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浅论大鼠一侧睾丸扭转后切除对另侧睾丸组织的保护作用
【摘要】 　　目的 ：探讨大鼠一侧睾丸扭转后行切除术对另侧睾丸组织的保护作用。方法：将63只青春期前SD大鼠随机分为假手术组、扭转复位组和扭转切除组，每组21只。假手术组将左侧阴囊打开分离暴露睾丸后，不予扭转，即将睾丸再固定于阴囊壁上，并缝合阴囊。扭转复位组和扭转切除组则依Turner法建立左侧睾丸扭转模型，均先扭转4 h，其后前者行复位固定术，后者行切除术。三组分别于复位后4 h、24 h、1周各处死大鼠7只，取右侧睾丸行丙二醛、白介素-6检测及病理评估，左侧睾丸仅行病理评估。结果 ：各组左侧睾丸病理评分值均达到最差分数，病理切片结果示存在绝大部分坏死或完全性坏死。与扭转切除组比较，扭转复位组对侧睾丸的MDA、IL-6值、病理评分等均有不同程度升高，且1周时生精细胞层数结合精细小管直径所示的预后情况亦较差；而各指标在扭转切除组与假手术组的相比中未示明显差异。结论 ：单侧睾丸扭转复位后对侧睾丸早期即可出现继发性损伤。在明确扭转侧睾丸出现坏死后，不复位直接行切除术可以保护对侧睾丸。
【关键词】 一侧睾丸扭转 对侧睾丸损伤 睾丸切除术 保护
　　Abstract: Objective: To explore the protective effects of orchiectomy on contralateral testis of SD rats with unilateral testicular torsion through the biochemical and histological indexes. Methods ：Sixty-three prepubertal Sprague-Dawley rats were randomly divided into 3 groups， with 21 rats in each group. The sham operation group underwent a sham operation of the left testis under general anaesthesia. The torsion/detorsion group and the torsion/orchiectomy group underwent a similar operation but the left testis was rotated 720 °clockwisely for 4 h， maintained by fixing the testes to the scrotum，then detorsion was performed in the torsion/detorsion group，while orchiectomy was performed in the torsion/orchiectomy group. Both testes of seven rats from each group were sacrificed at 4 hour，24 hour and 1 week intervals after surgery. Then，the biochemical parameters such as malondialdehyde (MDA) and interleukin-6 (IL-6) were evaluated ；histology index and seminiferous tubule diameter were assessed on right testes，while the left were only assessed by histology index. Results:Compared with The torsion/orchiectomy group，the biochemical parameters and histological grades in the torsion/detorsion group increased in different degrees， and the prognosis status demonstrated by the number of spermatogenic cell associated with the decreased mean diameter of the seminiferous tubule， there are a worse prognoses in the torsion/detorsion group. However，there were no significant differences of every indexes between the sham operation group and the torsion/orchiectomy group. It’s also known that all the left testes get the most vicious histological grade，and pathological sections showed completely necrosis or severe bulk necrosis. Conclusion:These results suggest that the injury of contralateral testes may occur in early time after unilateral testicular torsion/detorsion， and whenever，the testis necrosis definitely，performed orchiectomy after unilateral testicular torsion without detorsion can do protective effects on contralateral testis.
　　Key words: unilateral testicular torsion ；contralateral testis injury ；orchiectomy；protection
　　睾丸扭转是小儿外科临床常见的急症，处理得当与否将影响治疗效果。研究表明，睾丸扭转可导致精索内营养血管箝闭，除致使同侧睾丸急性缺血损伤外[1]，还可能致对侧睾丸不同程度的受损。本研究拟通过动物实验观察单侧睾丸扭转复位后切除与否对侧睾丸的影响。
　　1 材料和方法
　　动物分组 据Skoglund统计，该病发生集中于青春前期，平均年龄为岁，故选取相应时段的28～30 d的健康雄性SD大鼠63只，体重150～200 g，随机分为假手术组、扭转复位组和扭转切除组，每组21只。
　　动物模型建立 所有大鼠均在术前以25%乌拉坦行腹腔注射全麻。假手术组将左侧阴囊打开，分离暴露左侧睾丸后即予固定缝合。扭转复位组和扭转切除组先依Turner法建立左侧睾丸扭转模型：左下腹小切口，游离左侧睾丸，切断睾丸引带，分离周围组织至附睾头，睾丸顺时针扭转720 °，固定扭转侧睾丸防止自然复位，维持4 h后原切口打开，扭转复位组复位扭转睾丸并固定后关闭切口；扭转切除组不予复位，直接切除扭转的睾丸及附睾，结扎精索末端后缝合切口。
　　标本制备 各组大鼠分别于术后4 h、24 h、1周时以快速脱颈法处死7只，采集未扭转侧睾丸标本，将所有睾丸标本沿中轴切开分为两部分，一部分睾丸用于制备组织匀浆，另一部分睾丸迅速置于10%的中性福尔马林中待制作石蜡切片常规HE染色。扭转侧睾丸HE染色标本制作方法同未扭转侧。
　　检测方法
　　生化指标检测：按试剂盒要求制备组织匀浆；以化学比色法测定MDA浓度，以ELISA法测定IL-6浓度。均严格按照试剂盒说明书操作。
　　睾丸组织病理学检查：置于光镜下镜检，观察睾丸曲细精管结构，计数生精上皮层数，测量平均曲细精管直径，对睾丸组织结构依Cosentino法行4分制评分。1分：正常睾丸组织，生精上皮排列规则。2分：生精上皮排列不规则，结构松散，紧贴精细小管排列。3分：生精上皮排列更加不规则，且有脱落、缺失，可见核固缩现象，精细小管边界模糊不清。4分：紧贴精细小管的生殖细胞出现明显的凝固性坏死。
　　统计学处理方法 多组比较用单因素方差分析，组间两两比较方差齐性用LSD检验，方差不齐性用Dunnett T3检验。
　　2 结果
　　相对于假手术组与扭转切除组，扭转复位组的对侧睾丸MDA、IL-6值、病理评分等均在术后4 h起有明显升高，而假手术组与扭转切除组的同类指标比较差异无显着性。
　　按大鼠生长周期，早期生精上皮层计数及MSTD无明显意义，故取1周时进行比较。结果示，对侧睾丸在术后1周时，假手术组生精上皮层计数及MSTD分别为±和±，扭转复位组为±和±，扭转切除组为±和±。假手术组与扭转切除组同类项相比差异无显着性，假手术组、扭转切除组与扭转复位组相比有差异显着性。
　　另外，扭转侧睾丸损伤较重，损伤后4 h即可见组织内大片凝固性坏死及细胞脱落，病理评分均达4分，后期组织结构紊乱，细胞形态消失，故1周时无法行生精上皮层计数及MSTD测量。
　　3 讨论
　　当前关于单侧睾丸扭转复位后是否可致对侧睾丸损伤尚存争议。部分学者认为早期对侧睾丸无损害；多数学者则认为对侧睾丸早期即可出现病理性改变[7-9]。本实验中，扭转复位组与假手术组对比，MDA作为细胞膜脂质受氧自由基攻击后的产物，可以间接反映体内自由基的生成量，自4 h起升高，提示睾丸组织内自由基过量，存在过氧化损伤；IL-6是大鼠体内主要的炎症反应递质之一，本身有趋化作用，其在局部的浓度和组织受损情况密切相关，自4 h起开始升高，提示睾丸组织内炎症递质聚集，间接证明存在损伤；而病理评分亦在4 h时升高，提示存在光镜下可见的生殖细胞损伤；1周时生精上皮层计数与MSTD明显降低，提示生精功能预后不良。结合上述，我们认为单侧睾丸扭转复位后可致对侧睾丸早期出现损伤。
　　另外，假手术组与扭转切除组对侧睾丸在各指标的比较中差异均未见显着性，提示扭转切除组中大鼠的对侧睾丸无明显受损。相比于前述扭转复位组中大鼠睾丸的损伤情况，我们认为在一侧睾丸扭转后出现严重坏死的情况下，不予复位而行睾丸切除对另侧睾丸组织有显着的保护作用。在我们此前的系列研究中已经证实：对侧睾丸的损伤主要来自单侧睾丸扭转复位后缺血再灌注损伤过程中过量生成的氧自由基和NO，其中NO的损伤作用更是占了主导地位。单侧睾丸扭转后不予复位而行切除避免了缺血再灌注损伤的发生，也就阻断了过量的氧自由基和NO的生成途径，进而保护了对侧睾丸。当前临床处理单侧睾丸扭转病例，发现扭转侧睾丸未完全坏死，一般需予复位保留；但是，即便对侧睾丸出现完全性坏死，也往往由于各种原因予以复位保留，但就本实验结果来看，这类做法并不可取。
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