生化组习题(配答案)-.doc
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生化测试一 氨基酸 一、填空题 1、氨基酸得结构通式为 。 2、氨基酸在等电点时,主要以 兼性/两性 离子形式存在,在pH>pI得溶液中,大部分以 阴离子形式存在,在pH<pI得溶液中,大部分以 阳 离子形式存在。 3、生理条件下(pH7、0左右),蛋白质分子中得 Arg 侧链与 Lys 侧链几乎完全带正电荷,但His 侧链带部分正电荷。 4、测定蛋白质紫外吸收得波长,一般在 280nm ,主要由于蛋白质中存在着 Phe、Trp、Tyr氨基酸残基侧链基团。 5、皮肤遇茚三酮试剂变成 蓝紫 色,就是因为皮肤中含有 蛋白质(氨基酸)所致。 6、Lys得pk1(—COOH)=2、18,pk2(—)=8、95,pk3(—)=10、53,其pI为 9、74。在pH=5、0得溶液中电泳,Lys向 负 极移动。 7、Henderson—Hasselbalch方程为pH=pKa+lg[质子受体]/ [质子受体]。 8、实验室常用得甲醛滴定就是利用氨基酸得氨基与中性甲醛反应,然后用碱(NaOH)来滴定 上放出得 NH3+/氨基。 9、一个带负电荷得氨基酸可牢固地结合到阴离子交换树脂上,因此需要一种比原来缓冲液pH值 小 与离子强度 高 得缓冲液,才能将此氨基酸洗脱下来。 10、用 N-溴代琥珀酰亚胺 试剂可区分丙氨酸与色氨酸。 二、选择题 1、区分极性氨基酸与非极性氨基酸就是根据 (C) A、 所含得羧基与氨基得极性 B、 所含氨基与羧基得数目 C、 所含得R基团为极性或非极性 D、 脂肪族氨基酸为极性氨基 2、下列哪一种氨基酸不属于人体必需氨基酸 (D) A、 亮氨酸 B、 异亮氨酸 C、 苯丙氨酸 D、 酪氨酸 3、下列哪一组氨基酸为酸性氨基酸: (D) A、 精氨酸,赖氨酸 B、 谷氨酸,谷氨酰胺 C、 组氨酸,精氨酸 D、 谷氨酸,天冬氨酸 4、含硫得必需氨基酸就是 (B) A、 半胱氨酸 B、 蛋氨酸 C、 苏氨酸 D、 亮氨酸 5、芳香族必需氨基酸包括 (D ) A、 蛋氨酸 B、 酪氨酸 C、 亮氨酸 D、 苯丙氨酸 6、含四个氮原子得氨基酸就是 (B) A、 赖氨酸 B、 精氨酸 C、 酪氨酸 D、 色氨酸 7、蛋白质中不存在得氨基酸就是下列中得哪一种?(D) A、 赖氨酸 B、 羟赖氨酸 C、 酪氨酸 D、鸟氨酸 8、在蛋白质中不就是L-氨基酸得就是(B) A、 苏氨酸 B、 甘氨酸 C、 半胱氨酸 D、 谷氨酰胺 9、谷氨酸得PK值为2、19, 4、25, 9、76; 赖氨酸得PK值为2、18, 8、95, 10、53; 则它们得PI值分别为(B) A、 2、19与10、53 B、 3、22与9、74 C、 6、96与5、56 D、 5、93与6、36 10、从赖氨酸中分离出谷氨酸得可能性最小得方法就是(D) A、 纸层析 B、 阳离子交换层析 C、 电泳 D、 葡萄糖凝胶过滤 11、用于确定多肽中N-末端氨基酸得就是(C) A、 Sanger试剂 B、 Edman试剂 C、 两者均可 D、 两者均不可 12、有一蛋白质水解物,在PH6时,用阳离子交换柱层析,第一个被洗脱得氨基酸就是(C) A、 Val (PI5、96) B、 Lys (PI9、74) C、 Asp (PI2、77) D、 Arg (PI10、76) 13、下列那种氨基酸属于非编码氨基酸?(D) A、 脯氨酸 B、 精氨酸 C、 酪氨酸 D、 羟赖氨酸 14、可使二硫键氧化断裂得试剂就是(C) A、 尿素 B、 巯基乙醇 C、 过甲酸 D、 SDS 15、没有旋光性得氨基酸就是(C) A、 Ala B、 Pro C、 Gly D、 Glu 16、 Sanger试剂就是(B) A、苯异硫氰酸酯 B、 2,4—二硝基氟苯 C、 丹磺酰氯 D、β-巯基乙醇 17、酶分子可逆共价修饰进行得磷酸化作用主要发生在哪一个氨基酸上 (B) A、 Ala B、 Ser C、 Glu D、 Lys 18、当含有Ala,Asp,Leu,Arg得混合物在pH3、9条件下进行电泳时,哪一种氨基酸移向正极(+)(B) A、 Ala B、 Asp C、 Leu D、 Arg 19、下列哪种氨基酸溶液不使平面偏振光发生偏转(B) A、 Pro B、 Gly C、 Leu D、 Lys 20、对哺乳动物来说,下列哪种氨基酸就是非必需氨基酸(C) A、 Phe B、 Lys C、 Tyr D、 Met 21、一个谷氨酸溶液,用5ml得1M得NaOH来滴定,溶液中得PH从1、0上升到7、0,下列数据中哪一个接近于该溶液中所含谷氨酸得毫摩尔数为 (B) A、 1、5 B、 3、0 C、 6、0 D、 12 22、下列AA中含氮量最高得就是(A) A、 Arg B、His C、Gln D、 Lys 23、下列在280nm具有最大光吸收得基团就是(A) A、色氨酸得吲哚环 B、酪氨酸得酚环 C、苯丙氨酸得苯环 D、半胱氨酸得硫原子 24、在生理pH值条件下,具有缓冲作用得氨基酸残基就是(C) A、 Tyr B、 Trp C、 His D、 Lys 25、下列关于离子交换树脂得叙述哪一个就是不正确得?(D) A、就是人工合成得不溶于水得高分子聚合物 B、阴离子交换树脂可交换得离子就是阴离子 C、有阳离子交换树脂与阴离子交换树脂两类 D、阳离子交换树脂可交换得离子就是阴离子 26、下列哪种氨基酸可使肽链之间形成共价交联结构(D) A、Met B、 Ser C、 Glu D、 Cys 27、下列氨基酸中哪个含有吲哚环?(C) A、Met B、 Tyr C、 Trp D、 His 三、名词解释 1、 α-氨基酸:就是含有氨基得羧酸,氨基连接在α-碳上。α-氨基酸就是蛋白质得构件分子。 2、 必需氨基酸:机体自身不能合成、必须从外界摄入得氨基酸种类。 3、 层析:层析技术又称色谱技术,就是一种根据被分离物质得物理、化学及生物学特性得差异,使它们在某种基质中移动速度不同而进行分离与分析得方法。 4、 纸层析:利用滤纸作为层析载体,按照混合物在移动相与固定相之间分配比例得不同,将混合成分分开得技术。 5、 离子交换层析:就是以离子交换剂为固定相,根据物质得带电性质不同而进行分离得一种层析技术。 6、 氨基酸得等电点:在某一pH得溶液中,氨基酸解离成阳离子与阴离子得趋势及程度相等,成为兼性离子,呈电中性,在电场中既不向阳极也不向阴极移动。此时溶液得pH值称为该氨基酸得等电点。 四、问答题(课后题6,7,14,15) 生化测试二 蛋白质 一、填空题 1、 决定多肽或蛋白质分子空间构像能否稳定存在,以及以什么形式存在得主要因素就是由 一级结构 决定得。 2、 用于测定蛋白质溶液构象得各种方法中,测定主链构象得方法有 圆二色性 与 拉曼光谱, 测定侧链构象得方法有 紫外差光谱 与荧光与荧光偏振,能测定主链与侧链构象得有 核磁共振。 3、 测定蛋白质中二硫键位置得经典方法就是 对角线电泳 。 4、 从混合蛋白质中分离特定组分蛋白质得主要原理就是根据它们之间得 溶解度、分子量/分子大小、带电性质、吸附性质、生物亲与力。 5、 血红蛋白与氧结合就是通过 变构 效应实现得、由组织产生得CO2扩散到细胞,从而影响Hb与O2得亲合力,这称为 波尔效应。 6、 蛋白质二级结构与三级结构之间还存在 超二级结构 与 结构域 两种组合体。 7、 蛋白质多肽链主链构象得结构单元包括 α-螺旋、 β-折叠 、β-转角,,维系蛋白质二级结构得主要作用力就是 氢 键。 8、 三肽val-tyr-ser得合适名字就是 缬氨酰酪氨酰丝氨酸。 9、 蛋白质得-螺旋结构中,3、6 个氨基酸残基旋转一周,每个氨基酸沿纵轴上升得高度为 0、15 nm,旋转 100 度。 10、凡能破坏蛋白质 水化层 与 电荷层 得因素,均可使蛋白从溶液中沉淀出来。 11、变性蛋白质同天然蛋白质得区别就是 生物活性丧失,紫外吸收增加,溶解度降低,易被酶消化。 12、聚丙烯酰胺凝胶电泳得分辨力之所以很高,就是因为它具有 电荷效应、分子筛效应、浓缩效应 三种效应。 13、交换层析分离蛋白质就是利用了蛋白质得 带电/解离 性质。阴离子交换层析在层析柱内填充得交换剂上带 正 电荷,可吸引带 负 电荷得蛋白质,然后用带 负 电荷得溶液洗柱将蛋白质洗脱下来。 14、当蛋白质分子中得一个亚基与其配体结合后,能影响此寡聚体中另一个亚基与配体得结合能力,此效应称为 协同效应。当Hb得第一个亚基与O2结合后,对其她三个亚基与O2得结合具有 促进 作用,这种效应称为 正协同效应。其氧解离曲线呈 S型。 15、 胰岛素原由 1 条肽链组成。 二、选择题 1、 下列描述中哪些叙述对一直链多肽Met-Phe-Leu-Thr-Val-Ile-Lys就是正确得( AC ) A、 能与双缩脲试剂形成紫红色化合物 B、 由七个肽键连接而成 C、 胰凝乳蛋白酶水解 D、 含有-SH 2、 _D__就是一种去垢剂,常用在凝胶电泳中,以测定蛋白质得分子量( ) A、 β-巯基乙醇 B、盐酸胍 C、碘乙酸 D、十二烷基硫酸钠 3、 以下氨基酸中哪一种可能会改变多肽链得方向与阻断a-螺旋(D) A、 Phe B、 Cys C、 Trp D、 Pro 4、 免疫球蛋白分子中二重链之间,以及重链与轻链之间,均以如下一种键得形式相连(C) A、 氢键 B、 疏水相互作用 C、 二硫键 D、 离子键 5、 蛋白质分子中α螺旋得特点就是(C) A、肽键平面完全伸展 B、靠盐键维持稳定 C、多为右手螺旋 D、螺旋方向与长轴垂 6、 为从组织提取液中沉淀出活性蛋白最有可能得方法就是加入(A) A、 硫酸铵 B、 三氯乙酸 C、 对氯汞苯甲酸 D、 氯化汞 E、 NH4Cl 7、 下述哪种分离方法可得到不变性得蛋白质制剂(D) A、苦味酸沉淀 B、硫酸铜沉淀 C、常温下乙醇沉淀 D、硫酸钠沉淀 E、加热 8、 有一个肽用胰蛋白酶水解得:①H-Met-Glu-Leu-Lys-OH②H-Ser-Ala-Arg-OH③H-Gly-Tyr-OH三组片段,用BrCN处理得:④H-Ser-Ala-Arg-Met-OH⑤H-Glu-Leu-Lys-Gly-Tyr-OH两组片段,按肽谱重叠法推导出该九肽得序列应为(C) A、 3+2+1 B、5+4 C、2+1+3 D、2+3+1 E、1+2+3 9、 蛋白质变性后,不发生下列哪种改变(C) A、生物活性丧失 B、易被降解 C、一级结构改变 D、空间结构改变 E、次级键断裂 10、 两个不同蛋白质中有部分得一级结构相同 (B) A、这部分得二级结构一定相同 B、这部分得二级结构可能不同 C、它们得功能一定相同 D、它们得功能一定不同 E、这部分得二级结构一定不同 11、 带电颗粒在电场中得泳动度首先取决于下列哪项因素(C) A、 电场强度 B、 支持物得电渗作用 C、 颗粒所带净电荷数及其大小,形状 D、 溶液得pH值 E、 溶液得离子强度 12、关于离子交换色谱得描述下列哪一项不正确(CD) A、离子交换剂通常不溶于水 B、阳离子交换剂常中离解出带正电得基团 C、阴离子交换剂常可离解出带正电得基团 D、阳离子交换剂常可离解出带负电得基团 E、可用于分离纯化等电点等于7得蛋白质 13、 对于蛋白质得溶解度,下列叙述中哪一条就是错误得(B) A、可因加入中性盐而增高 B、在等电点时最大 C、可因加入中性盐降低 D、可因向水溶液中加入酒精而降低 E、可因向水溶液中加入丙酮降低 14、 向血清中加入等容积得饱与硫酸铵溶液,可使 (E) A、 白蛋白沉淀 B、 白蛋白与球蛋白都沉淀 C、 球蛋白原沉淀 D、 纤维蛋白原沉淀 E、 只有球蛋白沉淀 15、 下列蛋白质中,具有四级结构得就是(D) A、 胰岛素 B、 细胞色素C C、 RNA酶 D、 血红蛋白 E、 肌红蛋白 16、下列哪种蛋白质不含铁原子(E) A、 肌红蛋白 B、 细胞色素C C、过氧化氢酶 D、过氧化物酶 E、 胰蛋白酶 17、下列各项不符合纤维状蛋白理化性质得就是(B ) A、 长轴与短轴在比值大于10 B、易溶于水 C、不易受蛋白酶水解 D、不适合用分子筛得方法测其相对分子质量 E、其水溶液黏度高 18、 血红蛋白得氧合曲线向右移动就是由于(AC) A、 O2分压得减少 B、 CO2分压得减少 C、 CO2分压得增加 D、 N2分压得增加 E、 pH得增加 19、 关于蛋白质三级结构得描述,下列哪项就是正确得(A) A、疏水基团位于分子内部 B、 亲水基团位于分子内部 C、羧基多位于分子内部 D、二硫键位于分子表面 20、镰刀型贫血病患者,Hb分子中氨基酸得替换及位置就是(D) A、α链第六位Val换成Glu B、β链第六位Val换成Glu C、 α链第六位Glu换成Val D、 β链第六位Glu换成 Val 21、下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时,最先被洗脱得就是(D) A、牛胰岛素(分子量5700) B、 肌红蛋白(分子量16900) C、牛β乳球蛋白(分子量35000) D、马肝过氧化物酶(分子量247500) 22、每分子血红蛋白可结合氧得分子数就是(D) A.1 B.2 C.3 D.4 23、免疫球蛋白就是一种什么蛋白(A) A.糖蛋白 B.脂蛋白 C.铁蛋白 D.核蛋白 24、特殊得羟-Pro与羟-Lys存在于下列哪种蛋白质中 (A) A、 胶原 B、 角蛋白 C、 肌球蛋白 D、 微管蛋白 三、就是非题 1、 蛋白质分子得一级结构决定其高级结构,最早得实验证据就是蛋白质得可逆变性(√)。 2、 原胶原纤维中参与产生共价交联得就是羟脯氨酸残基。(×) 3、 a-螺旋中Glu出现得概率最高,因此poly(Glu)可以形成最稳定得a-螺旋。(×) 4、 用重金属盐沉淀蛋白质时,溶液得PH值应稍大于蛋白质得等电点。(√) 5、 phe-leu-ala-val-phe-leu-lys就是一个含有7个肽键得碱性七肽。(×) 6、 pH8条件下,蛋白质与SDS充分结合后平均每个氨基酸所带电荷约为0、5个负电荷。(√) 7、 在Hb分子中,其F8His与E7His都分别以第五与第六位与血红素中得Fe配位相结合。(×) 8、 在蛋白质分子进化过程中,其空间结构得变化要比序列得变化更为保守。(√ ) 9、 使亚基间缔合成一个蛋白质得主要作用力就是次级键,而其中又以疏水基团之间得作用力最为普遍。(√) 10、二硫键与蛋白质得三级结构密切有关,因此没有二硫键得蛋白质就只有一级与二级结构。(×) 11、 任何一个蛋白质得紫外吸收得峰值都在280nm附近。(×) 四、名词解释 1、 蛋白质变性:蛋白质在某些物理与化学因素作用下,其特定得空间构象被破坏,也即有序得空间结构变成无序得空间结构,从而导致其理化性质改变与生物活性得丧失。 2、 结构域:指多肽链在二级结构或超二级结构得基础上形成三级结构得局部折叠区,它就是相对独立得紧密球状实体,称为结构域。 3、 同源蛋白质: 来自不同种类生物得序列与功能类似得蛋白质。 4、 Edman降解 :就是一种用来测定多肽与蛋白质氨基酸序列得方法。用苯异硫氰酸酯与多肽得N末端得氨基酸反应,从多肽链得N末端切下第一个氨基酸残基,用层析法可以测定在与这个被切下得氨基酸残基。余下得多肽链(少了一个氨基酸残基),再进行下一轮Edman降解循环,切下N末端得第二个氨基酸残基,并测定。重复循环过程,直到测出整个多肽得氨基酸序列。 5、β-转角:多肽链中常见得二级结构,连接蛋白质分子中得二级结构(α-螺旋与β-折叠),使肽链走向改变得一种非重复多肽区。常见得β-转角含有四个氨基酸残基,第一个残基得C=O与第四个残基得N-H氢键键合形成一个紧密得环,第二个残基大都就是脯氨酸。此结构多处在蛋白质分子得表面。 6、 蛋白质得超二级结构:也称之模序(motif),在蛋白质中由若干相邻得二级结构单元组合在一起,彼此相互作用,形成得有规则、在空间上能辨认得二级结构组合体。 7、 肽平面:肽键具有一定程度得双键性质,参与肽键得六个原子C、H、O、N、Cα1、Cα2不能自由转动,位于同一平面,此平面就就是肽平面。 四、问答题 1、某八肽得氨基酸组成就是2Lys, Asp, Tyr, Phe, Gly, Ser与Ala。此八肽与FDNB反应、酸水解后释放出DNP—Ala。用胰蛋白酶水解该八肽,得到两个三肽及一个二肽,其三肽得氨基酸组成分别为Lys, Ala, Ser与Gly, Phe, Lys。用胰凝乳蛋白酶(糜蛋白酶)水解该八肽,释放出游离得Asp及一个四肽与一个三肽,四肽得氨基酸组成就是Lys,Ser, Phe, Ala, 三肽与FDNB反应后,经酸水解释放出DNP—Gly。根据上述结果分析,写出该八肽得氨基酸排列顺序,并简述分析过程。(分析过程写在反面) Ala-Ser- Lys- Phe- Gly- Lys- Tyr- Asp 题1,胰蛋白酶、糜蛋白酶水解后氨基酸后“分别为”给人得感觉有歧义,好像就是构成一个顺序一样、仔细分析一下题,显然从题意来瞧水解得片段组成没顺序、 DNS-Ala不用说N端第一个氨基酸Ala确定了、胰蛋白酶切割左边精、赖氨酸位点,糜蛋白酶切割左边phe、trp、tyr位点、 糜蛋白酶水解产生游离得ASP 不用说八肽C端-phe-ASP顺序确定了、产物四肽含有phe,phe一定在四肽得C末端确定了、 胰蛋白酶水解产物Lys, Ala, Ser,显然Lys一定在C末端,这三肽顺序就确定ala-ser-Lys、又由于四肽包含了三肽Lys, Ala, Ser、显然四肽顺序为Ala-ser-Lys-Phe 现在只剩下2个氨基酸顺序没确定,又胰蛋白酶另一个水解三肽为Gly, Phe, Lys,而这个三肽中得phe又就是必定与ASP相连,Gly与Lys被两个phe夹着,要保证胰蛋白酶水解3,3,2得结果,故八肽顺序为:Ala-ser-Lys-Phe-Gly-Lys-Phe-Asp 2、试考虑一个由ala,arg2,glu2,asp2,gly,lys,ser,thr组成得十一肽,用Sanger试剂DNFB处理确定其N-末端为谷氨酸,经部分酸水解后得到下列各肽段: (asp,glu)、 (glu,gly)、(asp,glu,gly)、(ala,asp)、 (ala,asp,ser)、 (asp,glu,lys)、(ser,thr)、(asp,lys)、(arg,thr)、(arg2,thr)、(ala,asp,gly)、(arg,lys),请直接写出此十一肽得氨基酸全顺序。(注:给出得12个小肽段只表示氨基酸组成,而非顺序) glu-gly-asp-ala-ser-thr-arg- arg- lys –asp- glu 或 反向序列 N末端为Glu而十一肽、Lys只有1个,其为突破口(asp,lys) (arg,lys) 可知Lys必然被夹着,又(asp,glu,lys) 故glu-ASP-Lys-Arg, 当然N C末端还无法确定 由(ser,thr)(arg,thr)可知Thr只有一个也必然被夹着又由于(arg2,thr) 可知为Ser-Thr-Arg-Arg、2个Arg已确定故:glu-Asp-Lys-Arg-Arg-Thr-Ser、又(ala,asp,ser)(ala,asp,gly)可知Ser连接(ala,asp)然后与Gly相连,又(asp,glu,gly)可以确定gly与Asp相连故Ser-Ala-Asp-Gly、又(asp,glu,gly) 可以确定整个顺序Glu-Asp-Lys-Arg-Arg-Thr-Ser-Ala-Asp-Gly-Glu 推到出来两头都有Glu,此题似乎信息无法确定哪端就是N端哪端就是C端? 生化测试三 酶 一、填空题 1、 酶得活性中心有 结合部位 与 催化部位 两个功能部位,其中 结合部位 直接与底物结合,决定酶得专一性,催化部位 就是发生化学变化得部位,决定催化反应得性质。 2、 温度对酶活性得影响有以下两个方面,一方面 随着温度得升高酶活性增加,另一方面 过高得温度会使酶蛋白变性。 3、 酶活力就是指 酶催化一定化学反应得能力,一般用 单位时间内酶催化反应产物得增加量 表示。 4、 磺胺类药物可以抑制 二氢叶酸合成酶 ,从而抑制细菌生长繁殖。 5、 全酶有 酶蛋白 与 辅助因子 组成,在催化反应时,二者所起得作用不同,其中 酶蛋白 决定专一性与效率,辅助因子 起传递电子、原子或化学基团得作用。 6、 酶活性得快速调节方式包括 变构调节 与 可逆修饰。 7、 酶促反应得特点为 专一性、高效性、催化条件温与活性可调节。 二、选择题 1、 竞争性可逆抑制剂得抑制程度与下列哪种因素无关 (A) A、作用时间 B、抑制剂浓度 C、底物浓度 D、 酶与抑制剂亲与力得大小 E、 酶与底物亲与力得大小 2、 哪种情况可用增加[S]得方法减轻抑制程度 (B) A、不可逆抑制作用 B、竞争性可逆抑制作用 C、非竞争性可逆抑制作用 D、反竞争性可逆抑制作用 E、无法确定 3、 酶得竞争性可逆抑制剂可以使 (C) A、 Vmax减小,Km减小 B、 Vmax增加, Km增加 C、 Vmax 不变,Km增加 D、 Vmax 不变,Km减小 E、 Vmax 减小,Km增加 4、 下列常见抑制剂中,除哪个外都就是不可逆抑制剂 (E) A、有机磷化物 B、有机汞化物 C、有机砷化物 D、氰化物 E、磺胺类药物 5、 溶菌酶在催化反应时,下列因素中除哪个外,均与酶得高效率有关 (D) A、底物形变 B、广义得酸碱催化 C、邻近效应与轨道定向 D、共价催化 E、无法确定 6、 在一酶反应体系中,若有抑制剂I存在时,最大反应速度为V’max,没有抑制剂时得最大反应速度为Vmax,若V’max=Vmax(E0-I0)/E0,则I 为 (D) A、竞争性可逆抑制剂 B、非竞争性可逆抑制剂 C、反竞争性可逆抑制剂 D、不可逆抑制剂 E、不确定 7、 关于变构酶下列哪一种说法就是错得 (C) A、变构效应剂多为酶得底物或产物 B、存在催化与调节两个活性部位 C、反应符合米-曼氏方程式 D、反应曲线呈S形 E、一般由多个亚基组成 8、 酶得活化与去活化过程中,酶得磷酸化与去磷酸化得位点通常在酶得哪一种氨基酸残基上(D) A、天冬氨酸 B、脯氨酸 C、赖氨酸 D、丝氨酸 E甘氨酸 9、 以Hill系数判断,具有负协同效应得别构酶 (C) A.n>1 B、 n=1 C、 n<1 D、 n大于等于1 E、 n小于等于1 10.酶得抑制剂 (B) A、由于引起酶蛋白变性而使酶活性下降 B、使酶活性下降而不引起酶蛋白变性 C、只引起酶蛋白变性而可能对酶活性无影响 D、一般为强酸,强碱 E、都与底物结构相似 11.关于变构调节,正确得就是 (B) A、所有变构酶都有一个调节亚基,一个催化亚基 B、变构酶得动力学特点就是酶促反应与底物浓度得关系呈s形而不呈双曲线形 C、变构激活与酶被激活剂激活得机制相同 D、变构抑制与非竞争抑制相同 12.同工酶得叙述,正确得就是 (C) A、结构相同来源不同 B、由不同亚基组成 C、 电泳迁移率往往不同 D、对同一底物具有不同专一性 13.丙二酸对琥珀酸脱氢酶得影响属于 (C) A反馈抑制 B底物抑制 C竞争性可逆抑制 D非竞争性可逆抑制 E反竞争性可逆抑制 14.下列叙述哪一种就是正确得 (C) A所有辅酶都包含有维生素组分 B所有得维生素都可以作为辅酶得成分 C所有得B族维生素都可以作为辅酶得成分 D只有B族维生素可以作为辅酶得成分 E只有一部分B族维生素可以作为辅酶得成分。 15、 关于酶得必需基团得错误描述就是 (E) A、可催化底物发生化学反应 B、可与底物结合 C、可维持酶活性中心得结构 D、可存在于酶得活性中心以外 E、只存在于酶得活性中心 16、 某一符合米曼氏方程得酶,当[S]=2Km时,其反应速度V等于 (B) A、Vmax B、2/3Vmax C、3/2Vmax D、2Vmax E、1/2Vmax 17、 酶得非竞争性抑制作用得特点就是 (D) A、抑制剂与酶得活性中心结构相似 B、抑制剂与酶作用得底物结构相似 C、抑制作用强弱与抑制剂浓度无关 D、抑制作用不受底物浓度得影响 E、动力学曲线中Vmax不变,Km值变小 18、 关于修饰酶得错误描述就是 (C) A、酶分子可发生可逆得共价修饰 B、这种修饰可引起其活性改变 C、修饰反应可在各种催化剂催化下进行 D、磷酸化与脱磷酸就是常见得修饰反应 E、绝大多数修饰酶都具有无活性与有活性两种形式 19、 有关全酶得描述下列哪一项不正确(D) A、全酶由酶蛋白与辅助因子组成 B、通常一种酶蛋白与辅助因子结合 C、而一种辅助因子则可与不同得酶蛋白结合 D、酶促反应得特异性取决于辅助因子 E、酶促反应得高效率取决于酶蛋白 20、、酶得竞争性抑制作用得特点就是(B) A、抑制剂与酶得活性中心结构相似 B、抑制剂与酶作用得底物结构相似 C、抑制作用强弱与抑制剂浓度无关 D、抑制作用不受底物浓度得影响 E、动力学曲线中Km值不变,Vmax变小 21、下列哪个过程就是酶原得激活过程 (B) A、前胶原→原胶原 B、胰岛素原→胰岛素 C、凝血因子I→Ia D、凝血因子II→IIa E、糖原合成D→I 22、 已知两种酶互为同工酶(D) A、它们得Km得值一定相同 B、它们得等电点相同 C、它们得分子结构一定相同 D、它们所催化得化学反应相同 E、它们得辅基一定相同 23、 酶促反应得最适温度 (E) A、随时间延长而升高 B、就是酶得特征性常数 C、在人体内为50℃ D、都不超过50℃ E、就是在某条件下,酶促反应速度最大时得温度 三、就是非题 1、 Km就是酶得特征常数,只与酶得性质有关,与酶得底物无关。 (×) 2、 酶得最适PH值就是一个常数,每一个酶只有一个确定得最适PH值。 (×) 3、 金属离子作为酶得激活剂,有得可以相互取代,有得可以相互拮抗。 (√) 4、 竞争性可逆抑制剂一定与酶得底物结合在酶得同一部位。 (×) 5、 正协同效应使酶促反应速度对底物浓度变化越来越敏感。 (√) 6、 从鼠脑分离得己糖激酶可作用于葡萄糖(Km=6X10-6mol/l)或果糖(Km=2X10-3mol/l),则该酶对果糖得亲与力更高。 (×) 7、 判断一个纯化酶得方法优劣得主要依据就是酶得比活力与总活力。 (√) 8、 蛋白激酶对蛋白质磷酸化得部位除了Ser,Thr与Tyr外,还有His,Cys,Asp等。(√) 四、名词解释 1. 酶得变构调节: 酶在效应物得作用下发生构象改变,同时引起酶得活性变化得调节方式。就是一种可逆得快速调节方式。 2. 酶得活性中心:酶分子中少数几个氨基酸残基组成得特定空间结构,包括结合部位与催化部位。 3. 酶得活力单位: 就是指规定条件(最适条件)下一定时间内催化完成一定化学反应量所需得酶量。就是衡量酶活力大小得计量单位。有国际酶学会标准单位与习惯单位。 4. 比活力: 每单位(一般就是mg)蛋白质中得酶活力单位数(酶单位/mg蛋白),可以表示酶得纯度。 五、计算题 1、 测定一种酶得活性得到下列数据:底物得初浓度:1nmol/10ml;反应时间:10分钟 ;产物生成量:50nmol/10ml;蛋白质浓度:10mg/10ml;反应速度至少在10分钟内与酶活性呈正比,试问此酶得比活力(specific activity)就是多少? 把酶得活力单位定义为:在标准得测定条件下,1分钟内生成1摩尔产物所需得酶量。 则此酶得比活力为:50×10-9÷10÷10=5×10-10活力单位/ mg蛋白质 (注意要先根据题意定义酶得活力单位或说明使用国际单位) 2、 焦磷酸酶可以催化焦磷酸水解成磷酸,它得分子量为120000,由6个相同得亚基组成,纯酶得Vmax为2800单位/毫克酶。一个活力单位规定为:在标准得测定条件下,37℃,15分钟内水解10微摩尔焦磷酸所需得酶量。问: (1)毫克酶在每秒钟内水解了多少摩尔底物? (2)毫克酶中有多少摩尔得活性中心(假定每个亚基上有一个活性中心) (3)酶得转换数为多少? 1)根据Vmax为2800单位/毫克酶以及活力单位得规定可得: 2800×10÷(15×60)=31、1μmol= 3、1×10-5mol 2)根据酶得分子量为120000,由6个相同得亚基组成,并假定每个亚基上有一个活性中心,可得: 6×(1÷120000) = 0、00005mmol= 5×10-8mol 3)转换数定义为:每秒钟每摩尔酶(活性中心)催化中心转换底物得摩尔数。则: Kcat = (3、1×10-5 )÷(5×10-8)=622 S-1 生化测试四 核酸化学 一、填空题 1.碱基 与 核糖 构成核苷,核苷与 磷酸 构成核苷酸,核苷酸残基之间以 3’-5’磷酸二酯 键相连。 2.tRNA得二级结构呈 三叶草型 ,三级结构呈 倒L 型。 3.稳定DNA双螺旋结构得作用力有 碱基堆积力、氢键 与 静电作用力(盐键)。 4. DNA得稀盐溶液加热至某个特定温度,可使其物化性质发生很大改变,如 紫外吸收增加 与 黏度降低,这种现象叫做 变性。其原因就是由于 由于DNA得空间结构被破,内部碱基暴露。 5.Watson-Crick提出得双螺旋结构中,核糖与磷酸 处于分子外边,碱基 处于分子中央,螺旋每上升一圈bp数为10 。 6.mRNA 分子指导蛋白质合成,tRNA 分子用作蛋白质合成中活化氨基酸得载体。 7.核酸可分为DNA 与RNA 两大类,其中DNA 主要存在于 细胞核中,而 RNA 主要存在于 细胞质中。 8.双链DNA中若 G、C 含量多,则Tm值高。 9.双链DNA螺距为3、4nm,每匝螺旋得碱基数目为10,这就是 B型得DNA。 10.DNA双螺旋得熔解温度Tm与GC含量、均一性 与 离子强度 有关。 11.变性DNA得复性与许多因素有关,包括 DNA浓度,DNA长度,均一性,GC含量与 离子强度等。 12.核酸在260nm附近有强吸收,这就是由于 碱基环得共轭双键具有紫外吸收得能力。 二、选择题 1.DNA与RNA两类核酸分类得主要化学依据就是(D) A、空间结构不同 B、所含碱基不同 C、核苷酸之间连接方式不同 D、所含戊糖不同 E、在细胞存在得部位不同 2.m G得中文名称就是(C) A、 N2,N2 —二甲基鸟嘌呤 B、 N2,N2 —二甲基鸟苷 C、 C2,C2 —二甲基鸟苷 D、 2’— 甲基鸟苷 E、 C2’,C2’ —二甲基鸟苷 3.DNA受热变性,下列叙述正确得就是(D) A、 在260nm波长处得吸光度下降 B、 多核苷酸键断裂成寡核苷酸键 C、 碱基对可形成共价连接 D、 加入互补RNA链并复性,可形成DNA-RNA杂交分子 4.在一个DNA分子中,若A占摩尔比为32、8%,则G摩尔比为(C) A、 67、2% B、32、8% C、 17、2% D、65、6% E、 16、4% 5.tRNA在发挥其功能时得两个重要部位就是(E) A、反密码子臂与反密码子环 B、氨基酸臂与D环 C、TΨC环与可变环 D、 TΨC环与反密码子环 E、 氨基酸臂与反密码子环 6.对于tRNA得叙述,下列哪一项就是错误得?(D) A、细胞内有多种Trna B、 tRNA通常由70—80个核苷酸组成 C、参与蛋白质得生物合成 D、相对分子质量一般比mRNA小 E、 每种氨基酸都只有一种tRNA与之对应 7.RNA经NaOH水解,其产物就是(E) A、 5’-核苷酸 B、 2’-核苷酸 C、 3’-核苷酸 D、 2’与3’-核苷酸 E、 2’,3’与5 ’-核苷酸 8.对DNA片段作物理图谱分析,需要用(E) A、核酸外切酶 B、Dnase I C、DNA连接酶 D、DNA聚合酶 I E、限制性内切酶 9.下列哪一股RNA能够形成局部双螺旋?(B) A、 AACCGACGUACACGACUGAA B、 AACCGUCCAGCACUGGACGC C、 GUCCAGUCCAGUCCAGUCCA D、 UGGACUGGACUGGACUGGAC E、 AACCGUCCAAAACCGUCAAC 10.Western bootting就是用于下列杂交技术中得哪一个(D) A、 DNA-DNA B、 RNA-RNA C、 DNA-RNA D、 抗体-抗原结合 11.下列关于核酸结构得叙述,那一项就是错误得?(B) A、在双螺旋中,碱基对形成一种近似平面得结构 B、G与C就是两个氢键相连 C、 双螺旋中每10对碱基对可使螺旋上升一圈 D、 双螺旋中大多数为右手螺旋,但也有左手螺旋 E、 双螺旋中碱基得连接就是非共价结合 12.下列几种不同碱基组成比例得DNA分子,哪一种DNA分子得Tm值最高?(A) A、 A+T=15% B、 G+C=25% C、 G+C= 40% D、 A+T=80% E、 G+C= 35% 13.单链DNA:5’—pCpGpGpTpA— 3’,能与下列哪一种RNA单链分子进行杂交?(C) A、 5-pGpCpCpTpA- 3’ B、 5’-pGpCpCpApU-3’ C、 5’-pUpApCpCpG- 3’ D、 5’-pTpApGpGpC- 3’ E、 5’-pTpUpCpCpG- 3’ 14.核酶(ribozgme)得底物就是 (B) A、 DNA B、 RNA C、 核糖体 D、 细胞核膜 E、 核蛋白 15.有关PCR得描述下列哪项不正确:(D) A、就是一种酶促反应 B、引物决定了扩增得特异性 C、扩增得产量按Y=m(1+X)n D、扩增得对象就是氨基酸序列 E、扩增得对象就是DNA序列 16、原核生物与真核生物核糖体上都有(B) A、18S rRNA B、 5S rRNA C、 5、8S rRNA D、 30S rRNA E、 28S rRNA 三、就是非题 1.生物信息得流向只能由DNA→RNA,而决不能由RNA→DNA。(×) 2.在生物体内存在得DNA分子多为负超螺旋。(√) 3.若双链DNA中得一条链碱基顺序为pCpTpGpGpApC,则另一条链得顺序为pGpApCpCpTpG。(×) 4.用碱水解核酸,可以得到2’与3- 配套讲稿:
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