实验室生物安全综合手册.doc

实验室生物安全手册

科左后旗妇幼保健所检查科

目录

一、临床实验室生物危害性评估--------------64
二、实验室设备与设施------------------------65
三、实验室与仪器设备危害有关危害----------65
四、微生物操作规程和规范--------------------65
（一）实验室安全技术操作规程--------------65
1、常规微生物操作规程中安全操作要点----65
2、特殊安全操作规程--------------------66
五、健康和医学监测--------------------------68
六、安全组织和培训--------------------------68
（一）、生物安全委员会---------------------68
（二）、保障人员安全准则-----------------68
1、生物安全管理制度-------------------68
2、实验室安全管理程序---------------69
（三）人员培训筹划------------------------71
七、废弃物解决----------------------------71
八、意外事故应对方案和应对程序------------72
九、化学试剂、火和电安全----------------78
1、防水灾、防火灾、防电害、防盗程序
2、有毒品、强酸、强碱等安全管理程序

一临床实验室危害性评估

科左后旗妇幼保健所
临床实验室危害性评估小组

组长：秦岭
副组长：张春玲
孟玉莲
李永山
白那顺
成员： 李媛媛
苏高原
包晓华
东智

生物危害评估是临床实验室生物安全工作核心内容，是实验室分级管理重要前提。临床实验室生物危害评估应建立在对于特定实验室工作全面理解基本之上并由有资力人员进行。微生物致病性是影响生物危害评估最重要决定性因素。依照病原体毒力、感染后果（涉及发病率）、流行性、感染发病剂量、实验室和社区中感染途径或传播方式、宿主范畴、病原体在实验室环境中存活能力以及有无有效防止治疗手段等分析评估微生物有关特定实验室危害。
当实验室活动涉及传染或潜在传染性生物因子时，应进行危害限度评估。生物危害评估不但有助于确立实验室原则化操作程序，有助于实验室合理设计与布局，有助于实验设备和安全设备对的配备与有效使用，并且有助于在工作过程中对于原则操作程序以及实验室设备、设施配备与否恰当和使用有效性进行评价与改进。因此，生物危害评估活动应是一种动态、不断完善过程。
1、生物因子种类：对有传染性标本检查也许具有如人类免疫缺陷病毒、丙型肝炎病毒、梅毒螺旋体、淋球菌、支原体、衣原体、结核杆菌、乙肝病毒、甲肝病毒等。
2、来源：临床实验室在工作过程中也许导致实验室环境污染，如离心、混匀、制片、移液、加样等可产气愤溶胶污染，标本喷溅等可直接污染皮肤黏膜及实验台面和地面等。此外，由于室内环境空间限制，设备、人员拥挤以及通风换气不充分等都也许使实验室内病原体浓度增长，使人群在室内被污染机会明显不不大于室外。此外，啮齿动物、昆虫等也都可携带传播微生物病原体，给实验室工作人员健康带来威胁。例如对患者血液、体液、分泌物、排泄物等标本解决时产生高浓度气溶胶。
由于病原微生物来源广泛，因此在临床实验室各个岗位均存在安全风险，对检查人员及其她有关人员均存在潜在危害。
a.静脉采血岗位
针刺接种：注射器针头刺伤，特别是在采集患者血液后来针头刺伤也许使被刺伤者发生职业暴露。采血者刺伤自己风险较大。
喷溅或泼撒污染：也许由于针头意外脱掉而发生血液喷溅，也也许由于容器倾倒而浮现血液泼撒，这两种状况均可导致皮肤或粘膜污染暴露。
气溶胶污染：在拔出采血针头时、在向容器内注入血液时，特别是在注入血液时发生针头脱落可形成大量气溶胶粒子，易导致呼吸暴露。
b.标本运送岗位
院内标本运送过程中，普通致病微生物也许通过经口、经粘膜或破损皮肤等途径导致传染发生。
泄漏和泼撒污染：容器破裂可导致标本泄漏污染环境和运送人员或其她人员；容器倾倒可导致标本泼撒而致环境和人员污染。
容器表面污染：标本采集时或发生泄漏、泼撒时可导致容器外表面污染而具备潜在危害。

c.标本接受岗位
重要是运送标本泄漏、泼撒及容器外表面污染导致工作人员接触污染，普通状况下工作人员需穿工作服、戴手套上岗。
在疑为高致病性病原体感染时，需特别注意呼吸道传播，特别是泄漏或泼撒后气溶胶污染导致播散。
d.标本离心岗位
离心时也许喷射出气溶胶粒子，特别是在离心结束前制动过程中以及在打开试管盖帽等时均可产生大量具备潜在感染性气溶胶颗粒。
泄漏污染：玻璃离心管可由于破碎导致标本泄漏；离心管内标本盛装过满可导致泄漏。在手工开盖时可发生血标本污染手指或环境；凝集实验可导致标本滴落污染台面或手指等；标本管破裂、倾倒可产生血液泄漏污染。
e.血细胞学检测岗位
在非自动进样血球计数仪进行血液细胞学分析时，标本混均及手工开盖时可产气愤溶胶颗粒；手工细胞学复检制片时可产气愤溶胶颗粒。
在手工开盖时可发生血标本污染手指或环境，手工细胞学复检制片时可污染手指或环境；标本管破裂可产生血液外泄。
f.体液检测岗位
标本污染：体液标本，特别是某些由患者自己采集体液标本如尿液、粪便、前列腺液等常存在容器外表面污染；制备涂片时标本污染手指。
泄漏污染：标本倾倒导致泼撒；容器破裂导致外泄；干化学检测试条携带污染。
气溶胶污染：在制备涂片及干化学试条蘸取标本时可产气愤溶胶颗粒。
g.酶联免疫吸附实验手工检测岗位
气溶胶污染：使用加样枪加样时可产气愤溶胶粒子，特别在吹出最后一滴液体时，手工洗涤时可产气愤溶胶粒子。
泄漏和泼撒污染：手工加样可发生样本滴落污染台面等；加样时可发生反映板表面污染，洗板时可发生洗液污染反映板表面；标本管破裂、倾倒可产生血液外泄。
h.胶体金免疫实验检测岗位
气溶胶污染：使用加样枪加样时可产气愤溶胶粒子，特别在吹出最后一滴液体时。
泄漏和泼撒污染：手工加样可发生样本滴落污染台面等；加样时可发生反映板表面污染；标本管破裂、倾倒可产生血液外泄。
i.仪器维修、维护岗位
表面污染：仪器外表面可附着有各种生物因子；临床标本对流经管道可导致污染。
气溶胶污染：实验过程中产气愤溶胶可在环境中长时间存在，其传染性即与粒子物理性质关于，又与粒子中所携带致病微生物特性关于；打开标本流经管道时可产生传染性气溶胶粒子污染

j.清洁、消毒岗位
气溶胶污染：任何布物等抖动可产气愤溶胶粒子；任何带盖容器在启动盖子时可产气愤溶胶；任何污染材料直接运送过程中可产气愤溶胶。
直接接触污染：任何实验室污染废弃物在收集、归类等时均可经直接接触导致操作人员接触污染。
泄漏和泼撒污染：容器破裂可导致生物材料泄漏；容器倾倒可导致生物材料泼撒。
刺伤接种：破碎玻璃以及针头等尖锐物品也许导致工作人员刺伤，当其污染有生物因子时也许导致相应直接接种。
此外，啮齿动物、昆虫等也都可携带传播微生物病原体，给实验室工作人员健康带来威胁。
3、传染性：由于临床实验室标本来自不同患者，其传染性和致病性也是未知。工作人员在工作中都极有也许接触到结核分支杆菌、SARS病毒、人类免疫缺陷病毒、丙型肝炎病毒、梅毒螺旋体、淋球菌、支原体、衣原体、、乙肝病毒、甲肝病毒等高致病性微生物，如人对乙肝病毒极易感染，只需少量污血进入人体即可导致感染。
4、致病性：临床实验室由于其规模、建筑布局、周边环境、内某些割及通风条件等不同而有不同室内小气候。室内小气候好坏、优劣，对实验室工作人员身体健康有很大影响。临床实验室也由于解决和检测标本不同、检测项目和办法不同，其藏匿具备潜在感染能力微生物种类、数量和存在形式亦不同，再加上实验室工作人员免疫状态不同，均可导致实验室工作人员及有关人员感染。
5、传播途径：实验室获得性感染与在工作中直接接触、使用具有传染性病原体标本或生物材料等关于。最常用实验室获得性感染由上呼吸道吸入、经口食入、尖锐物品刺伤接种及皮肤黏膜污染等形式职业暴露所致。PIKE对3921例报告实验室感染分析表白，其中59%源自研究性实验室，17%发生在临床诊断性实验室。大多数实验室感染由细菌、病毒和立克次体引起。在这些实验室感染中气溶胶是最重要传播途径，在实验室以外引起感染中70%是由喷溅、针刺或切割伤所致。
6、致病因子在环境中稳定性：病源微生物在环境中有一定抵抗力比较稳定，例如结核杆菌在干燥空气中可存活1年以上。
7、防止： 工作人员必要穿戴工作服、工作帽、口罩、手套，做好安全防护；对的使用生物安全标志；采集血液时必要做到一人一针一巾一带一片；工作流程必要合理，严格管理人流、物流、标本流，禁止重复流动；清洁区、半污染区、污染区三区划分明确；所有报告单消毒后发放；每天对室内空气、操作台、地面进行常规消毒；所有检查科工作人员在进入实验室工作之初应检测乙肝、丙肝病毒血清学指标并保存血清，并应注射乙肝疫苗，后来应定期每半年复检一次。
评估成果：科左后旗妇幼保健所检查科可以设立临检、生化、免疫等科室，可以检测乙肝病毒血清学指标以及丙肝等项目，有传染各型肝炎危险性，现为I级实验室。
二、实验室设立与设施
实验室设有常规室、生化室、免疫室和检查人员休息室。基本上做到对的分区。在各个检查室均有全自动检查仪器，和基本安全保护设施消毒设备如紫外线消毒灯。
三、实验室与仪器设备有关危害
如： 离心机在解决标本时易产气愤溶胶；
尖锐物品刺伤接种等。
仪器外表面可附着有各种生物因子；临床标本对流经管道可导致污染从而也许对检查人员及清洁维护维修人员导致接触危害。

四、微生物操作规程与规范
（一）实验室安全技术操作规程
A、常规微生物操作规程中安全操作要点
1、禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊状况须经实验室负责人批准后方可进入。
2、接触微生物或也许具有微生物物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手并注意洗手办法和质量。
3、禁止在工作区吃东西、吸烟、解决隐形眼镜、化妆及储存食物。也不可以在检查室冰箱内存储物品，以免导致交叉污染危害人员健康。
4、以移液器吸取液体，禁止口吸。以免吸入口中，导致直接危害
5、尖锐器具操作：如针头用后应放入锐器盒中禁止盖帽。
6、按照实验室安全操作规程，减少标本溅出和减少气溶胶产生。
7、每天至少消毒一次工作台，活性物质溅出后要随时消毒。每天开始工作前用湿布抹擦一次；地面用湿拖把拖擦一次，禁用干抹干扫，抹布和拖把等清洁工具各室专用，不得混用，用后洗净晾干。下班时用250-500mg/L有效氯溶液或0.1%-0.2%过氧乙酸溶液抹擦一次。地面消毒：用2倍浓度上述消毒液拖擦。
8、所有培养物、废弃物在运出实验室之前必要进行严格灭菌 。以免导致实验室外污染。
9、制定有效防鼠防虫办法，如窗纱等。
B、特殊安全操作规程
1、工作人员应接受必要免疫接种和检测（如乙型肝炎疫苗、卡介苗等）。
2、必要时收集从事危险性工作人员基本血清留底，并依照需要定期收集血清样本，应有检测报告，如有问题及时解决。
3、工作人员要接受关于潜在危险性知识培训，掌握防止暴露以及暴露后解决程序。
4、严格遵守下列规定，防止利器损伤：
(1)除特殊状况（肠道外注射和静脉切开等）外，禁止在实验室使用针、注射器及其她利器。尽量使用朔料器材代替玻璃器材。
(2)尽量应用一次性注射器或真空采血系统，用过针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽、从注射器取下必要置于利器盒或直接放入防穿透容器中，禁止用手直接操作。非一次性利器必要放入厚壁容器中并运送到特殊区域消毒。
（3）尽量使用无针注射器和其她安全装置（如真空采血系统）。
（4）禁止用手解决破碎玻璃器具。装有污染针、利器及破碎玻璃容器在丢弃之前必要严格消毒。
8、实验设备在运出修理或维护前必要进行消毒。
9、人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人报告，并记录事故通过和解决方案。
10、禁止将无关动物带入实验室。

五、健康和医学监测
实验室人员需严格遵守实验室规章制度以保障健康安全，工作人员应接受必要免疫接种和检测（如乙型肝炎疫苗）。并定期检测抗体及有无感染状况。

六、安全组织和培训
（一）、生物安全委员会

科左后旗妇幼保健所
生物安全组织管理委员会
组长：秦岭
副组长：张春玲 孟玉莲 李永山 白那顺
成员：李媛媛 苏高原 包晓华 东智

（二）、保障人员安全准则
严格按照微生物操作技术规范、生物安全管理制度和实验室安全管理程序进行操作是保障工作人员健康安全准则。
1、生物安全管理制度
实验室安全设施应完善。
(1)实验室内各工作室布局合理，应有清洁区、半污染区、污染区划分。规模较小实验室，也应有清洁区，作为工作人员生活区(工作室作为污染区，不得在其中饮水，抽烟、进餐，不得将食品带进工作室)。
(2)工作流程应合理，避免人流，物流、标本流过多重复、交叉流动。各室有各室专用物品涉及清洁工具。
(3)通风设备应合理，保证工作室通风良好，温湿度适当。实验室应有不少于每天3-4次通风换气次数。
（4）建筑材料应符合国家关于原则和规定：实验室台应防水、耐腐蚀、耐热；地面应平整、防滑、易清洁。
（5）每个实验室出口应有洗手装置，最佳为感应或脚踏式开关。应用洗手液，避免共用肥皂时导致交叉污染。
（6）应设立实行各种消毒办法设施，对于小型实验室也应按照规定进行严格消毒，合理应用消毒物品，至少有紫外线消毒设备。
（7）应有专门放置生物废弃物容器。且废液必要经进行消毒后送入指定地点销毁。
2、实验室安全管理程序
为了加强对实验室安全管理，保证医疗质量和医疗安全，依照《医疗机构临床实验室管理办法》和《病原微生物实验室生物安全管理条例》关于规定，对实验室在医疗安全上特做如下规定：
（1）禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊状况须经实验室负责人批准后方可进入。
（2）禁止非工作人员使用实验室仪器、设备及其她物品；未经容许，非工作人员禁止翻阅实验室任何资料。
（3）实验室各类测试数据、病人资料、记录和文献等均按保密规定进行保管和使用，任何人不得擅自对外提供。如发现泄密事故，应及时采用补救办法，并对泄密人员进行严肃解决。
（4）实验室电、水、气设施必要按规定安装。
（5）各类在用仪器设备和防护装置必要保持完好状态，不准随意改动安全装置。精密贵重仪器和大型设备专人操作和管理，未经批准不得擅自操作和拆卸。稀缺贵重物品材料和剧毒、易燃、易爆放射性等危险物品必要分类分柜存储，专人管理。注意防水、防高温、防电火花、防晒，通风良好。
(6)每天下班前，工作人员应关好水电、空调、电脑、仪器、火种、门窗等，确认无隐患后方可拜别。节假日前各室负责人应统一检查，贯彻值班人员和责任，消除不安全隐患。
(7)电炉、煤气炉使用时，工作人员不得离开现场。
（8）贵重物品妥善保管，做好安全防盗办法。
(9)做好消毒隔离工作，注意自身防护，防止传染病发生。
（10）实验室要把安全知识、安全制度、操作规程等列为实验教学内容之一。对新进实验室人员（涉及外协人员）必要先通过安全教诲，在掌握了安全操作技能，在掌握了安全操作技能和具备自我保护能力后，才干动手操作。实习和进行人员必要在带教人员指引下按操作规程进行实验，危险性实验必要有安全防护办法，需要有人监护。
（11）实验室发生事故后，工作人员应积极采用应急办法， 报告实验室负责人和科主任。导致轻伤以上事故或被盗、水灾、火灾、爆炸、中毒等严重安全事故要及时急救，保护事故现场，并及时逐级报告科主任、保卫等关于部门和医院主管领导，不得隐瞒不报或迟延上报。

（三）人员培训筹划
一方面进行上岗培训涉及对长期离岗或下岗人员再上岗培训，使将要进入检查室工作人员熟知实验室安全知识，对的进行自身防护和实验室现状。详细涉及实验室设施设备（涉及个体防护装备）安全使用、应急意外事故解决、实验室管理体系及技能培训。
七、废弃物解决
1 依照医疗废物类别，将医疗废物分类收集.包装，使用后一次性医疗用品在包装前要进行消毒，毁型。
2在盛装医疗废物前应当对医疗废物包装物或者容器进行认证检查，保证无损失 渗漏和其她缺陷。
3感染性废物，病理性废物 、损伤性废物、药物性废物不能混合收集。少量药物性废物可以混入动人性废物，但应当在标签上注明。
4放入包装物或者容器内德感染性废物、病理性废物、损伤性废物不得取出。
5盛装医疗废物达到包装物或者容器时，应当合用有效地封口方式，是包装物或者容器封口紧实、严实。
6包装物或者容器外表面被感染性废物污染时，应当对被污染处进行消毒解决或者增长一层包装。
7运送人员在运送医疗废物时，应当防止导致包装物或者容器破坏和医疗废物流失、泄露和扩散，并防止医疗废物直接接触身体。

八、意外事故应对方案和应对程序
（一）感染性物质运送程序
程序：
①运送前应将标本进行可靠包装。禁止使用皮氏细菌培养皿邮寄标本；禁止将干冰放入密闭容器。
②严格遵守运送关于规定．
③运送用于诊断标本时应依照需要标记上“易腐坏”、“干冰保存”、“冷冻生物制品”或“易碎”等标志。
④高致病性病原微生物检查标本运送
1）高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本容器应当密封或者包装材料应当符合防水、防破损、防外泄、耐高（低）温、耐高压规定：容器或包装材料上应当印有国务院卫生行政部门规定生物危害标记、警告用语和提示用语；
2）运送高致病性病原微生物菌（毒）种或者标本，应当不少于两人专人护送，并采用相应防护办法，严防发生被盗、被抢、丢失、泄露事件。
⑤病原微生物检查标本发生意外解决
1）泄漏事故：（1）及时消毒清洗发生泄漏污染区域。告知主管和主任。如果培养物发生泄漏或容器发生破损，应对该区域进行至少十分钟消毒清洗，直至气溶胶或飞沫已经沉降。（2）吸净漏出液体。（3）清洗发生泄漏区域。 （4）尽量使用漂白剂、酒精或苯酚对工作台进行消毒。
2）高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本在运送、储存中被盗、被抢、丢失、泄露，承运单位、护送人、保藏机构应当采用必要控制办法，并在2小时内分别向承运单位主管部门、护送人所在单位和保藏机构主管部门报告，同步向所在地县级人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门报告，发生被盗、被抢、丢失，还应当向公安机关报告；
（二）意外事故解决方案和应急程序
A、疑有高致病性病原微生物解决程序
程序：
①医疗机构临床实验室如发现疑有高致病性病原微生物标本，一方面应报告领导，所领导应及时报告给本地卫生行政部门；
②严格按照《病原微生物实验室安全管理条例》关于规定将标本送往有资质实验室进一步确诊；
③按照《病原微生物实验室安全管理条例》关于规定及时将病原微生物菌（毒）种标本就地销毁或者送交保藏机构保管。
④被高致病性病原微生物污染物品，解决前必要通过高压灭菌，涉及用于隔离设备和材料。

B、防止紧急意外事件预案与流程
1、当发生血样管打破，血样泼洒时，及时用l：5084消毒液将污染桌面或地面所有浸泡30分钟，再擦拭干净。
2、当发生废弃针头剌破皮肤时，及时用力挤压伤口，竭力多挤掉某些血液，直到挤不出血为止，再用2.5％碘伏消毒局部皮肤后包扎好。
3、当发生火灾意外时及时用灭火器灭火。
4、皮肤受强酸或其她酸性性药物伤害时，先用大量清水冲洗再用5％碳酸氢钠冲洗，最后用盐水洗净，并敷以碳酸氢钠纱布等。
5、皮肤受强碱或其她碱性药物伤害时，先用大量清水冲洗，再用5%硼酸冲洗，重者可用2%醋酸湿敷。
6、碱性物质溅伤眼睛后，应及时用生理盐水或大量干净水彻底冲洗眼睛至少10分钟，再用4%硼酸溶液冲洗，后用生理盐水冲洗，并滴以抗菌眼药，防止感染。
7、强酸溶液溅伤眼睛，迅速用清水冲洗，然后请眼科医生处置。

详见如下流程图

科左后旗妇幼保健所
所内紧急意外事件应急程序
在检查室内发生心脏骤停，晕厥等状况
请示报告
上级医师
上报领导
请关于科室会诊

紧急急救
如心肺复苏

科左后旗妇幼保健所实验室
突发公共卫生事件应急解决
在第一时间内，及时向所领导、主管部门报告
工 作 流 程 图

启动本实验室突发公共卫生事件应急解决预案
依照需要对食物和水源等采用控制办法
依照需要对患者、密切接触医务人员进行隔离，疏散周边人群
紧急调集人员、储备物资、交通工具、有关设备、设施
指挥关于部门即到达规定岗位，采用相应控制办法

依照《消毒管理办法》关于规定，加强对有关科室消毒解决

科左后旗妇幼保健所
发现火情后要冷静面对，及时呼喊周边人员。分别组织灭火机报告消防值班人员和上级领导
火势较小时，组织人力应用消防器材和自来水积极灭火
火势剧烈时，立即打电话“119”报警，并告知精确方位
将患者疏散到安全地带，保证患者生命安全
尽量切断电源、撤出易燃易爆物品贵重仪器设备及有价值科学资料
组织患者撤离时，。可嘱患者用湿毛巾捂住口鼻，尽量以最低姿势迅速迈进关闭邻近火情房间门窗，以减慢火势蔓延速度

火灾应用程序

九、化学试剂、火和电安全
（一）防水灾、防火灾、防电害、防盗程序
（1）对科员经常性进行“四防”宣教，增强防范意识；
（2）对易燃、易爆危险品等试剂设专人负责保管；
（3）对门、窗，水、电每班丁作人员在下班之前都要严格检查杜绝意外事故发生。
（4）对重点用电量大仪器设备、配备防火器材．
(二)有毒品、强酸、强碱等安全管理程序
（1）有毒品、强酸，强碱等浸专人负责管理，物品出入库要有严格手续和记载；
（2）经常检查门窗牢固限度，烟火禁止带入库内，保管对药物要经常检查。