复方红景天口服液的指纹图谱测定方法研究.docx
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1、复方红景天口服液的指纹图谱测定方法研究【摘要】 目的研究复方红景天口服液的HPLC指纹图谱的测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱:Diamosil C18 (200 mm mm, 5 m),流动相:乙腈-%磷酸水溶液(梯度洗脱),柱温30 ,检测波长:223 nm,分析时间55 min,流速1 mlmin-1。结果标示出复方红景天口服液23个共有峰。结论该法测定的HPLC指纹图谱为复方红景天口服液的质量控制提供了更全面的信息。【关键词】 复方红景天口服液; 高效液相色谱; 指纹图谱; 质量标准Abstract:ObjectiveTo establish an RP-HPLC method
2、for determination of the fingerprint of Compound Oral Liquid of Rhodiola. MethodsChromatographic conditions included a column of Diamosil C18 (200 mm mm, 5 m) and the mobile phase consisted of a mixture of acetonitrile-water(gradient elution),the detection wavelength at 223 nm,and the mobile phase f
3、low rate wasmlmin-1. Results23 peaks existed in the HPLC fingerprint of Compound Oral Liquid ofmethod can provide more information for the quality control of Compound Oral Liquid of Rhodiola.Key words:Compound Oral Liquid of Rhodiola; HPLC; Fingerprint; Quality control 复方红景天口服液是沈阳药科大学研制的由红景天、刺五加、枸杞等
4、补益中药经提取、精制而成的口服液制剂。主要用于高原反应所引起头晕,头痛,心悸,气喘,乏力,缺氧引起的红细胞增多症。现代药理学研究表明,红景天具有增强机体免疫功能、抗疲劳、抗衰老及增强脑力、体力机能等作用16。本品处方中主要含有红景天、刺五加、枸杞3味药材,目前采用的质量标准中除有TLC鉴别外,只有一个HPLC的含量测定项目,用于测定制剂中红景天苷的含量。近年来,国内众多研究工作者尝试采用各种方法致力于中药质量控制方法研究,并提出许多非常有意义的见解和观点。为了全面而有效的控制复方红景天口服液的内在质量,本研究应用RP-HPLC方法,建立了复方红景天口服液的HPLC指纹图谱分析方法,为其质量控制
5、提供了更全面的信息。 1 器材1 仪器HITACHI L-7100型输液泵,HITACHI L-7420型紫外检测器, AnaStar 色谱工作站;色谱柱Diamosil C18 (200 mm mm, 5 m),。2 试药红景天、枸杞子、刺五加购于辽宁省药材公司,经沈阳药科大学中药学院孙启时教授鉴定均为正品药材;复方红景天口服液各批号成品,由沈阳药科大学药用植物实验室提供;红景天苷对照品。甲醇;乙腈;纯净水;其它试剂均为分析纯。3 条件考察 流动相的选择 实验过程中选择了3种流动相系统:A乙腈,B水;A甲醇-乙腈 (11), B %磷酸水溶液;A乙腈, B %磷酸水溶液。流动相以A乙腈, B
6、 %磷酸水溶液系统效果最佳。 检测波长的选择根据红景天组成,实验过程中共选择了223,254,278 nm 3种波长进行检测。在223 nm波长下出现的色谱峰数目比较理想,各色谱峰相互之间分离度和稳定性较好。 样品溶液制备方法的选择量取10 ml口服液,用正丁醇萃取3次10 ml/次,合并正丁醇层,回收正丁醇,残渣溶于适量甲醇并定容于10 ml量瓶中。 量取10 ml口服液,用氯仿萃取3次,10 ml/次,弃去氯仿层,再用正丁醇萃取3次10 ml/次,合并正丁醇层,回收正丁醇,残渣溶于适量甲醇并定容于10 ml量瓶中。 量取10 ml口服液,上D101大孔树脂柱,用400 ml蒸馏水洗脱,弃取
7、。再用400 ml 70%的乙醇洗脱,收集洗脱液,回收乙醇,残渣溶于适量甲醇并定容于10 ml量瓶中。 结果以方法制备供试品,可以使图谱基线较平稳,并可以使各峰得到较好的分离。 2 方法色谱条件及色谱适用性实验色谱柱:Diamosil C18 (200 mm mm, 5 m),流动相:乙腈-%磷酸水溶液(梯度洗脱);柱温30 ,检测波长223 nm,分析时间55 min,流速1 mlmin-1。进样量:供试品溶液与对照品溶液各10 l;理论塔板数以红景天苷峰计不少于15 000。对照品溶液的制备精密称取红景天苷对照品5 mg,精密称定,置于25 ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得
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