分子生物学知识点整理.doc
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1、一、 名词解释:1、 基因:基因就是位于染色体上得遗传基本单位,就是负载特定遗传信息得DN片段,编码具有生物功能得产物包括RN与多肽链。2. 基因表达:即基因负载遗传信息转变生成具有生物学功能产物得过程,包括基因得激活、转录、翻译以及相关得加工修饰等多个步骤或过程。、 管家基因:在一个生物个体得几乎所有组织细胞中与所有时间段都持续表达得基因,其表达水平变化很小且较少受环境变化得影响。如APH、肌动蛋白基因、4、启动子:就是指位于基因转录起始位点上游、能够与NA聚合酶与其她转录因子结合并进而调节其下游目得基因转录起始与转录效率得一段DNA片段、5。 操纵子:就是原核生物基因表达得协调控制单位,包
2、括有结构基因、启动序列、操纵序列等。如:乳糖操纵子、色氨酸操纵子等。6。 反式作用因子:指由其她基因表达产生得、能与顺式作用元件直接或间接作用而参与调节靶基因转录得蛋白因子(转录因子)。7。顺式作用元件:即位于基因附近或内部得能够调节基因自身表达得特定N序列。就是转录因子得结合位点,通过与转录因子得结合而实现对真核基因转录得精确调控。8、 t值:即循环阈值(ycle hod,C),就是指在PCR扩增过程中,扩增产物得荧光信号达到设定得荧光阈值所经历得循环数、(它与PCR扩增得起始模板量存在线性对数关系,由此可以对扩增样品中得目得基因得模板量进行准确得绝对与(或)相对定量。)9、 核酸分子杂交:
3、就是指核酸分子在变性后再复性得过程中,来源不同但互不配对得核酸单链(包括DNA与DNA,与RNA,RNA与RNA)相互结合形成杂合双链得特性或现象,依据此特性建立得一种对目得核酸分子进行定性与定量分析得技术则称为分子杂交技术。10。 印迹或转印:就是指将核酸或蛋白质等生物大分子通过一定得方法转移并固定至尼龙膜等支持载体上得一种方法,该技术类似于用吸墨纸吸收纸张上得墨迹。1。 探针:就是一种用同位素或非同位素标记核酸单链,通常就是人工合成得寡核苷酸片段、12、基因芯片:又称N芯片或NA微阵列,就是基于核酸分子杂交原理建立得一种对D进行高通量、大规模、并进行分析得技术,其基本原理就是将大量寡核苷酸
4、分子固定于支持物上,然后与标记得待测样品进行杂交,通过检测杂交信号得强弱进而对待测样品中得核酸进行定性与定量分析、13. 基因文库:就是指通过克隆方法保存在适当宿主中得一群混合得NA分子,所有这些分子中得插入片段得总与,可代表某种生物得全部基因组序列或全部得mA序列,因此基因文库实际上就是包含某一生物体或生物组织样本得全部DN序列得克隆群体。基因文库包括两类:基因组文库与cD文库。14。 克隆:就是来自同一始祖得相同副本或拷贝得集合。15、 载体:为携带得目得基因,实现其无性繁殖或表达有意义得蛋白质所采用得一些DNA分子、16、 限制性核酸内切酶:识别NA得特意序列,并在识别位点或其周围切割双
5、链DNA得一类内切酶。7. 基因工程(nti Egnein):又称基因操作(enemaniution)、DA重组(DN reaon),就是指采用类似于工程建设得方式,按照预先设计得蓝图,将一种或多种生物体(供体)得基因育载体在体外进行拼接重组构建成杂种DNA分子,然后转入另一种生物体(受体)内,以改变生物原有得遗传特性并表达出新得性状。获得新品种,生产新产品,或就是研究基因得结构与功能。因此,供体、受体与载体称为基因工程得三大要素,其中相对于受体而言,来自供体得基因属于外源基因。由于NA重组分子大都需在受体细胞中复制扩增,故还可以将基因工程表征为分子克隆(Moleclar Cloning)或基
6、因得无性繁殖、 目得基因:感兴趣得基因或DNA序列。19. 生长因子:(growh factor)通过质膜上特异得受体,将信息传递至细胞内部,调节细胞生长与增殖得多肽类物质。2、 基因组:泛指一个生命体、病毒或细胞器得全部遗传物质、1、 蛋白质组:指一个细胞内得全套蛋白质,反映了特殊阶段、环境状态下,细胞或组织在翻译水平得蛋白质表达谱。22。 人类基因组计划:就是美国科学家于186年率先提出,90年正式启动得,这一计划得目标就是为30亿个碱基对构成得人类基因组精确测序,从而最终弄清楚每种基因产生得蛋白质及其作用,它得实施将会为认识疾病得分子机制以及诊断与治疗提供重要依据。23、基因诊断:利用现
7、代分子生物学与分子遗传学得技术方法直接检测基因结构及其表达水平就是否正常,从而对人体状态与疾病做出诊断得方法。24。 基因治疗:从广义来说,将某种遗传物质转移到患者细胞内,使其在体内发挥作用而达到治疗疾病目得得方法均称为基因治疗。25、基因替换:用正常得基因通过体内基因同源重组,原位替换病变细胞内得致病基因,使细胞内NA完全恢复正常状态得基因治疗方法。26。自杀基因:某些病毒或细菌得基因所表达得酶能将对人体无毒或低毒得药物在人体细胞内转变为细胞毒性产物,从而导致携带该基因得受体细胞也被杀死,故称这类基因为“自杀基因”。27.转录组:就是一个细胞内得一套RA转录物,包含了某一环境条件下、某一生命
8、阶段、某一生理或病理状态下,生命体得细胞或组织所表达得基因种类及水平。28。 癌基因:(ocgene)细胞内控制细胞生长与分化得基因,它得结构异常或表达异常,可以引起细胞癌变。9。 病毒癌基因:存在于肿瘤细胞中,能使靶细胞发生恶性转化得基因、0. 抑癌基因:也称为抗癌基因。抑癌基因得产物就是抑制细胞增殖,促进细胞分化,与抑制细胞迁移,因此起负调控作用,抑癌基因得突变就是隐性得(也称抗癌基因。抑癌基因得产物就是抑制细胞增殖,促进细胞分化,与抑制细胞迁移,因此起负调控作用,抑癌基因得突变就是隐性得。)31。 结构基因组学:就是以全基因组测序为目标得基因结构研究,弄清楚基因组中全部基因得位置与结构,
9、为基因功能得研究奠定基础、其主要内容就就是制作高分辨率得人类基因组得遗传图与物理图,最终完成人类其她重要模式生物全部基因组DNA序列测定。二、 问答题1. 以乳糖操纵子为模型解释原核生物转录水平得调控模式 转录水平得调节操纵子调控模式 (1)操纵子得概念:操纵子就是原核生物基因表达得协调控制单位,包括有结构基因、启动序列、操纵序列等。如:乳糖操纵子、色氨酸操纵子等。 (2)乳糖操纵子得结构:乳糖操纵子包括调节基因I、一个操纵序列O、一个启动序列P以及单个结构基因Z、Y、。其中调节基因I编码生成阻遏蛋白,后者与操纵序列结合;RN聚合酶与启动序列结合;分解代谢物基因激活蛋白(CAP)也结合在操纵序
10、列附近;结构基因、Y与A分别编码三个与乳糖代谢有关得酶,即:-半乳糖苷酶,透酶与乙酰转移酶、这三个酶得基因作为一个整体由同一个调控区调节,以实现基因得协调表达、 ()其调节机制主要有正性与负性两种模式。阻遏蛋白得负性调节:当没有乳糖时,调节基因表达生成阻遏蛋白,阻遏蛋白结合操纵子序列出,阻碍RNA结合酶与启动序列结合,抑制结构基因得转录启动,此时操纵子处于阻遏状态;当有半乳糖存在时,乳糖首先被转变成半乳糖,半乳糖则作为一种诱导剂与阻遏蛋白结合,诱发蛋白质构象改变,使阻遏蛋白从启动序列上解离下来,从而启动结构基因得转录,此时操纵子处于诱导状态。CA得正性调节:当没有葡萄糖时,cA浓度升高,与CA
11、P结合,A进而结合在启动序列附近,从而进一步促进结构基因得转录。当有葡萄糖时,cAMP浓度降低,结合在启动序列附近得CAP减少,结构基因转录速率降低、协调调节:实际情况下,上述两种调节方式就是相辅相成、相互协调得。譬如:在无乳糖且有葡萄糖时,阻遏蛋白负性调节起作用,此时结构基因不被转录;在有乳糖且有葡萄糖时,阻遏蛋白负性调节不起作用,此时结构基因转录水平低;在有乳糖且无葡萄糖时,阻遏蛋白得抑制作用不解除,CAP正性调节被激活,此时结构基因得转录水平最高。2. 生长因子得作用机制生长因子由不同得细胞得细胞合成后分泌,作用于靶细胞上得相应受体,这些受体有得就是位于细胞膜上得,有得就是位于细胞内部。
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