.02.Based on the group or groups with the highest survival rate(No significant differences between groups),themost suitable survival temperature range of juveniles was 1428.4)Based on the high and low temperatures corresponding tothe average daily growt
8、h of 30%of the optimal group,the suitable growth temperature range of juveniles was 16.6231.14.Based on the group or groups with the highest average daily growth(No significant differences between groups),the most suit-able growth temperature range of juveniles was 2428,and the optimal growth temper
9、ature was obviously biased towards the第 19 卷第 2 期南 方 水 产 科 学Vol.19,No.22023 年 4 月South China Fisheries ScienceApr.,2023收稿日期:2022-05-31;修回日期:2022-07-21基金项目:2019 广西创新驱动发展专项资金(桂科 AA19254032-3);南海经济动物种质创新与利用创新团队(2021KCXTD026)作者简介:吴加莹(1999),女,硕士研究生,研究方向为贝类遗传育种与增养殖。E-mail:通信作者:刘志刚(1963),男,教授,研究方向为贝类遗传育种与增
10、养殖。E-mail:Lhigh temperature side within the suitable survival temperature range.In conclusion,it is inferred that P.textile juvenile is suit-able for underwater bottom sowing in the southern sea area with a subtidal water temperature below 31.Keywords:Paphia textile;Juvenile mollusk;Semi-lethal temp
11、erature;Suitable temperature;Optimal temperature;Survivalrate;Daily growth织锦巴非蛤(Paphia textile)隶属软体动物门、瓣鳃纲、帘蛤目、帘蛤科、巴非蛤属,其贝壳长卵圆形,表面平滑呈淡褐色,内面中央紫红色,营底埋式生活,常栖息在浅海沙底、潮下带1。织锦巴非蛤营养丰富、滋味鲜美,历来有“花甲王”的美誉,是巴非蛤中经济价值较高的大型品种,在中国主要分布于广东、广西、海南、福建和台湾等南部沿海地区1-2。近年来,由于海洋生态环境恶化和无节制采捕,该贝野生资源量逐年衰减,而市场需求居高不下,其人工增养殖技术越来越受到重
12、视3。随着研发力度的不断加大,织锦巴非蛤的中间培育和养殖技术迈入新阶段,已探索出海上中培等多种苗种中培模式4,成为我国近年来海洋人工增养殖的重要品种之一2。目前,国内外有关织锦巴非蛤的研究报道较少,主要集中于环境胁迫、生态适应、形态分类、生理特性以及人工育苗技术等方面,如干露胁迫对织锦巴非蛤耗氧率的影响5;织锦巴非蛤稚贝对不同盐度的适应性1;我国东南沿海 5 个织锦巴非蛤群体 11 个形态性状的比较2;织锦巴非蛤不同组织及性别总类胡萝卜素含量研究6。邹杰等3研究表明,苗种培育是提高织锦巴非蛤养殖成活率不可或缺的环节,蛤种规格在人工培育阶段得到了提升,其养殖成活率比自然放养的成活率提高 5%30
13、%。温度是海水贝类人工培育中的重要影响因素,一些学者7-10研究了不同温度条件下贝类的存活及生长发育情况,如 Struan 等7报道了悬浮培养中放养密度和温度对海扇贝(Placopecten magellanicus)生长的耦合影响,发现温度和生长速率之间存在显著的非线性相互作用;司和等11研究了温度和盐度对波纹巴非蛤(P.undulata)胚胎、幼虫及稚贝发育的影响;刘越12探究了虾夷扇贝(Patinopectenyessoensis)对温度、饥饿胁迫的应答机制,指出饥饿和高温会对贝类的生理和免疫功能产生较大影响。目前国内外有关人工培育过程中温度对织锦巴非蛤稚贝生存和生长影响的研究尚未见报道
14、。织锦巴非蛤苗种底播养殖成活率低可能与该贝的温度适应性有关,弄清温度对其存活与生长的影响,可为其养殖场地的选择提供参考依据。因此,在实验室严格控温的条件下,本文研究了织锦巴非蛤稚贝在不同温度下的存活和生长情况,旨在探索该贝稚贝期生存和生长的适宜与最适宜温度,为织锦巴非蛤在南方海域人工中培和推广养殖提供参考依据。1 材料与方法 1.1 实验材料实验所用织锦巴非蛤稚贝为湛江市雷州市覃斗镇贝类育苗场以北部湾北海的织锦巴非蛤为亲本繁育的人工苗种,于 2022 年 1 月 6 日,选择壳缘无损、大小相对均匀、活力好、壳面织纹明显的稚贝,用双层塑胶袋充氧打包运输回广东海洋大学贝类遗传与育种实验室。其他材料
15、:海水、浓缩拟微球藻(Nanno-chloropsis gaditana)、暂养箱、烧杯、稚贝养殖网兜、充氧机、充气管、散气石、电子天平、游标卡尺、滤纸、镊子、电子温度计、光学盐度计、pH 计、低温恒温槽(型号:DC-0520,上海坤诚科学仪器有限公司)、溶解氧检测试剂盒(杭州陆恒生物科技有限公司)、胶头吸管、小型手抄网、筛网、光学显微镜、血球计数板等。1.2 实验方法1.2.1稚贝暂养稚贝从育苗场运回实验室后,先置于塑料箱暂养以消除应激反应。暂养期间保持不间断微充气,定时定量投喂浓缩拟微球藻液,保证水体藻细胞密度大于 1104个mL1且稚贝摄食后不产生明显假粪;每天吸除污物,100%换水 1
16、 次,待稚贝恢复活力即结束暂养,开始做预实验。实验期间海水自然水温 2022、盐度 3132、pH 7.808.00、溶解氧(DO)质量浓度6.0 mgL1。实验前,稚贝需经过筛分,使规格均匀一致,以减少组间变异系数,减少实验误差。预实验结束后,96 h 温度实验开始前,从暂养的稚贝中随机抽取 30 个个体进行测量,平均壳长为(3.660.28)mm,平均壳高为(2.640.23)mm,平均体质量为(7.00.3)mg;15 d 温度实验开始前,同法测量第 2 期吴加莹等:温度对织锦巴非蛤稚贝生存和生长的影响6330 个稚贝,平均壳长为(3.900.04)mm,平均壳高为(2.960.03)m
17、m,平均体质量为(8.60.4)mg。1.2.296h 温度实验预实验发现稚贝在低温 4 下 21 h 内 100%死亡、高温 36 下 19 h 内 100%死亡,据此,实验在 49、3136 范围内以 1 为梯度各设置 6 个实验组,同时设置一个常温对照组(2022),每组设 3 个平行,观察稚贝在 48、96 h 的半致死温度。实验容器为 1 000 mL 烧杯,内装800 mL 常温常盐过滤海水,在自动控温水槽中进行水浴控温,控温精度0.1,各组温度均经过严格校正。为避免温度突变对稚贝造成不可逆转的生理伤害,各实验组初始水温均为常温状态,中间温度渐变速率为以 1/4 h,3036 范围
18、内以1/5 h,94 范围内以 1/4 h 的速率升温或降温并使各组达到预设温度,然后分别开始实验计时。实验期间每日等温换水 50%,其他管理方法同暂养。每日定期统计死亡稚贝数及相应死亡时间。死亡稚贝以贝壳开口,壳内肉体腐烂或显微镜镜检鳃丝停止摆动,重新放入常温海水中不能恢复为标准。1.2.315d 温度实验根据 96 h 半致死温度实验结果,实验温度范围设置为 1032;此外,根据实验稚贝对高低温敏感程度的差异,在 1022 范围内以 4 为梯度设置 10、14、18、22 4 个温度组,在 2432 范围内以 2 为梯度,设置 24、26、28、30、32 5 个温度组,每组设 3 个平行
19、。稚贝放入烧杯后,按 1/4 h 温度渐变速率使水温达到预设温度,实验周期 15 d,过程管理同 96 h 温度实验。实验结束时对全部个体各性状进行测量。1.3 指标测定与数据处理1.3.1指标测定稚贝存活和生长指标公式如下:RS=(Nl/N0)100%(1)P=(Px/Pm)100%(2)RBWG=(W1 W0)/t(3)RLG=(L1 L0)/t(4)RHG=(H1 H0)/t(5)式中:RS为成活率;N1为实验结束存活数;N0为实验开始个体总数;P 为相对成活率;Px为实验组平均成活率;Pm为最佳组平均成活率;RBWG为体质量平均日增长;RLG为壳长平均日增长;RHG为壳高平均日增长;W
20、1、L1、H1,W0、L0、H0分别为实验结束时及实验开始时稚贝的体质量、壳长、壳高;t 为实验时间。体质量的测量使用电子天平(精确度 0.1 mg),壳长、壳高的测量使用电子数显游标卡尺(精确度0.01 mm),测量前用滤纸轻轻吸干贝壳表面水分。死亡稚贝的体质量、壳长、壳高视为与初始体质量、壳长、壳高相等,平均日增长视为 013。1.3.2半致死温度界定稚贝半致死温度(LT50)采用两点法14计算,公式为:LT50=T1+(P1 50%)/(P1 P2)(T2 T1)(6)式中:T1、T2分别为成活率接近 50%的高、低端温度;P1、P2为相应的相对成活率。1.3.3适宜及最适宜生存温度界定
21、以 15 d 内 50%个体稳定存活、不再出现死亡的高、低端温度作为生存临界温度,两端临界温度区间则为该稚贝生存适宜温度范围13。最适生存温度为经多重比较,成活率最高,与其他实验组有显著差异的一个或无显著差异(P0.05)的几个实验组对应的温度15。1.3.4适宜及最适宜生长温度界定以实验期间体质量、壳高和壳长平均日增长最高的组为标准,按该组平均日增长的 30%所对应的高、低端温度作为适宜生长临界温度,两临界温度区间则为该贝类的适宜生长温度范围13,15。临界温度(Critical temperature)的计算采用两点法:Tc=T1+(R1 pRm)/(R1 R2)(T2 T1)(7)式中:
22、Tc为临界温度;p 为 30%;Rm为最佳组的平均日增长;R1、R2为与 pRm相邻的高、低端平均日增长;T1、T2分别为相应的实验温度。生长最适温度界定同生存最适温度,适宜和最适生长温度范围为壳长、壳高和体质量这 3 个指标的适宜或最适生长温度的重叠部分。1.3.5数据处理XSD实验数据以“平均值标准差()”表示。用 Excel 2019 软件处理测定指标。采用 SPSS22.0 软件对数据作单因素方差分析,通过 Duncans多重比较法检验不同处理间的差异显著性。2 结果 2.1 织锦巴非蛤稚贝 48、96 h 半致死温度温度对织锦巴非蛤稚贝成活率的影响显著(P0.05)。4 组稚贝在 4
23、8 h 内全部死亡,5 组64南 方 水 产 科 学第 19 卷稚贝在 96 h 内全部死亡,35 组稚贝在 48 h 内全部死亡,34 组稚贝在 96 h 内接近全部死亡(表 1)。稚贝 48 h LT50低温端介于 45,高温端介于 3334,采用两点法,求得稚贝 48 hLT50低、高温分别为 4.95、33.39;稚贝 96 hLT50低温端介于 89,高温端介于 3233,采用两点法,求得稚贝 96 h LT50低、高温分别为8.68、32.49。2.2 温度对织锦巴非蛤稚贝生存的影响2.2.1适宜生存温度在 10 下,稚贝第 3 天开始出现死亡,第8 天成活率为 50.00%,第
24、10 天全部死亡;14 组 15 d 内死亡极少;30 组 15 d 内死亡极少;但 32 下,稚贝在第 8 天开始出现死亡,第 15天成活率仅为 16.67%(表 2)。由此可见,织锦巴非蛤稚贝在 10 和 32 下只具有短时间的耐受力,无法长期存活。根据表 3,采用两点法,求得 15 d的 LT50,低温端为 12.09,高温端为 31.02。因此,织锦巴非蛤稚贝适宜的生存温度范围为12.0931.02。2.2.2最适生存温度14、18、22、24、26、28 温度组稚贝成活率均高于 94%,且这 6 个组经 Duncans 多重比较法分析无显著性差异,可得织锦巴非蛤稚贝最适生存温度范围为
25、 1428 (表 3)。2.3 温度对织锦巴非蛤稚贝生长的影响2.3.1对稚贝体质量、壳长、壳高平均日增长的影响织锦巴非蛤稚贝在 1032 的体质量、壳长、壳高平均日增长见图 1、图 2。单因素方差分析结果显示温度对织锦巴非蛤稚贝的生长影响显著(P0.05)。2.3.2适宜生长温度范围采用两点法求得:体质量适宜生长温度介于表1 织锦巴非蛤稚贝在不同温度下48、96 h的成活率Table 1 Survival rates of P.textile juveniles at 48th and 96th hour at different temperatures温度Temperature/实测平均
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