免疫增殖病及检验概要.pptx

人民卫生出版社人民卫生出版社免疫学检验免疫学检验人民卫生出版社人民卫生出版社第二十七章第二十七章免疫增殖病及检验免疫增殖病及检验人民卫生出版社人民卫生出版社1.免疫增殖病的概念免疫增殖病的概念和分类和分类2.单克隆丙种球蛋白病单克隆丙种球蛋白病的概念的概念3.常见的常见的单克隆丙种球蛋白病单克隆丙种球蛋白病4.本周蛋白本周蛋白、M蛋白的概念蛋白的概念5.单克隆丙种球蛋白病的单克隆丙种球蛋白病的检测检测本章要点本章要点人民卫生出版社人民卫生出版社目录目录 概述概述1单克隆丙种球蛋白病的临床免疫学特征单克隆丙种球蛋白病的临床免疫学特征2单克隆丙种球蛋白病的检测方法单克隆丙种球蛋白病的检测方法3人民卫生出版社人民卫生出版社免疫增殖病（免疫增殖病（immunoproliferative diseaseimmunoproliferative disease）是是免疫免疫系统系统异常增生而引起的疾病。免疫增殖病的重异常增生而引起的疾病。免疫增殖病的重要临床表现包括免疫球蛋白数量和功能的异常，要临床表现包括免疫球蛋白数量和功能的异常，因因此此通过异常免疫球蛋白的检测通过异常免疫球蛋白的检测，可以可以为为该类疾病的该类疾病的诊断提供重要依据，检测异常免疫球蛋白已经成为诊断提供重要依据，检测异常免疫球蛋白已经成为临床免疫临床免疫检验检验的重要的重要检测检测内容。内容。前前 言言人民卫生出版社人民卫生出版社第一节第一节 概述概述免疫增殖病的概念免疫增殖病的概念 免疫器官、免疫组织或免疫细胞异常增生（包免疫器官、免疫组织或免疫细胞异常增生（包括良性或恶性）所致的一组疾病括良性或恶性）所致的一组疾病。人民卫生出版社人民卫生出版社免疫增殖病的分类免疫增殖病的分类增殖细胞增殖细胞疾病疾病T细胞细胞急性淋巴细胞白血病（急性淋巴细胞白血病（20）淋巴母细胞瘤淋巴母细胞瘤部分非霍奇金淋巴瘤部分非霍奇金淋巴瘤Sezary综合征综合征蕈样霉菌病蕈样霉菌病B细胞细胞慢性淋巴细胞白血病慢性淋巴细胞白血病原发性巨球蛋白血症原发性巨球蛋白血症多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤重链病和轻链病重链病和轻链病Burkitt淋巴瘤淋巴瘤其他多数淋巴细胞瘤其他多数淋巴细胞瘤传染性单核细胞增多症传染性单核细胞增多症人民卫生出版社人民卫生出版社免疫增殖病的分类免疫增殖病的分类增殖细胞增殖细胞疾病疾病裸细胞裸细胞急性淋巴细胞白血病（急性淋巴细胞白血病（80）部分非霍奇金淋巴瘤部分非霍奇金淋巴瘤组织组织-单核细胞单核细胞急性单核细胞白血病急性单核细胞白血病急性组织细胞增多症急性组织细胞增多症其他（分类不统一）其他（分类不统一）毛细胞白血病毛细胞白血病其他霍奇金病其他霍奇金病人民卫生出版社人民卫生出版社免疫球蛋白病的概念免疫球蛋白病的概念 由于由于B B细胞或细胞或浆细胞异常增殖所引起的免浆细胞异常增殖所引起的免疫球蛋白疫球蛋白的的异常增加，异常增加，从而导致从而导致机体病理损机体病理损伤的免疫增殖病伤的免疫增殖病。分类分类单克隆免疫球蛋白病（单一克隆、恶性）单克隆免疫球蛋白病（单一克隆、恶性）多克隆免疫球蛋白病（全面、良性或继发）多克隆免疫球蛋白病（全面、良性或继发）人民卫生出版社人民卫生出版社第二节第二节 单克隆丙种球蛋白病的临床免疫学特征单克隆丙种球蛋白病的临床免疫学特征 突突出出特特点点：患患者者血血清清存存在在异异常常增增多多的的单单克克隆隆免疫球蛋白免疫球蛋白 M M蛋蛋白白（monoclonal monoclonal proteinprotein）：单单克克隆隆免免疫疫球球蛋蛋白白理理化化性性质质十十分分均均一一，但但是是多多无无免免疫疫活活性性，可可以以是是IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA、IgEIgE或或IgDIgD，也也可可以以是是或或轻链中的任何一型。轻链中的任何一型。本本周周蛋蛋白白（Bence-Jone Bence-Jone proteinprotein）：M M蛋蛋白白的的轻轻链链分分子子量量较较小小，容容易易从从尿尿中中排排出出，最最早早由由Bence-JonesBence-Jones测知。测知。人民卫生出版社人民卫生出版社一、一、多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤 多发性骨髓瘤（多发性骨髓瘤（multiple myelomamultiple myeloma）是）是浆细胞异常增生的恶性肿瘤，也称浆细胞瘤，浆细胞异常增生的恶性肿瘤，也称浆细胞瘤，因其引起骨破坏而得名。患者常伴有贫血、因其引起骨破坏而得名。患者常伴有贫血、肾功损害和免疫功能障碍。近年发病有增高肾功损害和免疫功能障碍。近年发病有增高趋势，男性多发，男女比约为趋势，男性多发，男女比约为2:12:1，平均发病，平均发病年龄是年龄是46.546.5岁。岁。人民卫生出版社人民卫生出版社临床表现：临床表现：骨痛骨痛 贫血贫血 感染感染 高黏血症表现高黏血症表现 肾功能损害肾功能损害 患者骨破坏所致头颅肿患者骨破坏所致头颅肿物及眼球突出物及眼球突出人民卫生出版社人民卫生出版社特点：特点：血清中有大量单克隆血清中有大量单克隆M M蛋白或尿中有大量本周蛋白蛋白或尿中有大量本周蛋白免疫球蛋白含量明显降低免疫球蛋白含量明显降低骨髓发现大量浆细胞或组织活检证实有浆细胞瘤骨髓发现大量浆细胞或组织活检证实有浆细胞瘤原发性的溶骨性损害或广泛骨质疏松原发性的溶骨性损害或广泛骨质疏松人民卫生出版社人民卫生出版社类类 型型发生率发生率（%）本周蛋白尿本周蛋白尿阳性（阳性（%）临床特点临床特点IgG506050 70典型症状典型症状IgA20 2550 70高黏综合征较多见高黏综合征较多见IgD1 290骨骨髓髓外外病病变变多多见见，溶溶骨骨病病变多见，变多见，44%淀粉样变淀粉样变IgE0.01少见少见非非 分分 泌泌型型1 5无无溶溶骨骨病病变变较较少少，神神经经系系统统损害较多见损害较多见不同类型的多发性骨髓瘤特点不同类型的多发性骨髓瘤特点 人民卫生出版社人民卫生出版社二、二、原发性巨球蛋白血症原发性巨球蛋白血症 原发性巨球蛋白血症原发性巨球蛋白血症（macroglobulinemiamacroglobulinemia）是以分泌）是以分泌IgMIgM的浆细胞的浆细胞恶性增殖为病理基础的疾病，好发于老年男性。恶性增殖为病理基础的疾病，好发于老年男性。主要表现骨髓外浸润，以淋巴结、肝和脾主要表现骨髓外浸润，以淋巴结、肝和脾肿大等为主要体征并伴有血黏滞过高综合征。肿大等为主要体征并伴有血黏滞过高综合征。人民卫生出版社人民卫生出版社实验室检查：实验室检查：血清中血清中患者血清患者血清IgMIgM水平往往超过水平往往超过300mg/dl300mg/dl血清分离不出或呈胶冻状，电泳时血清有时难以血清分离不出或呈胶冻状，电泳时血清有时难以泳动，集中于原点是该病的电泳特征泳动，集中于原点是该病的电泳特征骨髓象可见淋巴细胞、浆细胞和介乎两者之间的骨髓象可见淋巴细胞、浆细胞和介乎两者之间的浆细胞样淋巴细胞明显增多浆细胞样淋巴细胞明显增多有些有些IgMIgM分子具有冷球蛋白的特征分子具有冷球蛋白的特征有约有约4040的病人可出现本周蛋白尿的病人可出现本周蛋白尿人民卫生出版社人民卫生出版社三、三、良性单克隆丙种球蛋白病良性单克隆丙种球蛋白病 良良 性性 单单 克克 隆隆 丙丙 种种 球球 蛋蛋 白白 病病（benign benign monoclonal monoclonal gammopathygammopathy）是是指指血血清清中中出出现现高高水水平平免免疫疫球球蛋蛋白白，但但并并无无浆浆细细胞胞恶恶性性增增殖殖的的疾疾病病。一一般般无无临临床床症症状状，往往往往因因其其它它疾疾病病就就诊诊时时发发现现血血中中有有M M蛋蛋白白，但但其其并并不不呈呈进进行行性性增增加加，在在少少部部分正常老年人群中也可出现上述情况。分正常老年人群中也可出现上述情况。人民卫生出版社人民卫生出版社三、恶性与良性单克隆丙种球蛋白三、恶性与良性单克隆丙种球蛋白病的鉴别诊断病的鉴别诊断 恶性与良性单克隆丙种球蛋白病的鉴别恶性与良性单克隆丙种球蛋白病的鉴别 人民卫生出版社人民卫生出版社四、四、冷球蛋白血症冷球蛋白血症 冷冷球球蛋蛋白白（cryoglobulincryoglobulin）：指指温温度度低低于于30 30 时时易易自自发发形形成成沉沉淀淀，加加温温后后又又可可溶溶解解的的免免疫疫球蛋白球蛋白 冷冷球球蛋蛋白白血血症症：当当血血中中含含有有冷冷球球蛋蛋白白时时称称为为冷球蛋白血症冷球蛋白血症人民卫生出版社人民卫生出版社特点：特点：多多见于某些原发性疾病，例如感染、自身免疫病见于某些原发性疾病，例如感染、自身免疫病和某些免疫增殖病和某些免疫增殖病患者常有因冷球蛋白沉淀所引起的高血患者常有因冷球蛋白沉淀所引起的高血黏度黏度、红、红细胞凝集、血栓形成等病理细胞凝集、血栓形成等病理表现表现。常见症状常见症状有有雷诺现象（即寒冷性肢端紫绀）、皮雷诺现象（即寒冷性肢端紫绀）、皮肤紫癜、坏死、溃疡、寒冷性荨麻疹、关节痛、肤紫癜、坏死、溃疡、寒冷性荨麻疹、关节痛、肾损害、神经系统病变（如肾损害、神经系统病变（如感觉麻木感觉麻木、运动障碍、运动障碍等等）以及肝以及肝、脾等器官损害。脾等器官损害。人民卫生出版社人民卫生出版社五、五、淀粉样变性淀粉样变性 淀粉样变性（淀粉样变性（amyloidosisamyloidosis）是组织器官中是组织器官中有淀粉样物质沉积的一种病理现象。该病比较有淀粉样物质沉积的一种病理现象。该病比较少见，常可累及各种不同的组织和器官，但以少见，常可累及各种不同的组织和器官，但以小动脉、肾小球、肝、脾和肾上腺最为常见。小动脉、肾小球、肝、脾和肾上腺最为常见。人民卫生出版社人民卫生出版社第三节第三节 单克隆丙种球蛋白病的检测方法单克隆丙种球蛋白病的检测方法 血清蛋白区带电泳血清蛋白区带电泳 免疫球蛋白定量检测免疫球蛋白定量检测 免疫球蛋白的分类鉴定免疫球蛋白的分类鉴定 本周蛋白检测本周蛋白检测 冷球蛋白检测冷球蛋白检测人民卫生出版社人民卫生出版社一、血清蛋白区带电泳一、血清蛋白区带电泳 血清区带电泳是测定血清区带电泳是测定M M蛋白的一种定性实验，蛋白的一种定性实验，常采用醋酸纤维素膜和琼脂糖电泳两种方法。常采用醋酸纤维素膜和琼脂糖电泳两种方法。M M蛋白在电泳时出现于蛋白在电泳时出现于 区代中，不同类区代中，不同类型的型的M M蛋白的电泳后所处位置。蛋白的电泳后所处位置。人民卫生出版社人民卫生出版社二、二、免疫球蛋白定量检测免疫球蛋白定量检测 免疫球蛋白定量测定较常用的方法有免疫球蛋白定量测定较常用的方法有单向扩单向扩散法散法与与免疫比浊法免疫比浊法，前者较为简便，后者更为，前者较为简便，后者更为准确迅速。准确迅速。恶性单克隆丙种球蛋白病常呈现某一类丙种恶性单克隆丙种球蛋白病常呈现某一类丙种球蛋白的显著增高。球蛋白的显著增高。在良性丙种球蛋白病的血清标本中，在良性丙种球蛋白病的血清标本中，M M蛋白的蛋白的升高幅度一般不象恶性丙种球蛋白病那么高升高幅度一般不象恶性丙种球蛋白病那么高 人民卫生出版社人民卫生出版社三、三、免疫球蛋白免疫球蛋白的分类鉴定的分类鉴定 免疫电泳免疫电泳 免疫选择电泳免疫选择电泳 免疫免疫固定固定电泳电泳人民卫生出版社人民卫生出版社免疫电泳：免疫电泳：免疫电泳是将免疫电泳是将琼脂糖电泳琼脂糖电泳和和免疫双向扩散免疫双向扩散相结相结合的一项技术。合的一项技术。血清标本先行区带电泳分成区带，继而用特定血清标本先行区带电泳分成区带，继而用特定的抗血清进行免疫扩散，阳性样本的的抗血清进行免疫扩散，阳性样本的M M蛋白将在适蛋白将在适当的部位形成异常沉淀弧，根据抗血清的种类、当的部位形成异常沉淀弧，根据抗血清的种类、电泳位置及沉淀弧的形状可以对电泳位置及沉淀弧的形状可以对M M蛋白作出判定。蛋白作出判定。人民卫生出版社人民卫生出版社正常及某些患者免疫电泳图谱正常及某些患者免疫电泳图谱 上孔中为血清，下孔中为尿液，槽中为抗血清，箭头所指为骨髓瘤蛋白上孔中为血清，下孔中为尿液，槽中为抗血清，箭头所指为骨髓瘤蛋白a：抗正常人血清；：抗正常人血清；b：抗：抗IgG血清；血清；c：抗：抗IgA血清；血清；d：抗：抗IgM血清血清e：抗：抗血清；血清；f：抗：抗血清血清A：IgA/型骨髓瘤；型骨髓瘤；B：IgG/型骨髓瘤；型骨髓瘤；C：IgG重链病重链病人民卫生出版社人民卫生出版社免疫选择电泳：免疫选择电泳：制备含抗制备含抗或或血清的薄层琼脂板，打孔并加入血清的薄层琼脂板，打孔并加入待测标本进行火箭电泳，待形成相应的火箭样沉待测标本进行火箭电泳，待形成相应的火箭样沉淀峰后，于孔的两侧各挖一槽，加入抗某类免疫淀峰后，于孔的两侧各挖一槽，加入抗某类免疫球蛋白血清或另一型抗轻链血清，温育扩散后，球蛋白血清或另一型抗轻链血清，温育扩散后，根据沉淀弧形成的情况，进行分析鉴定。根据沉淀弧形成的情况，进行分析鉴定。人民卫生出版社人民卫生出版社免疫选择电泳图谱示意图免疫选择电泳图谱示意图 琼脂中含抗琼脂中含抗及抗及抗抗血清，示例孔中为血清标本，抗血清，示例孔中为血清标本，槽中为抗槽中为抗IgA重链抗血清重链抗血清 A：正常人；：正常人；B：重链病；重链病；C：IgA骨髓瘤骨髓瘤人民卫生出版社人民卫生出版社免疫固定电泳：免疫固定电泳：免疫固定电泳是血清区带电泳与免疫沉淀反免疫固定电泳是血清区带电泳与免疫沉淀反应相结合的定性实验。应相结合的定性实验。与免疫电泳比较免疫固定电泳具有更高的灵与免疫电泳比较免疫固定电泳具有更高的灵敏性，敏性，M M蛋白在免疫固定电泳中显示狭窄而界限蛋白在免疫固定电泳中显示狭窄而界限明确的区带，而多克隆增殖或正常血清明确的区带，而多克隆增殖或正常血清 球蛋白球蛋白区带则比较弥散。区带则比较弥散。人民卫生出版社人民卫生出版社IgG/型多发性骨髓瘤的免疫固定电泳图谱型多发性骨髓瘤的免疫固定电泳图谱人民卫生出版社人民卫生出版社四、四、本周蛋白检测本周蛋白检测3.直接定量分析直接定量分析尿液透析浓缩尿液透析浓缩50倍后进行倍后进行2.免疫固定电泳免疫固定电泳1.本周蛋白定性检查本周蛋白定性检查(筛查筛查)溶解溶解(+)90沉淀沉淀标本标本5060人民卫生出版社人民卫生出版社五、五、冷球蛋白检测冷球蛋白检测 冷球蛋白冷球蛋白是血清中的一种特殊蛋白质，在是血清中的一种特殊蛋白质，在44时自发沉淀时自发沉淀，加温至，加温至3737时又可溶解时又可溶解，故常，故常利用这种可逆性冷沉淀的特性对其进行测定。利用这种可逆性冷沉淀的特性对其进行测定。人民卫生出版社人民卫生出版社 取患者外周血，分离出血清置取患者外周血，分离出血清置44冰箱冰箱中，一中，一般在般在2424h h72h72h出现沉淀出现沉淀，若，若1 1周仍不出现沉淀者周仍不出现沉淀者方可判断为阴性。方可判断为阴性。如形成沉淀，如形成沉淀，再置再置3737温育使其复溶温育使其复溶，也可，也可将冷沉淀物离心洗涤后做定性与定量分析将冷沉淀物离心洗涤后做定性与定量分析人民卫生出版社人民卫生出版社异常免疫球蛋白检测的应用原则异常免疫球蛋白检测的应用原则 凡检出无法解释的免疫球蛋白异常增高，都应建凡检出无法解释的免疫球蛋白异常增高，都应建议做进一步的检查。议做进一步的检查。初筛实验：初筛实验：区带电泳分析、免疫球蛋白定量检测或区带电泳分析、免疫球蛋白定量检测或尿本尿本-周蛋白定性。周蛋白定性。确证实验：确证实验：免疫电泳、免疫固定电泳、免疫球蛋白免疫电泳、免疫固定电泳、免疫球蛋白亚型定量和血清及尿中轻链等检测。亚型定量和血清及尿中轻链等检测。人民卫生出版社人民卫生出版社免疫增殖性疾病免疫增殖性疾病是指由于淋巴细胞发生恶性转化所是指由于淋巴细胞发生恶性转化所导致的一组疾病。免疫球蛋白的多克隆增殖多为良导致的一组疾病。免疫球蛋白的多克隆增殖多为良性；单克隆增殖多呈恶性发展趋势。性；单克隆增殖多呈恶性发展趋势。浆细胞异常增殖产生大量无正常功能及完整结构的浆细胞异常增殖产生大量无正常功能及完整结构的异常免疫球蛋白，可导致相应器官的功能障碍。异常免疫球蛋白，可导致相应器官的功能障碍。免疫球蛋白异常增殖病的免疫检测方法有：免疫球蛋白异常增殖病的免疫检测方法有：血清血清区带电泳；区带电泳；免疫电泳；免疫电泳；免疫固定电泳；免疫固定电泳；血清血清免疫球蛋白定量等。免疫球蛋白定量等。一般应采用一般应采用两种以上两种以上的检测方法互相印证。的检测方法互相印证。小小 结结小小 结结人民卫生出版社人民卫生出版社