单核细胞增生李斯特氏菌检验.pdf
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1、GB 4789.30-2016 Listeria monocytogenes 单核细胞增生李斯特氏菌检验 菩提 实验需在二级生物安全柜内进行。实验过程废弃物均由专用医疗废物袋收集,专人经高温121,高压0.1Mpa,灭菌30min后收集于危险废弃物箱内,妥善保存并尽快交专业危废处理公司处置。实验人员均配备安全服,无粉乳胶手套,口罩、眼罩,头套等实验用品。1 祸乱人间及降妖除魔的必要性 单核细胞增生李斯特氏菌 美国CDC每年报告单增李斯特氏菌感染约1600例,其中约260人死亡。2002年污染的火鸡导致9个州54例中8例死亡和3例流产。1998年21人因热狗中香肠污染死亡。1985年52人死于污
2、染的软奶酪。美国的单增李斯特氏菌爆发事件 2011 United States listeriosis outbreak 2011年美国甜瓜李斯特氏菌爆发事件 2011年,美国甜瓜(cantaloupe,哈密瓜)发生单增李斯特菌疫情,导致波及全美的疾病爆发。最后共导致147人生病,33人死亡,1名孕妇流产,其中死亡的人很多是独居在家的老人。这是美国历史上最严重的一次食源性疾病爆发。食源性疫情应对小组(CORE)成立 the Coordinated Outbreak Response and Evaluation FDA应对疫情需临时抽调人员指派任务。2011年8月,FDA局长建议采用新的疫情应
3、对方式。2011年8月,针对科罗拉多州Jensen 农场单增李斯特氏菌疫情,成立食源性疫情应对小组(CORE),成员包括流行病学专家、兽医、公共和环境卫生专家、消费者安全官员和政策分析专家。爆发事件调查 2011 United States listeriosis outbreak 一些患者能回忆起实用的甜瓜来自科罗拉多州Jensen Farms,检测发现甜瓜瓜与病例标本发现的单增李斯特氏菌分类株DNA指纹图谱相同。2011年10月18日美国FDA给该农场发出警告信。事件调查结果 the Coordinated Outbreak Response and Evaluation FDACORE
4、A food Safety Network 2011-2012 在包装厂检测到李斯特氏菌大规模传播,显示该厂卫生措施做得很差(食源性报告随后做了总结)。1、在哈密瓜生长的地方,可能会出现低水平的单核增生李斯特氏菌,这可能会被引入到包装设施中。2、一辆拉运甜瓜的卡车停在比邻牛棚旁包装,可能将污染物引入设施。3、包装厂设计允许水靠近设备和员工通道的地板。4、包装厂的地板建设方式难以彻底清洁。5、包装设备不易清洗消毒;用于哈密瓜包装的洗涤和干燥设备是改装的,本身是为别的农产品设计的。6、哈密瓜冷藏前没有预冷却步骤。冷藏时随着香瓜的温度下降(2011.8月爆发),可能造成Listeria monocy
5、togenes 生长繁殖。在这次调查中发现,单增不只是污染甜瓜表面,还深入甜瓜内部,污染整个甜瓜。美国FDA下属机构食源性疫情应对小组(CORE)2011-2012工作报告 Michael Taylor(食物及兽医副专员)Kathleen Gensheimer 首席医疗官 美国甜瓜李斯特氏菌爆发事件的来龙去脉来源于:食源性疫情应对小组 除李斯特菌疫情外,CORE小组还成功应对了寿司中冷冻金枪鱼、芽菜、冷冻牡蛎和土耳其松仁引发的疫情,以及宠物食品引发的疫情。小组成功应对了多起食源性疫情,大大提升了美国的食品安全状况。我国李斯特氏菌检出及中毒情况 2、中国食物中毒细菌(房海,陈翠珍主编 科学出版社
6、,2014)书中记载 1、2001年11月,我国质检部门多次从美国、加拿大、法国、爱尔兰、比利时、丹麦等二十多家肉类加工厂进口的猪腰、猪肚、猪耳、小排等三十多批近千吨猪副产品中检出单增李斯特氏菌等致病菌。李斯特氏菌病原学意义 美国人食物单一,可以追溯一周以上食谱。中国人食系比较复杂,三天前吃了什么可能都想不起来,无法追溯致病来源,国内报道很少,没有一份完整的调查报告。在引起细菌性食源性中毒事件方面,目前国外多发生,我国虽已有有单核细胞增生李斯特氏菌引起的报告,但尚为罕见。通常不会发生大规模流行,人类李斯特氏菌病的发病对象主要是:新生儿,孕妇,免疫力低下者,以及老年人群。无毒放射性李斯特菌是一种
7、有效的治疗转移性胰腺癌的方法 美国,阿尔伯特爱因斯坦医学院,微生物与免疫学系,Claudia Gravekamp 等人。将弱毒李斯特氏菌和元素铼(Re)结合,利用弱毒李斯特氏菌兼性厌氧与Re的放射性,治疗转移性胰腺癌。李斯特氏菌穿过小鼠小肠段肠道屏障的光学显微照片(只有细菌与肿瘤细胞相遇后,才会发出荧光)Listeriaat 积极的、可利用的一面 Gravekamp 博士在荷瘤小鼠尾静脉中注入一定数量的李氏菌后观察,数天之内其他部位的细菌就会被动物自身的免疫系统清除殆尽,而在肿瘤组织附近和内部却依然存在。图 A和B 所示:在原发性肿瘤中,Listeriaat在转移中增殖较少,而在正常组织中则较
8、少;C图所示:共聚焦显微镜证实。弱毒李斯特氏菌(红色小点),细胞核(蓝色),细胞质(绿色、肌动蛋白染色)。图D所示:单增在肿瘤细胞内繁殖。培养1 h,添加庆大霉素,进一步培养,终止。不同时间测定李斯特菌量。三个独立实验的平均值。李斯特氏菌菌落总数CFU/每106个肿瘤细胞细胞。(E)共聚焦显微镜证实肿瘤细胞内存在弱毒李斯特氏菌。Spleen:胰腺,Metastasis:转移性胰腺癌,Tumor:肿瘤。2 的发现及其细菌分类学地位 单核细胞增生李斯特氏菌 李斯特氏菌(Listeria)的发现 Joseph Lister(1827.4.5-1912.2.10),照片摄于1912年。为纪念英国的生理
9、学家,近代消毒手术之父约瑟夫.李斯特(1827-1912),1940年第三届国际微生物学大会由皮里提出(Pirie)命名为李斯特氏菌属。1926年,英国南非裔科学家Murray、Webb和Swann在病死的兔子和豚鼠体内首次发现李斯特氏菌。Bacterium monocytogens(单核细胞增生杆菌)Family科(Subfamily)Order目(Suborder)Genus属(复数genera)phylum门(复数phyla)Domain域;Kingdom界 Class纲(Subclass)Species种(Subspecies)Tribe族(Subtribe)科 目 属 门 域;界 纲
10、 种 族 细菌分类系统 https:/ Listeria monocytogenes的细菌分类学地位 cellular organisms细胞有机体 Bacteria细菌界 Terrabacteria group Firmicutes厚壁菌门 Bacilli 芽孢杆菌纲 Bacillales 芽孢杆菌目 Listeriaceae 李斯特氏菌科 Listeria 李斯特氏菌属 Listeria monocytogenes 单核细胞增生李斯特氏菌种 分类 英文名称 拉丁语名称 域 Domain Domain 界 Kingdom Regnum 门 phylum(复数phyla)Dividion 纲
11、Class Classis 目 Order Ordo 科 Family Familia 族 tribe tribe 属 Genus(复数genera)Genus 种 Species Species 介绍一些微生物分类学专业词汇 Taxonomic rank分类排列分类排列 Suffix reference后缀 Subtribe*亚族-inae Tribe*族-eae Subfamily*亚科-oideae Family科-aceae Suborder亚目-ineae Order目-ales Subclass亚纲 Proposed suffix idea Class纲 Proposed suff
12、ix-ia Division or phylum*门-Domain or empire*域/界-(根据细菌法典第9条(1990年修订版),在属和类之间的分类的名称是由在类型属的名称中加入适当的后缀而形成的。1997年,E.Stackebrandt等提出了表示类和子类的后缀。下表中提供了后缀。微生物分类学专业词汇 1 Listeria aquatica 水李斯特氏菌 2 Listeria booriae 布尔李斯特氏菌 Listeria denitrificans 反硝化李斯特氏菌(已转移)3 Listeria cornellensis 康奈尔李斯特氏菌 4 Listeria fleischma
13、nnii 弗氏李斯特氏菌(含2个亚种:科罗拉多亚种,弗氏亚种)4.1 Listeria fleischmannii subsp.coloradonensis 4.2 Listeria fleischmannii subsp.fleischmannii 5 Listeria floridensis 佛罗里达李斯特氏菌 6 Listeria grandensis Grand美国小县 Grand县,隶属于美国科罗拉多州 7 Listeria grayi 格氏李斯特氏菌 7 Listeria murrayi 默氏李斯特氏菌 8 Listeria innocua 英诺克李斯特氏菌(无害L)9 Liste
14、ria ivanovii 伊氏李斯特氏菌(绵羊L)(包含2个亚种:伊凡诺夫亚种,加伦敦亚种)9.1 Listeria ivanovii subsp.Ivanovii 9.2 Listeria ivanovii subsp.Londoniensis 10 Listeria marthii 莫氏李斯特氏菌 Rocourt法国巴斯德研究所细菌研究中心研究人员 11 Listeria monocytogenes 单增李斯特氏菌 12 Listeria newyorkensis 纽约李斯特氏菌 13 Listeria riparia 河岸李斯特氏菌 14 Listeria rocourtiae Roco
15、ur李斯特氏菌 15 Listeria seeligeri 斯氏李斯特氏菌(西尔L)16 Listeria weihenstephanensis(维森李斯特氏菌)17 Listeria welshimeri 威尔斯李斯特氏菌 18 Listeria costaricensis 哥斯达黎加李斯特氏菌 18个种个种 按照字母排序 李斯特氏菌属下面有18个种(本部分信息个人分析整理,暂时国内领先)李斯特氏菌属(Listeria)11 1926 Listeria monocytogenes 单核细胞增生李斯特氏菌(Murray et al.1926)Pirie 1940(Approved Lists
16、1980)7 1966 Listeria grayi 格氏李斯特氏菌 Errebo Larsen and Seeliger 1966(Approved Lists 1980)emend.Rocourt et al.1992.7 1971 Listeria murrayi 默氏李斯特氏菌(L.grayi同菌异名,以格氏李斯特氏菌为菌名。)Welshimer and Meredith 1971(Approved Lists 1980),species.8 1979 Listeria innocua 英诺克李斯特氏菌(无害李斯特氏菌)(ex Seeliger and Schoofs 1979)See
17、liger 1983,sp.nov.,nom.rev.15 1983 Listeria seeligeri 斯氏李斯特氏菌(西尔李斯特氏菌)Rocourt and Grimont 1983 17 1983 Listeria welshimeri 威尔斯李斯特氏菌 Rocourt and Grimont 1983.9 1984 Listeria ivanovii 伊氏李斯特氏菌(伊万诺夫李斯特氏菌,绵羊李斯特氏菌)Seeliger et al.1984 1926年-2009年 按照发现年代排序(2-1)李斯特氏菌属 2009年现在 10 2010 L.marthii 莫氏李斯特氏菌 Graves
18、等 14 2010 L.rocourtiae Rocourt,人名;法国巴斯德研究所细菌学研究中心 Alexandre Leclercq(亚历山大.勒克莱尔)等 16 2013 L.weihenstephanensis 维森李斯特氏菌(地名,德国最古老的啤酒厂产地)Lang Halter等 4 2013 L.Fleischmannii 弗氏李斯特氏菌(弗莱施曼李斯特氏菌)Bertsch等 6 2014 L.Grandensis Grand,美国小县 den Bakker等 13 L.riparia 河岸李斯特氏菌 5 L.Floridensis 佛罗里达李斯特氏菌 1 L.aquatica 水
19、李斯特氏菌 3 L.cornellensis 康奈尔李斯特氏菌 2 2015 L.Booriae 布尔李斯特氏菌 Weller 等 12 L.newyorkensis 纽约李斯特氏菌 18 2018 Listeria costaricensis 哥斯达黎加李斯特氏菌 Kattia N ez-Montero et al.2018 注意:注意:中文名目前没有专业机构翻中文名目前没有专业机构翻译,以拉丁文为准。译,以拉丁文为准。按照发现年代 排序(2-2)二个种合并。Listeria grayi 和Listeria murrayi合并后,叫:Listeria gray Evi Lang Halter
20、等人发现 慕尼黑工业大学/生物科学基础部/微生物生态学系 公元725年,修道院的僧侣们开始在这里结社,从768年起种植啤酒花。最早的啤酒酿造出现在1040年。这家啤酒坊在900年毁于战火。重建后又在1600年被拿破仑关闭,最终被巴伐利亚的一个皇室收购。现在的Weihenstephan是国有的酿酒公司,有现代化的厂房和由修道院改造成的餐厅。这里有世界上最先进的专业大学和酵母实验室。该啤酒坊酿造大约10款Lager和小麦啤酒,后者尤其著名。其中Hefe-Weissbier是一款非常出色的啤酒,有浓厚的香气,细致的气泡非常赏心悦目,除了扎实的麦香,引人注目的还有香蕉味,另外带有少许的柠檬与香草的气息
21、,麦香的回甘非常强烈,气泡的辛辣感也属上乘,整体而言,非常清爽顺口。Listeria weihenstephanensis维森(或译唯森)李斯特氏菌 Weihenstephane(维森小镇);最古老的啤酒产地 2009年后,那些发现新种的可敬可爱的科学家们!den Bakker 2014,L.grandensis,L.riparia,L.floridensis,L.aquatica,L.cornellensis Department of Food Science,Cornell University,Ithaca,NY 14853,USA康奈尔大学食品科学学院 Weller 2015,L.b
22、ooriae,L.newyorkensis Department of Food Science,Cornell University,Ithaca NY 14853,USA David Bertsch 2013,L.Fleischmannii Laboratory of Food Biotechnology,Institute of Food,Nutrition and Health,ETH Zurich,8092 Zurich,Switzerland瑞士营养和健康研究所 Evi Lang Halter 2013,L.weihenstephanensis Lehrstuhl f r Mikr
23、obielle kologie,Department f r Grundlagen der Biowissenschaften,WZW,Technische Universitat Munchen,Weihenstephaner Berg 3,D-85354 Munchen,Germany慕尼黑工业大学生物科学基础部微生物生态学系 Lewis M.Graves 2010,L.marthii Enteric Diseases Laboratory Branch and Bacterial Zoonoses Branch,Division of Foodborne,Bacterial,and My
24、cotic Diseases,National Center for Zoonotic,Vector-borne and Enteric Diseases,Coordinating Center for Infectious Disease,Centers for Disease Control and Prevention,Atlanta,GA 30333,USA美国佐治亚州亚特兰大疾病控制和预防中心传染病协调中心肠道疾病实验室分支和细菌人畜共患病分支食品,细菌和霉菌病分部,动物传染病,病媒传染和肠道疾病国家中心,美国(注:den Bakker也是发现者之一)Alexandre Lecler
25、cq亚历山大 勒克莱尔 2010,L.rocourtiae Institut Pasteur,Groupe Microorganismes et barrieres de lhote,WHO Collaborating Center for Foodborne Listeriosis and French National Reference Center for Listeria,Paris,France巴斯德研究所,Microorganismes et barrieres de lhote组,WHO合作中心食源性李氏杆菌病与李斯特氏菌法国国家参考中心,法国 Kattia N ez-Mont
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