微生物学霍乱厌氧.pptx

1 医医 学学 微微 生生 物物 学学 统编教材第统编教材第6 6版版 第11（续）、12章课件 肖彭年 厦门大学医学院2霍乱弧菌 Vibeio cholerae 厌氧性细菌厌氧性细菌 anaerobic bacteria3霍乱弧菌 V cholerae 概述：霍乱弧菌是烈性传染病霍乱的病原体 该病发展猛、传播快、波及广、时间长 急性失水、电介质高度紊乱、死亡率高 古典生物型：1817年耒6次均起源孟加拉盆地 El-tor生物型：1961年笫七次发生西奈半岛4一一 生物学生物学性状性状：（一）形态染色：（一）形态染色：G G一一弧菌，单鞭毛，似弧菌，单鞭毛，似穿梭流星穿梭流星（二）培养：（二）培养：碱性碱性蛋白胨水（蛋白胨水（8.8-9.08.8-9.0）：菌膜菌膜 碱性平板碱性平板：透明透明、水滴样菌水滴样菌落落（三）生化反应：（三）生化反应：多种糖多种糖，靛基质，还原硝酸盐，靛基质，还原硝酸盐（四）抗原：（四）抗原：0 0抗原抗原：200200多群，多群，0 01 1、0 0139139群引起霍乱群引起霍乱 0 01 1群群含含ABCABC抗原，分小川、稻叶、彦岛三型抗原，分小川、稻叶、彦岛三型 0 01 1群群每型每型两个生物型两个生物型 H H抗原抗原：共同弧菌抗原共同弧菌抗原（五）抵抗力：（五）抵抗力：河水河水1-3W1-3W，越冬，不耐酸，越冬，不耐酸567二二 致病性：致病性：（一）（一）致病物质致病物质：1 1 霍乱肠毒素霍乱肠毒素：A A、B B亚单位亚单位 B B亚单位亚单位与肠上皮与肠上皮GMGM1 1受体结合形成膜孔受体结合形成膜孔 A A亚单位亚单位穿孔道被裂解，片段穿孔道被裂解，片段A A1 1活化活化cAMPcAMP酶，使酶，使ATPATP 变成变成cAMPcAMP，主动大量分泌，主动大量分泌CLCL-，被动带出水，被动带出水，致严重水和电介质紊乱致严重水和电介质紊乱 2 2 鞭毛、菌毛、其他毒性因子鞭毛、菌毛、其他毒性因子：鞭毛鞭毛：菌穿过粘液层：菌穿过粘液层 菌毛菌毛：粘附：粘附 01390139群群致病物质致病物质还有还有：荚膜荚膜 抗杀菌物质抗杀菌物质 LPSLPS 粘附粘附 8（二）所致疾病：（二）所致疾病：1 1 传播途径传播途径：污染水源污染水源 2 2 所致疾病：所致疾病：霍乱霍乱 菌菌粘附粘附肠粘膜繁殖，肠粘膜繁殖，不入细胞不入细胞，肠毒素致病肠毒素致病 吞菌吞菌2-3d2-3d突然突然剧剧烈腹泻和呕吐，数十次烈腹泻和呕吐，数十次d d1L1Lh h，排出粘膜、上皮细胞和大量弧菌，呈排出粘膜、上皮细胞和大量弧菌，呈“米泔水米泔水”样样，12-24h12-24h死亡。死亡。3 3 免疫力：牢固免疫力：牢固 抗肠毒素抗体抗肠毒素抗体针对针对B B亚单位亚单位 抗菌抗体抗菌抗体针对针对0 0抗原，对抗原，对H H抗原无保护作用抗原无保护作用 SIgASIgA：凝集菌失动力凝集菌失动力 结合粘附因子阻止菌粘附结合粘附因子阻止菌粘附 阻止阻止B B亚单位与亚单位与GM1受体结合结合 0 01 1与与0 0139139群群感染无交叉保护感染无交叉保护9三三 微检：微检：（一）标本：粪便、肛拭、水样（一）标本：粪便、肛拭、水样（二）直接镜检：悬滴法（二）直接镜检：悬滴法（三）培养：碱性平板（三）培养：碱性平板 （可疑菌落（可疑菌落 生化反应生化反应 凝集反应）凝集反应）四四 防治原则防治原则：（一）（一）三管三管：管水、粪便、食品管水、粪便、食品（二）（二）疫苗疫苗：口服疫苗：口服疫苗 B B亚单位亚单位-全菌灭活口服疫苗全菌灭活口服疫苗 基因工程基因工程(去除去除0101群野生株毒性基因群野生株毒性基因)减毒活菌苗减毒活菌苗（三）（三）治疗治疗：补足水、电介质、抗生素补足水、电介质、抗生素10副溶血弧菌副溶血弧菌 Vibrio parahemolyticusVibrio parahemolyticusl嗜盐菌嗜盐菌，存于海产品，存于海产品lG G一一弧菌，弧菌，3.53.5NaclNacl生长，生长，565min565min杀灭杀灭l肠毒素（耐热溶血毒素）：肠毒素（耐热溶血毒素）：氯离子分泌氯离子分泌 细胞毒性细胞毒性 心脏毒害心脏毒害l食不熟海产品，食不熟海产品，食物中毒食物中毒 病菌病菌 6-8h6-8h发病发病 呕吐、发热呕吐、发热 1-7d1-7d恢复恢复1112厌氧性细菌厌氧性细菌anaerobic bacteiraanaerobic bacteiral厌氧芽胞菌厌氧芽胞菌：G G+，无氧芽胞菌，无氧芽胞菌 存在土壤、人和动物肠道存在土壤、人和动物肠道 少数少数产生强烈外毒素和酶致病产生强烈外毒素和酶致病 （破伤风、气性坏疽、肉毒中毒（破伤风、气性坏疽、肉毒中毒等等）l厌氧无芽胞菌厌氧无芽胞菌：G G+球菌和杆菌球菌和杆菌 人和动物占人和动物占绝对优势正常菌群绝对优势正常菌群 分布皮肤、上呼吸道、泌尿生殖道分布皮肤、上呼吸道、泌尿生殖道 占厌氧菌感染占厌氧菌感染9090 13破伤风梭菌破伤风梭菌 Clostridium tetaniClostridium tetani一一 生物学性状生物学性状：（一）形态染色：（一）形态染色：G G杆菌，周鞭毛，杆菌，周鞭毛，顶端大芽胞顶端大芽胞（二）培养：（二）培养：48h48h见膜状物，见膜状物，溶血环溶血环（三）（三）抵抗力：抵抗力：土壤芽胞生存数十年土壤芽胞生存数十年14二二 致病性与免疫力：致病性与免疫力：（一）（一）致病物质致病物质：1 1 破伤风痉挛毒素破伤风痉挛毒素：嗜神经毒素嗜神经毒素，质粒编码蛋白质，小鼠质粒编码蛋白质，小鼠 LDLD50 50 0.015ng0.015ng 重链结合神经细胞和转运毒素；轻链毒性部分重链结合神经细胞和转运毒素；轻链毒性部分 重链重链C C端与运动神经元端与运动神经元膜受体膜受体结合，结合，促促轻链进入胞内轻链进入胞内 小泡，并沿神经小泡，并沿神经轴突上行轴突上行至运动神经元，至运动神经元，跨突触跨突触，至中至中 枢神经系统；枢神经系统；N N端端膜转位膜转位使轻链入胞质使轻链入胞质 轻链轻链为为锌内肽酶锌内肽酶，裂解裂解储存有抑制介质（储存有抑制介质（-氨基丁氨基丁 酸、甘氨酸）小泡酸、甘氨酸）小泡膜肽键膜肽键，阻止阻止介质介质释放，肌肉的兴奋释放，肌肉的兴奋 与与抑制抑制失调失调，骨骼肌强直，骨骼肌强直痉挛痉挛 2 2 破伤风溶血毒素破伤风溶血毒素：不清不清15（二）过程：（二）过程：咀嚼肌痉挛：咀嚼肌痉挛：牙关紧闭牙关紧闭 创口创口 深深 外口小外口小 神经轴突神经轴突 脑干脑干 咽肌痉挛：咽肌痉挛：吞咽困难吞咽困难声嘶声嘶窒息窒息 病菌病菌 异物异物 痉挛毒素痉挛毒素 面肌面肌痉挛：痉挛：苦笑苦笑 化脓感染化脓感染 （需氧菌）（需氧菌）脊髓前角：脊髓前角：角弓反张角弓反张 （三）免疫力：（三）免疫力：体液免疫，弱体液免疫，弱三三 防治原则防治原则：（一）（一）人工自动免疫人工自动免疫：破伤风类毒素：破伤风类毒素（二）（二）人工被动免疫人工被动免疫：1 1 紧急预防：紧急预防：TAT 1500TAT 1500 2 2 特异性治疗：早期足量特异性治疗：早期足量TATTAT，青霉素，青霉素16产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌 Clostridiu perfringensClostridiu perfringens一一 生物学性状生物学性状：(一一)形态染色：形态染色：G G+大杆菌，大杆菌，芽胞次极端芽胞次极端，体内形成荚膜体内形成荚膜(二二)培养：培养：双溶血环双溶血环 内环内环 Q Q 毒素毒素溶血溶血 外环外环毒素毒素溶血溶血 “汹涌发酵汹涌发酵”现象现象 乳糖，酪蛋白凝固乳糖，酪蛋白凝固 乳糖乳糖，冲散凝固酪蛋白，冲散凝固酪蛋白 (三三)分型：主要毒素抗原分产气荚膜梭菌分型：主要毒素抗原分产气荚膜梭菌A-EA-E五型五型 1718二二 致病性：致病性：（一）（一）致病物质致病物质：1212种毒素种毒素 主要主要毒素毒素分解胞膜磷脂蛋白分解胞膜磷脂蛋白 毒素毒素组织坏死组织坏死 毒素毒素胃肠壁通透性胃肠壁通透性 毒素毒素血管壁通透性血管壁通透性 （二）（二）所致疾病所致疾病：1 1 气性坏疽气性坏疽：创口创口 深而小深而小 毒素毒素 胞膜卵磷脂胞膜卵磷脂 病菌病菌 异物异物 18-48h18-48h 化脓感染化脓感染 毒素毒素 组织坏死组织坏死，毒毒血症血症，全身全身中中毒毒 （需氧菌）需氧菌）糖糖 组组织肿胀织肿胀，血运障碍血运障碍19（二）（二）食物中毒食物中毒：食食A A型菌株污染食品型菌株污染食品 腹痛腹痛、腹胀腹胀、水样泻，水样泻，1-2d1-2d自自愈愈（三）（三）坏死性肠炎坏死性肠炎：食食C C型菌株型菌株(毒素毒素)污染食品污染食品三三 微检：微检：（一）涂片镜检（一）涂片镜检：G G+大杆菌，有荚膜大杆菌，有荚膜（二）培养：牛奶培养基（二）培养：牛奶培养基“汹涌发酵汹涌发酵”（三）动物试验（三）动物试验“泡沫肝泡沫肝”四四 防治原则防治原则：扩创、抗毒素、抗生素、高压氧舱扩创、抗毒素、抗生素、高压氧舱20肉毒梭菌肉毒梭菌 Clostridium botulinumClostridium botulinum一一 生物学性状生物学性状：（一）形态染色（一）形态染色：G G+大杆菌，大杆菌，次极端大芽胞次极端大芽胞（二）培养：厌氧普碟不规则菌落（二）培养：厌氧普碟不规则菌落（三）（三）抵抗力抵抗力：毒素毒素100100，20 min20 min破坏破坏 芽胞芽胞100100，3-5h3-5h杀灭杀灭21二二 致病性致病性：（一）（一）致病物质致病物质：肉毒毒素肉毒毒素(比比氰化钾强氰化钾强1 1万倍，人致死量万倍，人致死量1 1g)g)毒素作用肌肉神经接头处和自主神经末梢，毒素作用肌肉神经接头处和自主神经末梢，阻止释放阻止释放乙酰胆碱乙酰胆碱（二）二）所致疾病所致疾病：食物中毒食物中毒 潜伏期数潜伏期数h h：乏力、头痛：乏力、头痛 病菌病菌 污染罐头污染罐头 肉毒毒素肉毒毒素 眼肌麻痹：复视、斜视、眼睑下垂眼肌麻痹：复视、斜视、眼睑下垂 咽肌麻痹：吞咽咀嚼难、口齿不清咽肌麻痹：吞咽咀嚼难、口齿不清 膈肌麻痹：窒息膈肌麻痹：窒息三三 微检微检：（一）分离鉴定（一）分离鉴定：可疑食物可疑食物8010min8010min杀繁殖体，厌氧培养杀繁殖体，厌氧培养（二）动物试验（二）动物试验：四四 预防原则预防原则：加强食品管理，多价抗毒素加强食品管理，多价抗毒素 22艰难梭菌艰难梭菌 Clostridium difficileClostridium difficilelG G+大杆菌，大杆菌，芽胞次极端芽胞次极端，鞭毛，鞭毛l肠道正常菌群，抗生素肠道正常菌群，抗生素不正规使用不正规使用致微生态失调，致微生态失调，耐药艰难梭菌产毒，致假膜性结肠炎耐药艰难梭菌产毒，致假膜性结肠炎l假膜性肠炎假膜性肠炎致病机制致病机制：A A毒素：毒素：趋化中粒致肠壁释放趋化中粒致肠壁释放CKCK，分泌液体，分泌液体 、出血坏死、出血坏死 B B毒素：毒素：肌动蛋白解聚，细胞骨架损坏，肠壁细胞坏死肌动蛋白解聚，细胞骨架损坏，肠壁细胞坏死l抗生素相关腹泻抗生素相关腹泻：氨苄青霉素、克林霉素使用不当出现的水样腹泻，氨苄青霉素、克林霉素使用不当出现的水样腹泻，轻于假膜性结肠炎，轻于假膜性结肠炎，2525与艰难梭菌有关与艰难梭菌有关2324脆弱类杆菌脆弱类杆菌 Bacteroides fragilisBacteroides fragilislG G一一杆菌，两端浓染，荚膜，菌毛杆菌，两端浓染，荚膜，菌毛l培养：培养：心脑浸出液平板呈细小灰色菌落心脑浸出液平板呈细小灰色菌落l致病物质致病物质：菌毛菌毛：粘附：粘附 荚膜荚膜：抗吞噬：抗吞噬 纤溶酶纤溶酶、DNADNA酶酶、透明质酸酶透明质酸酶：侵袭力有关：侵袭力有关 肝素酶肝素酶：血栓性静脉炎、迁延性脓肿：血栓性静脉炎、迁延性脓肿l所致疾病所致疾病：腹腔盆腔感染腹腔盆腔感染：9090 皮肤感染皮肤感染：6060 口腔感染口腔感染：5050 上呼吸道感染上呼吸道感染：808025262728