乙肝小三阳血清HBV.docx
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1、乙肝小三阳血清HBVDNA定量检测及其与前S1关系的研究摘 要 目的:检测乙型肝炎小三阳患者HBVDNA含量,并与前S1抗原(PreS1)进行比较分析。方法:收集351例乙型肝炎小三阳患者血清和30例正常体检者血清,用ELISA方法检测前S1抗原,用荧光定量PCR方法定量检测HBVDNA。结果:HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性(小三阳)患者HBVDNA检出率为%(106 copiesml),前S1抗原检出率为%。结论:HBeAg转阴者也存在病毒复制,HBVDNA与前S1抗原相关性较好,对于乙型肝炎患者在常规血清学标志物检测的基础上对HBVDNA数量进行动态检测有助于临床诊断、疗效观察及预后判
2、断。关键词 乙型肝炎;HBVDNA;前S1抗原Study the Relationship of HBVDNA Quantitatively Detection and PreS1 for the Patients of Hepatitis B with Positive of HBsAg、AntiHbe and AntiHBcAbstract:Objective To determine hepatitis B virusDNA(HBVDNA) and pre S1 antigen in patients with hepatitis B and expolore their differe
3、nt clinical351 positive serum of HBsAg,antiHBe,antiHBc of hepatitis B and 30 healthy man wrer S1 antigen and HBV markets were detected with ELISA and HBVDNA with fluorescent quantitative PCR(FQPCR)The positive rates of HBVDNA and PreS1 antigen were %(106 copiesml)、% respective in patients with hepat
4、itis B of which HBsAg、antiHBe、antiHBc wereThere were replication of virus in patients with HBeAg negative,The serum levels of HBVDNA of patients with hepatitis B closely correlate PreDNA with fluorescent quantitative PCR for the patients with hepatitis B is helpful to clinical diagnosis、clinical eva
5、lution and prognosis.Key words:Hepatitis B;HBVDNA;PreS1 antigen乙型肝炎血清标志物的检测方法有多种,寻求快速、敏感和特异性检测手段具有十分重要的意义。前S1(PreS1)抗原已成为HBV感染、复制和乙肝患者诊断、治疗和预后的一个重要标志,但存在“窗口期”及“免疫逃避株”等问题。乙型肝炎病毒HBVDNA含量是判断病毒复制活跃和具有传染性的直接可靠依据,HBVDNA定量测定可以反映乙型肝炎病毒(HBV)的量的变化,直接检测患者血清中病毒的拷贝数量,反映患者病毒血症的水平。本研究观察了乙肝小三阳患者血清标志物、前S1和HBVDNA三者之间
6、的相关性,探讨了HBVDNA检测的临床意义,现报道如下。1 材料与方法1 标本 收集我院351例乙型肝炎小三阳患者血清,其中男273例,平均年龄岁,女78例,平均年龄岁,健康对照30例,男25例,平均年龄岁,女5例,平均年龄岁。留取清晨空腹静脉血,分离血清,-20 保存待检。2 仪器 RSP150/8全自动加样器(瑞士TECAN公司生产),BEP全自动酶免疫分析仪(德国DadeBehring公司生产),美国ABI公司AB770型PCR荧光定量仪。3 方法 血清标志物(HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc)检测 应用ELISA方法,试剂由上海实业科华生物技术有限公司提供,试剂批号
7、分别为:20060718、20061013、20060913、20060925、20060924。用瑞士TECAN公司生产的加样器(RSP150/全自动酶免分析仪)进行加样(包括质控血清、阴阳性对照及待检血清),然后用BEP全自动酶免疫分析仪进行检测,判定方法严格按照说明书进行。 前S1抗原检测 采用双抗体夹心ELISA法,用抗前S1和抗HBs作为固相化抗体和酶标抗体,单抗捕获待检标本中的乙肝病毒表面抗原,用辣根过氧化物酶标记的抗PreS1单抗作为检测抗体。严格按照试剂盒说明书的检测步骤进行操作,根据酶底物反应后的呈色吸光值,测定血清中乙肝病毒PreS1,试剂由上海阿尔法生物技术有限公司提供,
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