洁净服清洁灭菌效果验证方案.doc

洁净服清洁灭菌效果验证方案

验证方案的起草与审批
验证小组成员
部门
人员
职责
品控部

负责验证项目批准。
品控部

负责验证项目审核。
生产部

负责验证项目复核。
车间

负责验证项目起草。
负责协调车间生产安排，保证验证顺利进行。
按岗位操作规程进行操作
设备部

确保所有动力系统的正常供应；完成设备和设备相关仪表的校验；协助完成验证程序。
品控

配合验证项目的实施
负责对整个验证过程的监控和取样
化验室

负责实施方案中涉及质量检验方面的工作。
方案起草
起草人
起草日期

年 月 日
方案复核
复核人
复核日期

年 月 日
方案审核
审核人
审核日期

年 月 日
方案批准
批准人
批准日期

年 月 日

目 录
1 概述 4
2 验证目的 5
3 验证范围 5
4 验证指导文件 5
5 验证职责 6
6 验证实施前提条件 7
7 风险评估 7
8 验证时间安排 9
9 验证内容 9
9.1 清洗效果验证 9
9.2灭菌效果验证 11
9.3洁净服灭菌效果及存放时限检验 12
10 变更控制 13
11 偏差处理 13
12 验证结论及评价 13
13 附件 13

1 概述
洁净区分为C、D级，灌封、称量局部A级送风，为了减少人员对洁净环境的污染，所有进入洁净区人员均需穿戴洁净服。洁净服在洗衣间清洗后经脉动真空灭菌柜121℃、30分钟灭菌后转移到灭菌后层流下存放备用。
洁净服生产厂家是XX有限公司，由江苏省特种安全防护产品质量监督检验中心出具了检验报告。
洁净菌服清洗灭菌效果直接会对洁净区环境造成影响，因此必须对其清洗灭菌的操作程序进行验证，清洗灭菌图如下：

整理
纯化水漂洗
液体洗涤剂清洗
待清洁的洁净服

纯蒸汽灭菌：121℃，30min
层流下暂存
转运发放

设备信息

灭菌柜
产品名称：灭菌器
产品型号：
生产日期： 年 月
产品订货号：
动力电源：380V/50Hz
控制电源：220V/50Hz
设备代码：
设计压力： MPa~ MPa
容积： m3
工作压力： MPa
内壳材料：
作用：洁净服灭菌
产品编号：
安装位置：
生产公司： 有限公司

洗衣机
洗衣机名称：波轮全自动洗衣机
生产公司： 洗衣机有限公司
型号：
设备编号：
说明：
洁净服
洁净服生产公司：
C级洁净服样式
直开连帽三连体服（含带头套洁净服、洁净口罩、高筒洁净鞋套。）
清洗剂：洗衣液
生产公司：
2 验证目的
证明洁净服清洗方式能够满足洁净服清洁要求；证明洁净服灭菌方式能够杀灭洁净服上所有微生物，及存放期内洁净服微生物限度在可控范围内。
3 验证范围
本方案适用于洁净服清洁灭菌。
4 验证指导文件
4.1 内部文件
文件名称
文件编号
存放地点
《确认与验证管理规程》
SMP-PK-706
品控部
《偏差处理管理规程》
SMP-PK-708
品控部
《变更管理规程》
SMP-PK-710
品控部
《洗衣机使用、清洁、维护与保养操作规程》
SMP-PK-212
车间
《灭菌柜的使用、清洁、维护和保养操作规程》
SMP-PK-213
车间
《洁净服清洗、整理、灭菌、暂存及转移操作规程》
SOP-GT-104
车间
4.2 相关法规文件

5 验证职责
5.1 验证领导小组
5.1.1 负责验证文件格式、内容的审核。
5.1.2 负责对验证系统的风险评估报告进行审核和批准。
5.1.3 负责对系统的变更进行审核和批准。
5.1.4 负责对验证出现的偏差和验证结果进行分析讨论，并作出评价，决定验证周期。
5.1.5 组织协调验证活动，提供验证所需资源，确保验证进度。
5.1.6 审批验证报告和验证证书。
5.2 验证小组
5.2.1 负责验证方案的制定及实施。
5.2.2 执行验证方案中的内容，并对实施过程中出现的结果进行分析。同时对出现的偏差填写“偏差调查处理表”，并上报验证领导小组。
5.2.3 对验证系统的变更按照《变更管理规程》提出变更申请。
5.2.4 负责收集各项验证、试验记录，归入验证文件中。
5.2.5 准备和检查验证报告。
5.3 品控部
5.3.1 负责对洁净服清洗灭菌验证进行取样检测。
5.3.2 负责对检测的结果进行审核。
5.3.3 负责验证证书的发放，验证的文档管理。
5.4 车间
5.4.1 负责洗衣机和灭菌柜操作、预防性维护保养、维修。
5.4.2 负责洗衣机、灭菌柜和洗衣岗位相关操作规程的编写与更改。
5.5 设备部
5.5.1 负责设备维修、维护。
6 验证实施前提条件
6.1 纯化水系统、纯蒸汽系统、洁净厂房空调净化系统、压缩空气系统等已进行确认验证，检查记录在附件1《设备设施确认记录》；操作规程为现行批准的文件，检查记录在附件2《操作规程确认记录》。
6.2确认参加工艺验证人员已进行健康检查，健康检查合格且在有效期内（一年内）。查阅培训档案，确认是否对有关操作者进行了相关培训，包括：食品管理法、GMP基础知识、相关GMP文件培训、卫生和微生物学知识、洁净区人员更衣验证、生产岗位操作规程、洁净室环境控制和检测方法、检验基础知识和操作，相关人员资质确认表见附件3。
6.3验证小组成员和所有参与测试的人员均经过验证方案的培训及相关操作规程的培训。详见附件4、附件5
7 风险评估
严重程度：测定风险的潜在后果，主要针对可能危害产品质量、患者健康及数据完整性的影响。
严重程度
描述
关键（4）
直接影响产品质量或工艺与质量数据的可靠性、完整性或可跟踪性。此风险可导致产品不能使用。
直接影响GMP原则，危害生产厂区的活动
高（3）
直接影响产品质量或工艺与质量的可靠性、完整性或可跟踪性。此风险可导致产品召回或退回。
未能符合一些GMP原则，可能引起检查或审计中产生偏差
中（2）
尽管不存在对产品或数据的相关影响，仍间接影响产品质量要素或工艺与质量的可靠性。
此风险可能造成资源的极度浪费或对企业形象产生较坏的影响
低（1）
尽管此类风险不对产品或数据产生最终影响，但对产品质量要素或工艺与质量数据的可靠性、完整性或可跟踪性仍产生较小的影响
可能性：测定风险产生的可能性。根据工艺/操作复杂性或小组提供的其他目标数
据获得可能性的数值。
可能性
描述
较高（4）
极易发生
高（3）
偶尔发生
中（2）
很少发生
低（1）
发生可能性极低
可测性：在潜在风险造成危害前监测发生的可能性，
可测性
描述
高（4）
不存在能都检测到错误的机制
中（3）
下一工序可能被发现
低（2）
下一工序肯定能被发现
极低（1）
能马上发现（如：报警、无法进入下一工序）
风险优先系数（RPN）计算，将不同因素相乘：可能性×可测性×严重性=风险优先系数（RPN），RPN≤7为低风险，16＞RPN≥8为中风险，RPN≥16或S=4为高风险
经确认小组人员共同对大容量注射剂软袋车间脉动真空灭菌器进行了风险评估，对可能存在的质量风险提出了预防和纠正措施建议，具体见下表：
风险
因素
风险
影响
现有控
制措施
可能性
P
严重性
S
检测性
D
风险优先数RPN
风险级别
建议采
取措施
人员
未按SOP操作。
人员操作失败
加强员工培训，实行随时监控。
2
3
2
12
中
加强人员培训
设备
未按SOP操作。
设备维护失败
加强员工培训，实行随时监控。
2
3
2
12
中
加强人员培训
公用系统不稳定
操作失败
加强生产现场公用系统监控
2
3
2
12
中
进行公用系统确认
关健工艺参数漂移
操作失败
加强生产现场的工艺参数确认
2
3
3
18
高
在本次确认中进行再确认
环境
生产环境不符合要求
操作失败
进行生产现场环境检测
2
3
2
12
中
生产现场环境进行确认
8 验证时间安排
于2019年 月 日进行验证。
9 验证内容
9.1 清洗效果验证
9.1.1清洗前准备
9.1.1.1洁净服根据工艺要求，每次使用后进行清洗。洗衣人员每次需记录洁净服使用清洗信息。
9.1.1.2洗衣人员从脱衣间分别从回收桶中收集洁净服（即二连体服、三连体服和披肩头巾）、高筒鞋套、洁净口罩和洁净眼罩并转移到洗衣房。需核对收集收集桶内洁净服和高筒鞋套编号与《洁净区人员使用洁净服记录》是否一致。
9.1.1.3 洗衣人员将取来的洁净服拉链拉上。
9.1.1.4 清洗前检查洁净服、洁净鞋磨损与破损情况，必要时需报告车间主任，按报废程序处理。下列情况下，洁净服和洁净鞋套因做报废处理：（1）A/B级衣物（如无头套、无连体服、无鞋套），超过其验证要求的清洗或灭菌次数。（2）洁净服袖口、脚口破损，必须报废。（3）高筒洁净鞋套鞋底变形（较严重），必须报废。（4）高筒洁净鞋套鞋底被刺破，必须报废。（5）所有洁净服和高筒洁净鞋套，发现破洞、碳纤维勾出必须报废。在清洗和灭菌次数记录上备注好每个编号洁净服详细的报废原因、日期和清洗、灭菌次数。
9.1.2 清洗说明：口罩（需先用手洗一次,再和洁净服一起清洗）、二连体服、三连体服和鞋套分开清洗。如下表:
洗衣件数
水位
洗衣液
洗衣液品牌
清洗水
二连体服
8（套）
70L
70ml
超能
纯化水
三连体服
8（套）
70L
70ml
超能
纯化水
高筒鞋套
8（双）
70L
70ml
超能
纯化水
洁净口罩需要用手洗（用洗衣液）至无无泡沫。洁净眼罩用纯化水清洗干净。
C级洁净鞋和洁净拖鞋每天使用后清洗，一次清洗6双，用纯化水浸泡5分钟，用鞋刷蘸取5ml洗衣液刷洗干净，再用纯化水冲洗直至目视无泡沫。
9.1.3检测方法：洁净服清洁后，品控检查员用2只洁净250ml具塞三角瓶，取最后一次清洗水约150ml-200ml，检查可见异物、电导率；
判断标准：灯检清洗水应 澄清透明；电导率与纯化水一致； 目视洁净服表面洁净。
洁净服清洗记录附件6《洁净服清洗记录》；检查结果记录附件7《洁净服清洗检测记录》
9.1.4清洁及存放时限的验证：在洁净服清洗及清洗后48小时后，取1套洁净服用直径55mm接触碟分别在前胸拉链部、裤脚、前臂、额头、口罩接触取样，先在20-25℃至少培养72小时，然后转移至30-35℃培养至少48小时，计数菌落数，确认洁净服清洗及清洗后存放48小时后效果。
9.1.4.1标准：C级洗衣间存放时限48小时检验标准：小于25cfu/碟。
9.1.4.2洁净服取样结果记录于《洁净服取样记录表》（附件7）
9.1.5整理流程
9.1.5.1二连体洁净服整理流程
9.1.5.1.1先把二连体服正面朝下，平铺在整理台上。
9.1.5.1.2把裤管的外表面按扣扣在相应的位置上，内表面翻出，整理平齐，再把袖管叠好，扣在相应位置。
9.1.5.1.3将裤管向上折叠至四分之一处，两侧向中间对叠。
9.1.5.1.4再将二连体服下端向上折叠约三分之一处，再对折，整理平整。
9.1.5.1.5将二连体服装入衣袋主夹层，领口向上向外，拉上衣袋拉链，注意成型的尺寸。
9.1.5.1.6将披肩帽正面朝上，平铺在整理台上，下摆往里对折至与帽同宽，将帽子上部与下摆对折平齐，翻转过来，放在衣袋中间夹层，下摆开口向上向外，拉上拉链。
9.1.5.1.7将口罩沿中心线对折，放入衣袋最上面的夹层，绑带应方便取出，然后按上夹层按扣。
9.1.5.2高筒洁净鞋套流程
9.1.5.2.1将高筒鞋套内表面翻出，卷至恰当位置，按上按扣。保证鞋套内表面朝外，然后将拉链拉至距底部的5公分处。以同样的方法叠好第二只高筒鞋套。
9.1.5.2.2将叠好的高筒鞋套依次放入洁净袋中，鞋套向上，鞋跟向外，将口封好。
9.1.5.3三连体洁净服整理流程
三连体服的整理与二连体服的9.1.5.1.1-9.1.5.1.5步骤相同，最后放入洁净袋中，洁净口罩放入洁净口罩袋中。
注：洁净服按要求放入相同编号的洁净袋中。
9.2灭菌效果验证
灭菌方式：已清洗的洁净服，按照洁净服灭菌操作规程操作，设定脉动次数是5次，灭菌温度121℃，时间30min。重复进行3次验证试验。
装载方式：上层平放二连体洁净服8套，护目镜2个；中层平放三连体洁净服8套，下层放置鞋套16套。
生物指示剂挑战：每柜取3支生物指示剂（嗜热脂肪芽孢杆菌）分别放置在二连体、三连体、高筒鞋套内，灭菌后取出培养。生物指示剂按厂家提供的数据进行培养。
判断标准：生物指示剂培养阴性；阳性对照显阳性。
生物指示剂灭菌结果记录附件8 《生物指示剂记录表》
9.3洁净服灭菌效果及存放时限检验
9.3.1洁净服灭菌效果检验：取灭菌后1套洁净服在层流下用直径55cm接触碟分别在前胸拉链部、裤脚、前臂、额头、口罩接触取样，先在20-25℃至少培养72小时，然后转移至30-35℃培养至少48小时，计数菌落数，确认洁净服灭菌效果。
9.3.2洁净服存放时限检验：取灭菌后8套洁净服，2套二连体存放在房(更衣间)2套三连体存放在房(更衣间)，分别在24小时、36小时用直径55cm接触碟接触碟分别在前胸拉链部、裤脚、前臂、额头、口罩接触取样；2套三连体和2套二连体存放在M1035房层流保护下，分别在72小时、84小时用直径55cm接触碟接触碟接触取样；先在20-25℃至少培养72小时，然后转移至30-35℃培养至少48小时，计数菌落数，确认洁净服存放有效时间。
9.3.3标准
灭菌效果检验标准：无微生物生长。
层流下存放时限72、84小时检验标准：小于1个/碟。
C级环境下存放时限24、36小时检验标准：小于5个/碟。
洁净服灭菌后取样结果记录附件9《洁净服取样记录表》
10 变更控制
严格按照《验证管理规程》 对变更进行控制。验证报告中应列出验证期间对本方案内容所进行的任何变更，列出对此修改的主要内容，做好“验证期间变更说明”。
11 偏差处理
将验证过程发现的所有偏差记录在“偏差调查处理表”中，并由验证小组提出解决方案，由验证领导小组审核和批准偏差解决方案及其实施。
12 验证结论及评价
12.1 验证负责人负责收集各项验证、试验结果记录，报验证管理小组。
12.2 验证管理小组负责对验证结果进行综合评审，做出验证结论，发放验证证书。
13 附件
13.1附件1 设备设施确认记录(文件编号: SOR-)式样
13.2附件2 相关文件确认记录(文件编号: SOR-)式样
13.3 附件3 人员资质确认表（文件编号：SOR-）式样
13.4 附件4 员工培训签到表（文件编号：SOR-）式样
13.5 附件5 培训评估报告（文件编号：SOR-）式样
13.6 附件6 洁净区洁净服、洁净口罩、洁净鞋套清洗(文件编号: SOR-)式样
13.7 附件7 洁净服清洗检测记录(文件编号: SOR-)式样
13.8 附件8 生物指示剂记录表(文件编号: SOR-)式样
13.9 附件9 洁净服灭菌取样记录表(文件编号: SOR-)式样
13.10 附件10 验证方案修改申请及批准书(文件编号: SOR-)式样
13.11 附件11验证周期表(文件编号: SOR-)式样
13.12 附件12 验证证书(文件编号: SOR-)式样
13.13 附件13验证结果评定表(文件编号: SOR-)式样
附件1
文件编号：SOR-

设备设施确认记录
项目
验证编号
文件是否批准
纯化水系统验证方案/报告

□是 □否
注射用水系统验证方案/报告

□是 □否
纯蒸汽系统确认方案/报告

□是 □否
空调净化调节系统验证报告/方案

□是 □否
压缩空气系统验证方案/报告

□是 □否
灭菌柜再验证方案/报告

□是 □否
评估：
检查人： 日期：
复核人： 日期：

附件2
文件编号：SOR-

相关文件确认记录
文件名称
文件编号
文件是否批准并在有效期内
微生物限度检查法操作规程
SOP-
□是 □否
灭菌柜的使用、清洁、维护和保养操作规程
SOP-
□是 □否
洁净服清洗、整理、灭菌、暂存及转移操作规程
SOP-
□是 □否
车间人员进出生产区操作规程
SOP-
□是 □否
车间人员进出洁净区操作规程
SOP-
□是 □否
洗衣机使用、清洁、维护和保养操作规程
SOP-
□是 □否
检查人： 日期：
复核人： 日期：
附件3
文件编号：SOR-

人员资质确认表
参与本方案的人员已经过（1）健康体检并合格（有效期内），参加了相关培训主要包括以下方面：(2) 食品管理法；(3)GMP知识培训；(4)微生物基础知识培训；(5)洁净区更衣培训；(6)相关岗位操作规程的培训（生产类）；(7)无菌操作的培训；(8)取样方法培训；(9)检验方法培训，相关人员参与培训的情况见下表（在相应的表格中填写“√” ）：
姓名
部门/职位
培训项目

□(1) □(2) □(3) □(4) □(5) □(6) □(7) □(8) □(9)

□(1) □(2) □(3) □(4) □(5) □(6) □(7) □(8) □(9)
评估：
检查人/日期

复核人/日期

附件6
文件编号：SOR-

洁净服、洁净鞋清洗记录
车间部门

清洗地点

洁净服、无菌口罩、高筒鞋套、无菌护目镜
清洗日期
洁净服种类
编号
液体皂使用量（ml）
洗涤时间
操作者
年 月 日

~

年 月 日

~

年 月 日

~

年 月 日

~

年 月 日

~

年 月 日

~

年 月 日

~

年 月 日

~

年 月 日

~

年 月 日

~

附件7
文件编号：SOR-S

洁净服清洗检测结果
洗衣机编号： 房间编号：
验证项目
合格标准
检测结果
第一次
第二次
第三次
灯检清洗水
清洗水应澄清透明

洁净度
洁净服表面洁净

可见异物
无明显白点和纤毛

电导率
与纯化水一致

检查人： 日期：
复核人： 日期：
洗衣机编号： 房间编号：
验证项目
合格标准
检测结果
第一次
第二次
第三次
灯检清洗水
清洗水应澄清透明

洁净度
洁净服表面洁净

可见异物
无明显白点和纤毛

电导率
与纯化水一致

检查人： 日期：
复核人： 日期：
清洗后及清洗存放48小时洁净服取样
洁净服编号

取样点
前胸部
裤脚
前臂
额头
口罩

取样编号

检查结果

取样人/日期

检测人/日期

洁净服编号

取样点
前胸部
裤脚
前臂
额头
口罩

取样编号

检查结果

取样人/日期

检测人/日期

附件8
文件编号：SOR-

生物指示剂记录表
试验生物指示剂编号
培养结果
阳性对照生物指示剂编号
培养结果
送样人/日期
接收培养人/日期
复核人/日期

附件9
文件编号：SOR-S

洁净服灭菌取样记录表(一)
第一柜
洁净服编号：
灭菌时间：
取样时间：
取样人：
检测人：
报告日期：
取样点
前胸部
裤脚
前臂
额头
口罩
取样编号

检查结果

第二柜
洁净服编号：
灭菌时间：
取样时间：
取样人：
检测人：
报告日期：
取样点
前胸部
裤脚
前臂
额头
口罩
取样编号

检查结果

第三柜
洁净服编号：
灭菌时间：
取样时间：
取样人：
检测人：
报告日期：
取样点
前胸部
裤脚
前臂
额头
口罩
取样编号

检查结果

文件编号：SOR-S
洁净服灭菌取样记录表（二)
灭菌后存放时间： h， 房间编号：
洁净服编号

取样点
前胸部
裤脚
前臂
额头
口罩

取样编号

检查结果

取样编号

检查结果

取样人/日期

检测人/日期

附件10
文件编号：SOR-
验证方案修改申请及批准书
验证方案
名 称

验证方案
编 号

修改内容

修改原因
及依据

修改后
方 案

起草人： 部门部长： 年 月 日
验证管理小组
审 批

验证管理小组负责人： 年 月 日

附件11
文件编号：SOR-

验 证 周 期 表
车间部门

验证
周 期

项 目

变更控制

记录人

复核人

日期

附件12
文件编号：SOR-

验 证 证 书
☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆☆
洁净服清洁灭菌效果已按方案进行确认，各项验证结果
符合标准要求，批准投入使用。
验证报告名称：
验证报告编号：
验证完成日期：
有 效 期：
验证管理小组负责人：
年 月 日

附件13
文件编号：SOR-

验证结果评定表
验证名称

验证

结果

本方案负责人： 年 月 日
评价
及建议

部门部长： 年 月 日

部门部长： 年 月 日

确

认

验证管理小组： 年 月 日

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