柴胡有效成分提取工艺的研究.docx
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1、柴胡有效成分提取工艺的研究【摘要】目的确定柴胡有效成分提取的最佳工艺。方法以柴胡中挥发油吸收度和柴胡皂苷a的含量为指标,采用单因素实验筛选主要因素和水平,再以正交实验筛选柴胡有效成分提取最佳工艺。结果最佳工艺参数为40温浸,收集相当于药材2倍量蒸馏液,继用8倍量含5%氨水的95%乙醇回流1 h提取柴胡皂苷,可使挥发油吸收度达,柴胡皂苷a的含量达%。结论该工艺为柴胡有效成分的提取提供了可靠依据,且工艺条件稳定可靠,重复性好。 【关键词】提取工艺 柴胡皂苷a 挥发油 正交实验 Abstract:ObjectiveTo determine the optimum technology of acti
2、ve ingredients from Bupleurum chinensethe absorbance of volatile oils and the content of saikosaponin a in Bupleurum chinense DC as indexes, the major influencing factors and levels were observed by single factor experiment, and the optimum technology was optimized by orthogonal experiment. ResultsT
3、he optimum condition was as follows: the impregnating temperature was 40 ,the volume of distilled fluid was 2 times of wght of Bupleurum chinense DC, and the volume of 95%alcohol with 5%ammonia water to reflux extraction for 1hour was 8 times of wght of Bupleurum chinense DC, then the absorbance of
4、volatile oils wasand the content of saikosaponin a was %.ConclusionThe optimum technology provides reliable evidence for extraction of active ingredients from Bupuleurum chinense DC, and the conditions are accurate and reliable with good reproducibility.Key words:Extraction technology; Saikosaponin
5、a; Volatile oils; Orthogonal experiment柴胡为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狭叶柴胡Bupleurum scorzonerifolium Wild的干燥根1。具有疏散退热、疏肝解郁、升阳举陷之功效,为中医 治疗 少阳症的首选要药。其主要化学成分为柴胡皂苷和挥发油类。柴胡作为常用药,中成药制剂品种众多,且大多以煎煮法提取柴胡皂苷类成分,而多以水蒸气蒸馏法提取挥发油2。由于柴胡皂苷a、d化学结构均具不稳定性,遇酸或受热易分别降解生成活性较弱的次生苷b1,b2,因此随着水蒸气蒸馏法提取时间的延长,柴胡皂苷a,d的含量将逐渐降低,以致
6、严重影响了柴胡制剂的质量和临床疗效。目前国内关于柴胡提取工艺的 文献 报道较多,但多以挥发油或柴胡皂苷a单独为指标进行考察,很少有同时考察挥发油和柴胡皂苷a的文献报道,更是未曾有文献报道过在保证挥发油提取率的同时还兼顾柴胡皂苷a的充分提取。因此,本研究采用正交实验综合考察柴胡中挥发油吸收度和柴胡皂苷a含量,筛选最佳工艺,以期为提高柴胡制剂的质量和疗效打下坚实基础。1 仪器与试药仪器岛津LC-20A高效液相分析仪;752紫外分光光度计;RE 52-86A 旋转蒸发器;METTLER AE240 电子 分析天平。试药柴胡药材购于河南省药材公司,经本院陈随清教授鉴定为伞形科植物柴胡 Bupleuru
7、m chinense DC.的干燥根;柴胡皂苷a对照品自制,经峰面积归一化法测定含量为:% ;乙腈为色谱纯;水为双重蒸馏水;其他试剂均为分析纯。2 方法单因素实验分别以药材浸渍温度、浸渍时间、料液体积比、蒸馏液收集量等为因素,在不同水平下进行单因素实验,筛选出影响柴胡挥发油提取的主要因素和水平,同样分别以乙醇浓度、pH值、柴胡皂苷提取时间、料液体积比等为因素,在不同水平下进行单因素实验,筛选出影响柴胡皂苷提取的主要因素和水平。从而为正交实验设计提供依据。挥发油的提取和测定方法随机称取50 g柴胡干燥粗粉,置于500 ml圆底烧瓶中,采用水蒸气蒸馏法在不同条件下提取柴胡挥发油,收集蒸馏液,加3%
8、丙二醇摇匀,精密量取上述蒸馏液2 ml两份,一份置5 ml容量瓶中,加蒸馏水定容,摇匀,作为样品液,另一份置蒸发皿中,置水浴上蒸干,残渣用蒸馏水溶解,转移至5 ml容量瓶中,加蒸馏水定容,摇匀,作为空白。用752紫外分光光度计在277 nm波长处测定蒸馏液中挥发油的吸收度。柴胡皂苷的提取取提取挥发油后的药渣,滤干,置于500 ml圆底烧瓶中,在不同条件下回流提取柴胡皂苷,过滤得滤液,减压低温浓缩成每毫升含 g柴胡的浓缩液,备用。柴胡皂苷a 含量测定色谱条件大连伊利特C18( mm250 mm,5m);流动相为乙腈-水3763;流速1 ml/min;检测波长208 nm;柱温35;进样量20 l
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