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选修三基因工程综合练习题

第I卷(选择题）

1．下列有关基因工程中限制性内切酶的描述,错误的是（）
A．一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B。限制性内切酶的活性受温度影响
Ｃ.限制性内切酶能识别和切割RNA
D．限制性内切酶可从原核生物中提取
2.下列叙述符合基因工程概念的是(）
A。B淋巴细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因
B.用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株
Ｃ.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得产生人干扰素原的菌株
D。自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNＡ整合到细菌DNA上
3。将人的生长激素基因导入鲫鱼，培育出能快速生长的鲫鱼新品种.该育种方法属于( 　　)
A.诱变育种 　 Ｂ．转基因技术
C．单倍体育种 D。杂交育种
4。采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是(）
①将毒素蛋白注射到棉受精卵中
②将编码毒素蛋白的ＤＮA序列注射到棉受精卵中
③将编码毒素蛋白的DＮＡ序列与质粒重组,导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞,再进行组织培养
④将编码毒素蛋白的DＮＡ序列与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵
A．①②B。②③C．③④Ｄ．④①
5。若利用细菌大量生产人胰岛素，则下列叙述不正确的是()
A．需有适当运载体将人胰岛素基因导入细菌
B．需有适当的酶对运载体与人胰岛素基因进行切割与黏合
C．重组后的DNA，须在细菌体内转录,翻译成人胰岛素
Ｄ．人胰岛素基因与运载体DＮＡ混合后,只得到一种DNA分子(重组DNＡ)
6．下列四条DＮA分子，彼此间间具有粘性末端的一组是

A．①② B．②③ﻩC．③④ﻩD．②④
7．基因工程中用来修饰改造基因的工具是（）。
Ａ。限制酶和ＤNA连接酶B.限制酶和ＤＮA水解酶
C。限制酶和运载体Ｄ.DNA连接酶和运载体
８。下列有关基因工程技术的叙述中，正确的是（ ）
A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体
B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列
Ｃ。选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快
Ｄ。只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达
9。基因工程的“四步曲”中未发生碱基互补配对的是（)
Ａ.用ＰＣＲ扩增抗病毒基因
B.将人的胰岛素基因与大肠杆菌质粒结合,形成重组质粒
C.将重组质粒导入受体细胞
D．抗病毒基因的表达
1０。质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是（ 　）.
①能自主复制　②不能自主复制③结构很小　④蛋白质⑤环状RＮA ⑥环状DＮA　⑦能“友好”地“借居"
A。①③⑤⑦ 　B.②④⑥　 Ｃ.①③⑥⑦ Ｄ。②③⑥⑦
11。利用生物工程技术能够实现对良种种畜的快速大量繁殖,以下哪项技术不具备此优点？
A。基因工程技术　Ｂ．细胞核移植技术C．胚胎分割技术 　 　　D．试管动物技术
1２．如果科学家通过转基因技术，成功改造了某女性血友病患者的造血干细胞，使其凝血功能全部恢复正常，那么预测该女性与正常男性结婚后所生子女的表现型为
A．儿子、女儿中各一半正常　 　Ｂ。儿子全部患病、女儿全部正常
C。儿子、女儿全部正常 　 　 　 D．儿子全部正常、女儿全部患病
１３．下列有关基因工程中载体的说法正确的是
A.质粒是一种独立于细菌拟核外的链状DＮA分子B.所有的质粒都可以作为基因工程中的载体
C.质粒载体的复制和表达不遵循中心法则D．作为载体的质粒常含有抗生素抗性基因
14.有人说：“转基因生物所转移的只是一两种自然界中已经存在的外源基因，它并不会改变生物原有的分类地位,充其量只能说是具有某种新特征的同一物种”。上述说法中是否是“同一物种”，关键应该看转基因生物与原来的生物是否具有()。
A．生殖能力 B.地理隔离　 C。生殖隔离ﻩＤ.能否杂交
15．下列哪一项不是动物基因工程的应用前景
Ａ．转入外源生长激素基因的鲤鱼
B．将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组
C.乳腺生物反应器表达医药产品
D．利用工程菌生产干扰素
16.基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中基因工程的核心是
A．目的基因的获取
B．基因表达载体的构建
C．将目的基因导入受体细胞
D。目的基因的检测与鉴定
1７．转基因动物是指
A．提供基因的动物
B．基因组中增加外源基因的动物
C．能产生白蛋白的动物
D．能表达基因信息的动物

第IＩ卷（非选择题)

18．根据下述材料，回答下列问题:
棉铃虫是一种严重危害棉花的害虫。我国科学家发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金芽孢杆菌,它能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死.而此毒蛋白对人畜无害。通过基因工程的方法,我国已将毒蛋白基因移入棉株细胞内并实现成功表达。由于棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡,所以该棉花新品种在１998年推广后，已经取得了很好的经济效益。
（1)害虫在喷洒农药进行化学防治后抗药性增强是＿＿____＿__的结果。
（２)毒蛋白对人畜无害,但那使棉铃虫致死，从蛋白质特性看，蛋白质具有_＿_＿______＿_＿_＿性。
（3）“转基因抗虫棉"抵抗害虫的遗传信息表达过程可以表示为__＿_＿__＿＿.
（４)“转基因抗虫棉”的抗虫变异，属于可遗传变异类型中的＿_＿_＿＿___.
（5）该项成果在环境保护上的作用是______＿___＿__＿_____＿_＿____。
（6）科学家预言,该棉花独立种植若干代后,也将出现不抗虫的植株，此现象来源于_＿_＿____＿___＿＿____＿__.
(７)题中“毒蛋白基因移入棉株细胞内并实现成功表达”中的“成功表达”含义是指__＿__＿_＿＿____＿__＿___。
(8）与杂交育种、诱变育种相比，基因工程培育新品种的主要优点是__＿＿＿___＿_______________＿。
(9）在该工程操作中,所用基因的“剪刀”是＿＿__＿___＿____＿___＿_，基因的“针线"是_＿_________＿_＿，基因的“运载工具”是＿_＿_＿＿________＿__。
１9．基因工程是在现代生物学、化学和工程学基础上建立和发展起来的，并有赖于微生物学理论和技术的发展运用。基因工程基本操作流程如下图所示，请据图回答：
质粒
A
②拼接
重组DNA
③导入
受体细胞
④扩增和筛选
含重组DNA的受体细胞
工程动物
工程植物
工程菌
优良动物
优良植物
表达产物
选育
选育
选育

（1)质粒可存在于细菌细胞内，它的化学本质是,标记基因的作用是，图中A是        ；在基因工程中,需要在          酶的作用下才能完成剪接过程.
(２)在上图基因工程的操作过程中，遵循碱基互补配对原则的步骤有          .（用图中序号表示)。
(3）研究中发现，番茄体内的蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有抑制作用，导致害虫无法消化食物而被杀死,人们成功地将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米体内，玉米获得了与番茄相似的抗虫性状，玉米这种变异的来源是                         。
（4）科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，并用基因工程的方法将该基因导入金茶花叶片细胞的染色体DNA上，经培养长成的植株具备了抗病性，这说明。如果把该基因导入叶绿体ＤNA中，将来产生的配子中
（填“一定"或“不一定”)含有抗病基因
20．（每空1分，共1２分）下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答：

（1）在基因工程中，Ａ表示目的基因,如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因,①过程使用的酶是;B表示构建的基因表达载体,其组成除了目的基因外,还必须有启动子、终止子以及等，其中启动子是酶识别和结合的部位。
(2)Ｂ→C为转基因绵羊的培育过程，其中②过程常用的方法是，使用的绵羊受体细胞为,④用到的生物技术主要有动物细胞培养和。若转基因绵羊可通过分泌的乳汁来生产人类蛋白质，在基因表达载体中，目的基因的首端必须含有，这种转基因动物称被为.
（3）B→Ｄ为转基因抗虫棉的培育过程，其中③过程常用的方法是,若使用的棉花受体细胞为体细胞，⑤表示的生物技术是。要确定目的基因（抗虫基因）导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作,请写出检测目的基因是否转录出了mＲNA,方法是，以作为探针。
2１。（12分）下图是利用转基因技术生产干扰素的简化流程.请分析回答:

（1）过程①使用的酶能使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的（化学键）断开.运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过而结合.过程②需要用到酶，
（2图中A的名称是＿＿______＿___,它重组成功的物质基础是__＿________＿__＿_＿___________的结构组成相同。
（3）Ａ上应有RNＡ聚合酶识别和结合的部位,以驱动干扰素基因转录，该部位称为。为直接检测干扰素基因是否转录，可从细胞中提取__与用放射性同位素标记的＿_＿__＿__＿___作探针进行分子杂交,。
（４)利用PＣR扩增仪大量扩增目的基因的前提是目的基因的核苷酸序列要有一段是已知的，以便根据这一序列合成,除了该物质和目的基因外,扩增仪中还需加入四种脱氧核苷酸和酶，并适时调整温度,才能使目的基因数量成指数式增长。
(５）在该工程中所用的基因“剪刀”能识别的序列和切点是—G′GAＴCＣ-。
请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图

22。以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。
(1)获得目的基因的方法通常包括 和 。
(２）切割和连接ＤNA分子所使用的酶分别是和 。
（3)运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或，后者的形状呈.
（４）由于重组DＮA分子成功导入受体细胞的频率,所以在转化后通常需要进行操作。
（5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和序列上是相同的
(6） 大肠杆菌是理想的受体细胞,这是因为它 ＿______
2３.基因工程又叫基因拼接技术。
（1）在该技术中,切割DＮＡ的工具是限制酶，它能识别某一特定核苷酸序列,使两个核苷酸之间的断开。限制酶切割产生的DNA片段末端有两种形式，分别是、。
　(2）基因工程中常用“分子缝合针”是连接酶，根据酶的来源不同可分为E·cｏlｉＤNA、两类，其中前者只可以连接,后者既可以连接也可以连接。
24。应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品.请根据资料和图解回答下列问题：
材料一：蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢”,有着超强的抗张强度，可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱.科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。
材料二：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦,将疫苗藏身于水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。

(1）过程①⑤所需要的工具酶有,构建的乙肝表面抗原蛋白基因表达载体一般由等部分组成。
（2）过程②是将重组质粒导入山羊受体细胞,受体细胞应选择，采用最多的也是最有效的导入方法是；
过程⑥是将重组质粒导入莴苣受体细胞，受体细胞可为，采用最多的导入方法是.
(3)通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。还可以形成膀胱生物反应器，从中提取所需蛛丝蛋白，简化提取过程.
资料三：PＣR技术（聚合酶链式反应)是一项在生物体外复制特定的ＤＮA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答:

（4）A过程高温使ＤNA变性解旋，对该过程的原理叙述正确的是:（ )
Ａ。该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键；
B。该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键；
C．该过程不需要解旋酶的作用；
D.该过程与人体细胞的过程完全相同;
（5）从图中可知，催化C过程的酶是,它与正常细胞内的酶区别是;PＣR反应除提供酶、DNA模板、通过控制温度使DNＡ复制在体外反复进行外,还需要满足的两个基本条件是。
（6)如果把模板DＮＡ的两条链用15Ｎ标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94℃-55℃－72℃”温度循环3次,则在形成的子代ＤNＡ中含有１5Ｎ标记的DＮＡ占。如果模板ＤNA分子共有a个碱基对，其中含有胞嘧啶m个，则该DNA复制10次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸个。

参考答案
1．C
【解析】生物体内有能识别并切割特异性双链DNA序列的一种核酸内切酶，它是一种可以将外来的DNA切断的酶，即能够限制异源DＮA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNＡ却无损害作用，这样可以保护细胞原有的遗传信息。由于这种切割作用是在DNＡ分子内部进行的,故叫限制性内切酶（简称限制酶）.限制性内切酶只能识别和切割DNA,不能识别和切割ＲNA。
２．C
【解析】
试题分析：基因工程通俗的说就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状，所以符合基因工程概念的是C选项.
考点：本题考查基因工程的概念，意在考查识记能力及对概念的理解应用。
3。Ｂ
【解析】
试题分析：人和鲤鱼属于两个不同的物种,根据题意将人的生长激素基因导入鲫鱼，培育出能快速生长的鲫鱼新品种,这是利用了转基因技术培育的鲫鱼新品种，Ｂ项正确.
考点:本题考查生物育种的有关内容，意在考查考生能理解所学知识要点的能力。
4。C
【解析】
试题分析：在基因工程中,需要将目的基因与运载体结合后才能导入受体细胞.对于植物而来可以将目的基因导入植物的体细胞中，然后通过组织培养技术获得抗虫棉；同时也可将目的基因导入受精卵中,故Ｃ正确。
考点：本题主要考查基因工程的过程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
5．Ｄ
【解析】
试题分析：基因工程的步骤为:获取目的基因、将目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测和鉴定，故ABC均正确；在目的基因与运载体结合时，有的能成功,有的不能成功,故D错。
考点：本题主要考查基因工程的过程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力.
６．Ｄ
【解析】
试题分析:粘性末端是指能够通过碱基进行互补配对的由图可知应选择②④，它们之间能进行互补配对，故选D。
考点:本题考查基因工程相关知识,意在考察考生对知识点的理解掌握程度。
７．A
【解析】
试题分析：基因工程中修饰改造基因的工具是限制性核酸内切酶和DNA连接酶，A正确.
考点：本题考查基因工程的有关知识,意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
8.C
【解析】
试题分析：重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶，运载体常用质粒，不是酶，A错误；一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，不同的限制酶识别的核苷酸序列不同,B错误;导入受体细胞中的目的基因主要是为了表达，生产目的基因的产物，因此能够快速繁殖是选择受体细胞的重要条件之一，C正确;目的基因进入受体细胞后，只有受体细胞表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过程，D错误。
考点:本题考查基因工程操作及原理的知识.意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力.
９．C
【解析】
试题分析:在基因工程中涉及碱基互补配对的过程有目的基因的提取，重组DＮA分子的形成过程和目的基因的表达，只有将重组DＮA分子导入到受体细胞的过程不涉及碱基配对。
考点：本题考查基因工程的四步曲，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构。
10．C
【解析】
试题分析:质粒是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状的DNA分子,它能“友好”地“借居”在宿主细胞中。Ｃ正确。
考点：本题考查基因工程中质粒的知识.意在考查能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。
11。A
【解析】
试题分析：基因工程是指按照人们的意愿，通过体外DＮA重组技术和转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，改变了生物性状，不能保持亲本优良性状,故Ａ错。细胞核移植技术可以快速获得与供体相似的个体，故Ｂ正确。胚胎分割技术将早期胚胎切割为几等份,经移植可获得同卵多胎，故C正确.试管动物技术利用体外受精和胚胎移植可缩短育种周期，故D正确。
考点:本题考查生物工程技术相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系能力。
12。B
【解析】
试题分析：题目描述的是基因治疗,把正常基因导入病人体内，是该基因表达产物发挥功能，达到治疗疾病目的,并没有改变患者的基因型.所以血友病女性与与正常男性结婚后所生子女的表现型为儿子全部患病、女儿全部正常，故B正确.
考点：本题考查基因治疗和伴性遗传相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系能力。
13.D
【解析】
试题分析：质粒是一种独立于细菌拟核外的环状ＤNＡ分子,故Ａ错。质粒表现含有1个至多个限制酶切割位点，和标记基因等,故Ｂ错。质粒载体是DNA,表达和复制遵循中心法则,故C错。作为载体的质粒常含有抗生素抗性基因,作为标记基因,共重组DNA的鉴定和性状,故D正确.
考点：本题考查基因工程载体相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系能力.
1４．Ｃ
【解析】
试题分析：是否具有生殖隔离，是判断是否是同一物种的标志.
考点：本题主要考查生殖隔离概念,意在考查考生对生殖隔离概念的理解,把握知识间的内在联系的能力。
1５．D
【解析】
试题分析：动物基因工程的应用有用于提高动物生长速度，如转入外源生长激素基因的鲤鱼；用于改善畜产品的品质，如将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组；用转基因动物生产药物，如乳腺生物反应器表达医药产品;利用工程菌生产干扰素是微生物基因工程的应用。
考点:考查动物基因工程的应用。
点评：难度较小,熟记动物基因工程的应用。
16。B
【解析】
试题分析:基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定，其中基因表达载体的构建是基因工程的核心.
考点：考查基因工程的操作步骤。
点评：难度中等，熟记基因工程的操作步骤。
１7.B
【解析】
试题分析：转基因动物是指利用基因工程技术改变基因组成的动物,即基因组中增加外源基因的动物;故选B。
考点：转基因动物。
点评：基础知识考查，基本概念的识记。
１8.（1)农药对害虫的变异类型进行选择(2)多样性
（3)抗虫基因→（转录）mＲNＡ→（翻译)蛋白质（４）基因重组
（5）减少农药对环境的污染，保护了环境(６)基因突变
(７)毒蛋白基因在棉花细胞内转录和翻译合成了毒蛋白
（８）目的性强,育种周期短,克服远缘杂交不亲和障碍
(9）限制酶 DNA连接酶运载体
【解析】
试题分析：(1)由于农药对害虫的变异类型进行选择，导致具有抗药性的害虫数量增加,抗药物增强。
（2）同一种毒蛋白对人畜无害，对棉铃虫致死，说明了蛋白质具有多样性。
（3)基因的表达过程包括转录和翻译。
(4）转基因引起的变异属于基因重组。
（5）“转基因抗虫棉”减少农药对环境的污染，保护了环境.
（６）抗虫棉后代出现不抗虫植株，其原因最可能是基因突变。
(７）成功表达说明毒蛋白基因在棉花细胞内转录和翻译合成了毒蛋白.
（8）与杂交育种、诱变育种相比，基因工程育种目的性强，育种周期短，克服远缘杂交不亲和障碍。
（９)基因工程中的剪刀是限制酶，针线是DNA连接酶,运载工具是运载体。
考点：考查基因工程的知识。
点评：难度较小，理解基因工程的过程。
19.（1） DNA 鉴别和筛选载体　 限制酶和DNＡ连接 （２)②④（3）基因重组　（４）目的基因(抗枯萎病的基因）已表达　不一定
【解析】
试题分析：图中A是目的基因，运载体是质粒，其本质是双链环状DＮA分子，运载体上的标记基因用于鉴别和筛选重组质粒。在基因工程中，需用限制酶切割含有目的基因的外源DＮA分子和运载体，之后需用ＤＮA连接酶连接目的基因和运载体形成重组DNA分子。基因工程的操作过程中，基因表达载体的构建和目的基因的扩增和筛选步骤需遵循碱基互补配对原则。通过基因工程技术使玉米获得了与番茄相似的抗虫性状,这属于基因重组。植株具备了抗病性,这说明目的基因（抗枯萎病的基因)已表达。如果把该基因导入叶绿体DＮA中，将来产生的配子中不一定含有抗病基因，若将该基因导入雌性植株的叶绿体DNＡ中，产生的配子中含有抗病基因,若将该基因导入雄性植株的叶绿体DNA中,产生的配子中不含有抗病基因。
考点:本题考查基因工程的相关知识。
点评:本题意在考查考生的识记能力、识图能力和理解能力,属于容易题。
20．（每空1分，共1２分)
(１）限制性核酸内切酶；标记基因；RNA聚合酶。
（2）显微注射技术;受精卵；胚胎移植；乳腺蛋白基因的启动子；乳腺(或乳房）生物反应器.
(3）农杆菌转化法;植物组织培养；分子杂交技术；放射性同位素标记的含有目的基因的DNＡ片段.
【解析】ＰCＲ技术的原理是DNＡ的复制，目的基因的检测和鉴定有DNA分子杂交法、DNAＲNA杂交法、抗原—抗体杂交法以及个体水平上的方法等。基因工程中利用限制酶和ＤＮA连接酶,基因表达载体的构建由启动子、终止子、目的基因和标记基因组成，将目的基因导入动物细胞的方法是利用显微注射技术，导入到受精卵中，导入植物细胞的方法是农杆菌转化法利用，将植物进行组织培养.在含有目的基因的DNＡ片段上用放射性同位素标记，以此作为探针，与基因组DＮA杂交，如果显示出杂交带，就表明目的基因已插入染色体DＮＡ中。过程二:采用DＮA分子杂交技术，从转基因生物提取的mＲＮＡ用放射性同位素标记，与ｍＲNA杂交,如果显示出杂交带，就表明目的基因转录出了ｍRNA.过程三：从转基因生物中提取出蛋白质，用相应的抗体进行抗原—抗体杂交,若有杂交带出现,表明目的基因已形成蛋白质产品.
2１．(1)(同一种）限制性核酸内切酶（限制酶）磷酸二酯键碱基互补原则ＤNA连接酶
（2）重组载体（重组质粒) 　干扰素基因的DNA与细菌质粒ＤＮA
（3）启动子RNA目的基因
（4）引物　 ＤNA聚合酶（Ｔaｑ酶）
（5)—Ｇ′GＡTCＣ--G GAＴCC-
-C CＴAGＧ——ＣCTＡG 　　　　 　 G—
【解析】(1）切割目的基因和质粒需用同一种限制性核酸内切酶.限制酶破坏脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,目的基因与质粒的黏性末端之间通过碱基互补配对连接起来，通过DＮＡ连接酶构建重组质粒。
（2)由于干扰素基因的DNA与细菌质粒DNA结构组成相同，所以可构建重组质粒。
（３)驱动基因转录的结构是启动子。检测目的基因是否转录，可从细胞中提取RNA与用放射性同位素标记的目的基因作探针进行分子杂交。
（4）PCR的条件需有引物和耐高温的DNA聚合酶，即Taq酶。
（5）黏性末端是两条链。
2２。（1)化学合成(人工合成）
从生物细胞分离　(从染色体DNＡ分离/酶切获取／鸟枪法)
（2）限制性核酸内切酶（限制酶）DNA连接酶
(３)质粒小型环状(双链环状、环状)
(４)低筛选
（5）氨基酸
（6) 繁殖快、为单细胞生物、遗传物质相对较少
【解析】获取目的基因的方法是从基因文库中提取，采用PCR技术扩增,人工合成目的基因；基因工程中的工具酶是限制酶和DＮA连接酶，运载体通常用动植物病毒和质粒，质粒通常为小型环状的DNA分子.重组DNA分子受体细胞的机率比较小，对是否导入和表达还需要进行检测。受体细胞的通常是繁殖快,易培养,遗传物质相对较少.
23．(1)磷酸二酯键黏性末端平末端
(２）、T4连接酶、黏性末端、黏性末端、平末端
【解析】限制酶切目的基因和运载体末端有两种形式：一是平末端，一是粘性末端，分子缝合针是ＤNA连接酶连接是磷酸二酯键，DNA连接酶常见有各种类型为: Ｅ·cｏｌiDNA连接酶和Ｔ4连接酶，E·ｃoliDNA连接酶连接的是粘性末端,T4连接酶连接粘性末端和平末端。主要是平末端。
24．（1)限制酶和DNA连接酶（1分，答案不全不给分）；乙肝表面抗原蛋白基因、启动子、终止子、标记基因（写全2分，不全面１分，顺序随意）
（2）山羊的受精卵细胞;显微注射法;莴苣的体细胞或受精卵细胞（答案不全不给分）；农杆菌转化法; 
（３）乳汁;尿液；（4）C；
（5)Ｔaq酶（热稳定DNＡ聚合酶）；耐高温;引物和四种游离的脱氧核苷酸（原料）（答案不全不给分)；
（6）25%；
【解析】(１）构建基因表达载体所需的酶有限制酶和DNＡ连接酶.基因表达载体包括乙肝表面抗原蛋白基因（目的基因）、启动子、终止子、标记基因。
（2）将目的基因导入动物细胞,选择的受体细胞是受精卵细胞,方法是显微注射法；将目的基因导入植物细胞,选择的受体细胞是体细胞或受精卵细胞，选择的方法是农杆菌转化法。
（３)乳腺生物反应器,是从动物的乳汁中获取蛛丝蛋白;膀胱生物反应器,是从动物的尿液中获取蛛丝蛋白。
(４）高温使DＮＡ变性解旋，不需要解旋酶。
（５）ＰCR技术中催化ＤNA复制的酶是Taq酶,耐高温，DＮＡ复制的条件有引物、酶、DNＡ模板、原料(四种游离的脱氧核苷酸）.
(6）DNA复制3次，共形成8个DNA,其中2个DNA，占1/4。该DNA中T有（a—m）个，DNA复制10次,需游离的胸腺嘧啶脱氧核苷酸（２1０—1)（a-ｍ）个。
基因工程的操作工具和操作程序练习题
班级 姓名
一、选择题
1.下面哪项不具有限制酶识别序列的特征(　 ）
A。GAATＴC Ｂ．ＧGGGＣＣCＣＣ.ＣTGCAＧ 　 　 D.CTAAＡTＣ
CTTAAＧ 　 CCCCＧＧGG　 　 GＡＣＧTC　　 　　 GATTTAＧ
２。EcoＲI和SmaⅠ限制酶识别的序列均由6个核苷酸组成,但切割后产生的结果不同,其识别序列和切割点（图中箭头处）分别如下图所示，请据图分析正确的是

A．所有限制酶的识别位点均由６个核苷酸序列组成
B。ＳmaⅠ限制酶切割后产生的是黏性末端
Ｃ。用连接酶连接平末端和黏性末端的连接效率一样
Ｄ．细菌细胞内限制酶可以切割外源DＮA,防止外源ＤNA入侵
3。下列DＮＡ片段能够用DNA连接酶连接起来的是

A。①和⑤ B．①和⑤、②和④ 　 Ｃ．①和③ 　 D．①和③、④和⑥
４。对基因组文库的描述,不正确的是　 　 　　　　 　 　 　 　
A。含有某种生物的全部基因
B.基因中含有启动子和内含子
C。文库的基因是通过受体菌承载的
D.文库中的全部基因可以在物种间交流
５．下表是基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容,正确的组合是 

目的基因供体
分子手术刀
分子缝合针
载体
受体
Ａ
质粒
限制性
内切酶
DNA连接酶
提供目的基因
的生物
大肠杆菌等
Ｂ
提供目的基因的生物
ＤNA连接酶
限制性
内切酶
质粒
大肠杆菌等
Ｃ
提供目的基因的生物
限制性
内切酶
DNA连接酶
质粒
大肠杆菌等
D
大肠杆菌等
ＤNA连接酶
限制性
内切酶
提供目的基因
的生物
质粒
6。目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过鉴定和检测才能知道.下列属于目的基因检测和鉴定的是①检测受体细胞是否有目的基因②检测受体细胞是否有致病基因
③检测目的基因是否转录ｍRNＡ 　 ﻩ④检测目的基因是否翻译蛋白质
ﻩA。①②③ Ｂ．②③④ C．①②④D．①③④
７．基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓ＧＡTCC－,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GＡTC—。根据图示判断下列操作正确的是 　 　 　 　 　

A.目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
Ｃ。质粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割
Ｄ．质粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割
8．人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是
A。提高受体细胞在自然环境中的耐药性　　 B.有利于对目的基因是否导入进行检测
C.增加质粒分子的分子量 　 　 D。便于与外源基因连接
9。 有关基因工程的叙述正确的是 (　　)
Ａ。限制性内切酶只在获得目的基因时才用 　 　Ｂ．重组质粒的形成在细胞内完成
Ｃ．质粒都可作运载体 　 　 D．蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料
10．下列有关基因工程中限制内切酶的描述，错误的是
A．一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B。限制性内切酶的活性受温度的影响
C．限制性内切酶能识别和切割RNＡ　
D．限制性内切酶可从原核生物中提取
线性DNA分子的酶切示意图
1１．已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、ｂ、c、d四种不同长度的ＤＮA片段。现在多个上述线性ＤNA分子,若在每个DＮA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲,经该酶切后,这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是
A．3　 Ｂ．4 　 C．9 　 　 Ｄ．１2
12。下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌Ｂ细胞内不含质粒Ａ，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是

A.将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法或基因枪法
B。将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌
C．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上,能生长的就是导入了质粒A的细菌
D.目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长
13．下图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤,这一步需用到的工具是

Ａ。ＤＮA连接酶和解旋酶 　 　 B。ＤＮA聚合酶和限制性核酸内切酶
C．限制性核酸内切酶和ＤＮA连接酶 　 　 　D．DNＡ聚合酶和RＮA聚合酶
1４。人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体加工合成。通过转基因技术,可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是
A.大肠杆菌 　B.酵母菌 Ｃ.T４噬菌体 　D．质粒DＮA
15．下图为用于基因工程的一个质粒示意图。用EcoRI限制酶切割目的基因和该质粒，再用DＮA连接酶连接形成重组质粒,然后导人大肠杆菌，最后将大肠杆菌放在四种培养基中培养:a一无抗生素的培养基，b一含四环素的培养基,c一含氨苄青霉素的培养基，d一含四环素和氨苄青霉素的培养基。含重组质粒的大肠杆菌能生长的是( ）

　Ａ．ａ 　 B．a和c　 C．a和b　 　　Ｄ．b和c

１
2
3
４
5
6
７
8
9
10
1１
12
1３
14
15

二、填空题
１6.为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。
(1)获得耐盐基因后，构建重组DＮA分子所用的限制性内切酶作用于图中的处，DNＡ连接酶作用于处.（填“ａ"或“b”）
(2)将重组ＤNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和法。
（3)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的作探针进行分子杂交检测，又要用方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

17．以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活.请回答下列问题。
(１）获得目的基因的方法通常包括和。
（2）切割和连接DNA分子所使用的酶分别是和。
（3)运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或，后者的形状成。
（4）由于重组DＮＡ分子成功导入受体细胞的频率,所以在转化后通常需要进行操作。
(5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌,从两者中生产的胰岛素在功能和序列上是相同的。

1８. 1９７0年，特明和巴尔的摩证实了ＲNA病毒能依赖RＮＡ合成DＮA的过程，并发现了催化此过程的酶.下面为形成cDNＡ的过程和ＰCR扩增过程示意图。请根据图解回答下列问题:

70～75℃
RNA单链
杂交双链
RNA链 DNA链
①
核酸酶H
单链DNA
②
双链DNA
90～95℃
③
55～60℃
④
⑤

（1）催化①过程的酶是；核酸酶H的作用是.
（2）③过程也称为DＮA的变性,此过程在温度高达90～９5℃时才能完成,说明DNA分子具有性。
（3）由图中信息分析可知，催化②⑤过程的酶都是,两者在作用特性上的区别是。

19。在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因,只含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长.下图为获得抗虫棉的技术流程.
侵
染
抗虫基因
含kan质粒
重组质粒
土壤农杆菌
含重组质粒土壤农杆菌
A
构建
导入
B
培养选择
转基因抗虫植株
再生植株
愈伤组织
离体棉花叶片组织
C
诱导选择
分化
D
检测

请据图回答：
（1）A过程需要的酶有___＿＿___＿______＿_________＿_＿_＿_＿__＿___＿_＿______。
（2）Ｂ过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是__________＿____＿＿__＿
__＿＿＿_______＿__＿_＿__＿__＿_＿______＿____＿__＿_＿＿_____＿____＿___＿_。
(4)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用__＿__＿_＿_＿＿_＿_＿_
＿____＿_______＿_＿___＿______＿_________________＿__＿作为探针。
（５）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
①将转基因植株与__________＿_____＿_____＿＿杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为１：１。
②若该转基因植株自交,则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为＿_______。
③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占_________＿__%。
除法的初步认识姓名:
平均分
1、填一填。
（1） 每份分得同样多，叫（ ）。
（2） 把9个面包平均分成3份，每份有（ ）个面包。
（3） 把10个橘子平均分成5份，每份有（ ）个；如果平均分成
2份，每份有（ ）个。
（4） 把15瓶矿泉水平均分成3份，每份有（ ）瓶。