急性和慢性帕金森病大鼠血脑屏障通透性变化的研究.docx
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1、急性和慢性帕金森病大鼠血脑屏障通透性变化的研究【摘要】 目的通过观察帕金森病大鼠在不同时间点脑组织中伊文斯蓝(EB)含量变化来探讨急性和慢性PD大鼠血脑屏障通透性的变化。方法脑立体定向将6羟基多巴胺注入大鼠右侧纹状体建立PD模型。将大鼠随机分成对照组和模型组,后者又分为6 h,12 h,24 h,4周组,最后一组为慢性PD组。按BELAYEV法使用EB测定BBB通透性。结果急性PD大鼠BBB通透性在6 h达到高峰,12 h逐渐下降,持续至24 h,慢性PD大鼠与对照组相比无明显差异。结论急性PD时伴有BBB的通透性增加,而慢性PD时BBB的通透性未见改变。【关键词】 帕金森病; 血脑屏障; 伊
2、文斯蓝Abstract:ObjectiveTo study the alteration of blood-brain barrier (BBB) with parkinson diseasemeasured by EB content in the brain tissue of rats with acute and chronic parkinsonparkinson disease model was established by direct injection of 6-OHDA into the right striatumrats were randomly divided i
3、nto control group and modelrats in model group were killed at hour 6, hour 12, hour 24 and weeklast group was chronic parkinson Disease ratBBB permeability was assessed by BelyaevsBBB permeability reached the peak at hour 6 after 6-OHDA acute lesion,then decreased at hour 12,lasted until 24 h.The BB
4、B permeability of chronic parkinson disease rats had no significant difference as compared with control group. ConclusionThe permeability of BBB will increase in acute parkinson disease rats but has no change in chronicity parkinson disease rats.Key words: Parkinson Disease; Blood-brain barrier; Eve
5、ns Blue 帕金森病是一种常见的中老年性疾病,主要病理学特征是中脑黑质部位多巴胺(dopamine,DA)能神经元变性死亡1,引起纹状体内DA递质含量显着降低。6羟基多巴胺作为DA神经元的化学切断剂,注入脑内可引起DA神经细胞急性损伤致DA含量下降。短期应用可致急性PD模型,长期应用可制作慢性PD模型。我们将6OHDA注入鼠脑右侧纹状体分别建立急性和慢性PD模型,通过测量伤侧脑组织伊文斯蓝(Evens Blue,EB)含量来观察血脑屏障通透性的改变,以探讨BBB的改变在急性和慢性PD发生中的作用。1 仪器与材料1 仪器和试剂脑立体定位仪,牙科钻,Varioskan Flash 型酶标仪,H
6、M202型十万分之一天平,HHS精密电热恒温水浴锅(江苏金坛市医疗仪器厂),高速冷冻离心机;6OHDA(sigma 公司),阿朴吗啡(sigma 公司),甲酰胺,伊文斯蓝(上海新中化学厂生产),Millipore超纯水系统。2 动物分组 健康雄性Wistar大鼠,体重220250 g室温2025,湿度50%70%饲养,白天-黑夜分别12 h睡眠和活动,自由进食、饮水。随机分为对照组和模型组,后者按损伤后不同观察时相点又分为6 h,12 h,24 h,4周组。每组6只。2 方法动物模型制作实验鼠用%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,固定于脑立体定位仪上,齿杆较耳杆低约 mm。头皮正中切口约6 cm,剥离骨
7、膜,暴露前囟。定位方法依据PaxinosWatson所着The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates找到前囟。在右侧纹状体钻一直径为1 mm的小孔,用固定于立体定位仪上的微量注射器延针孔垂直进针。模型组:用10 l微量注射器抽取6 l 6OHDA注入右侧纹状体内,注射速度 l/min,进药后留针15 min,退针5 min。缝合头皮,腹腔注射庆大霉素以预防感染。对照组:接受同样位点的注射,注射生理盐水6 l,其他过程同模型组。术后放回笼中,单笼饲养,常规饲料,自由进食、饮水。行为学检测筛选慢性PD模型 第4组实验鼠术后第2周开始经皮下注射新鲜配制的阿朴吗啡,
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