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实验室生物安全手册第四版及相关专论实验室生物安全手册第四版实验室生物安全手册第四版实验室生物安全手册第四版及相关专论实验室生物安全手册，第四版 Laboratory biosafety manual,fourth edition(实验室生物安全手册，第四版 及 相关专论/Laboratory biosafety manual,fourth edition and associated monographs)ISBN 978-92-4-005924-5（网络版）ISBN 978-92-4-005925-2（印刷版）世界卫生组织 2023年保留部分版权。本作品可在知识共享署名非商业性使用相同方式共享3.0政府间组织（CC BY-NC-SA 3.0 IGO;https:/creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/igo/deed.zh）许可协议下使用。根据该许可协议条款，可为非商业目的复制、重新分发和改写本作品，但须按以下说明妥善引用。在对本作品进行任何使用时，均不得暗示世卫组织认可任何特定组织、产品或服务。不允许使用世卫组织的标识。如果改写本作品，则必须根据相同或同等的知识共享许可协议对改写后的作品发放许可。如 果对本作品进行翻译，则应与建议的引用格式一道添加下述免责声明：“本译文不由世界卫生组织（世卫组织）翻译，世卫组织不对此译文的内容或准确性负责。原始英文版本为应遵守的正本”。与许可协议下出现的争端有关的任何调解应根据世界知识产权组织调解规则进行(http:/www.wipo.int/amc/en/mediation/rules/)。建议的引用格式。实验室生物安全手册，第四版 Laboratory biosafety manual,fourth edition。日 内瓦：世界卫生组织；2023年(实验室生物安全手册，第四版 及 相关专论/Laboratory biosafety manual,fourth edition and associated monographs)。许可协议：CC BY-NC-SA 3.0 IGO。在版编目（CIP）数据。在版编目数据可查阅 http:/apps.who.int/iris。销售、版权和许可。购买世卫组织出版物，参见 http:/apps.who.int/bookorders。提交商业使用请求和查询版权及许可情况，参见 https:/www.who.int/zh/copyright。第三方材料。如果希望重新使用本作品中属于第三方的材料，如表格、图形或图像等，应自行决定这种重新使用是否需要获得许可，并相应从版权所有方获取这一许可。因侵犯本作品中任何属于第三方所有的内容而导致的索赔风险完全由使用者承担。一般免责声明。本出版物采用的名称和陈述的材料并不代表世卫组织对任何国家、领地、城市或地区或其当局的合法地位，或关于边界或分界线的规定有任何意见。地图上的虚线表示可能尚未完全达成一致的大致边界线。凡提及某些公司或某些制造商的产品时，并不意味着它们已为世卫组织所认可或推荐，或比其它未提及的同类公司或产品更好。除差错和疏忽外，凡专利产品名称均冠以大写字母，以示区别。世卫组织已采取一切合理的预防措施来核实本出版物中包含的信息。但是，已出版材料的分发无任何明确或含蓄的保证。解释和使用材料的责任取决于读者。世卫组织对于因使用这些材料造成的损失不承担责任。iii目录致谢 vi术语表 x前言 xv第1节 简介 11.1 预期适用范围 21.2 如何使用实验室生物安全手册 2第2节 风险评估 52.1 信息收集 82.2 风险评价 92.3 制定风险控制策略 142.4 选择并实施风险控制措施 152.5 审查风险和风险控制措施 20第3节 核心要求 233.1 良好的微生物学操作和程序 233.2 人员能力和培训 263.3 设施设计 263.4 标本的接收和保存 283.5 清除污染和废弃物管理 293.6 个体防护装备 343.7 实验室设备 353.8 应急/事件响应 373.9 职业健康 38实验室生物安全手册 第四版iv第4节 强化控制措施 394.1 操作实践和程序 394.2 人员的能力和培训 394.3 设施设计 404.4 标本的接收和储存 404.5 清除污染和废弃物管理 404.6 个体防护装备 414.7 实验室设备 434.8 应急/事件响应 444.9 职业健康 44第5节 最高防护措施 475.1 操作实践和程序 475.2 人员能力和培训 485.3 设施设计 485.4 标本接收和储存 495.5 去除污染和废弃物处理 495.6 个体防护装备 505.7 实验室设备 505.8 应急/事件响应 505.9 职业健康 50第6节 转移和运输 536.1 实验室内转移 536.2 建筑物内转移 546.3 同一现场的建筑物之间的转移 546.4 感染性物质在现场外的运输 55v目录第7节 生物安全规划管理 637.1 生物安全文化 647.2 生物安全政策 647.3 角色分配及职责 647.4 生物安全手册 657.5 生物安全和生物安全保障风险评估 657.6 支持性方案和计划 657.7 报告和审查 66第8节 实验室生物安全保障 698.1 生物安全保障风险评估 698.2 库存管理 708.3 信息控制 718.4 人员控制 718.5 物理性安全保障控制 718.6 运输控制 728.7 应急/事件响应 728.8 新兴生物风险 728.9 值得关注的两用性研究 73第9节 国际国内生物安全监督 75参考文献 77更多信息 81实验室生物安全手册 第四版vi致谢首席协调员KazunobuKojima博士，世界卫生组织，瑞士科学贡献者Allan Bennett先生，英国公共卫生署（世界卫生组织应用生物安全和培训合作中心），大不列颠及北爱尔兰联合王国Stuart Blacksell教授，牛津大学/马希敦-牛津热带医学研究处，泰国Marianne Heisz女士，加拿大公共卫生署（世界卫生组织生物安全和生物安全保障合作中心）Catherine Makison Booth博士，英国健康与安全执行局，大不列颠及北爱尔兰联合王国Michelle McKinney女士，美国疾病预防控制中心（世界卫生组织生物安全和生物安全保障合作中心）；美国国立卫生研究院Kathrin Summermatter博士，瑞士伯尔尼大学传染病研究所项目管理Lisa Stevens女士，世界卫生组织，法国Rica Zinsky女士，世界卫生组织，瑞士审核人个人Amadou AlphaSall博士，达喀尔巴斯德，塞内加尔William Ampofo博士，加纳大学野口纪念医学研究所saSzekely Bjrndal博士，瑞典公共卫生局ChristinaCarlson博士，世界卫生组织，瑞士；美国疾病预防控制中心（世界卫生组织生物安全和生物安全保障合作中心）Mike Catton博士，澳大利亚得多尔蒂感染和免疫研究所，彼维多利亚感染性疾病参比实验室vii致谢Sbastien Bruno Francois Cognat博士，世界卫生组织，法国Clarissa Damaso博士，里约热内卢联邦大学，巴西Francois Diaz博士，世界动物健康组织，法国Maureen Ellis女士，生物安全协会国际联合会，加拿大David Franz博士，美国Isabel Hunger-Glaser博士，瑞士生物安全专家委员会Kevin Karem博士，美国疾病预防控制中心（世界卫生组织生物安全和生物安全保障合作中心）Paul Meechan博士，美国疾病预防控制中心（世界卫生组织生物安全和生物安全保障合作中心）Masayuki Saijo博士，日本国立感染症研究所Rosemary Sang博士，肯尼亚医学研究所Christina Scheel博士，美国疾病预防控制中心（世界卫生组织生物安全和生物安全保障合作中心）Andrew Thompson先生，牛津大学，大不列颠及北爱尔兰联合王国审核人组织/协会/社会团体/政府部门WHO内部非洲地区办公室Mamoudou Harouna Djingarey,Yahaya Ali Ahmed,Tieble Traore,Sheick Oumar Coulibaly,Belinda Louise Herring美洲地区办公室Jean-Marc Gabastou东南亚地区办公室Aparna SinghShah,Francis Yesurajan Inbanathan欧洲地区办公室Joanna Zwetyenga,Caroline Sarah Brown,Eugene Victor Saxentoff东地中海地区办公室Frank Konings,Amal Barakat,Amany Ghoniem,Humayun Asghar 和Tarek Al-Sanoury,Heba Abdulridha,Rhizlane Selka西太平洋地区办公室VarjaGrabovac,OrlaCondell,Pakapak Ketmayoon,Karen Nahapetyan实验室生物安全手册 第四版viiiWHO抗生素耐药办Carmem Lucia Pessoada SilvaWHO应急预案处Jaouad MahjourWHO新发和危险病原实验室网络办Pierre FormentyWHO食品安全、动物源性和食源性疾病办Jorge Raul Matheu Alvarez,Amina Benyahia Chaieb,Kazuaki MiyagishimaWHO全球暴发预警和反应网Patrick Anthony DruryWHO全球感染性威胁预案部Sylvie Briand,Tim Nguyen,Matthew LimWHO全球流感项目办Magdi Samaan,Wenqing Zhang,Terry Gail Besselaar,Sandra JacksonWHO全球疟疾项目办Andrea Bosman,JaneA.CunninghamWHO全球结核病项目办Christopher Gilpin,Karin WeyerWHO卫生体系和创新办Ivana Knezevic,Tiequn Zhou,Hye-na Kang,Francis Gabriel MoussyWHO艾滋病办Meg Doherty,Lara Vojnov,Silvia BertagnolioWHO免疫、疫苗和生物学办Mick Mulders,Fatima Serhan,Deepa Sharma,Varja GrabovacWHO实验室网络办Mark Perkins,Karinvon Eije,Mariavan KerkhoveWHO脊灰消除办Daphne Moffett,Nicoletta Claudia Previsani,Ousmane(Madiagne)Diop,Harpal SinghWHO公共卫生实验室强化办Virginie Dolmazon,Cline Marie Josphine Barnadas,Jos Guerra,Christopher John Oxenford,Evelyne Chaignat Wyssen,Lisa Louise CarterWHO监管和资格预审办Irena Prat,Mark Lanigan,Anita SandsWHO研发蓝图 Vaseeharan Sathiyamoorthyix外部阿富汗生物安全协会、非洲实验室医学学会、美国生物安全协会,美国微生物学会,阿根廷生物安全委员会,国际生物安全和生物安全保障协会,科特迪瓦（捷克）生物安全保障协会,孟加拉生物安全和生物安全保障协会,肯尼亚生物风险管理协会,中亚和高加索地区生物安全协会,加勒比海公共卫生局,全球卫生保障中心查塔姆研究所,欧盟,欧洲疾病预防控制中心,欧洲临床微生物和感染性疾病学会,联合国粮农组织,格鲁吉亚生物安全协会,全球健康保障议程行动包预案3,希腊生物安全学会,印度医学研究理事会,墨西哥流行病学诊断与参比研究所（WHO实验室安全合作中心）,国际原子能局,国际生物安全和生物安全保障协调专家组,国际生物安全协会联盟,国际感染性疾病学会,国际微生物学会联合会,拉丁美洲微生物协会,马来西亚生物安全和生物安全保障协会,马尼帕尔大学高等教育学院（“卓越学院”视作大学）,墨西哥生物安全协会,摩洛哥生物安全协会,美国国立卫生研究院,荷兰遗传修饰委员会,荷兰国立公共卫生和环境研究所,巴基斯坦生物安全协会,葡萄牙实验室生物安全网络,西班牙生物安全协会,瑞典生物安全网络,美国健康和人类服务部,美国疾病预防控制中心（WHO生物安全和生物安全保障合作中心）制剂和毒素探寻部,美国疾病预防控制中心（WHO生物安全和生物安全保障合作中心）全球健康、实验室科学,世界动物健康组织。技术编辑Fiona Curlet女士经费支持本文件的编写和出版得到了加拿大全球事务部全球伙伴计划、美国国务院生物安全保障合约项目和美国国防部国防威胁降低局的经费支持。致谢实验室生物安全手册 第四版x术语表可接受风险：考虑到计划开展活动的预期收益，可接受的、不影响工作继续进行的风险。事故：导致实际伤害的意外事件，如感染、疾病、人身伤害或环境污染。气溶胶：悬浮在空气中的液体或固体微粒，可被吸入下呼吸道（直径通常小于10微米）。气溶胶/空气传播：因吸入气溶胶引起的感染传播。产生气溶胶的操作：任何有意或无意使液体或固体微粒悬浮在空气中生成气溶胶的操作。无菌技术：为有效防止污染而设计的条件和程序性措施。生物因子：自然产生或经过基因修饰的微生物、病毒、生物毒素、感染性微粒或材料，可能对人类、动物或植物造成感染、过敏、中毒等危险。生物安全柜（BSC）：为保护实验人员、实验室环境和/或实验材料而设计的外部封闭、内部通风的工作空间，空间内存在气溶胶危险。安全柜通过将特定工作区与其他实验室区域分隔开，和/或采用气流定向控制机制起到防护作用。排出的空气经过高效空气过滤器（HEPA）后再循环到实验室或进入建筑物的供暖、通风和空调系统。生物安全柜可分为不同的级别（I、II和III级)，提供不同级别的防护。生物安全：为防止意外暴露于生物因子或防止其意外泄露而实施的防护原则、技术和实践。生物安全委员会：作为独立的生物安全问题审查小组而成立的机构委员会，对高级管理层负责。生物安全委员会的成员构成应体现该组织覆盖的不同职业领域和科学专长。生物安全官：指定监督机构或组织的生物安全（可能包括生物安全保障）工作的人员。履行这一职能的人员也可称为生物安全专员、生物安全顾问、生物安全主管、生物安全协调员或生物安全管理顾问。生物安全规划管理：在机构层面，利用各种信息，包括机构政策、实践和流程指导文件、规划文件（培训、招聘、应急/事故响应）和记录材料（人员、物品清单、事故管理），制定、实施和监督生物安全工作。生物安全保障：为保护、控制生物材料和/或相关设备、技能及数据，并落实相关责任而实施的原则、技术和操作。生物安全保障的目的是防止未经授权的接触、丢失、盗窃、滥用、转移或泄露。xi校准：确立仪器测量值和已知标准值之间的关系，通过校正提高测量值的准确性。例如，移液器等实验室设备需要定期校准，以确保其性能正常。认证：基于系统评估的正式文件，由第三方机构提供的某系统、人员或设备符合特定要求（如某特定标准）的证明。操作规范（行为规范、伦理规范）：非立法规定的行为指南和操作标准，因被一个或多个组织和/或个人视为最佳实践而自愿采用。传染性：生物因子通过直接或间接方式从一个人或动物传到另一个人或动物的能力。通常与称作“基本再生数（R0）”的流行病学指标相关，也可以用R0代表传染性。R0是指在全体易感的人群中，某感染个体所造成的继发感染的平均数。（实验室事件的）后果：实验室操作过程中发生事件（暴露于生物因子和/或生物因子泄露)所造成的不同程度的损害结果。后果可能包括实验室相关感染、其他疾病或身体伤害、环境污染或生物因子的无症状携带。防护：物理设计参数与操作实践相结合，保护人员、工作环境和社区免于生物因子暴露。术语“生物防护”也用于此语境中。核心要求：世界卫生组织（WHO）实验室生物安全手册第四版中规定的一组最低要求，介绍了各种风险控制措施的组合。这些措施既是实验室生物安全的基础，也是其不可或缺的组成部分。它们反映了生物安全方面的国际标准和最佳实践，对于安全使用生物因子是十分必要的，即使在相关风险很小时也是必需的。清除污染：通过化学和/或物理手段，将环境表面或物体上的活性生物因子或其他有害物质减少到预定水平。消毒剂：能够消除物体表面或废液中的活性生物因子的制剂。由于消毒剂的性质、浓度、保质期以及消毒时间不同，其效果也不相同。消毒：为进一步安全处理或使用，清除物体或环境表面的活性生物因子的过程。飞沫：一种悬浮微粒，通常定义为直径超过10微米，容易从空气中沉降，从而导致附近物体表面污染。两用物项：某些材料、信息和技术是有益的，但可能因不当使用而造成伤害。应急/事件响应：处理突发或意外情况时（包括暴露于生物因子或生物因子泄露），需遵守的行为、操作程序和处理流程的总和。应急/事件响应的目的是防止感染或伤害，减少对设备或环境的损害，加快恢复正常运行。地方病：一种在特定地区或人群中自然发生的疾病。术语表实验室生物安全手册 第四版xii工程控制：在实验室或实验室设备的设计中内置的进行危险防护的风险控制措施。生物安全柜（BSC）和隔离器都是工程控制的形式，其作用是尽量减少生物因子暴露和/或意外泄漏的风险。输入性疾病：一种通常不发生在特定地区的疾病，常从另一地区传入。也可以称为非地方性疾病。暴露：个体靠近或接触生物因子并可能导致感染或伤害的事件。暴露途径可包括吸入、摄入、经伤口侵入和皮肤吸收，具体途径通常取决于生物因子的特性。然而，一些感染途径是实验室环境所特有的，在一般社区里并不常见。良好的微生物学操作和程序（GMPP）：基本的实验室操作规范，适用于与生物因子相关的所有类型的实验室活动，包括在实验室需始终遵守的常规操作和无菌技术。该规范旨在保护实验室人员和社区免受感染、防止环境污染以及保护工作中所使用的设备及材料。危险：可能对暴露其中的生物体、系统或（亚）人群造成不利影响的物体或情况。在实验室生物安全方面，危险的定义为可能对工作人员和/或人类、动物、广大社区和环境造成不利影响的生物因子。只有在考量危险造成损害的可能性及后果时，危险才能成为“风险”。强化控制措施：世界卫生组织实验室生物安全手册中描述的一系列风险控制措施。如果风险评估结果表明正在处理的生物因子和/或将要用其进行的活动存在某种风险，而仅依靠核心要求不能将风险控制在可接受范围内，则可能需要在实验设施中采取这些措施。灭活：通过破坏、抑制增殖或抑制酶活性来去除生物因子的活性。事件：导致或可能导致实验室人员暴露于生物因子或生物因子泄漏到环境中的事件，该事件并不一定会造成实际的伤害。感染剂量：引起宿主感染所需的生物因子的量，以生物体的数量表示。通常被定义为ID50，该剂量可导致50%的暴露个体感染。感染性物质：运输中使用的术语，指任何含有能够导致人类和/或动物感染的生物因子的固体或液体材料。感染性物质可包括患者标本、生物培养物、医学或临床废弃物、或者生物制品（如疫苗）。初始风险：在未采取风险控制措施的情况下，与实验室活动或程序相关的风险。实验室相关感染：任何由于在实验室活动中暴露于生物因子而导致的或合理推定因此而导致的感染。事故后发生的人际传播可产生关联的二代病例。实验室相关感染也被称为实验室获得性感染。（实验室事件发生的）可能性：指在实验室工作过程中事件（即暴露于生物因子和/或生物因子的泄露）发生的概率。最高防护措施：世界卫生组织实验室生物安全手册第四版中描述的一组极为严格和详细的风险控制措施。在实验室工作中，如果风险评估显示将要进行的实验活动对实验室人xiii员、广大社区和/或环境构成极高的风险，则有必要采取极高的保护措施。某些类型的生物因子的暴露或释放会引起灾难性的后果，尤其需要采取这些防护措施。大健康：多部门交流与合作，共同设计和实施相关方案、政策、立法和研究，以取得更好的公共卫生成果的工作。与大健康尤其相关的工作领域包括食品安全、人畜共患病控制和遏制抗生素耐药。病原体：能够引起人类、动物或植物疾病的生物因子。个人防护装备（PPE）：工作人员穿戴的设备和/或服装，是防护生物因子的屏障，将暴露的可能性降至最低。PPE包括但不限于实验服、隔离衣、连体服、手套、防护鞋、安全眼镜、防护眼罩、普通口罩和防护口罩。基本防护装置（设备）：指一个封闭的工作空间，在有气溶胶危险的活动中，为操作人员、实验室环境和/或实验材料提供保护。该装置通过将特定工作区与其他实验室区域分隔开，和/或气流定向控制机制起到防护作用。基本防护装置包括生物安全柜(BSCs)、隔离器、局部排气通风系统和通风工作空间。繁殖：有目的地增加或扩增生物因子数量的行为。预防性治疗：对可能发生的感染给予治疗，以预防感染或减轻感染的严重程度。在发生暴露之前或暴露后症状未出现时实施。冗余：系统或部分系统的备份，在主系统出现故障时提供保护。例如，使用一系列的高效空气过滤器（HEPA），以防止实验室空气在排到室外的过程中，一个或多个过滤器出现故障。剩余风险：实施精心选择的风险控制措施后，仍然存在的风险。如果剩余风险不可接受，则有必要采取额外的风险控制措施或停止实验室活动。风险：事件发生的可能性及其造成危害（后果）的严重程度的组合。风险评估：一个系统的过程，包括收集信息、评估工作场所有害物质暴露或释放的可能性及后果，并确定适当的风险控制措施以将风险降低到可接受的程度。风险沟通：关于风险的系统的、交互式的信息和观点交换过程，参与者包括不同类型的所有相关人员，必要时还包括社区领导和官员。风险沟通是风险评估中必不可少、持续进行的环节，有助于清晰的了解风险评估的过程和结果，目的是为了正确的实施风险控制措施。风险沟通的决策，包括存在哪些风险、谁有风险以及如何控制风险，也应是整体风险沟通策略的重要组成部分。风险控制措施：采取多种方法，包括沟通、评估、培训、以及物理和操作上的控制，使事故/事件发生的风险降低到可接受的水平。周期性风险评估决定了控制风险应采取的策略以及所需的风险控制措施的具体类型。风险评价：是风险评估的一部分，指在预先确定的一系列条件下（如特定的实验室程序），权衡暴露于危险的可能性和潜在危险的严重程度。风险评价的目标是确定所评估的风险是否可接受，或者是否应采取进一步有针对性的控制措施预防或降低风险。术语表实验室生物安全手册 第四版xiv安全文化：由共同工作的个人和组织在开放和彼此信任的氛围中逐渐培养和发展出的一套价值观、信念和行为模式（无论在适用的操作守则和/或法规中是否有相关规定）。安全文化可以支持和强化实验室生物安全的最佳实践。锐器：任何具有尖锐末端或边缘、能引起刺伤或划伤的物体或器具。在实验室里，锐器包括针头、带针头的注射器、刀片、手术刀或碎玻璃。标准操作规程（SOPs）：一套有充分记录的、已确证的步骤说明，介绍如何按照机构政策、最佳实践和所适用的国际国内法规，以一种安全、及时、可靠的方式实施实验室操作和相关流程。无菌：完全没有活性生物因子和孢子的状态。灭菌：杀死和/或去除包括孢子在内的所有生物因子的过程。传播：生物因子直接或间接地通过气溶胶、飞沫、体液、载体、水/食物或其他被污染的物品，从物体到生物体或在生物体之间转移。确认：系统的书面确认，即满足规定要求足以确保预期结果。例如，为了证明一种材料已去污，实验室人员必须根据化学、物理或生物指标的检测限，测量残余的生物因子，以验证去污方法的稳定性和有效性。验证：确认某一事物（产品、过程或体系）满足具体的规定要求。例如，应定期核实高压灭菌器的性能符合制造商的规定标准。人畜共患疾病（人畜共患病）：人和动物之间自然传播的传染性疾病。xv前言世界卫生组织（WHO）实验室生物安全手册第一版于1983年出版。该手册鼓励各国接受并采用生物安全领域的基本概念，制定国家级的业务法规，使管辖区域内的实验室能够安全的处理致病性生物因子。从那时起，已经有许多国家利用该手册提供的专家指导，制定此类法规。第二版和第三版的实验室生物安全手册分别于1993年和2004年出版。在每一次版本更新中，WHO都通过阐述新出现的问题、技术和挑战以及提供最佳实践的指导，持续发挥其在国际生物安全领域的引领作用。该手册此前的版本介绍了如何通过风险/危害级别以及生物安全/防护水平对生物因子和实验室进行分类。虽然这是处理和防护生物因子的一个逻辑起点，但也导致了一种误解，即生物因子的风险级别直接对应实验室的生物安全水平。事实上，特定情况下的实际风险不仅受到正在处理的因子的影响，还受到正在执行的程序和相关实验人员能力的影响。第四版手册建立在第三版引入的风险评估框架之上。对风险进行彻底、循证、透明的评估，可以以个案为基础，使安全措施与使用生物因子的实际风险达到平衡。这样，各国就可以根据自身条件和优先次序，实施经济上可行且可持续的实验室生物安全和生物安全保障政策及实践。1第1节简介实验室生物安全和生物安全保障活动，是保护实验室工作人员和广大社区免遭由意外暴露或致病生物因子泄露带来的危害的根本措施。这些活动通过风险评估框架和建设安全文化来实施，目的是采取充分的措施使任何潜在的暴露于生物因子的可能性及暴露后的损害程度降到最低，以确保工作区域的安全。世界卫生组织（WHO）实验室生物安全手册早前版本(1-3)问世后，相关领域内的生物安全意识和专业知识有了很大的发展和提高，新技术如分子学方法的使用也已经取得了相当大的进步，减少了需要繁殖高滴度生物因子的诊断活动的数量。对最近发生的实验室相关感染的回顾分析显示，其中大多数是人为因素导致的，而不是工程控制方面的问题(4,5)。导致潜在和已确认的生物因子暴露的因素包括，未使用个体防护装备（PPE）或防护装备使用不当(6,7)、忽视风险评估或评估不充分(8)、缺乏标准操作规程（SOPs）(9)、针刺伤(10,11)和/或人员培训不到位(12)。因此可以说，如果实验室的员工不称职，实验室的设计再优秀、工程再完善也无济于事。更新国际实验室生物安全指导文件是生物安全全球化倡议的组成部分，重视在拥有广泛的金融、技术和监管资源的国家可以推行的原则和方法。世卫组织于2005年修订了国际卫生条例，帮助国际社会预防和应对可能跨境并威胁全球健康的紧急公共卫生风险(13)。条例要求所有196个世卫组织缔约国为潜在的疫情暴发和新发疾病做好充分准备，包括进行实验室早期诊断和确认以促进感染的预防和控制。生物安全和生物安全保障也是国际卫生条例的监测和评估框架应用的技术领域。这些都表明了安全可靠的实验室操作是遵守国际卫生条例和预防紧急公共卫生威胁的重要组成部分。本版手册旨为生物安全的可持续发展提供指导，内容包括国家监管系统、培训、最佳实践和风险评估框架，以及建立遵守国际卫生条例和促进国家能力建设的可靠的安全文化。实验室生物安全手册 第四版21.1 预期适用范围为确保实验室设施、安全设备和工作实践适合本地情况、与之相称且可持续，第四版世卫组织实验室生物安全手册（LBM4）采取了以生物安全风险和循证为基础的方法，而不是已规定好的方法。此外，手册强调“安全文化”的重要性，包括风险评估、良好的微生物学操作和程序（GMPP）及标准操作规程（SOPs），为人员进行适当的基础培训、进修和指导性培训，及时报告事件和事故，并进行适当的调查和纠错。这种新方法旨在促进实验室设计，使其在保持生物安全控制的同时，具有更高的可持续性。对于兽医学实验室来说，这种基于风险的方法，是最近修订的世界动物健康组织（OIE）关于兽医学实验室和动物设施中生物风险管理标准(14)的有益补充。第四版手册提供了基于风险、技术中立且具有成本效益的方法以确保生物安全，对资源有限的设施也提出了可行的实验室操作的指导。这种方法为全球各地公平的使用临床和公共卫生实验室检测奠定了基础，并且在不影响安全的前提下，增加了生物医学研究的机会，而这在抗击传染病暴发方面的作用已变得日益重要。该手册还概述了生物安全保障的内容，该主题在另一份世卫组织指导文件(15)中有详细说明。手册中不包含动物病原体的信息，除非其可导致人畜共患病。动物病原体相关资料应参考管理兽医学实验室和动物设施生物风险的OIE标准(14)。本出版物专门为在工作中接触生物因子的人员，或可能暴露于危害人类健康的潜在感染性物质的设施中的人员提供指导。本手册有助于促进在日常实验室操作和程序中建立安全文化。对建设或更新实验室设施的机构、制定或实施生物安全方案及国家级生物安全监督框架的国家，也有一定价值。本手册的主要内容是实验室生物安全，包括管理、处理和防护对人类健康构成威胁的生物因子和材料。需要注意的是，对以下风险也应进行评估，包括1）与对植物、动物和/或环境有害的生物因子和材料有关2）与生物因子和材料无关的健康和安全风险因素，因为它们也存在于实验室环境中。LBM4中描述的以风险和询证为基础的生物因子和材料的生物安全和生物安全保障方法，也可应用于非生物危害的风险管理，如化学品、物理危害、不良人体工程学环境、过敏原、广泛的社会心理因素（如工作压力）以及对动物或环境构成实际或潜在威胁的生物危害（如携带绝育基因的节肢动物载体、对地方病或流行性生物因子更加敏感的转基因实验动物）。LBM4中概述的指导材料的广泛应用，可以提供全面、综合的实验室生物安全和生物安全保障方法，促进实验室对生物因子和材料的负责任的使用。应参考相关指导文件和国际最佳实践(16)，以获得该领域的更多信息。1.2 如何使用实验室生物安全手册本手册应作为国家现行规定和监管机制的补充，并用于地方的风险评估、控制和审查。因此，本材料涵盖如下领域：n风险评估、控制和审查，n生物安全的核心要求，n强化控制措施的选择，3第1节 简介n高风险操作的最高防护措施，n感染性物质的转移和运输，n生物安全规划管理，n实验室生物安全n国际和国内生物安全监督相关的专论也已经出版，这些材料提供了更详细的信息，有助于实施特定专题下的体系和策略。希望读者首先阅读本核心文件，需要更详细的信息时，可参考相关专论。这些专论包括：n生物安全规划管理(17)n风险评估(18)n生物安全柜和其他基本防护装置(19)n个体防护装备(20)n实验室设计和维护(21)n清除污染和废弃物管理(22)n暴发疫情准备与应对(23)5在实验室生物安全中，可能性是指暴露于生物因子和/或生物因子向实验室外泄漏的可能性。后果指如果发生暴露，其结果的严重程度。包括实验室相关感染、无症状携带、环境污染、疾病在周围社区传播、以及其他疾病或伤害。因此，评估暴露或泄漏的结果时，导致感染发生的因素如传播途径、感染剂量和传染性均需纳入考量。框2.1 实实实实实实实实实实实实实实风险评估如下所述，生物风险的控制，无论是在国家还是机构层面，都是通过实施风险评估获取信息的。风险评估这一术语用于描述一个分步实施的过程，包括评估工作中的危害造成的风险，并根据评估结果决定是否可以采取风险控制措施使风险降至可接受水平。风险是由危害引起伤害的概率以及损害的严重程度构成的组合。在实验室生物安全中，危害就是指生物因子，其致病特性使其有可能对暴露的人类或动物造成伤害。暴露于生物因子所造成的伤害性质各不相同，可以造成个体感染、损伤或疾病，也可以导致人群中的疫情暴发（见框2.1）。值得注意的是，危害本身并不会对人类或动物构成风险。例如，一小瓶含有生物因子（如埃博拉病毒）的血液在实验室人员接触瓶中的血液之前不会对其造成风险。因此，与生物因子相关的真正风险不能仅通过确认其致病性来确定，还必须考虑到采用该生物因子进行操作的实验类型以及在何种环境下进行操作。为了保证工作人员和周围社区的安全，任何处理生物因子的机构都有义务对将要进行的工作进行风险评估，选择和应用合适的风险控制措施以将风险降低到可接受的水平。风险评估的目的是收集和评估信息，用这些信息证明是否需要相应的程序、流程和技术以控制存在的风险。对这些信息的分析可以提高实验室人员的能力，使他们对生物风险及其影响方式有更深入的了解。同时，还有助于创造共同的价值观、行为模式和安全意识，使实验室人员更有可能安全的开展工作，维护实验室的安全文化。第2节实验室生物安全手册 第四版6图2.1说明了风险评估框架的步骤，而表2.1概述了评估周期的每个步骤中应考虑的主要问题。值得注意的是，并非所有因素都会以同样的方式影响相关风险，应认真考虑每个因素的作用。在进行风险评估时，必须记住风险不仅仅取决于生物因子的致病性，还取决于事件发生的可能性和后果换言之，即在实验室操作过程中暴露于生物因子和/或生物因子泄漏的风险。图2.1 风险评估的步骤框架收集信息评价风险制订风险控制策略选择和实施风险控制策略审查风险及风险控制措施风险评估必须始终以标准化、系统化的方式进行，以确保它们在相同的情境下的可重复性和可比性。因此，很多组织都提供了风险评估模板、检查清单或调查问卷，有步骤的识别、评估和确定与现有危害相关的风险，随后，利用这些信息确定适当的风险控制措施(24,25)。风险评估过程中的各种步骤构成了风险评估框架（图2.1）。7第2节 风险评估表2.1 实实实实实实实实实实实实实实实步骤需考虑的主要问题1.收集信息 （危害识别）n将要处理哪些生物因子？其致病特征是什么？n将要进行何种类型的实验室工作和/或程序？n使用何种类型的设备？n具备何种类型的实验室设施？n人员因素（例如人员的能力水平如何）？n还有哪些其他因素可能会影响实验室操作（例如法律、文化、社会经济、公众观念）？2.评估风险n暴露和/或泄漏是如何发生的？n暴露和/或泄漏的可能性有多大？n收集到的哪些信息对以上可能性的影响最大？n暴露和/或泄漏的后果是什么？n哪些信息/因素对后果的影响最大？n活动的总初始风险有多大？n什么是可接受风险？n哪些风险是不可接受的？n不可接受的风险是否可控，还是工作根本不应该继续？3.制定风险控制策略n实施风险控制措施可利用的资源有哪些？n哪些风险控制策略最适用于现有资源？n是否有足够的资源确保获取并维持这些风险控制措施？n在本地条件下，建议的控制策略是否可以实现、是否有效和可持续？4.选择并实施风险控制措施n是否有任何国际国内法规要求实施规定的风险控制措施？n当地有哪些可持续的风险控制措施？n现有的风险控制措施是否足够有效，是否应联合采用多种风险控制措施以提高有效性？n选定的风险控制措施是否与风险控制策略一致？n采取风险控制措施实施后的剩余风险是什么？目前的剩余风险是否可接受？n是否需要、是否具备额外的资源以实施风险控制措施？n选定的风险控制措施是否符合国际国内法规？n工作是否已获得批准？n风险控制策略是否已传达给相关人员？n必要物品是否已纳入预算且已经购入？n相关操作和维护程序是否已到位？n工作人员是否已接受过适当的培训？5.审查风险和风险控制措施n相关活动、生物因子、人员、设备或设施是否有任何变化？n是否有关于生物因子和/或相关过程的新知识？n从事件报告和事后调查中是否能够得到任何经验教训？是否需要据此进行改进？n是否确立了定期审查制度？实验室生物安全手册 第四版8应该注意的是，世界各地的实验室都可能会遇到一些独特的挑战，这些挑战会影响风险评估框架内各个部分的实施方式。相关挑战包括：生物风险管理的组织水平和财力资源、缺乏可靠的电力供应、基础设施不足、恶劣天气、实验室人员配备不足和培训不足。此外，在高于实验室管理的层面，国家监管框架的状态也会影响风险识别和控制的方式，而遵守国家法规是重中之重。由于这些原因，风险评估的结果和所采取的风险控制措施在不同实验室、不同机构、不同地区以及不同国家之间会出现很大的差异。以下各小节更详细的介绍了风险评估框架中每个步骤的活动，概述了风险评估最主要的组成部分和实施评估的关键考量。其他考虑事项和相关模板的详细信息，请参见专论：风险评估(18)。2.1 信息收集进行风险评估