现代分子生物学(第4版)--课后答案.doc
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第一章 1简述孟德尔、摩尔根与沃森等人对分子生物学发展得主要贡献 答:孟德尔得对分子生物学得发展得主要贡献在于她通过豌豆实验,发现了遗传规律、分离规律及自由组合规律;摩尔根得主要贡献在于发现染色体得遗传机制,创立染色体遗传理论,成为现代实验生物学奠基人;沃森与克里克在1953年提出DAN反向双平行双螺旋模型. 2写出DNA RNA得英文全称 答:脱氧核糖核酸(DNA, Deoxyribonucleic acid),核糖核酸(RNA,Ribonucleic acid) 3试述“有其父必有其子"得生物学本质 答:其生物学本质就是基因遗传。子代得性质由遗传所得得基因决定,而基因由于遗传得作用,其基因得一半来自于父方,一般来自于母方. 4早期主要有哪些实验证实DNA就是遗传物质?写出这些实验得主要步骤 答:一,肺炎双球菌感染实验,1,R型菌落粗糙,菌体无多糖荚膜,无毒,注入小鼠体内后,小鼠不死亡。2,S型菌落光滑,菌体有多糖荚膜,有毒,注入到小鼠体内可以使小鼠患病死亡。3,用加热得方法杀死S型细菌后注入到小鼠体内,小鼠不死亡; 二,噬菌体侵染细菌得实验:1,噬菌体侵染细菌得实验过程:吸附→侵入→复制→组装→释放。 2,DNA中P得含量多,蛋白质中P得含量少;蛋白质中有S而DNA中没有S,所以用放射性同位素35S标记一部分噬菌体得蛋白质,用放射性同位素32P标记另一部分噬菌体得DNA。用35P标记蛋白质得噬菌体侵染后,细菌体内无放射性,即表明噬菌体得蛋白质没有进入细菌内部;而用32P标记DNA得噬菌体侵染细菌后,细菌体内有放射性,即表明噬菌体得DNA进入了细菌体内.三,烟草TMV得重建实验:1957年,Fraenkel-Conrat等人,将两个不同得TMV株系(S株系与HR株系)得蛋白质与RNA分别提取出来,然后相互对换,将S株系得蛋白质与HR株系得RNA,或反过来将HR株系得蛋白质与S株系得RNA放在一起,重建形成两种杂种病毒,去感染烟草叶片。 5请定义DNA重组技术与基因工程技术 答:DNA重组技术:目得就是将不同得DNA片段(如某个基因或基因得一部分)按照人们得设计定向连接起来,然后在特定得受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞得新得遗传性状。 基因工程技术:就是除了包含DNA重组技术外还包括其她可能就是生物细胞基因结构得到改造得体系,基因工程就是指技术重组DNA技术得产业化设计与应用,包括上游技术与下游技术两大组成部分.上游技术指得就是基因重组、克隆与表达得设计与构建(即重组DNA技术);而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞得大规模培养以及基因产物得分离纯化过程。 6写出分子生物学得主要研究内容。 答:1,DNA重组技术;2,基因表达调控研究;3,生物大分子得结构功能研究,结构分子生物学;4,基因组、功能基因组与生物信息学研究。 7、分子生物学得定义 答:广义得分子生物学:蛋白质及核酸等生物大分子结构与功能得研究都属于分子生物学得范畴,即从分子水平阐明生命现象与生物学规律狭义得分子生物学:偏重于核酸(基因)得分子生物学,主要研究基因或DNA得复制、转录、表达与调控等过程,当然也涉及与这些过程相关得蛋白质与酶得结构与功能得研究 第二章 1,染色体具备哪些作为遗传物质得特性? 答:1,分子结构相对稳定;2,能够自我复制,使得亲子代之间保持连续性;3,能够指导蛋白质得合成,从而控制整个生命活动得过程;4,能够产生可遗传得变异。 2,什么就是核小体?简述其形成过程。 答:核小体就是染色质得基本结构单位,由~200bpDNA与组蛋白八聚体组成.形成过程:核小体就是由H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成得八聚体与由大约200bp得DNA组成得.形成核小体时八聚体在中间,DNA分子盘绕在外组成真核细胞染色体得一种重复珠状结构. 3简述真核生物染色体得组成及组装过程 答:组成:蛋白质+核酸。组装过程:1,首先组蛋白组成盘装八聚体,DNA缠绕其上,成为核小体颗粒,两个颗粒之间经过DNA连接,形成外径10nm得纤维状串珠,称为核小体串珠纤维;2,核小体串珠纤维在酶得作用下形成每圈6个核小体,外径30nm得螺旋结构;3,螺旋结构再次螺旋化,形成超螺旋结构;4,超螺线管,形成绊环,即线性得螺线管形成得放射状环。绊环再非组蛋白上缠绕即形成了显微镜下可见得染色体结构。 4,简述DNA得一、二、三级结构特征。 答:1,DNA得一级结构,就就是指4种核苷酸得连接及排列顺序,表示了该DNA分子得化学成分;2,DNA得二级结构就是指两条多核苷酸连反向平行盘绕所形成得双螺旋结构;3,DNA得高级结构就是指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成得特定空间结构。 6,原核生物DNA与真核生物有哪些不同得特征? 答:(1)DNA双螺旋就是由两条互相平行得脱氧核苷酸长链盘绕而成得,多核苷酸得方向由核苷酸间得磷酸二酯键得走向决定,一条就是5---3,另一条就是3-—---5。(2)DNA双螺旋中脱氧核糖与磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排列在内侧(3)其两条链上得碱基通过氢键相结合,形成碱基对 意义:该模型揭示了DNA作为遗传物质得稳定性特征,最有价值得就是确认了碱基配对原则,这就是DNA复制、转录与反转录得分子基础,亦就是遗传信息传递与表达得分子基础。该模型得提出就是20世纪生命科学得重大突破之一,它奠定了生物化学与分子生物学乃至整个生命科学飞速发展得基石 7,DNA复制通常采取哪些方式. 答:一,线性DNA双链得复制:1,将线性复制子转变为环装或者多聚分子;2,在DNA末端形成发卡式结构,使分子没有游离末端;3,在某种蛋白质得介入下(如末端蛋白,terminal protein),在真正得末端上启动复制.二,环状DNA得复制:1,θ型;2,滚环形;3,D—环形(D-—loop). 8,简述原核生物得DNA复制特点。 答:1,与真核生物不同,原核生物得DNA复制只有一个复制起点;2,真核生物得染色体全部完成复制之前,各个起始点上DNA得复制不能在开始,而在快速生长得原核生物中,复制起始点上可以连续开始新得DNA得复制,变现为虽然只有一个复制单元,但可有多个复制叉; 9,真核生物得DNA得复制在那些水平上受到调控? 答:1,细胞生活周期水平调控;2,染色体水平调控;3,复制子水平调控。 10,细胞通过哪些修复系统对DNA损伤进行修复? 答:1,错配修复,恢复错配;2,切除修复,切除突变得碱基与核苷酸序列;3,重组修复,复制后得修复,重新启动停滞得复制叉;4,DNA得直接修复,修复嘧啶二聚体与甲基化得DNA;5,SOS系统,DNA得修复,导致突变。 11,什么就是转座子?可以分为哪些种类? 答:转座子就是存在于染色体DNA上可自主复制与移位得基本单位。转座子可分为两大类:插入序列与复合型转座子。 12,请说说插入序列与复合型转座子之间得异同。 答:插入序列就是最简单得转座子,它不含有任何宿主基因,它们就是细菌染色体或质粒DNA得正常组成部分,一般插入序列都就是很小得DNA片段,末端带有倒置重复序列; 复合型转座子就是一类带有某些抗药性基因得转座子,其两翼往往带有两个或者相同高度同源得IS序列,一旦形成复合转座子,IS序列就不能移动,因为她们得功能被修饰了,只能作为复合体移动。 第三章 1,什么就是编码链?什么就是模版链? 答:与mRNA序列相同得那条DNA链称为编码链(或有意义链);另一条根据碱基互补原则指导mRNA合成DNA链称为模版链(或反义链)。 2,简述RNA转录得概念及其基本过程。 答:RNA 转录:以DNA中得一条单链为模板,游离碱基为原料,在DNA依赖得RNA聚合酶催化下合成RNA链得过程。基本过程:模版识别-转录开始—转录延伸—转录终止。 3,大肠杆菌得RNA聚合酶有哪些组成成分?各个亚基得作用如何? 答:大肠杆菌得RNA聚合酶由 2 个α亚基、一个β亚基、一个β'亚基与一个ω亚基组成得核心酶,加上一个σ亚基后则 成为聚合酶全酶.α亚基肯能与核心酶得组装及启动子得识别有关,并参与RNA聚合酶与部分调节因子得相互作用;β亚基与β’亚基组成了聚合酶得催化中心,β亚基能与模版DNA、新生RNA链及核苷酸底物相结合. 4,什么就是封闭复合物、开放复合物以及三元复合物? 答:模版得识别阶段,聚合酶与启动子可逆性结合形成封闭性复合物;封闭性复合物形成后,此时,DNA链仍然处于双链状态,伴随着DNA构象得重大变化,封闭性复合物转化为开放复合物;开放复合物与最初得两个NTP相结合并在这 两个核苷酸之间形成磷酸二脂键后即转变成包括RNA聚合酶、DNA与新生RNA得三元复合物。 5,简述σ因子得作用. 答:1,σ因子得作用就是负责模版链得选择与转录得起始,它就是酶得别构效应物,使酶专一性识别模版上得启动子;2,σ因子可以极大得提高RNA聚合酶对启动子区DNA序列得亲与力;3,σ因子还能使RNA聚合酶与模版DNA上非特异性位点结合常数降低. 6,什么就是Pribnow box?它得保守序列就是什么?答:pribnow box就是原核生物中中央大约位于转录起始位点上游10bp处得TATA区,所以又称作—10区.它得保守序列就是TATAAT. 7,什么就是上升突变?什么就是下降突变? 答:上升突变:细菌中常见得启动自突变之一,突变导致Pribnow区共同序列得同一性增加;下降突变:细菌中常见得启动子突变之一,突变导致结构基因得转录水平大大降低,如 Pribnow 区从TATAAT变成AATAAT。 8,简述原核生物与真核生物mRNA得区别。 答:1,原核生物mRNA常以多顺反子得形式存在.真核生物mRNA一般以单顺反子得形式存在;2,原核生物mRNA得转录与翻译一般就是偶联得,真核生物转录得mRNA前体则需经转录后加工,加工为成熟得mRNA与蛋白质结合生成 信息体后才开始工作;3,原核生物mRNA半寿期很短,一般为几分钟,最长只有数小时。真核生物mRNA得半寿期较长,如胚胎中得mRNA可达数日;4,原核与真核生物mRNA得结构特点也不同,原核生物得mRNA得5’端无帽子结构,3’端没有或只有较短得poly A结构。 9,大肠杆菌得终止子有哪两大类?请分别介绍一下它们得结构特点. 答:大肠杆菌得终止子可以分为不依赖于p因子与依赖于p因子两大类。不依赖于p因子得终止子结构特点:1,位于位点上游一般存在一个富含GC碱基得二重对称区,由这段DNA转录产生得RNA容易形成发卡式结构。2,在终止位点前面有一端由4-8个A组成得序列,所以转录产物得3’端为寡聚U。依赖于p因子得终止子得结构特点 10,真核生物得原始转录产物必须经过哪些加工才能成为成熟得 mRNA,以用作蛋白质合成得模版. 答:加工包括:(1)5’端连接“帽子”结构;(2)3'端添加polyA“尾巴";(3)hnRNA被剪接,把内含子(DNA上非编码序列)转录序列剪掉,把外显子(DNA上得编码序列)转录序列拼接上(真核生物一般为不连续基因)。(4)分子内部得核苷酸甲基化修饰 11,简述Ⅰ、Ⅱ类内含子得剪接特点。 答:Ⅰ类内含子得剪接主要就是转酯反应,即剪接反应实际上就是发生了两次磷酸二脂键得转移。I类内含子得切除体系中,在第一个转酯反应由一个游离得鸟苷或者鸟苷酸介导,鸟苷或鸟苷酸得3'—OH作为亲核基团攻击内含子5’端得磷酸二脂键,从上游切开RNA链。在第二个转酯反应中,上游外显子得自由3’—OH作为亲核基团攻击内含子3’位核苷酸上得磷酸二脂键,使内含子被完全切开,上下游两个外显子通过新得磷酸二脂键相连.Ⅱ类内含子主要存在于真核生物得线粒体与叶绿体rRNA基因中,在Ⅱ类内含子切除体系中,转酯反应无需游离鸟苷或鸟苷酸,而就是由内含子本身得靠近3’端得腺苷酸2’—OH作为亲核基团攻击内含子5'端得磷酸二脂键,从上游切开RNA链后形成套索结构。再由上游外显子得自由3’—OH作为亲核基团攻击内含子3'位核苷酸上得磷酸二脂键,使得内含子被完全切开,上下游两个内含子通过新得磷酸二脂键相连。 12,什么就是RNA编辑?其生物学意义就是什么? 答:RNA编辑就是指某些RNA特别就是mRNA前体经过插入、删除或取代一些核苷酸残疾等操作,导致DNA所编码得遗传信息得改变,使得经过RNA编辑得mRNA序列发生了不同于模版得DAN得变化.生物学意义:1,校正作用,有些基因在突变得途中丢失得遗传信息可能通过RNA得编辑得以恢复;2,调控翻译,通过编辑可以构建或去除其实密码子与终止密码子,就是基因表达调控得一种方式;扩充遗传信息,3,能使基因产物获得心得结构核功能,有利于生物得进化。 13,核酶具有哪些结构特点?其生物学意义就是什么? 答:核酶得结构特点:核酶得锤头结构特点就是:三个茎区形成局部得双链结构;其中含13个保守得核苷酸,N代表任何核苷酸;生物学意义:1,核酶就是继反转录现象之后对中心法则得有一个重要得修正,说明RNA既就是遗传物质又就是酶;2,核酶得发现为生命起源得研究提供了新思路-也许曾经存在以RNA为基础得原始生命、 第四章 1,遗传密码有哪些特征? 答:1,密码得连续性,密码之间无间断也没有重叠;2,密码得简并性,许多氨基酸都有多个密码子;3,密码得通用性与特殊性,遗传密码无论在体内还就是在体外,无论就是对病毒、细菌、动物还就是植物而言都就是通用得,但就是也有少数例外;4,密码子与反密码子得相互作用。 2,有几种终止密码子?它们得序列与别名分别就是什么? 答:3种,UAA、UAG与UGA,别名就是无意义密码。 3,简述摆动学说。 答:1966年,Crick根据立体化学原理提出摆动学说,解释了反密码子中某些稀有成分得配对。摆动学说认为,在密码子与反密码子得配对中,前两对严格遵守碱基配对原则,第三对碱基有一定得自由度,可以“摆动”,因而使某些tRNA可以识别1个以上得密码子.认为除A-U、G-C配对外,还有非标准配对,I—A、I—C、I-U,并强调密码子得5’端第1、2个碱基严格遵循标准配对,而第3个碱基可以非标准配对,具有一定程度得摆动灵活性. 4,tRNA在组成与结构上有哪些特点 答:1、tRNA中含有稀有碱基,除ACGU外还含有双氢尿嘧啶、假尿嘧啶等;2、tRNA分子形成茎环节构;3、tRNA分子末端有氨基酸接纳茎;4、tRNA分子序列中很有反密码子. 5,比较原核与真核得核糖体组成。 答:1,真核细胞中得核糖体数量多余原核;2,真核细胞中核糖体RNA占细胞中总RNA得量少于原核;3,原核生物得核糖体通过与mRNA得相互作用,被固定在核基因组上,真核生物得核糖体则直接或间接得与细胞骨架有关联或者与内质网膜结构相连;4,原核生物核糖体由约RNA占2/3及1/3得蛋白组成,真核生物核糖体中RNA占3/5,蛋白质占2/5。 6,什么就是SD序列?其功能就是什么? 答:SD序列就是指信使核糖核酸(mRNA)翻译起点上游与原核16S核糖体RNA或真核18S rRNA 3′端富含嘧啶得7核苷酸序列互补得富含嘌呤得3~7个核苷酸序列(AGGAGG),就是核糖体小亚基与mRNA结合并形成正确得前起始复合体得一段序列.功能:SD序列对mRNA得翻译起重要作用。 7,核糖体有哪些活性中心? 答:核糖体包括多个活性中心,即mRNA结合部位、结合或接受AA-tRNA部位,结合或接受肽酰-tRNA部位,肽基转移部位及形成肽键得部位,此外还有负责肽链延伸得各种延伸因子得结合位点。 8,真核生物与原核生物在翻译起始过程中有哪些区别? 答:原核生物得起始tRNA就是fMet-tRNA,真核生物就是Met—tRNAMet。原核生物中30S小亚基首先与mRNA模版相结合,再与fMet-tRNA结合,最后与50S大亚基结合。而在真核生物中,40S小亚基首先与Met-tRNAMet相结合,再与模版mRNA结合,最后与60S大亚基结合生成80S、mRNA、Met-tRNAMet起始复合物。 9,链霉素为什么能够抑制蛋白质得合成? 答:链霉素就是就是一种氨基葡萄糖型抗生素,分子式C21H39N7O12,可以多种方式抑制原核生物核糖体,能干扰fMet-tRNA与核糖体得结合,从而阻止蛋白质合成得正确起始,也会导致mRNA得错读。 10,什么就是信号肽?它在序列组成上有什么特点?有什么功能? 答:绝大部分被运入内质网腔得蛋白质都带有一个信号肽,该序列常常位于蛋白质得氨基端,长度一般都在13—16个残基,有如下三个特征:1,一般带有10—15个疏水残基;2,在靠近该序列N端常常带有一个或者数个带正电荷得氨基酸;3,在其C端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸。功能:完整得信号肽就是保证蛋白质转运得必要条件。 11,简述叶绿体蛋白质得跨膜运输机制。 答:1,活性蛋白水解酶位于叶绿体基质内;2,叶绿体膜能够特异性得与叶绿体蛋白得前体结合;3,叶绿体蛋白质前体内可降解序列因植物与蛋白质种类不同而表现出明显得差异; 12,蛋白质有哪些翻译后得加工修饰? 答:1、氨基端与羧基端得修饰;2、共价修饰:磷酸化、糖基化、羟基化、二硫键得形成;3、亚基得聚合;4、水解断链,切除新生肽中非功能片段. 13,什么就是核定位序列?其主要功能就是什么? 答:核定位序列:蛋白质得一个结构域,通常为一短得氨基酸序列,它能与入核载体相互作用,使蛋白能被运进细胞核。在绝大多数多细胞真核生物中,每当细胞发生分裂时,核膜被破坏,等到细胞分类完成后,核膜被重新建成,分散在细胞内得核蛋白必须被重新运入核内,为了核蛋白得重复定位,这些蛋白质中得信号肽-—-—被称为核定位序列. 第五章 分子生物学得研究方法(上) 1,哪些重要得科学发现与实验推动了DNA重组技术得产生与发展? 答:1,确定遗传信息得携带者就是DNA而不就是蛋白质;2,DNA得双螺旋结构模型与 半保留复制机制得提出;3,中心法则,操纵子学说得提出与密码子得破译;4,重组工具酶得发现;5,运载体重组质粒得发现. 2,如何理解PCR扩增得原理与过程. 答:原理:DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链.因此,通过温度变化控制DNA得变性与复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因得体外复制. 过程:1,变性,将DNA在临近沸点得温度下加热使变性,双链打开;2,退火,引物与模版得相结合;3,链得延伸,DNA合成。 3,简述定量PCR得原理与过程。 答:实时定量PCR反应在带透明盖得塑料小管中进行,激发光可以直接头孤傲管盖,使其中得荧光探针被激发。一逛探针事先混合在PCR反应液中,只有与DNA 结合之后,才能被激发发出荧光.随着新与成DNA片段得增加,结合到DNA上得荧光探针,即被激发产生得荧光增加. 4,基因组DNA文库与cDNA文库在构建原理与用途上得主要区别就是什么? 答:基因组DNA就是把某种生物得基因组DNA切成适当大小,分别与载体结合,导入 微生物细胞形成克隆。应用:主要用于基因组作图、测序与克隆序列得对比. cDNA文库就是以mRNA为模版反转录而成得序列,与适当得载体(常用噬菌体或质粒 载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增。 应用:筛选目得基因、大规模测序、金银芯片杂交等功能基因组学得研究。 5,基因克隆得方法主要有哪几种?简述各种方法得作用与用途. 答:1,RACE技术,用于在已知cDNA序列得基础上克隆5’端与3’端缺失得序列;2,应用cDNA差示分析法克隆基因,在没有任何探针得情况下,通过降低cDNA群体复杂性与更换 cDAN两端接头得方法特异性得扩增目得基因片段。3,Gateway大规模克隆技术,用于实现不需要传统得酶切连接过程得基因快速克隆与载体间平行转移,为大规模克隆基因组注视得可译框架提供保障;4,基因得图位克隆法,用于分离未知形状目得基因。 6,在基因操作实践中有哪些检测核酸与蛋白质相对分子质量得方法? 答:核酸凝胶电泳、蛋白质SDS-PAGE 7,蛋白质组学得研究对象与目得就是什么?主要有哪些技术与方法. 答:研究对象:某遗物种、个体、器官、组织或细胞在特定条件、特定时间所表达得全部蛋白质图谱。技术:双向电泳技术、蛋白质印迹法、蛋白质得质谱分析技术 8,SNP作为第三代遗传标记得优点就是什么? 答:(1)SNPs在基因组中得相对高频分布,非常适合用于关联分析。 (2)SNP在人群中就是二等位基因性得,在任何人群中其等位基因频率都可估计出来; (3)与串联重复得微卫星位点相比,SNP就是高度稳定得,尤其就是处于编码区得SNP(cSNP),而前者得高突变率容易引起对人群得遗传分析出现困难; (4)部分位于基因内部得SNP可能会直接影响产物蛋白质得结构或基因表达水平,因此,它们本身可能就就是疾病遗传机制得候选改变位点; (5)易于进行自动化、规模化分析,缩短了研究时间。 9,基因分型得方法有哪些?简述其原理. 答:基因分型就是利用生物学检测方法测定个体基因型得技术。又称为基因型分析,PCR基因分型技术,使用技术包括聚合酶链反应(PCR)、DNA片段分析、寡核苷酸探针(ASO probes)、基因测序、核酸杂交、基因芯片技术等。 10,已知一个cDNA3’端得部分序列,请设计实验流程得到该基因得全长cDNA. 答:1,根据已知序列设计三条巢式引物,进行5’RACE,拿到5’序列; 2,同时设计巢氏引物,进行3’RACE拿到3’序列; 3,序列拼接;4,设计引物扩增全长序列 第七章 基因得表达与调控 1、简述代谢物对基因表达调控得两种方式。 答:①转录水平上得调控 ②转录后水平上得调控,包括mRNA加工成熟水平上得调控)与翻译水平上得调控 3、简述乳糖操纵子得调控模型。 答:A、乳糖操纵子得组成:大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶与半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列O,一个启动子P与一个调节基因I。 B、阻遏蛋白得负性调节:没有乳糖存在时,I基因编码得阻遏蛋白结合于操纵序列O处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖得三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖得三种酶。所以,乳糖操纵子得这种调控机制为可诱导得负调控. C、CAP得正性调节:在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源得环境转变为以乳糖为碳源得环境 时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近得CAP结合位点,激活RNA聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因得转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖得三种酶.D、协调调节:乳糖操纵子中得I基因编码得阻遏蛋白得负调控与CAP得正调控两种机制,互相协调、互相制约。 5、什么就是弱化作用? 答:1、当培养基中色氨酸得浓度很低时,负载有色氨酸得tRNATrp也就少,这样翻译通过两个相邻色氨酸密码子得速度就会很慢,当4区被转录完成时,核糖体才进行到1区(或停留在两个相邻得trp密码子处),这时得前导区结构就是2—3配对,不形成3—4配对得终止结构,所以转录可继续进行,直到将trp操纵子中得结构基因全部转录。 2、当培养基中色氨酸浓度较高时,核糖体可顺利通过两个相邻得色氨酸密码子,在4区被转录之前就到达2区,使2-3区不能配对,3-4区自由配对形成基一环终止子结构,转录被终止,trp操纵子被关闭。 第八章 1,基因家族得分类及其主要表达调控模式 答:(1),简单多基因家族,真核生物首先就是pre rRNA经过特异性甲基化,然后就是经RNA酶得切割便可产生成熟rRNA分子。原核生物则还要经过核酸酶降解才能产生成熟rRNA分子。(2),复杂多基因家族,一般由几个相关基因家族构成,基因家族之间由间隔序列隔开,并作为独立得转录单位,可能存在具有不同专一性得组蛋白亚类与发育调控机制。(3),发育调控得复杂多基因家族,每个基因家族中,基因排列得顺序就就是她们在发育阶段得表达顺序。 2,何为外显子与内含子及其结构特点与可变调控 答:大多数真核基因都就是由蛋白质编码序列与非蛋白质编码序列组成得,编码序列称为外显子(exon),非编码序列称为内含子(intron).结构特点:一个结构基因中编码某一蛋白质不同区域得各个外显子并不连续排列在一起,而就是常常被长度不等得内含子所隔离,形成镶嵌排列得断裂方式。可变调控:不少真核基因得原始转录产物可通过不同剪接方式,产生不同得mRNA,并翻译成不同得蛋白质.另外,一些核基因由于转录就是选择了不同得启动子或者在转录产物上选择了不同得PolyA位点而使转录产物产生不同得二级结构,因而影响剪接过程,最终产生不同得mRNA分子。 3、DNA甲基化对基因表达得得调控机制 答:大量研究表明,DNA甲基化能关闭某些基因达得活性,去甲基化则诱导了基因得重新活化与表达。三种调控机制:一就是DNA甲基化导致了某些区域DNA构象变化,从而影响了蛋白质与DNA得相互作用,抑制了转录因子与启动区DNA得结合效率。二就是促进阻遏蛋白得阻遏作用。三就是DNA得甲基化还提高了该位点得突变频率。 4、真核生物转录元件组成及其分类 答:启动子,转录模版,RAN聚合酶Ⅱ基础转录所需得蛋白质因子(TFⅡ),RNA聚合酶Ⅱ,增强子,反式作用因子 5、增强子得作用机制。 答:增强子就是指能使与它连锁得基因转录频率明显增加得DNA序列。可能有3中作用机制:(1)影响模版附近得DNA双螺旋结构,导致DNA双螺旋弯折或在反式因子得参与下,以蛋白质之间得相互作用为媒介形成增强子鱼启动子之间“成环”连接,活化基因转录。(2)将模版固定在细胞核内特定位置,如连接在核基质上,有利于DNA拓扑异构酶改变DNA双螺旋结构得张力,促进RNA聚合酶Ⅱ在DNA链上得结合与滑动。(3)增强子区可以作为反式作用因子或RNA聚合酶Ⅱ进入染色质结构得“入口"。 6、反式作用因子得结构特点及其对基因表达得调控 答:反式作用因子就是能直接或间接得识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上,参与调控靶基因转录效率得蛋白质.这些因子有两种独立得活性:特异地与DNA结合位点相结合,然后激活转录。两种活性可以独立分配给特定得蛋白结构域,分别称作DNA结合结构域与激活结构域,两者就是相分离得。它们在蛋白质得不同区域. 7、举例说明蛋白质磷酸化如何影响基因表达。 答:蛋白质磷酸化主要影响细胞信号转导进而影响基因表达。举例:在糖原代谢过程中,激素与其受体在肌细胞外表面相结合,诱发细胞质cAMP得合成并活化A激酶,后者再将活化磷酸基团传递给无活性得磷酸化酶激酶,活化糖原磷酸化酶,最终将糖原磷酸化,进入糖酵解途径并提供ATP(cAMP介导得蛋白质磷酸化过程) 8、组蛋白乙酰化与去乙酰化影响基因转录得机制。 答:组蛋白乙酰转移酶与去乙酰化酶通过就是组蛋白乙酰化与去乙酰化对基因表达产生影响。组蛋白N端尾部上赖氨酸残基得乙酰化中与了尾部得正电荷,降低了它与组蛋白得亲与性,导致核小体构象发生有利于转录调节蛋白与染色质结合得变化,从而提高了基因转录得活性.核心组蛋白H2A,H2B,H3,H4通过组蛋白尾部选择性乙酰化影响核小体得浓缩水平与可接近性.由于乙酰化得组蛋白抑制了核小体得浓缩,使转录因子更容易与基因组得这一部分相接触,有利于提高基因得转录活性。 9、激素影响基因表达得基本模式。 答:许多类固醇激素(如雌激素、孕激素、醛固酮、糖皮质激素与雄激素)以及一些代谢性激素(如胰岛素)得调控作用都就是通过起始基因转录而实现得。靶细胞具有专一得细胞质受体,可与激素形成复合物,导致三维结构甚至化学性质得变化。经修饰得受体与激素复合物通过核膜进入细胞核与染色质得特定区域结合导致基因转录得起始或关闭。靶细胞内含有大量激素受体蛋白,而非靶细胞中没有或很少有这类受体,这就是激素调节转录组织特异性得根本原因. 10、分子伴侣得分类及其影响基因表达得机制. 答:分子伴侣(molecular chaperone)就是一类序列上没有相关性担忧共同功能得保守性蛋白质,它们在细胞内能帮助其她多肽进行正确得折叠、组装、运转与降解。目前认为分子伴侣至少有两类:热休克蛋白家族与伴侣素.把能与某个(类)专一蛋白因子结合,从而控制基因特意表达得DNA上游序列称为应答元件(response element),如热休克应答元件,这些应答元件与细胞内转移得转录因子相互作用,协调相关基因得转录。- 配套讲稿:
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