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基因工程练习【实用文档】doc
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基因工程练习
(一)回答下列有关基因工程问题.
图9表示含有目的基因Ｄ的DNＡ片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图1０表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MsｐＩ、BamＨI、MｂoI、SmaI　4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CＧG、G↓GATCＣ、↓GATＣ、CCC↓GGG。

1. 若用限制酶SmaＩ完全切割图9中DＮＡ片段,其产物长度分别为_＿___________＿__＿_＿____＿__＿。
若图9中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从隐形纯合子中分离出图9及其对应的DNA片段,用限制酶Ｓma I完全切割,产物中共有_＿____＿__种不同长度的DNＡ片段。
2. 为了提高试验成功率，需要通过_________技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝.该方法也是检测__＿__＿__＿多样性的最简单方法。
3. 若将图10中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒,那么应选用的限制酶是_____＿___。
4. 为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌，首先将大肠杆菌在含＿＿_______的培养基上培养,得到如图11的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含_＿＿___＿＿＿的培养基上培养，得到如图１2的结果(空圈表示与图11对照无菌落的位置)。请在图11中圈出一个含目的基因的重组质粒的大肠杆菌的菌落。
5. 在选出的大肠杆菌内基因Ｄ能成功表达的原因是___＿_____＿_____＿___＿＿______.其表达产物是一条多肽链,如考虑终止密码,则其至少含有的氧原子数为___＿＿____。
（二）回答下列有关基因工程的问题
图1表示含有目的基因Ｄ的ＤNA片段长度（bｐ即碱基对）和部分碱基序列，图２表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MｓpⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SｍaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓ＣGG、G↓GATCＣ、↓GATC、CCC↓ＧGG。请回答下列问题：

6. 用图1中的外源DNA（含有目的基因D)和图2中的质粒构建重组质粒需要使用限制酶和＿_＿_＿____。前者(酶）的专一性很强,其作用特点是_______＿___＿___＿__＿＿_____＿_＿__________＿__＿_＿_.
7. 应该使用限制酶BamHⅠ同时处理质粒、外源DNA，而不选择其他3种，原因在于( 　）。(多选)
Ａ．若使用ＳmaⅠ或者MspⅠ会破坏目的基因.
B.　若使用SmaⅠ切割质粒,能成功切开质粒得到粘性末端的可能很低。
C. 若使用MboⅠ切割质粒,质粒上会有2处被切开,会将质粒切成两段不利于筛选.
D． 使用限制酶BaｍＨⅠ能保证目的基因和质粒获得相同的粘性末端，以便目的基因和运载体定向连接,不至于反向连接.
E．使用BamＨⅠ切割质粒,质粒上会有1处被切开,破坏抗生素A抗性基因,保留抗生素B抗性基因，以便于将来筛选含目的基因的受体细胞.
F。只有使用BaｍHⅠ切割,才能保证质粒和目的基因上产生相同的粘性末端.
8. 若图1中虚线方框内的碱基对被Ｔ-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶Sｍa Ⅰ完全切割，产物中共有________＿种不同DNＡ片段。若同时用限制酶MspⅠ、MbｏⅠ切割图2中的质粒,则可得到__＿____＿_个ＤNＡ片段。
为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌，一般可进行如下步骤筛选：
图3
图4
9. 第一步:将大肠杆菌在含_______的培养基上培养，得到如图3的菌落.
第二步:再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含___＿___的培养基上培养,得到如图４的结果（空圈表示与图3对照无菌落的位置)。
第三步：选出图3培养皿中的某些菌落进行培养,即可得到含重组质粒的大肠杆菌。请在图3中圈出含目的基因的重组质粒的大肠杆菌的菌落
以上筛选方式至少需要两步，其实还有其他更简单的操作方法。请阅读下列材料，回答问题。
大肠杆菌pUC1１８质粒的某限制酶唯一酶切序列,位于该质粒的ｌacZ基因中。lacＺ基因中如果没有插入外源基因，便可表达出b－半乳糖苷酶。当培养基中含有Ａ物质时,A物质便会被b-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落；如果laｃZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达ｂ-半乳糖苷酶,培养基中的A物质不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118质粒还携带了氨苄青霉素抗性基因。右图是利用ｌａcＺ基因筛选重组质粒示意图。
10. 用图中的培养基中筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌,制备时除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外还应加入物质应包括（ 　)(多选）
A．伊红美蓝试剂 B.琼脂　 C．Ａ物质 D。氨苄青霉素 Ｅ.四环素 F。噬菌体
11. 将上述处理后的大肠杆菌置于图中培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,结果可能出现蓝色或者白色菌落，其中＿______色大肠杆菌菌落即为含重组质粒的目的菌。
（三)回答下列有关遗传信息传递和表达的问题.
12. 用限制酶BaｍHⅠ、HindⅢ单独或联合切割甲DNＡ分子（长度为14kb),在完全酶切（每个切点都被切断）时得到的DNＡ片段长度如图11所示(１kb即1０0０个碱基对)。图1２显示了乙DNA分子上的BａmHⅠ、ＨindⅢ的切点的情况.下列说法错误的是＿_＿_＿__＿＿。
图11
图12

A。甲ＤＮＡ分子上没有BamHⅠ的酶切位点，有一个HiｎdⅢ的酶切位点
B．甲DNA分子为环状DNA分子
C。用BamHⅠ和HiｎdⅢ联合切割甲DNA分子，最多可能得到７种不同长度线性片段
D．用BamHⅠ和HindⅢ联合切割甲、乙DNA分子（所有切点都被切断)，然后用ＤNA连接酶处理酶切产物,最多能得到9种由两个片段连接而成的环形重组DNＡ
β-半乳糖苷酶是一种能够将乳糖水解成葡萄糖和半乳糖的酶，经β—半乳糖苷酶处理过的奶制品可供乳糖不耐症患者安全食用。某研究机构为了研发一种比天然酶活性更高的新型β-半乳糖苷酶,从预期新型β—半乳糖苷酶的氨基酸序列出发,推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成两条8０个碱基的DNA单链，两条链通过１6个碱基对形成部分双链ＤNA片段，再利用K酶补平,获得双链DNA，过程如图１3。
图13
图14

13. K酶是一种____＿＿___，合成的双链DNA有_____＿___个碱基对。
14. 在利用K酶得到少数双链DNＡ分子之后,需要经过PCR获得更多相同的DNA分子并在基因两端加上限制酶识别序列,以便构建基因表达载体。PCR的原理如图14所示。图中引物为单链ＤＮA片段，它是子链合成延伸的基础。从理论上推测，第六轮循环产物中含有引物A的ＤNA片段所占的比例为_＿__＿____。在第___＿＿___＿轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
某乳业公司欲获得含有β—半乳糖苷酶的奶源，研发人员设计了图15所示的技术路线。图中kanR表示卡那霉素抗性基因,aｍpＲ表示氨苄青霉素抗性基因，SmaⅠ、EcoRⅤ、EｃoＲⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。图中的“启动子"对应于mＲNA的转录起始位点。
图15

15. 图15中将β—半乳糖苷酶基因插入载体，需要__＿________＿____＿_（填限制酶名称），同时酶切载体和PCR产物。
16. 筛选含有重组运载体的大肠杆菌需要在含__＿______的培养基上进行。大肠杆菌作为理想的受体细胞，这是因为它_＿______＿__＿＿____＿＿＿＿__＿_______＿_＿__＿________等特点。
17. 过程a一般采用的操作技术是_＿_＿＿____。
18. 能使β-半乳糖苷酶基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_＿＿_＿____。
A.启动子B。kanRＣ.复制起始点D.aｍpR
（四)回答下列有关微生物、基因工程和酶的问题
常见的酿酒酵母能利用葡萄糖，不能利用木糖发酵.若用转基因技术将发酵木糖的关键基因-—木糖还原酶（XYＬ1)或木糖异构酶基因（XＹLA）转入酿酒酵母中，均能培育出能利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母。图26表示XＹL1基因与细菌pYMIＬP质粒重组的过程示意图。图中AＭPr是氨苄青霉素抗性基因,其基因产物可使“碘—淀粉"复合物脱色，从而在含有“碘—淀粉"的固体平板上形成透明圈。转化成功的酿酒酵母中含AMPr基因的重组质粒拷贝数越多,透明圈越大。
图26

19. 据图26可知,目的基因的长度是___＿__＿__ｂp；图中获取目的基因和切割质粒所用的限制性核酸内切酶分别是____＿____、___＿_＿＿__，最终能形成重组质粒的原因是___＿___＿＿___＿___＿_＿_＿_＿___＿。
20. 图27是四个成功导入重组质粒的酵母菌的菌株（品系），在“碘—淀粉”的固体平板上的生长情况，其中目的基因表达量最高的是＿_＿____＿_，根据题意，分析原因是＿＿__＿__＿____＿___________＿____ ＿_＿____＿＿__＿________________＿___________＿＿__＿＿_＿_＿_＿_＿。

21. 图28是不同温度条件下重组酿酒酵母菌株的木糖异构酶活性。据图推测,此酶最初来自于(　 )
A．嗜热细菌 　 ﻩ B．大肠杆菌 　 ﻩC．葡萄球菌 　 　 ﻩＤ。乳酸杆菌
(五）基因工程。
λ噬菌体有极强的侵染能力,能在细菌中快速进行DNA复制,产生子代噬菌体，最终导致细菌破裂(称为溶菌状态)；或者整合到细菌基因组中潜伏起来，不产生子代噬菌体（称为溶原状态）。在转基因技术中常用λ噬菌体构建基因克隆载体,使其在受体细菌中大量扩增外源ＤNA，以备研究使用。相关操作如下图所示，请回答：

22. 组装噬菌体时,可被噬菌体蛋白质包装的DNA长度约为3６～51kb，则λgｔｌ0载体可插入的外源DＮA的最大长度为＿__＿_＿＿kｂ;为获得较大的插入能力，在改造载体时可删除λ噬菌体DNA组成中的______＿序列以缩短其长度。
23. λ噬菌体DNA上通常没有适合的标记基因,因此人工改造时需加装适合的标记基因，如上图λgｔｌ0载体中的imｍ4３４基因，该基因编码一种阻止λ噬菌体进入溶菌状态的阻遏物。在构建基因克隆载体时，需用到的酶是__＿___＿＿＿_＿＿_＿__＿____，外源DＮA的插入位置应位于imｍ４34基因___＿_＿_（之中/之外）,使经侵染培养后的受体菌处于______＿状态，表明已成功导入目的基因。
24. 包装用的蛋白质与DＮA相比,特有的化学元素是__＿__＿_,若对其进行标记并做侵染实验，则实验结论是_＿_＿＿＿_____＿__＿__＿______＿___。
25. 假设上述含目的基因的外源模板链中的TGA序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是__＿__＿_.
26. 合成噬菌体所需的小分子原料主要是_＿____＿__＿＿＿__＿＿__＿__。分离纯化噬菌体重组ＤNA时，将经培养1０小时左右的大肠杆菌—噬菌体的培养液超速离心,从＿______（上清液、沉淀物)获得噬菌体.
(六)回答下列关于基因工程的问题。
　 口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病,目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VPI.科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗，过程如下图1所示.图2表示目的基因与pZHZ1质粒构建重组质粒的过程，Ｅ、F、G、H分别为A、B、C、Ｄ四种不同限制酶的酶切位点。请据图回答。

27. 如图1所示,口蹄疫病毒的遗传物质为RNＡ,则在过程①中，必须用到的酶是______＿__；在过程②中，必须用到的酶是__＿＿___＿___＿_＿____。
28. 图2所示,若限制酶A、B切割出的末端完全不同,那么用这种双酶切的方法构建重组质粒的优点是______＿_____＿____＿__＿_________________＿__＿___.
29. 已知质粒pＺHZ１的长度为３.7kb,（1kb=100０对碱基)其中EＦ区域长度为0.２kb,GE区域长度为0。8ｋｂ,FH区域长度为0。5kｂ.现分别用限制酶G、Ｈ切割重组质粒ｐZＨＺ2样品，结果被酶Ｇ切割成1。６kｂ和３．1ｋb两个片段，被酶H切割成1.２kb和3。5kb两个片段。据酶切结果判断VＰI基因大小为_________kb,并将目的基因内部的酶G、酶H切割位点用相应的字母标注在答案纸的对应位置。

30. 过程⑥的培养基中除了加入各种必需营养物质和____＿__＿__＿___＿＿__＿＿＿_＿___等激素外，还需要添加_______＿_筛选出含有重组质粒的叶片小段.
31. 获得表达VPＩ蛋白的番茄植株以后,需要进行免疫效力的测定.具体方法是:将转基因番茄叶片提取液注射到豚鼠体内，每半个月注射一次，三次后检测豚鼠血液内产生的_＿__＿_＿＿_的数量。
(七）回答下列有关基因工程的问题。
32. 基因工程中使用的限制酶,其特点是_＿＿_＿＿＿_＿_____＿____＿___＿＿_____＿__。
下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别，Ａpr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。

33. 将两端用E1切开的Tｃｒ基因与用E１切开的质粒X－1混合连接，连接后获得的质粒类型有__＿__＿_＿_。(可多选）
A．X-１ 　Ｂ.X－2   C.X—３   D.X－4
34. 若将上图所示X－１、X－2、Ｘ-3、X—4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上.在这两种培养上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有___＿__＿_____、___＿＿___＿＿_＿_。
35. 如果X—1用Ｅ1酶切，产生8５0对碱基和35５0对碱基两种片段:那么质粒X－2(Tcｒ基因的长度为１2００对碱基)用E２酶切后的片段长度为_＿___＿_＿_对碱基。
36. 若将外源的Ｔcr基因两端用E2切开，再与用E２切开的Ｘ－1混合连接，并导入大肠杆菌细胞,结果显示，含X-4的细胞数与含X－1的细胞数之比为1３,增大DNＡ连接酶用量能否提高上述比值？_________。
原因是＿＿_＿__＿______＿＿__＿＿＿_＿__＿___＿_＿____＿___＿____＿____＿＿_____＿______.
（八)回答下列有关遗传信息传递和表达的问题。
37. 如图18所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和Ｆ从基因组DNA上切下目的基因,并将之取代质粒pZＨZ1(3.7ｋb,1kb＝100０对碱基）上相应的E—F区域 (０。2ｋb）,那么所形成的重组质粒pZHＺ2___＿___＿___.
A．既能被E也能被Ｆ切开 　 　B．能被Ｅ但不能被F切开
C。既不能被E也不能被F切开 　D。能被F但不能被Ｅ切开

38. 已知在质粒pZHZｌ中,限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0.８kb,限制酶Ｈ切割位点距限制酶F切割位点O．5kb。若分别用限制酶Ｇ和H酶切两份重组质粒pＺHZ２样 品,据表4所列酶切结果判断目的基因的大小为kb;并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图１9中.

39. 若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物,则需将重组质粒pＺHＺ２导入至山羊的______细胞中。若pＺＨZ2进入细胞后插入在一条染色体DNＡ上，那么获得转基因纯合子山羊的方式是__＿_＿＿____＿_＿__＿_____。
40. 上述目的基因模板链中的。ＴＧA序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的tRＮA上相应的碱基序列是_＿__＿＿__。一般而言,一个核糖体可同时容纳_＿______分子的tRNＡ.
41. 下列四幅图中能正确反映目的基因转录产物内部结构的是＿＿_＿_____＿_.
TSS：转录起始位点，ＴＴS：转录终止位点，SＴC：起始密码子，SPC：终止密码子

（九）回答下列有关遗传信息传递和表达的问题。
图17表示利用致病病毒M的表面蛋白基因和无害病毒Ｎ，通过基因工程制作重组Ｍ病毒疫苗的部分过程。其中①~⑤表示操作流程，ａ~h表示分子或结构。据图回答问题.

42. 基因工程除了微生物基因工程外，还有_______＿＿_____＿_____＿___。在图17所示过程中，获取目的基因的步骤是流程_____＿_＿（用图中编号回答）;在流程③中必需实施的步骤有__＿_______＿_＿__＿______________＿__＿___＿.
43. 在图17所示的整个过程中，用作运载体的DＮＡ来自分子＿__＿___＿（用图中字母回答）。
44. 下列关于质粒运载体的说法正确的是＿_____＿＿(多选）。
A．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
B。质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞
C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNＡ改造的
Ｄ.质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则
E。质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DＮA中才能表达
F．没有限制酶就无法使用质粒运载体
45. 据图比较结构g和结构ｈ的异同，并解释产生差异的原因＿___＿____＿_＿________________＿__＿＿__＿_＿＿_____＿＿____＿_________＿_＿__＿＿____＿_＿＿＿_____＿＿__＿_＿___＿_____＿_＿_＿。　
(十)回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。
　 　 pIJ70２是一种常用质粒(图20）,其中tsｒ为硫链丝菌素(一种抗生素）抗性基因;mｅl是黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶ClaI、BglII、Ｐst、SacI、SpｈI在pIJ702上分别只有一处识别序列。

46. 质粒DＮA分子中的两条链靠_＿__＿_____＿键维系成双链结构。
47. 以SacI和SphI切取的目的基因置换pIＪ702上0.4Ｋｂ(1Kb=1000对碱基）的SacI/SｐhI片段，构成重组质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表4中。由此判断目的基因内部是否含有BglＩＩ切割位点，并说明判断依据__＿_____＿____________＿___＿_＿＿______________________＿＿__。
48. 已知pIＪ702上含mel基因的ＣlaI/PstＩ区域长度为2.5Kｂ,若用ClaI和ＰstI联合酶切pZHＺ8,则参照表4数据可断定酶切产物中最小片段的长度为_＿＿___＿__Kb.
49. 不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素固体培养基上的生长状况如表５所示。若要筛选接纳了pIＪ702或pZHＺ8的链霉菌细胞，所需的硫链丝菌素最小浓度应为_______＿_uｇ／mＬ(填写表格中给定浓度）;含有重组质粒pZHZ8的菌落呈____＿__＿色。

50. 上述目的基因来源于原核生物，其蛋白质编码序列（即编码从起始密码子到终止密码子之间的序列）经测定为1256对碱基,试判断对这段序列的测定是否存在错误？＿＿__________，并说明依据________＿__ _______＿＿_＿___＿____＿___＿____＿___＿。
　基因工程及其应用专题练习
1、在基因工程中,切割载体和含有目的基因的DNA片段时,需使用
A．同种限制酶B.两种限制酶C.同种连接酶Ｄ。两种连接酶
2、(2004 北京海淀）下列关于基因工程的叙述,正确的是
A．基因工程经常以抗菌素的抗性基因为目的基因
B．细菌质粒是基因工程最常用的运载体
C.通常选用不同的限制性内切酶分别处理含目的基因DNA和运载体DNA
D．为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体
3、人们将苏云金杆菌中的抗虫基因导入棉花细胞中，成功培育出抗虫棉。这个过程中利用的主要原理是
A．基因突变，DNA→ＲＮA→蛋白质Ｂ.基因重组，DNA→ＲNA→蛋白质
C.基因工程，DNＡ→RNA→蛋白质D．染色体变异,DＮＡ→RNＡ→蛋白质

4、（2001　　广东综)植物基因工程往往需要接受外来DＮＡ的细胞经有丝分裂形成植株。细胞每次分裂时DNA都复制一次．每次复制都是（ ）
A。母链和母链,子链和子链，各组成一条子代DＮA 　　
B.每条子链和它的母链组成子代DNＡ
C．每条子链随机地和两条母链之一组成子代ＤNA 　　
D。母链降解，重新形成两个子代DNＡ
5、不属于基因工程生产的药物是（)
A、 干扰素 B、青霉素 　Ｃ、白细胞介素 　Ｄ、乙肝疫苗
6、下列实践与基因工程无关的是(）
A、 利用DNA探针检测饮用水是否含病毒B、 选择“工程苗”来生产胰岛素
C、　用不育系来培育杂种一代D、培育转基因抗虫棉
7、（20０4　 无锡调研）发酵工程中,能通过多种途径培育优良品种。其中能定向培育优良菌种的方法是
A。人工诱变和基因工程B．人工诱变和细胞工程
C。人工诱变、基因工程和细胞工程D．基因工程和细胞工程
８、基因工程技术中的目的基因主要来源于(）
A、自然界现存生物体内的基因Ｂ、自然突变产生的新基因
Ｃ、人工诱变产生的新基因Ｄ、科学家在实验室内人工合成的新基因
9、将重组DＮA导入细菌生产激素或蛋白质的过程一般称为（ )
Ａ.基因工程 B．细菌工程 C．酶工程ﻩ D．微生物工程
１0、切取动物控制合成生长激素的基因,注入鲇鱼受精卵中，与其DNA整合后产生生长激素，从而使鲇鱼比同种正常鱼增大3～４倍。此项研究遵循的原理和这项技术分别是（ 　 　）
Ａ。DＮA→RNＡ→蛋白质和转基因技术 B.RNA→DNＡ→蛋白质和DNA重组技术
C。DNA→蛋白质→RNA和转基因技术 D.RＮA→蛋白质→RNA和细胞核移植技术
11、将人的胰岛素基因,通过基因工程的方法转入大肠杆菌细胞内,结果在大肠杆菌细胞内表达而产生胰岛素，说明不同种生物共用一套（　　 )
A。遗传信息 ﻩB.遗传密码 C。DNAﻩ ﻩＤ．ＲNＡ
12、不属于基因工程操作工具的是　 　 　 　 　 　 　　 （ 　 ）
A、目的基因 　 　 　B、运载体 　 Ｃ、DNＡ连接酶　 　 　D、限制性内切酶
１3、质粒之所以能做基因工程的运载体，是由于它（　 ）
A.含蛋白质从而能完成生命活动 　　B．能够自我复制而保持连续性
　 　 C。是RＮA能够指导蛋白质的合成D．具有环状结构能够携带目的基因
14．当前生物化学的研究方法和技术在工农业生产上被广泛应用的一项新技术是( 　 )
Ａ.酶工程ﻩﻩB.遗传工程 ﻩC。发酵工程ﻩﻩD。细胞工程
１５。英国克隆羊“多利”的产生、“抗虫棉”的培育、“番茄马铃薯”的创造、单克隆抗体的制备、抗生素的生产依次是下列哪项生物技术取得的成果（ 　）
①基因工程　　②细胞工程 ③发酵工程 　④酶工程
A．①②②③④ ﻩＢ。②①③②②③ C.①②④③③ ﻩD．①②①③②
16、21世纪被认为是生物的世纪，目前基因芯片可以在很短时间内观察病变细胞,并分析出数种由于基因变异而引起的疾病。以下与基因芯片有关的叙述中,不正确的是
A.利用基因芯片可以进行基因鉴定 　B.基因芯片可以检测变异基因
C．基因芯片可以改造变异基因 　　 　　 D.基因芯片技术能识别碱基序列
17、在人类染色体DNA不表达的碱基对中，有一部分是串联重复的短序列，它们在个体之间具有显著的差异性，这种短序列可用于
Ａ.生产基因工程药物 　　 　 Ｂ.侦查罪犯
C.遗传病的产前诊断　 　 　　 　　 D．基因治疗
18、（２003 　新课程理综高考）采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是
①将毒素蛋白注射到棉受精卵中 ②将编码毒素蛋白的DNＡ序列,注射到棉受精卵中 　③将编码毒素蛋白的DNＡ序列,与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞,再进行组织培养 ④将编码毒素蛋白的ＤNA序列,与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵
Ａ。①②ﻩﻩﻩ B.②③ﻩ ﻩC.③④ ﻩﻩ D．①④
19、基因工程中，科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是
A。结构简单，操作方便B．繁殖速度快
C.遗传物质含量少、简单D。性状稳定，变异少
２0、（200４ 　徐州)在下列基因操作的四个基本步骤中,不需要进行碱基互补配对的步骤是
A．人工合成目的基因 ﻩ ﻩB.将目的基因导入受体细胞
C。目的基因与运载体结合ﻩ ﻩﻩD.目的基因的检测和表达
二、非选择题（每空3分，共6０分)
２1、某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Ａmｙ）基因ａ，通过基因工程的方法将基因a转移到马铃薯植物中,经检测，Ａmy在成熟块茎细胞的细胞间隙中发现。若将右图作块茎细胞,请据图回答(题内如有括号，请在其中写出结构的标号,线上写有关内容）：
(1）a已整合到图中［ ]＿＿＿_＿＿__结构中。
(2)在细胞核是以a为模板合成Amy的＿_＿＿＿____。
（３）Amｙ合成后，经［ ］＿_____加工分泌到细胞外，定位在细胞间隙中。
（4)以本图比作块茎细胞的缺陷是该图中多画了［］＿____＿_______.
22、1９７８年，美国科学家利用生物工程技术，将人类胰岛素基因拼接到大肠杆菌的ＤNA分子中，然后通过大肠杆菌的繁殖,生产出了人类胰岛素.请回答：
（1）上述人类胰岛素的合成是在_＿_＿_____处进行的,其决定氨基酸排列顺序的mRNA的模板是由_＿＿_______＿基因转录而成的。
(2)合成的该胰岛素含有51个氨基酸，由2条多肽链组成,那么决定它合成的基因中至少应含有碱基＿_____＿_个，若核苷酸的平均分子量为３00，则与胰岛素分子对应的mＲNA的分子量应为________;若氨基酸的平均分子量为90，该胰岛素的分子量约为＿_＿_____＿。
（3)不同种生物之间的基因移植成功，说明了生物共用的是同一套＿＿＿_________。
(4)从进化的角度分析，它能说明____________＿_＿____＿.
２3、基因工程是在现代生物学、化学和工程学基础上建立和发展起来的，并有赖于微生物学理论和技术的发展运用。基因工程基本操作流程如下图所示,请据图回答：
⑴基因工程的剪接过程需要在酶的作用下才能完成。
⑵重组运载体导入宿主细胞后，筛选的依据是;重组克隆后鉴定的目标是。
⑶培育工程菌的途径除了图中所示的外，还可以通过的方法获得。利用工程菌生产表达产物的后处理技术的中心环节是。
⑷若利用工程菌生产乙肝疫苗,则影响产量的主要环境因素是。
⑸在谷氨酸生产中，如培养液内谷氨酸棒状杆菌的含量升高而谷氨酸含量降低，则可能的原因是。
创新设计训练
２4、干扰素是治疗癌症的重要物质.人血液中每升只能提取0。０５　mｇ干扰素,因其价格昂贵,平民百姓用不起。但美国有一家公司用遗传工程方法合成了价格低廉、药性一样的干扰素，其具体做法是:
（1）从人的淋巴细胞中提取能指导干扰素合成的＿_＿_＿_＿____＿，并使之与一种叫的DNA结合，然后移到酵母菌内,从而让酵母菌来___＿__＿__＿__＿。
（2)酵母菌能用__＿__＿___方式繁殖,速度很快，所以能在较短时间内生产大量___＿_＿___.利用这种方法不仅产量高,并且成本较低。
（3）科学家陈炬在这方面也作出了突出贡献，他成功地把人的干扰素基因嫁接到烟草的DNA分子上,其物质基础和结构基础__＿＿＿_________＿_＿_______＿_____＿＿______＿_。
（4)烟草具有了抗病毒能力，这表明烟草体内产生了___＿______＿_____，由此可见,烟草和人体合成蛋白质的方式是_____＿____＿_.从进化角度来考虑，证明了人和植物的起源是__＿__＿___＿__＿＿____＿_＿。

１、Ａ　 解析　 用同种限制酶切割运载体和含有目的基因的DNA片段,可使二者产生互补的黏性末端，能形成一个完整的重组ＤNA。
2、B解析 抗虫基因、抗病基因、贮藏蛋白的基因、干扰素基因等都是目的基因。处理目的基因DNA和运载体DNA的酶相同。
3、B 解析 基因工程是一种技术手段,而不是生物学原理。
４、Ｂ 　5、B 6、C　 7、D解析:人工诱变是不定向的,既有有利变异又有有害变异。
8、A解析目前,基因工程技术中的基因主要来源于自然界现存在生物体内的基因，野生动植物是自然界最大的基因库，因此，我们要保护好野生动植物。
9、 A 1０、A １1、B　 1２、A 13、B 　　14、A 　１5、B 1６、C　 17、B
18、C 解析　　基因工程一般要经历四个步骤：提取目的基因,目的基因与运载体结合，将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测和表达。所以在导入目的基因前，首先要获得目的基因即本题中的编码毒素蛋白质的DNＡ序列,然后要将目的基因与运载体结合即与细菌质粒重组。完成上述两步以后才将目的基因导入受体细胞即棉的体细胞或受精卵，目的基因导入受体细胞后，可随受体细胞的繁殖而复制，所以上述③④操作是正确的。①将毒素蛋白注射到棉受精卵中,没有获得目的基因,②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中没有将目的基因与受体细胞结合,所以①②是错误的操作。
１９、B　 解析目的基因导入受体细胞后，随着受体细胞的繁殖而复制，由于细菌等微生物繁殖速度非常快,在很短时间内就能获得大量的目的基因。
２0、B 解析用人工方法使体外重组的DNＡ分子转移到受体细胞,主要是借助于幼苗或病毒侵染细胞的途径。在此过程中不需要碱基互补配对。
21、（１）[8］ 染色体（DＮA）　　（2）mRNＡ　 （3）［5]高尔基体 （4)［4］叶绿体
22、（1）大肠杆菌核糖体 人类胰岛素 （2)３0６ 45900 　370８　　(3）遗传密码 (4）地球上的一切生物都是由共同的祖先进化而来的
2３、（１）限制性内切酶和DNＡ连接酶 （2)标记基因是否表达目的基因是否表达(3）细胞工程和诱变育种发酵（４）温度、pH、氧气等⑸培养液中的营养比例不协调(或碳氮比不协调）
２４、解析：（1)基因工程又叫基因拼接技术，一般要先将目的基因与运载体（质粒等）结合，然后导入受体细胞中进行表达.（2）以酵母菌等微生物作受体细胞，主要原因是由于它们繁殖快，可使目的基因得到快速表达。（3）不同来源的ＤNA之所以能整合到一起，是由于它们在结构和组成上是一致的.（4)人的基因在烟草中表达,表明了遗传物质表达的统一性。
答案(1）干扰素基因 质粒 合成干扰素 （2）出芽生殖　　干扰素 (3）都是脱氧核苷酸组成的,都有双螺旋结构 （4)干扰素 　相同的 　相同的
选修三基因工程综合练习题

第I卷(选择题）

1．下列有关基因工程中限制性内切酶的描述,错误的是（）
A．一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B。限制性内切酶的活性受温度影响
Ｃ.限制性内切酶能识别和切割RNA
D．限制性内切酶可从原核生物中提取
2.下列叙述符合基因工程概念的是(）
A。B淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因
B.用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株
Ｃ.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得产生人干扰素原的菌株
D。自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNＡ整合到细菌DNA上
3。将人的生长激素基因导入鲫鱼，培育出能快速生长的鲫鱼新品种.该育种方法属于( 　　)
A.诱变育种 　 Ｂ．转基因技术
C．单倍体育种 D。杂交育种
4。采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是(）
①将毒素蛋白注射到棉受精卵中
②将编码毒素蛋白的ＤＮA序列注射到棉受精卵中
③将编码毒素蛋白的DＮＡ序列与质粒重组,导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞,再进行组织培养
④将编码毒素蛋白的DＮＡ序列与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵
A．①②B。②③C．③④Ｄ．④①
5。若利用细菌大量生产人胰岛素，则下列叙述不正确的是()
A．需有适当运载体将人胰岛素基因导入细菌
B．需有适当的酶对运载体与人胰岛素基因进行切割与黏合
C．重组后的DNA，须在细菌体内转录,翻译成人胰岛素
Ｄ．人胰岛素基因与运载体DＮＡ混合后,只得到一种DNA分子(重组DNＡ)
6．下列四条DＮA分子，彼此间间具有粘性末端的一组是

A．①② B．②③ﻩC．③④ﻩD．②④
7．基因工程中用来修饰改造基因的工具是（）。
Ａ。限制酶和ＤNA连接酶B.限制酶和ＤＮA水解酶
C。限制酶和运载体Ｄ.DNA连接酶和运载体
８。下列有关基因工程技术的叙述中，正确的是（ ）
A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体
B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列
Ｃ。选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快
Ｄ。只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达
9。基因工程的“四步曲”中未发生碱基互补配对的是（)
Ａ.用ＰＣＲ扩增抗病毒基因
B.将人的胰岛素基因与大肠杆菌质粒结合,形成重组质粒
C.将重组质粒导入受体细胞
D．抗病毒基因的表达
1０。质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是（ 　）.
①能自主复制　②不能自主复制③结构很小　④蛋白质⑤环状RＮA ⑥环状DＮA　⑦能“友好”地“借居"
A。①③⑤⑦ 　B.②④⑥　 Ｃ.①③⑥⑦ Ｄ。②③⑥⑦
11。利用生物工程技术能够实现对良种种畜的快速大量繁殖,以下哪项技术不具备此优点？
A。基因工程技术　Ｂ．细胞核移植技术C．胚胎分割技术 　 　　D．试管动物技术
1２．如果科学家通过转基因技术，成功改造了某女性血友病患者的造血干细胞，使其凝血功能全部恢复正常，那么预测该女性与正常男性结婚后所生子女的表现型为
A．儿子、女儿中各一半正常　 　Ｂ。儿子全部患病、女儿全部正常
C。儿子、女儿全部正常 　 　 　 D．儿子全部正常、女儿全部患病
１３．下列有关基因工程中载体的说法正确的是
A.质粒是一种独立于细菌拟核外的链状DＮA分子B.所有的质粒都可以作为基因工程中的载体
C.质粒载体的复制和表达不遵循中心法则D．作为载体的质粒常含有抗生素抗性基因
14.有人说：“转基因生物所转移的只是一两种自然界中已经存在的外源基因，它并不会改变生物原有的分类地位,充其量只能说是具有某种新特征的同一物种”。上述说法中是否是“同一物种”，关键应该看转基因生物与原来的生物是否具有()。
A．生殖能力 B.地理隔离　 C。生殖隔离ﻩＤ.能否杂交
15．下列哪一项不是动物基因工程的应用前景
Ａ．转入外源生长激素基因的鲤鱼
B．将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组
C.乳腺生物反应器表达医药产品
D．利用工程菌生产干扰素
16.基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中基因工程的核心是
A．目的基因的获取
B．基因表达载体的构建
C．将目的基因导入受体细胞
D。目的基因的检测与鉴定
1７．转基因动物是指
A．提供基因的动物
B．基因组中增加外源