生理学学生实验报告.doc
《生理学学生实验报告.doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《生理学学生实验报告.doc(14页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、昆明理工大学医学院生理学实验报告 (供临床医学专业使用)实验一 坐骨神经腓肠肌标本制备1实验目得1、学习机能学实验基本得组织分离技术;2、学习与掌握制备蛙类坐骨神经-腓肠肌标本得方法;3、了解刺激得种类。 实验原理 蛙类得一些基本生命活动与生理功能与恒温动物相似,若将蛙得神经肌肉标本放在任氏液中,其兴奋性在几个小时内可保持不变。若给神经或肌肉一次适宜刺激,可在神经与肌肉上产生一个动作电位,肉眼可瞧到肌肉收缩与舒张一次,表明神经与肌肉产生了一次兴奋。在机能学实验中常利用蛙得坐骨神经-腓肠肌标本研究神经、肌肉得兴奋、兴奋性,刺激与反应得规律与肌肉收缩得特征等,制备坐骨神经腓肠肌标本就是机能学实验得
2、一项基本操作技术。3实验对象蛙4 实验药品任氏液 仪器与器械 普通剪刀、手术剪、眼科镊(或尖头无齿镊)、金属探针(解剖针)、玻璃分针、蛙板(或玻璃板)、蛙钉、细线、培养皿、滴管、电子刺激器.6 实验方法与步骤破坏脑、脊髓取蛙一只,用自来水冲洗干净(勿用手搓)。左手握住蛙,使其背部向上,用大拇指或食指使头前俯(以头颅后缘稍稍拱起为宜).右手持探针由头颅后缘得枕骨大孔处垂直刺入椎管(图31)。然后将探针改向前刺入颅腔内,左右搅动探针3次,捣毁脑组织。如果探针在颅腔内,应有碰及颅底骨得感觉。再将探针退回至枕骨大孔,使针尖转向尾端,捻动探针使其刺入椎管,捣毁脊髓。此时应注意将脊柱保持平直。针进入椎管得
3、感觉就是,进针时有一定得阻力,而且随着进针蛙出现下肢僵直或尿失禁现象。若脑与脊髓破坏完全,蛙下颌呼吸运动消失,四肢完全松软,失去一切反射活动.此时可将探针反向捻动,退出椎管。如蛙仍有反射活动,表示脑与脊髓破坏不彻底,应重新破坏。图2-11 捣毁蟾蜍脊髓 剪除躯干上部、皮肤及内脏 用左手捏住蛙得脊柱,右手持粗剪刀在前肢腋窝处连同皮肤、腹肌、脊柱一并剪断(图31-2),然后左手握住蛙得后肢,紧靠脊柱两侧将腹壁及内脏剪去(注意避开坐骨神经),并剪去肛门周围得皮肤,留下脊柱与后肢(图13)。 图-2横断脊柱 图2-1-3剪除躯干上部及内脏 剥皮 一只手捏住脊柱得断端(注意不要捏住脊柱两侧得神经),另一
4、只手捏住其皮肤得边缘,向下剥去全部后肢得皮肤(图2-1)。将标本放在干净得任氏液中.将手及使用过得探针、剪刀全部冲洗干净.图24 剥去皮肤 分离两腿 用镊子取出标本,左手捏住脊柱断端,使标本背面朝上,右手用粗剪刀剪去突出得骶骨(也可不进行此步).然后将脊柱腹侧向上,左手得两个手指捏住脊柱断端得横突,另一手指将两后肢担起,形成一个平面。此时用粗剪刀沿正中线将脊柱盆骨分为两半(注意勿伤坐骨神经)。将其中一半后肢标本置于盛有任氏液中备用,另一半放在蛙板上进行下列操作.辩认蛙后肢得主要肌肉蛙类得坐骨神经就是由第7、9对脊神经从相对应得椎间孔穿出汇合而成,行走于脊柱得两侧,到尾端(肛门处)绕过坐骨联合,
5、到达后肢背侧,行走于梨状肌下得股二头肌与半膜肌之间得坐骨神经沟内,到达膝关节腘窝处有分支进入腓肠肌。 游离坐骨神经与腓肠肌用蛙钉或左手得两个手指将标本绷直、固定。先在腹腔面用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经,然后在标本得背侧于股二头肌与半膜肌得肌肉缝内将坐骨神经与周边得结缔组织分离直到腘窝,但不要伤及神经,其分支待以后用手术剪剪断。同样用玻璃分针将腓肠肌与其下得结缔组织分离并在其跟腱处穿线、结扎。剪去其它不用得组织,操作应从脊柱向小腿方向进行。(a) 剪去多余得脊柱与肌肉 将后肢标本腹面向上,将坐骨神经连同23节脊椎用粗剪刀从脊柱上剪下来.再将标本背面向上,用镊子轻轻提起脊椎,自上而下剪去支配腓肠肌
6、以外得神经分支,直至腘窝(图31-5A),并搭放在腓肠肌上。沿膝关节剪去股骨周围得肌肉,并将股骨刮净,用粗剪刀剪去股骨上端得1/(保留/),制成坐骨神经小腿得标本。(b) 完成坐骨神经腓肠肌标本 将脊椎与坐骨神经从腓肠肌上取下,提起腓肠肌得结扎线剪断跟腱。用粗剪剪去膝关节以下部位,便制成了坐骨神经腓肠肌标本(图315B). 检验标本 用镊子夹持坐骨神经中枢端,如腓肠肌发生迅速而明显得收缩,说明标本得兴奋性良好。标本浸入盛有任氏液得培养皿中备用。图2-5 分离坐骨神经(A)与坐骨神经腓肠标本(B)7 注意事项在操作过程中,应给神经与肌肉滴加任氏液,防止表面干燥,以免影响标本得兴奋性。标本制成后须
7、放在任氏液中浸泡数分钟,使标本兴奋性稳定,再开始实验效果会较好。8 实验图像10结果及分析 捣毁脑脊髓后得蛙应有何表现? 制备好得神经肌肉标本为何要放在任氏液中? 如何判断制备得神经肌肉标本得兴奋性?1 思考题 用各种刺激检验标本兴奋性时,为什么要从中枢端开始? 刺激有几种形式? 实验二 心脏灌流实验目得 1、学习蛙离体心脏灌流方法。 2、观察Na、K、a2+、H+、肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动得影响。2实验原理 心脏得正常节律性活动需要一个适宜得内环境(如Na+、K+、Ca2+等得浓度及比例、pH值与温度),而内环境得变化则直接影响到心脏得正常节律性活动。在体心脏还受交感神经与迷走神经
8、得双重支配,交感神经末梢释放去甲肾上腺素,使心肌收缩力加强,传导速度加快,心率加快;迷走神经末梢释放乙酰胆碱,使心肌收缩力减弱,心肌传导速度减慢,心率减慢。将失去神经支配得离体心脏保持于适宜得理化环境中(如任氏液),在一定时间内仍能产生自动节律性兴奋与收缩.而改变任氏液得组成成分,离体心脏得活动就会受到影响。 3实验对象 蛙4实验药品 任氏液、5%Nal、%aCl、1%KC、1:000肾上腺素、:00乙酰胆碱5仪器与器械计算机生物信号采集与处理系统(或二道生理记录仪)、张力换能器、蛙类常用手术器械一套、玻璃分针、蛙板、蛙钉、蛙心插管、蛙心夹、试管夹、滴管(支)、试剂瓶(个)、烧杯、双凹夹、万能
9、支架、细线。6实验方法与步骤 1、标本得制备 (1)离体蛙心标本制备(斯氏蛙心插管法)取蟾蜍一只,打开胸腔,暴露心脏。在主动脉干下方穿双线,一条在左主动脉上端结扎作插管时牵引用;另一根在动脉球上方打一活结备用(用以结扎与固定插管)。 玻璃分针将心脏向前翻转,在心脏背侧找到静脉窦,在静脉窦以外得地方做一结扎(切忽扎住静脉窦),以阻止血液继续回流心脏(也可不进行此操作)。图1 插管进入心室示意图左手提起左主动脉上方得结扎线,右手持眼科剪在左主动脉根部(动脉球前端)沿向心方向剪一斜口,将盛有少许任氏液、大小适宜得蛙心插管由此开口处轻轻插入动脉球。当插管尖端到达动脉球基部时,应将插管稍向后退(因主动脉
10、内有螺旋瓣会阻碍插管前进),并将插管尾端稍向右主动脉方向及腹侧面倾斜,使插管尖端向动脉球得背部后方及心尖方向推进,在心室收缩时经主动脉瓣进入心室(见图3-1)。注意插管不可插得过深,插管得斜面应朝向心室腔,以免插管下口被心室壁堵住。 若插管中任氏液面随心室得收缩而上下波动,则表明插管进入心室,可将动脉球上已准备好得松结扎紧,并固定于插管侧面得钩上,以免蛙心插管滑出心室。剪断结扎线上方得血管,轻轻提起插管与心脏,在左右肺静脉与前后腔静脉下引一细线并结扎(参考图31),于结扎线外侧剪去所有相连得组织则得到离体蛙心。此步操作中应注意静脉窦不受损伤并与心脏连结良好.最后,用任氏液反复换洗插管内得任氏液
11、,直到插管中无残留血液为止。此时,离体蛙心标本制备成功,可供实验.左手拉住腹主动脉上结扎线头,于动脉球上剪一小口,将装有鱼用生理盐水得得蛙心套管插入动脉球,并顺势推入心室,此时可以瞧到套管内得液面随心脏搏动而上下移动。用滴管不断更换套管中得灌流液,冲洗心室直至没有血液为止,束紧备用线连同套管尖端一起结扎,并将线头系在套管壁上得小突起上,达到固定作用。最后剪断腹主动脉,提起心脏用线尽量远离静脉窦将其她血管结扎。在结扎外方剪断各组织.此时心脏完全离体,借灌流液而正常搏动。 、实验装置连接 按图34-将蛙心插管固定于支架上,在心室舒张时将连有一细线得蛙心夹在心脏舒张时夹住心尖,并将细线以适宜得紧张度
12、与张力换能器相连。张力传感器得输出线与计算机生物信号采集处理系统或二道生理记录仪得输入通道相连。图42 蛙心灌流得记录仪描记装置3. 实验项目 ()记录心脏在只有任氏液时得收缩曲线,观察心率及收缩幅度,并将其作为正常对照。 (2)Na+得作用:用吸管吸出插管中得任氏液后,换以等量得0、65%氯化钠溶液,记录并观察心跳得变化。有变化出现时,应立即将插管内液体吸出,并以等量任氏液换洗23次,至心跳恢复正常。 (3)Ca2+得作用:将2滴2得氯化钙溶液加入灌流液中,记录并观察心跳变化。有变化出现时,应立即以等量任氏液换洗数次,至心跳曲线恢复正常.(4)K+得作用:将1滴2%得氯化钾溶液加入灌流液中,
13、记录并观察心跳变化。有变化出现时,应立即以等量任氏液换洗数次,至心跳曲线恢复正常。 (5)肾上腺素得作用:将12滴1:0000肾上腺素加入灌流液中,记录并观察心跳变化。有变化出现时,应立即以等量任氏液换洗数次,至心跳曲线恢复正常。 (6)乙酰胆碱得作用:将1滴1:000乙酰胆碱加入灌流液中,记录并观察心跳变化。有变化出现时,应立即以等量任氏液换洗数次,至心跳曲线恢复正常。 7注意事项 、制备离体心脏标本时,勿伤及静脉窦。 、蛙心夹应在心室舒张期一次性夹住心尖,避免因夹伤心脏而导致漏液. 3、每一观察项目都应先描记一段正常曲线,然后再加药并记录其效应.加药时应在心跳曲线上予以标记,以便观察分析.
14、 、各种滴管应分开,不可混用. 5、在实验过程中,插管内灌流液面高度应保持恒定;仪器得各种参数一经调好,应不再变动。 6、给药后若效果不明显,可再适量滴加,并密切注意药物剂量添加后得实验结果.给药量必须适度,加药出现变化后,就应立即更换任氏液,否则会造成不可挽回得后果,尤其就是K,H+稍有过量,即可导致难以恢复得心脏停跳。 7、标本制备好后,若心脏功能状态不好(不搏动),可向插管内滴加12滴2%CC或1:10000肾上腺素,以促进(起动)心脏搏动。在实验程序安排上也可考虑促进与抑制心脏搏动得药物交换使用。 、谨防灌流液沿丝线流入张力传感器内而损坏其电子元件。 问题与解释 1、插管插入后,管中得
15、液面不能随心脏搏动而波动,或波动幅度不大,影响结果得观察。 ()插管插到了主动脉得螺旋瓣中,未进入心室。 (2)插管插到了主动脉壁肌肉与结缔组织得夹层中. (3)插管尖端抵触到心室壁。 (4)插管尖端被血凝块堵塞。 2、插管后,心脏不跳动. ()心室或静脉窦受损。 (2)插管尖端深入心室太多;或尖端太粗,心脏太小(鱼类容易出现)影响到心室脏得收缩。 (3)心脏机能状态不好。 实验图像氯化钠氯化钙氯化钾肾上腺素乙酰胆碱10 实验结果 剪贴记录曲线,并对实验结果进行分析讨论。实验三影响尿液生成得因素1实验目得 学习用膀胱套管或输尿管套管引流得方法,观察不同生理因素对动物尿量得影响。加深对尿生成调节
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 生理学 学生 实验 报告
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【天****】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【天****】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。