人教版教学51DNA的粗提取与鉴定.pptx
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1、专题专题5DNA和蛋白质技术和蛋白质技术课题课题1.DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定1DNA的溶解性:的溶解性:思考题思考题1:DNA在氯化钠溶液中的溶解度有什么在氯化钠溶液中的溶解度有什么特点?对此有什么应用?特点?对此有什么应用?DNADNA在氯化钠溶液中的溶解度,随着氯化钠的浓度在氯化钠溶液中的溶解度,随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0 014mol/L14mol/L时,时,DNADNA的溶解度最低。利用这一原理,的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的可以使溶解在氯化钠溶液中的DNADNA析出;析出;思考题
2、思考题2:利用什么原理来将利用什么原理来将DNA与蛋白质分离与蛋白质分离开?开?一、实验原理:一、实验原理:2DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性:对酶、高温和洗涤剂的耐受性:蛋白酶蛋白酶能水解能水解 ,但对,但对 没有影响。大多没有影响。大多数蛋白质不能忍受数蛋白质不能忍受 的高温,而的高温,而DNADNA在在 以上才会变性。以上才会变性。能够瓦解细胞膜,但对能够瓦解细胞膜,但对DNADNA没有影响没有影响。3细胞在细胞在 中易吸水而导致细胞膜和细胞核膜中易吸水而导致细胞膜和细胞核膜的破裂,据此可得到含有核的破裂,据此可得到含有核DNA的溶液。的溶液。4DNA的鉴定:的鉴定:思考题思考题3:依据
3、什么原理来鉴定依据什么原理来鉴定DNA?三、实验材料:鸡血细胞液三、实验材料:鸡血细胞液思考题思考题4:能否选用牛、羊、马血做实验材能否选用牛、羊、马血做实验材料?为什么?料?为什么?不能。不能。因为哺乳动物成熟的红细胞中无细因为哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核,仅靠白细胞和淋巴细胞中的少数胞核,仅靠白细胞和淋巴细胞中的少数DNA,在实验中很难提取到。,在实验中很难提取到。四、实验步骤:四、实验步骤:1制备鸡血细胞液:制备鸡血细胞液:在鸡血中加入质量浓度为01g/mL的 溶液,离心处理;2提取鸡血细胞的细胞核物质:提取鸡血细胞的细胞核物质:向鸡血细胞液中加入蒸馏水,搅拌、过滤过滤;思考题5:加入
4、蒸馏水的目的是什么?为什么能达到此目的?加速了鸡血细胞的破裂加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂细胞膜和核膜的破裂),从而释放出从而释放出DNADNA;蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种;蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞胀裂。胞胀裂。3溶解细胞核内的溶解细胞核内的DNA:加入2mol/L的氯化钠溶液,搅拌,使DNA呈溶解状态;过滤过滤4析出含析出含DNA的黏稠物:的黏稠物:加入蒸馏水,用玻璃棒搅拌;思考题6:此时加入蒸馏水的目的是什么?使氯化钠溶液浓度接近使氯化钠溶液浓度接近0 014mol/L14mol/L,使,
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