单核细胞增生性李斯特菌研究进展.pdf

基金项目：吉林省科技项目资助（）吉林省卫生厅项目资（）通讯作者文章编号：（）单核细胞增生性李斯特菌研究进展郭宏华，贾芙蓉，韩晓英，何成彦（吉林大学中日联谊医院，吉林 长春 ；解放军第 医院；长春八一医院）单核细胞增生性李斯特菌是一种短小的革兰氏阳性无芽胞杆菌，是一种人畜共患病的致病菌，可使人和动物患李斯特菌病。李斯特菌属（）现在有个群个种，分别是单核细胞增生性李斯特菌（，）（亦称产单核细胞李斯特菌）、伊氏李斯特（）（亦称绵羊李斯特菌）、英诺克李斯特菌（）（亦称无害李斯特菌）、韦氏李 斯 特 菌（）、塞 氏 李 斯 特 菌（）、格氏李斯特菌（）和莫氏李斯特菌（）。生物学特性的幼龄菌（取 的培养物进行革兰染色），呈革兰阳性小杆菌，长，宽 ，直或稍弯，常呈 字形，成对排列。在营养肉汤中 培养 可形成根小鞭毛，有动力；培养时无鞭毛，动力消失。此菌营养要求不高，在普通营养琼脂平板上 培养 呈细小、半透明、微带珠光的露水样菌落，直径约 ，在斜射光下，菌落呈典型的蓝绿色光泽。在血平板上 培养 ，菌落呈溶血。流行病学 是一种人畜共患的致病菌，也是重要的食源性致病菌之一。感染家畜后可引起脑膜炎、脑炎以及自发性流产等，可暴发流行。引起人类的疾病统称为李斯特菌病（），人感染后主要表现为脑膜炎、败血症和单核细胞增多。婴幼儿、怀孕妇女和免疫耐受病人的感染死亡率可高达 。毒力基因 李斯特菌溶解素（）是由 基因编码的蛋白，是一种孔形成毒素，是主要的毒力因子，可破坏吞噬体，使细菌进入胞液并在其中繁殖，失去后导致细菌毒力的丧失。不产生 的 可在非吞噬细胞的胞液中生存一段时间，但却不能繁殖，可被吞噬细胞杀灭。近年的研究表明 是一个多功能的毒力因子，能引起宿主细胞很多反应，如细胞增殖、黏膜细胞外渗作用、巨噬细胞中细胞因子的表达树突状细胞的凋亡、磷脂代谢及引起机体产生免疫反应等。蛋白是一种胞壁质水解酶，由 基因编码，它是单核细胞增生性李斯特菌重要毒力因子。通常 蛋白于细胞表面产生，并大量分泌到生长介质中，对于细胞的分裂是必不可少的。分析 蛋白编码基因的突变体显示，对于 的吞噬细胞溶解作用以及对机体的感染过程，蛋白是一个重要的因素，。单增李斯特菌能产生两种磷脂酶：和 。基因编码一个特异的作用于磷脂酰肌（）的磷脂酶（）。基因编码磷脂酶（）。毒性相对较小，对细菌在细胞间扩散作用不大，主要是协同 发挥作用。使细菌从吞噬泡中逃逸出来，能破坏宿主细胞的信号通路，能调节细胞因子和化学因子的合成，还能通过二酰基甘油、神经酰胺、肌醇磷酸盐等调节细胞的生长、分化、凋亡等，。系以活化的形式合成，而 则先以非活化的前肽被分泌出来，然后在胞外由 的基因产物 蛋白酶加工。可辅助细菌逸出初级吞噬体，而细菌在细胞与细胞之间的扩散过程中，则表现出一定的活性作用。等通过利用诱导 表达系统证明，缺乏 的，的活性不仅对在人类上皮细胞中初级吞噬体的溶解是必需的，而且对细胞与细胞之间的扩散也是必需的。编码 蛋白，是单增李斯特茵毒力基因簇上各种毒力基因的调节蛋白，直接检测 可以减少其他毒力基因突变或缺失所造成假阴性中国实验诊断学 年月第 卷第期结果的概率。蛋白是一种转录因子，是李斯特菌所有基因簇（包括 本身）转录激活所必需，是迄今鉴定出的李斯特菌的唯一毒力调节蛋白；在感染宿主细胞的过程中，对于许多毒力因子的等位表达起到了关键调控因子的作用。蛋白是由 基因编码的表面蛋白，通过诱导细胞肌动蛋白分子的聚合作用促使细菌在细胞与细胞之间的传递，同时也与细菌被宿主细胞内化有关。内化素（）有 ，种，与 被非吞噬细胞内化有关。另外一种表面蛋白 与肠道细胞的粘附有关。检测 用 增菌液 培养，后转种于 增菌液 培养，取 增菌液划线接种科玛嘉李斯特菌显色培养基和 琼脂 培养 ，然后挑取可疑菌落进行生化、溶血和协同溶血试验，并用生化鉴定系统进行鉴定 焦新安研制出李斯特氏菌酶标单抗试剂，具有高度特异性，为该菌属检验提供了优良试剂，建成了单抗夹心 试验，经实际样品的检测表明，该方法敏感、特异且安全与经典分离鉴定方法相比，法需天可完成检验。胶体金免疫层析技术胶体金免疫层析技术是 世纪 年代发展起来的将层析法与免疫胶体金相结合的诊断技术，具有快速、操作简便、与酶联免疫法相似的特异性及灵敏度的优点，广泛用于样品的检测。聚合酶免疫检测方法（，）是将样品增菌液和阳性对照加到酶标板的微孔内，微孔的内壁上固定有对李斯特氏菌抗原有高度特异性的抗体。李斯特氏菌抗原在微孔内形成抗体抗原复合物。一般操作方法是在样品板内加入抗李斯特氏菌特异抗体，进孵育、冲洗程序，然后加入碱性磷酸酶结合剂，使酶与抗原结合，冲洗后加入底物显色，用 的光度计读数，计算临界值。当样品测量值大于临界值时为阳性结果，可疑阳性结果还需经传统方法检测 。应用 检测、荧光定量 、多重一巢式 、改良分子信标一实时荧光 法、微矩阵法、竞 争 等 方 法 测 定 单 增 李 斯 特 菌。等 运用 核酸酶 对单增李斯特氏菌定量；等 运用 对李斯特氏菌进行定量；等 以 为靶基因，采用 联合检测技术。核酸探针杂交方法 等根据 和 基因间的间隔区序列设计 引物，将 产物和单增李斯特菌的特定寡核苷酸探针进行杂交，通过比色法测定杂交体，结果表明，每 样品中能检测出 。等报告内可得到结果，效果良好。防治单核细胞增生李斯特菌在自然界广泛分布，主要是通过食源性传播，污染食品的来源和途径很多，所以预防此菌的感染要从多个环节进行，如食品的生产加工、包装、储存和销售的过程及部门、家庭个人的饮食卫生、牲畜的养殖等，减少细菌的污染，切断细菌的传播途径并杀灭细菌。参考文献：刘秀峰，刘红，林剑琴福州市 年各类食品中产单核细胞增生李斯特菌污染情况 调查 中 国 卫 生 检 验杂 志，（）：部庆福 蔡宏道，何晓青，等 现代卫生生物学，北京：人民卫生出版杜，王俊霞，王兴龙，秦兰柱，等 产单核细胞李斯特菌毒力因子及免疫预防研究进展动物医学进展，（）：，：，（）：，：，：，：（，）（），：（）：，（）：，：，：，（）：，：沈正达 细菌毒力岛的研究 进展 中国兽医学报，（）：，：，：，：食品卫生微生物学检验：单核细胞增生性李斯特氏菌检验 焦新安，范红杰，文其乙，等单抗夹心 检测李斯特氏菌方法的建立及其初步应用 肉品卫生，（）：宋农，李君文，王新为，等 胶体金探针制备及滴金免疫法检测产肠毒素金葡菌中国公共卫生，（）：，：，（）：，：，（）：，（）：，（）：，（）：，：，：（收稿日期：）通讯作者文章编号：（）铜绿假单胞菌感染现状及耐药分析张栩，盛传伦（吉林大学中日联谊医院 感染科，吉林 长春 ）铜绿假单胞菌（，）是一种致病力较低的革兰阴性杆菌，在自然界分布广泛，土壤、水、空气，正常人的皮肤、呼吸道和肠道等都有该菌存在。该菌是一种条件致病菌，只在某种特定条件下才能致病。长期应用激素、免疫抑制剂，化疗、放射治疗等导致病人免疫功能低下，可引起严重的甚至致死性的感染；手术后或某些治疗操作后（气管切开、留置导尿等）的病人也易罹患本菌感染，因此铜绿假单胞菌已成为医院内感染的重要病原菌之一。但由于铜绿假单胞菌抗药性强，近年来 多 重 耐 药 铜 绿 假 单 胞 菌（，）感 染 日 益 增多，耐药率不断增加，耐药谱广泛，为抗菌药物治疗带来极大挑战。因此加强铜绿假单胞菌相关研究可以为临床合理有效地选用抗生素提供科学依据，现将铜绿假单胞菌感染的流行状况及耐药的相关进展做一综述。铜绿假单胞菌感染的流行状况 铜绿假单胞菌的生物学特性铜绿假单胞菌是假单胞菌属的代表菌种，在琼中国实验诊断学 年月第 卷第期