APE1在肝细胞癌组织芯片的表达及临床病理意义.docx
《APE1在肝细胞癌组织芯片的表达及临床病理意义.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《APE1在肝细胞癌组织芯片的表达及临床病理意义.docx(14页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、APE1在肝细胞癌组织芯片的表达及临床病理意义 作者:郑智华, 黄爱民, 刘景丰, 臧盛兵, 高凌云, 陈水平【摘要】 目的 探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)基因在原发性肝细胞癌(HCC)的表达及其与临床病理变化的关系。 方法 应用免疫组织化学方法,检测包含HCC及转移灶、癌旁肝硬化组织、癌旁慢性肝炎组织和正常肝组织的组织芯片中APE1的表达情况,结合临床病理资料进行统计分析。 结果 APE1在癌旁肝硬化组织、癌旁慢性肝炎组织和正常肝组织以细胞核表达为主,在HCC和转移灶组织以细胞质细胞核联合表达为主()。细胞质与细胞核染色强度均与HCC分级和转移密切相关(),细胞质染色强度还与肿瘤
2、包膜有无浸润有关()。 结论 APE1蛋白表达与HCC恶性表型有关,APE1蛋白过表达及细胞质表达的出现可能成为HCC预后不良的指标之一。【关键词】 癌,肝细胞; 内切核酸酶类; 芯片分析技术; 免疫组织化学; 预后 ABSTRACT: Objective To study the association of apurinc/apyrimidinic endonuclease1(APE1) expression with clinicopathologic parameters in hepatocelluar carcinoma(HCC). Methods APE1 protein was
3、 detected in seven tissue chips, which contains HCC, para-carcinoma tissues, para-carcinoma choronic hepatitis tissues and normal liver tissues by immunohistochemistry. Detailed analysis of APE1 expression with clinicopathologic parameters was performed. Results APE1 was mainly detected in nuclei of
4、 para-carcinoma tissues, para-carcinoma chronic hepatitis tissues and normal liver tissues. While APE1 expressed in both nucleus and cytoplasm only found in HCC and metastatic tumor(). A statistic significantty correlation between the positive degree of APE1 expression in both nucleus and cytoplasm
5、with histological grade of HCC and metastasis(). Furthermore, the positive degree in cytoplasm was correlated with capsule invasion(). Conclusion The expression of APE1 is associated with the malignant phenotype of HCC. Overexpression and cytoplasm localization of APE1 can be used as a poorly progno
6、stic marker for HCC. KEY WORDS: carcinoma,hepatocelluar; endonucleases; microchip analytical procedures; immunohistochemistry; prognosis 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国最常见的恶性肿瘤之一,其癌变是一个多步骤的渐进过程,与慢性肝脏损伤、肝炎和肝硬化有关。脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)是一种多功能的碱基切除修复途径的关键酶,具有脱嘌呤/脱嘧啶位点(AP位点)核酸内切酶(APE)活性,修复烷化剂、氧自由基、电离辐
7、射等因素产生的DNA损伤。AP位点是DNA最常见的损伤位点之一,具有细胞毒性和基因毒性,若不能修复,可阻碍DNA的复制,导致基因突变、染色体微卫星不稳定性或细胞凋亡,最终可导致肿瘤的发生。APE1又名氧化还原因子1(Ref-1),可调节许多转录因子的DNA结合活性,参与细胞增殖、分化和细胞凋亡等多种关键的细胞反应。笔者采用组织芯片技术检测APE1在HCC、转移灶中的表达情况,分析APE1表达与HCC临床病理因素的关系。 1 对象与方法对象收集福建医科大学附属第一医院19982006年手术切除标本,其中HCC 126例,癌旁肝硬化组织(距癌组织2 cm,镜下无癌)95例,癌旁慢性肝炎组织(距癌组
8、织5 cm)46例,肝内外转移灶29例,术前均未化疗及放疗。男性114例,女性10例,60岁28例,60岁96例。根据中国常见肿瘤诊治规范对肿瘤进行组织学分类:梁状型、假腺管型、实体型、硬化型。根据Edmondson组织学分级法进行病理学分级分为I级,并判断有无包膜癌浸润和发生肝内外转移。根据肿瘤大小和数量分为3组:肿瘤直径3 cm,肿瘤直径35 cm,肿瘤数量2个或直径5 cm。另收集正常肝组织5例,来源于1998-2006年福建医科大学附属第一医院手术切除的肝血管瘤的瘤旁肝组织。方法鼠抗人APE1 mAb(克隆号13B8E5C2,美国Novus Biologicals公司),工作浓度118
9、 000;Elivision plus免疫组织化学试剂盒(Kit-9901,福州迈新生物科技有限公司)。按照免疫组织化学Elivision plus二步法试剂盒说明操作,DAB显色。以PBS代替一抗作为阴性对照。制作组织芯片根据研究目的设计点阵,选择典型区域在玻片和相应蜡块做标记。将本研究小组已制成的定位板盖在受体蜡块上1,按照定位板的点阵打孔,并从供体蜡块已标记的典型区域钻取组织,每个区域3个组织孔,转移到受体蜡块的承载孔。将组织芯片和周围蜡质加热融合。结果判断参照Bamberger等的半定量积分法2,在光镜下分别对阳性染色细胞数和染色强度进行判定。取表达最强的部分,按着色程度计分,无着色者
10、为0分;浅黄色、略高于背景者为1分;棕黄色、明显高于背景者为2分;强染、棕褐色者为3分。同时按阳性细胞数计分,5为0分,625为1分,2650为2分,5175为3分,75%为4分。两项相加后分4级:01分为阴性(),2分为阳性(),34分为中等阳性(),5分以上为强阳性()。取各点的平均值综合判断。统计学处理采用SPSS 统计软件分析,选用参数秩和检验对两个样本半定量等级资料进行分析,选用Kurskal-Wallis H 检验对多个样本半定量资料进行分析,选用Spearman秩相关进行指标间的相关分析。2 结 果 组织芯片免疫组织化学封片后观察,部分组织有脱片,以每个病灶的3个点(至少有2个点
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- APE1 肝细胞 组织 芯片 表达 临床 病理 意义
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【快乐****生活】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【快乐****生活】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。