细菌分离培养及药敏试验方法及步骤.doc
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1、细菌分离培养方法及操作步骤无菌取血液或脏器、淋巴结划线接种于鲜血琼脂平板或血清琼脂平面培养基、普通肉汤培养基,37恒温培养24 h,观察其生长特性。目前细菌分离培养得常用方法有平板划线分离法、加热分离法与实验动物分离法。平板划线接种法这就是目前临床上最常用得分离接种方法。它可以从被检病料中通过划线可使细菌分离、分散生长而形成单个菌落(有利于从含有多种细菌得标本中分离出目得菌),以便挑选可疑菌落作纯培养加以鉴定。具体操作:1、 右手持接种环,在酒精灯上火焰灭菌;图1 病料采集 图2 接种环灭菌2、 待接种环冷却后,挑取被检料少许,左手持琼脂平板,以食指为支点,用拇指与无名指将平皿揭开一空隙。大约
2、20时,迅速地将接种环轻轻地涂布在培养基得边缘。3、 在涂布处来回移动作曲线形划线接种。(注意:划线时,以腕力使接种环在琼脂平板表面划动,尽量不要划破培养基,划得线条要密,但不能重复旧线,以免培养物形成菌苔。)图3 平板划线接种法4、划线完毕,合上平皿盖,将琼脂平板倒置,放入37温箱内培养1824小时。注意:分离培养用得平板培养基应表面干燥,可于临用前置37孵育箱内30分钟,这样表面即干燥有利于分离培养,又使培养基预温,对培养某些较娇弱得细菌有利。细菌药敏试验方法操作步骤药敏试验就是抗菌药使用以前必不可少得一个基本环节,一个正确得药敏结果能够科学得指导养殖户用药,减少抗菌素使用得盲目性,从而减
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