基因工程选择题题库-很全.doc
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1、基因工程选择题题库,很全(完整资料)(可以直接使用,可编辑 优秀版资料,欢迎下载)2 第一个作为重组A载体的质粒是()(a)pR322 (b)ClE ()pCl1 (d)pUCl3. 关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有( )不太恰当。(a)由作用于同一NA序列的两种酶构成(b)这一系统中的核酸酶都是类限制性内切核酸酶(c)这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰(d)不同的宿主系统具有不同的限制修饰系统。型限制性内切核酸酶: ( )(a)有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列()仅有内切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供(c)限制性识别非甲基化的核苷酸序
2、列(d)有外切核酸酶和甲基化酶活性(e)仅有外切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供5。下面有关限制酶的叙述哪些是正确的?( )(a)限制酶是外切酶而不是内切酶(b)限制酶在特异序列(识别位点)对NA进行切割(c)同一种限制酶切割D时留下的末端序列总是相同的(d)一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA,产生黏末端(e)一些限制酶在识别位点内相同的位臵切割双链A,产生平末端。第一个被分离的类酶是:( )(a)cK(b)Hind()i(d)EB7.在下列进行DA部分酶切的条件中,控制那一项最好?( )(a)反应时间 (b)酶量 (c)反应体积(d)酶反应的温度8。在下列试剂中,那一种
3、可以螯合C2离子?()(a)ED (b)柠檬酸钠 (c)SS (d)EGTA在下列工具酶中,那一种可以被EGA抑制活性?( )(a)单链核酸酶 (b)末端转移酶 (c)碱性磷酸酶 (d)Bal 31核酸酶10.限制性内切核酸酶可以特异性地识别: ( )(a)双链DNA的特定碱基对 (b)双链DNA的特定碱基序列()特定的三联密码 (d)以上都正确1下列关于限制性内切核酸酶的表示方法中,正确一项的是( )。(a)Su3A (b)EcRI (c)ind I (d)S 312限制性内切核酸酶的星号活性是指:()(a)在非常规条件下,识别和切割序列发生变化的活性。 (b)活性大大提高(c)切割速度大大
4、加快(d)识别序列与原来的完全不同3下面哪一种不是产生星号活性的主要原因?( )()甘油含量过高 ()反应体系中含有有机溶剂(c)含有非Mg+的二价阳离子(d)酶切反应时酶浓度过低14.关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有( )不太恰当(a)由作用于同一NA序列的两种酶构成()这一系统中的核酸酶都是类限制性内切核酸酶()这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰(d)不同的宿主系统具有不同的限制修饰系统15在长模板链的指导下引物延伸合成长的DN互补链时应选用( )(a)T4DA聚合酶()Klenow酶.(c)大肠杆菌NA聚合酶I ()T7DNA聚合酶16。末端转移酶是合
5、成酶类,( )(a)作用时不需要模板2+ (b)在a的存在下,可以在突出的,末端延长DN链2+ ()在Ca的存在下,可以在隐蔽的,末端延长DN链()上述说法有两种是正确的。在基因工程中,可用碱性磷酸酶( )()防止DNA的自身环化 (b)同多核苷酸激酶一起进行D的5,末端标记 (c)制备突出的,末端 (d)上述说法都正确。下列酶中,除( )外都具有磷酸酶的活性(a)核酸外切酶(b)外切酶()单核苷酸激酶 (d)碱性磷酸酶19。 下列哪一种酶作用时需要引物? ()(a)限制酶(b)末端转移酶 (c)反转录酶(d)DA连接酶201核酸酶的功能是( )(a)切割双链的DNA (b)切割单链的RNA
6、()切割发夹环 ()以上有两项是正确的1Keow酶与DN聚合酶相比,前者丧失了()的活性。(a)5,-3,合成酶, (b),-5,外切酶()5,-3,外切酶(d)转移酶22. 下面关于松弛型质粒(reaxd lsid)性质的描述中,( )是不正确的 (a)质粒的复制只受本身的遗传结构的控制,而不受染色体复制机制的制约, 因而有较多的拷贝数(b)可以在氯霉素作用下进行扩增()通常带有抗药性标记(d)同严紧型质粒融合后,杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子23。 基因工程中所用的质粒载体大多是改造过的,真正的天然质粒载体很少,在下列载 体中只有( )被视为用作基因工程载体的天然质粒载体()R322
7、(b)pSCl01 (c)pBll0 (d)pCl4。下列哪种克隆载体对外源DN的容载量最大?( )(a)质粒 (b)黏粒 (c)酵母人工染色体() (d) ?噬菌体(e) cDNA表达载体5.松弛型质粒:( )(a)在寄主细胞中拷贝数较多 ()可用氯霉素扩增()一般没有选择标记 (d)上述(a)、(b)两项正确26Col El是惟一用作基因工程载体的自然质粒,这种质粒: ( )(a)是松弛复制型 (b)具有,四环素抗性()能被氯霉素扩增 (d)能产生肠杆菌素2同一种质粒N,以三种不同的形式存在,电泳时,它们的迁移速率是:() (a)CDNASCDNADA ()SCLDNACDA(c)DNAO
8、CASCDNA(d)SNACDNALDNA2pB322是一种改造型的质粒,含有两个抗性基因,其中四环素抗性基因来自: ( )(a)ColEl (b)Ri质粒 (c)Cl0 (d)pUCl829.关于穿梭质粒载体,下面哪一种说法最正确?( )()在不同的宿主中具有不同的复制机制(b)在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点(c)在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶(d)在不同的宿主细胞中具有不同的复制速率能够用来克隆2k以下大小的外源片段的质粒载体是( )(a)charomid(b)plasmid ()comi (d)pagemid3第一个作为重组DNA载体的质粒是( )(a)B32 (b)Coll(
9、)Cl (d)pU32。 Ti质粒:( )(a)可从农杆菌转到植物细胞中 (b)作为双链NA被转移(c)在植物中导致肿瘤 (d)介导冠瘿碱的合成,作为细菌的营养物和植物的生长激素 ()需要细菌的ir基因帮助转移 (f)在植物细胞中作为染色体外质粒33。黏粒(omi)是一种人工建造的载体,( )(a)它具有OS位点,因而可进行体外包装()它具有质粒D的复制特性()进入受体细胞后,可引起裂解反应(d)进入受体细胞后,可引起溶源化反应3。有两种确定核酸中核苷酸序列的方法:化学序列分析法(Mxa-Glbt)和酶学序列分析法(Sanger).酶学测序法的基本原理优点是:()(a)碱基与特殊染料间不同的相
10、互作用()一个合成引物的延伸和NA修复合成的可靠终止()限制性位点与D末端标记的相关性(d)可同时对A双螺旋的两条链进行测序()反应是DA特异的,R不会带来干扰。这样既减少纯化步骤,也节约了开支。35。关于的最正确的说法是:( )()同mRN互补的单链N (b)同mRNA互补的双链DA(c)以mRA为模板合成的双链DN(d)以上都正确36。用碱法分离质粒DNA时,染色体DNA之所以可以被除去,是因为:()(a)染色体DNA断成了碎片 ()染色体DNA分子量大,而不能释放(c)染色体变性后来不及复性 (d)染色体未同蛋白质分开而沉淀3 关于碱解法分离质粒DNA,下面哪一种说法不正确?()(a)溶
11、液I的作用是悬浮菌体(b)溶液的作用是使DA变性(c)溶液的作用是使NA复性()质粒NA分子小,所以没有变性,染色体变性后不能复性38。 Clar做了一个有趣的实验,发现TaqDN聚合酶可以不需要模板,在双链N的 末端加一个碱基,主要是加( )(a)dGTP ()ATP ()CTP(d)d39根据构建方法的不同,基因文库分为基因组文库、cDNA文库等。在下列文库中,()属cD文库(a)YA文库 (b)M文库(c)扣减文库(d)BA文库40下面关于多克隆位点(mulipleconet,MCS)的描述,不正确的句是( ) (a)仅位于质粒载体中 ()具有多种酶的识别序列(c)不同酶的识别序列可以有
12、重叠 ()一般是人工合成后添加到载体中1。在cNA技术中,所形成的发夹环可用( )(a)限制性内切核酸酶切除 (b)用31外切核酸酶切除(c)用S1核酸酶切除 (d)用51外切核酸酶切除42。在NA的酶切反应系统中,通常:( )2+ (a)用SC缓冲液(b)加入M作辅助因子(c)加入BSA等保护剂(d)上述说法中,有两项是正确的黏性末端连接法,不仅操作方便,而且( )()产生新切点 (b)易于回收外源片段 (c)载体不易环化(d)影响外源基因的表达4在下列表型中,( )是基因工程上理想的受体菌表型+-+- ()rrc ()rmec (C)mrec (d)re45.关于NA接头在基因工程中的作用
13、,下列说法中哪一项不正确?( )()给外源NA添加适当的切点 (b)人工构建载体(c)调整外源基因的可读框 (d)增加调控元件46DN文库包括该种生物的( )(a)某些蛋白质的结构基因 ()所有蛋白质的结构基因(c)所有结构基因 (d)内含子和调控区下列关于建立cNA文库的叙述中,哪一项是错误的?( )()从特定组织或细胞中提取DN或RNA(b)用反转录酶合成mRNA的对应单链DA(c)以新合成的单链N为模板合成双链DN(d)新合成的双链A甲基化4.下列对黏性末端连接法的评价中,哪一项是不正确的? ( )(a)操作方便(b)易于回收片段(c)易于定向重组 (d)载体易于自身环化,降低重组率9。
14、关于感受态细胞性质的描述,下面哪一种说法不正确?( )(功具有可诱导性 (b)具有可转移性(c)细菌生长的任何时期都可以出现 (d)不同细菌出现感受态的比例是不同的下面关于用T4多核苷酸激酶标记5 端制备探针的描述中( )是不正确的.()既能标记A,又能标记NA (b)既能标记双链A又能标记单链NA (c)只能标记突出的5 端不能标记其他类型末端(d)DA或RN必须有5H的存在1.Suhe印迹的D探针( )杂交。(a)只与完全相同的片段 ()可与任何含有相同序列的DNA片段()可与任何含有互补序列的DA片段(d)可与用某些限制性内切核酸酶切成的DN片段 (e)以上都是52 用下列方法进行重组体
15、的筛选,只有( )说明外源基因进行了表达。(a)Souem印迹杂交 (b)Norem印迹杂交(c)Wn印迹 (d)原位菌落杂交5。下列哪一个不是Sohr印迹法的步骤?( )()用限制酶消化DNA ()DNA与载体的连接(c)用凝胶电泳分离DNA片段 (d)A片段转移至硝酸纤维素膜上(e)用一个标记的探针与膜杂交5 报告基因( )(a)以其易于分析的编码序列代替感兴趣基因的编码序列(b)以其易于分析的启动子区代替感兴趣基因的启动子区(c)能用于检测启动子的活性()能用于确定启动子何时何处有活性5. 在利用lacZ失活的显色反应筛选法中,IPT的作用是( )(a)诱导宿主的肽的合成 (b)诱导宿主
16、的肽的合成()作为酶的作用底物 (d)作为显色反应的指示剂56. 切口移位是指在( )作用下,使()带上放射性标记。(a)DNA聚合酶I,NA ()DN聚合酶,(c)DA聚合酶,NA(d)DN聚合酶,DA5用于核酸分子杂交的探针可以是放射性标记的( )(a)DNA (b)RN(c)抗体 ()抗原58Soutrn印迹是用DA探针检测DN片段,而Nothern印迹则是:( )(a)用RNA探针检测DA片段 (b)用RNA探针检测RNA片段(c)用DA探针检测RNA片段 (d)用DNA探针检测蛋白质片段59用免疫化学法筛选重组体的原理是( )()根据外源基因的表达 (b)根据载体基因的表达(c)根据
17、mRA同DA的杂交 ()根据DN同NA的杂交6随机引物标记探针,下列各项中哪一项是不正确的?()(a)双链DNA、单链DA、RNA都是可以标记的 (b)不需要用Dnae I预处理()反应时可用Klenw酶 (d)反应时可用DA聚合酶161.在切口移位标记DA探针时只能使用( )(a)enow酶 (b)DNA聚合酶 (c)NA聚合酶 (d)DNA聚合酶62.要对一双链的A分子进行末端标记,可用( )()Kleow酶 (b)NA聚合酶 (c)4DN聚合酶 (d)7NA聚合酶答案;1。c;2;3b;。5b,d,e;6.c;。b;。d;d;10.B;1;1.;3.d;14b5.;1c;17.,b;18
18、a;19。;0。;1。c;22C;2。b;24.C;25。d;26.a,C,d;27b;8.c;2b;0a;.c;32。a,,d,e,3a,,;34.;35c;3c;37.;38.;9c;0;41c;42a,b,c;43;44b;5d;46.a;4;48c;4.;5。;5;52;3.b;54a,c,d;。a;56。b;57。a,b;8c;5。a;0;61。;62。;基因工程中限制酶的选择及的筛选方法摘要:基因工程是现代生物科技专题的重要内容,基因工程四部曲中的核心内容是基因表达载体的构建,在构建表达载体过程涉及的限制酶的种类以及筛选方法成为考试的热点内容。本文结合三道例题将限制酶的选择和筛选方
19、法结合在一起进行比较分析。关键词:限制酶 筛选单酶切及筛选若用同一种限制酶切割质粒和目的基因形成相同的四个黏性末端,因而可能出现多种连接方式如质粒和质粒目的基因和目的基因质粒的自身环化,目的基因的自身连接质粒与目的基因的连接。质粒与目的基因的连接又会出现正向连接和反向连接两种.若启动子在质粒上,目的基因与质粒的反向连接则导致三联体密码顺序改变,起始密码子和终止密码子位置改变,使得翻译不能正常进行而无法得到正常的表达产物。例1:(202江苏生物高考33题部分)图表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp I、BamH I、Mo I、Sa 种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C
20、CG、GGTCC、GATC、CCGG。请回答下列问题若将图2中质粒和目的基因通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是.在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加的培养基进行培养.经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因是.答案: Bm I抗生素B同种限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因D与质粒反向链接笔者认为可通过免疫学方法检测目的基因的表达产物排除反向连接的重组质粒,或分别在质粒和目的基因上设计相同的限制酶识别位点,然后用该酶去切割重组质粒,正向连接和反向连接便会得到不同长度的DNA片段,再根据已知的限制酶
21、在目的基因的位置进行比对,找到正确连接的重组质粒.2 双酶切及筛选因为用单酶切会出现质粒与目的基因的任意连接,所以在实际操作中多使用双酶切。双酶切可以避免质粒的自身环化,目的基因的自身连接和目的基因和质粒的反向连接,而目的基因与目的基因的连接因为没有抗生素抗性基因所以可以在含有该抗生素的培养基上去除,故只剩下质粒与质粒,以及质粒与目的基因的重组体。1插入失活筛选法例2:(苏锡常镇12届高三教学调研测试)M,EcoI,PstI识别的碱基序列和切割位点分别为GATTAATT,AT,TGAG。请回答下列问题:)在用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时,需要对质粒改造,构建新的限制酶切位点.试写出构建
22、需要的限制酶切位点的过程(提供构建需要的所有条件):首先用酶处理质粒;然后用DNA聚合酶等处理质粒;再运用酶处理质粒,从而形成新的限制酶切位点,可被酶识别。(2)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤.下图表示运用影印培养法(使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入大肠杆菌。图3培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有,。从检测筛选的结果分析,含有目的基因的是菌落中的细菌。答案:()EcoRI,A连接,MeI(2)四环素 青霉素(四环素和青霉素)4和6用限制酶Ms和 stI同时切割含目的基因的DNA和质粒,但原有质粒上无M
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