免疫技术.pptx
《免疫技术.pptx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《免疫技术.pptx(60页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、 第一节第一节 基本技术基本技术(一)、分离纯化抗原或抗体的一般理化技术 、沉淀法常用有机溶剂沉淀法、盐析法,用于蛋白粗提。2、过滤法 也称分子筛,一般用凝胶层析,为不完全筛。常用有葡聚糖、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等。3、离子交换色谱法常用有离子交换纤维素、离子交换葡聚糖等。4、亲合色谱法 常用有抗原或抗体交联葡聚糖、琼脂糖凝胶、戊二醛等。5、电泳法1)区带电泳(Zone electrophoresis)2)免疫电泳6、离心法(二)、制备单克隆抗体的方法 在免疫学实验中常需要取得纯化的特异性抗体。单克隆抗体是利用细胞杂交技术形成可分泌某种特异性抗体的肿瘤细胞,进行持续传代而获得的特异性抗体。
2、经典模式为通过抗原免疫动物(通常为小鼠)获得有关B细胞,使其与同系骨髓瘤细胞融合,选择出能产生针对该抗原的特异性抗体的稳定杂种瘤细胞,既有可持续传代的肿瘤细胞特性又有可分泌特异性抗体的特性 第二节第二节 体外抗原抗体反应及其应用体外抗原抗体反应及其应用1、体外抗原抗体反应2、经典的血清学反应3、免疫标记技术 抗原抗体反应抗原抗体反应1、抗原抗体的结合与析出2、抗原抗体反应的特点3、抗原抗体反应的影响因素引起抗原抗体结合的作用力引起抗原抗体结合的作用力1、电荷引力(库仑引力)2、电子云引力(Van der Waals力)3、氢键结合力4、疏水作用力抗原抗体结合物析出的原因抗原抗体结合物析出的原因
3、析出+电解质+抗原抗体反应的特点抗原抗体反应的特点1、特异性2、适合比例性3、可逆性特异性特异性抗原A抗原C抗原B特异性反应交叉反应无反应适合比例性适合比例性抗体含量抗原含量前带后带等价带网格学说网格学说(lattice theory)抗体过剩抗原过剩抗体抗体比例合适可逆性可逆性K(亲和常数)=Ag+AbAg Ab 抗原抗体反应的影响因素抗原抗体反应的影响因素1、电解质2、酸碱度(pH值6-8)3、温度(37-42。C)经典血清学反应的种类经典血清学反应的种类类型 抗原 抗体 辅助物 敏感度(g抗体氮)凝集反应 颗粒性 凝集素 0.01沉淀反应 可溶性 沉淀素 5-10溶血(菌)红细胞 溶血素
4、 补体 0.001-0.3反应 G-细菌 溶菌素 补体 (同上)补体结合 固定补 补体反应 体抗体 SRBC 溶血素 0.1中和反应 外毒素 抗毒素 靶细胞 0.01 病毒 中和抗体 靶细胞 (同上)直接凝集反应直接凝集反应颗粒性抗原凝集素正向间接凝集反应正向间接凝集反应可溶性抗原载体颗粒反向间接凝集反应反向间接凝集反应抗体可溶性抗原载体颗粒间接凝集抑制反应间接凝集抑制反应凝集凝集抑制待检样品待检样品Coombs试验试验抗人免疫球蛋白液相内沉淀反应液相内沉淀反应絮状沉淀反应环状沉淀反应+抗血清抗原抗原抗体免疫比浊凝胶内沉淀反应凝胶内沉淀反应免疫扩散技术免疫电泳技术单向扩散试验双向扩散试验火箭电
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 免疫 技术
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【丰****】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【丰****】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。