椎间失稳诱发椎间盘退变的病理学观察.docx
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1、椎间失稳诱发椎间盘退变的病理学观察【摘要】 目的探讨新西兰大白兔腰椎关节突关节破坏能否诱发椎间盘退变的组织学改变。方法30只新西兰大白兔,体重 kg,雄性。随机分为骨性手术组和软组织手术组。软组织手术组仅骨膜下剥离L37的椎旁肌肉;骨性手术组完整切除L4、L5双侧下关节突、L5棘突,保留L5、L6上关节突。骨性手术组L4、5、L5、6椎间盘为实验组椎间盘,上下相邻的L3、4、L6、7为自身对照组椎间盘。软组织手术组L4、5、L5、6椎间盘为实验对照组椎间盘。术后1、2、4、及8个月行光学显微镜、电子显微镜检查。结果正常新西兰大白兔椎间盘由纤维环、髓核组成,纤维环胶原纤维排列规则,软骨样细胞镶嵌
2、其中。髓核组织由大量细胞外基质和散在的细胞组成。随着术后时间延长,实验组椎间盘纤维环胶原纤维排列紊乱,细胞数进行性减少。术后4个月,实验组椎间盘开始出现大量退变细胞,表现为外形不规则,细胞膜破裂,线粒体肿胀,细胞核位于周边,核浓缩,核膜皱缩,异染色质较正常增加,核仁消失。术后8周实验组椎间盘开始出现大量死亡细胞,表现为溶酶体明显增多,细胞核扭曲,粗面内质网扩张,线粒体空泡化,死亡细胞外周的“巢”增厚呈多层排列,致密颗粒增多。结论L4、5、L5、6关节突关节破坏导致椎间失稳,椎间失稳后可以诱发出椎间盘退变的组织学改变。【关键词】 椎间盘 退变 组织学Histological observatio
3、n of intervertebral disk degeneration caused by bilateral zygapophysial joints destructionAbstract:ObjectiveTo study whether intervertebral disk degeneration can be induced by destroying bilateral zygapophysial joints of NewZealand rabbit.MethodThirty male NewZealand rabbits were randomly divided in
4、to operation group on the bone and operation group on the softoperation group on the bone,L4 and L5 inferior articular processes were en bloc excised,L5 and L6 superior articular processes werethe operation group on the softtissue,Only L3 to L7 paravertebral muscles wereoperation group on the bone,L
5、4、5 and L5、6 intervertebral disks acted as experimental group;L3、4 and L6、7 acted as selfcontrolthe operation on the soft tissue,L4、5 and L5、6 acted as experimental control ,two,four and eight months postoperation,histological and ultrastructure organizations of intervertebral disks of NewZealand ra
6、bbits were performed.ResultThe normal rabbit discs formed a very complex system,with an outer anulus fibrosus surrounding a central nucleus pulposus in which collagen fibers aligned parallelly and intervertebral disk cells distributedfibers derangly aligned and intervertebral disk ceils declined wit
7、h time post the end of four months postoperation,many degenerative cells were found in the study group,which features as irregular cell contours,swelling chondrosome,rough endoplasmic reticulum,and condense nucleus located in the cellularmonths after operation,many dead cells wereincreased,cellular
8、nucleus became twisted,rough endoplasmic reticulums swelled,and chondrosome becameintervertebral disk cells were located in nidi which were made of multilayer degenerative collagen fibers.ConclusionHistological changes of intervertebral disk degeneration can be induced by destroying L4、5 and L5、6 zy
9、gapophysial joints of NewZealand rabbit.Key words:intervertebral disk; degeneration; histology制作动物模型,是开展病因、发病机理和治疗等方面研究的重要途径。人类椎间盘及同节段的双侧关节突关节组成脊柱运动单位的三关节复合体,文献1报道破坏椎间盘结构会造成同节段关节突关节增生、骨赘形成等。本研究利用这一特性,破坏新西兰大白兔关节突关节,观察造成椎间盘退变组织学改变。 1 材料和方法 动物分组及手术方法30只新西兰大白兔,质量 kg,雄性。随机分组,骨性手术组20只,用氯氨酮3550 mgkg、安定35 m
10、gkg联合肌肉注射,用50 ml注射器针头在X线片下透视定位后,俯卧位,以定位点为中心做长约5 cm的纵形正中切口,骨膜下剥离L46椎旁肌,暴露双侧关节突关节。切除L4、L5双侧下关节突、L5棘突,保留L5、L6完整的上关节突。L4、5、L5、6椎间盘做为实验组椎间盘,上下相邻的L3、4、L6、7做自身对照椎间盘;软组织手术组10只,不切除骨性组织,仅骨膜下剥离相同范围的肌肉,L4、5、L5、6椎间盘为实验对照组椎间盘。术后分笼饲养,自由活动。图1手术示意图光学显微镜观察术后1、2、4、及8个月骨性手术组各取4只、软组织手术组各取2只进行检查。用上法麻醉后,耳缘静脉注入510 mL空气致死。迅
11、速切取腰椎全段,用咬骨钳切除椎板及附着肌肉,分别取出L3、4、L4、5、L5、6、L6、7椎间盘。用4多聚甲醛溶液固定4872 h,用 molL乙二胺四乙酸脱钙2周,针刺法检测脱钙程度。再次修整标本,行梯度酒精脱水、二甲苯固定、石蜡包埋,椎间盘水平面、矢状面及冠状面切片,厚5 m。做HE、Masson三色、高碘酸-无色品红染色。Olympus公司BH-50光学显微镜下观察。 电子显微镜观察 扫描电子显微镜观察:同法将实验动物处死后,取出L3、4、L4、5、L5、6、L6、7椎间盘,去除上、下终板。样品固定:用24%戊二醛低温初固定24 h。用1锇酸后固定12 h。梯度丙酮溶液行样品脱水;样品干
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