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类型DNA的特性及应用.docx

  • 上传人:丰****
  • 文档编号:4531119
  • 上传时间:2024-09-26
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    关 键  词:
    DNA 特性 应用
    资源描述:
    DNA的特性及应用   一   在刑事案件的侦破工作中,常常要检验血痕、精斑、唾液等现场遗留物的血型物质是哪个种属,并同嫌疑人进行对照、比较,确认异同。这种血型鉴定是法医物证检验中最常用的技术手段。   最早意义上的血型仅指血红细胞表面抗原的四种类型。当今血型检验的系统己经大大扩展,可以在刑事技术部门实际 应用 的血斑检验系统15 -20个,精班检验系统5一6个。譬如,设在伦敦的国际刑警组织实验室常规检验血液项目为13项,检验精液项目为5项,因而排除嫌疑的比率明显增大。但是,各检验项目的联合排除率并不等于各项目独立排除率的简单相加,而是:P=l-l…… 。其中,Pl、P2……Pn分别代表各独立血型系统的排除率,P为联合排除率。从 理论 上可以看出,尽管检验项目扩展,但最终不能达到同一认定的目的。而DNA检验技术,则解决了这个关键 问题 。   法医物证的DNA检验技术是本世纪80年代中期才开始 研究 和应用的,它借助了新兴的“分子生物学”和“遗传工程学”的理论与技术。早在19世纪60年代,奥地利遗传学家孟德尔在运用数学 方法 对植物遗传性状进行多年 分析 研究的基础上,提出了着名的孟德尔遗传定律,预言了遗传因子的存在。到20世纪40年代,美国学者艾弗里等人证明了遗传因子就是脱氧核糖核酸。1953年,美国生物学家沃森和英国物 理学 家克里克发现并提出了DNA分子的双螺旋结构理论与碱基配对原则,开创了分子生物学。1989年,美国 科学 家用“扫描隧道显微镜”直接观察到了脱氧核糖核酸的双螺旋结构。1990年,我国青年科学家白春礼用自己研制的“扫描隧道显微镜”首次观察到人们尚未认知的三链状脱氧核糖核酸,为生命信息研究又辟新途。在60年代,经过许多科学家的共同努力,破译了遗传物质中的全部密码,使人类对遗传物质的认识进入了新的阶段;1973至1974年,美国斯坦福大学的科恩博士在实验室运用重组DNA的方法,改变了生物的遗传信息,也改变了生物的遗传性状,开创了遗传工程学。1985年,英国莱斯特大学三名遗传学家亚历克·杰费里斯、彼得·吉尔、戴维·沃雷特发现每个人的DNA分子中,碱基的排列都是独特的。事实上,除了同卵双生子的DNA结构有相同的可能性之外,没有任何两个人存在相同的DNA.这一重大发现立刻引起法医学界的高度重视,各国纷纷投向这一领域的研究。英国首先在移民纠纷中应用DNA检验手段确认母子亲缘关系。   二   DNA是脱氧核糖核酸的 英文 缩写。它是在生物细胞核中普遍存在的大分子聚合物。它具有“自我复制”及“互补合成RNA”二项功能,使生物体的遗传性状得以在新生体上体现,因而被称为“遗传基因”。DNA的化学组成包括磷酸、脱氧核糖和四种含氮碱基:腺嘌呤脱氧核苷酸、鸟嘌呤脱氧核苷酸 、胞嘧啶脱氧核苷酸、胸腺嘧啶脱氧核苷酸。DNA的分子结构为两条平行但方向相反的多个核苷背酸聚合长链,围绕一个中心轴相对旋转成双螺旋状   每条长链的外侧排列着磷和脱氧核糖,内侧排列的四种碱基依照A=T、T=A、G=C、 C=G的对应关系由氢键连接,使双链成一整体。在不同的DNA分子中,S与P的排列结构是相同的,但碱基的排列顺序不同。DNA分子中的碱基虽只四种,但由氢键连接的碱基对的数目少则几千,多则数万,组成极多的不同排列顺序。这就构成了DNA分子结构的多样性,从理论上解决了同一认定问题。   DNA分子的复杂结构具有三个重要特性:人各不同;终生不变;同一人体各不同部位细胞中的DNA结构相同。法医物证检验正是利用了这些可贵特性,依据摄取的DNA结构图谱进行个体识别。这同利用指纹进行个体别的准确性相同,因而又被称为“DNA遗传指纹图谱”。   三   目前 ,各国专家一般采用化学方法分离DNA,再用特殊的DNA探针检验,可以获得代表每个人独特基因组的DNA图谱。其程序包括七个环节   1、提取。先将DNA从检材细胞核中提取出来。不同检材的性质不同,提取和纯化DNA的方法也不完全相同。如对精液与阴道分泌物混合的检材:先裂解、洗涤,清除女性物质后,获得纯精子,再裂解取出DNA.   2、酶解。由特定的限制性内切酶裂解DNA分子长链。由于每个人DNA分子中碱基排列呈现多样性,所以酶切碱基后,就获得在数量和长度上体现个体差异的若干DNA片段。   3、电泳。琼脂糖凝胶是一层充满网孔的胶状物,在电泳时,其一端为正极,另一端为负极。DNA片段带负电,当将它加在凝胶负极板后,就会向正极缓慢泳动,泳动速度和距离取决于片段长度大小。经过一段时间,DNA片段按长短顺序排列开来。   4、转移。经电泳展开的DNA片段通过吸印或真空转移法,转移并固定到硝酸纤维素膜或尼龙膜上。   5、探针标记与杂交。所谓探针标记,就是使用专门的特殊试剂,经过特定的反应,在不破坏DNA排列结构的前提下,使DNA片段能产生放射线,或显色发光,从而可以识别DNA片段。标记好的探针需与附着有DNA片段的转移膜温育,才能结合,这个过程叫“杂交”。杂交后清洗未结合的多余探针。   6、显影。将杂交好的膜与X光感光片重合放在暗盒内感光,再经显影、定影,即得到DNA图谱。   7、检验。将检材DNA图谱与嫌疑样本DNA图谱进行谱带比较。一般若有15条以上谱带相同,又不存在差异,则可做认定结论。但现场检材会由于各种客观原因,使DNA图谱不完整,所以用15条以上谱带完全吻合为标准是不现实的。据观察统计:每个个体平均具有的谱带数16·8条,两个不相关的个体间具有一条相同谱带的概率为0·21,具有二条相同谱带的概率为2,如果现场检材DNA图谱有5条以上谱带与样本吻合,则个人认定的准确率达到%以上。这时,如果没有发现其他差异点,可以作认定结论。如果检材的谱带在5条以下,即使全能与样本吻合,亦只能做可能性认定。如果检材与样本的谱带不同,则做否定结论   四   DNA检验在刑事案件侦破工作中的意义包括   在强奸及轮奸案件中,依据精细胞DNA认定犯罪人。在轮奸案件中,几个人的精液混合后的分离技术, 目前 并没解决,因而血型鉴定的难度很大。但DNA 检验可以解决这个难题:将所有嫌疑人的精液或血液样本采来与现场检材比对,如果嫌疑人中的确有犯罪分子,则必然会认定其一,同时又不能籍以否定其他人。   在碎尸案件中收集到的尸块组织,以DNA检验来判定是否为同一人。   按遗传 规律 ,亲子的DNA分别继承其双亲。如果孩子DNA图谱有一半与母亲相同,另一半与嫌疑父亲相同,则认定其为生父。因此,DNA检验对于拐卖儿童、强奸致孕等案件中的生父认定,具有极重要意义,这也是目前国际上认可、且不能为其他 方法 替代的手段。   在杀人案件中,从现场血液或血痕DNA图谱认定犯罪人,或确认为受害人所留。   在无名尸案件中认定身源。对面目全非,其他方法无法辩认的尸块,可以通过DNA检验与失踪人的父母的DNA图谱对照,确认身源。   其他。如若干起强奸案通过精斑DNA检验进行并案;在移民争端中进行血缘关系的审查;在汽车肇事案中对车辆上附着的人体组织进行检验等。   此外,加拿大专家 应用 Y一染色体特异性DNA探针可以将不同性别的人血加以区分;又用重复序列DNA探针将人血和动物血进行区分。各国专家认为,DNA技术开创了法医物证检验的崭新天地,是法医生物学 发展 的方向。   五   由于DNA分子在外界环境的 影响 下会发生降解作用,减少其谱带数量,所以对检材和样本的提取有较严格的要求,一般以人脑组织、深层肌肉组织和液体血为佳。   ①在强奸案件中,提取现场精斑、混合斑为检材。如果是轮奸案,应尽量多收集现场各不同部位的精斑并分别记录和保存,减少不同人精液混合的概率。   ②在奸杀案件中,提取精斑和阴道擦拭棉球为检材,取受害人脑组织或深层肌肉为样本,以备与嫌疑人和受害人分别作鉴别区分。   ③在碎尸案中,如需认定不同尸块是否为同一人时,按DNA降解的难易顺序提取检材。   ④杀人案中,提取现场及嫌疑人衣物上的血液、血斑为检材,提取受害人液体血、脑组织为样本。   ⑤现场带毛囊的毛发、沾有唾液的烟头等亦可作为检材。   ⑥对受审查嫌疑人,应提取其液体血为样本。DNA检验技术对于提取检材和样本的数量及保存亦有严格要求:液体血取3m1以上,加抗凝剂,密封在冰壶中保存送检。各种组织提取5克以上,密封,在一2O0C保存。各种斑迹提取后,阴干,一2O0C保存。带毛囊的毛发及烟头检材,亦应阴干,在一2O0C保存。各种检材、样本提取后及时送检。   六   我国辽宁省公安厅和公安部第二 研究 所自1987年开始研究DNA检验技术。至1989年,辽宁省已在十余起案件中应用。如1988年10月,辽宁省喀左县一女青年被奸杀,在重大嫌疑人李XX衣服上发现的血斑与李本人及受害人的血样均为B型,按以往的刑事检验手段无法进一步分辩。经DNA检验,确认李XX衣服上血斑系被害女青年的血,从而提供了铁证。1988年10月,沈阳市一名女工程师在家中被奸杀,现场遗留的避孕套内有精液。经排查,与被害人长期通奸的XXX嫌疑重大,其血型与现场精液同属B型,酶型检验均为PGM2-1型,又在现场发现了嫌疑人遗留的眼镜盒。在拘留审查过程中,嫌疑人时供时翻;无法结案。最后应用DNA检验技术,查明现场精液并非嫌疑人的,避免了一起错案。   继辽宁和公安部之后,天津市公安局刑科所是全国第三家把DNA技术应用于办案的单位。自1990年以来,刑科所已办理刑民事案件检验数十起,为发展公安 科技 事业和推动刑侦工作 现代 化做出了贡献。
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