幽门螺旋杆菌检测方法和治疗.pptx
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1、幽门螺旋杆菌检测与治疗幽门螺旋杆菌检测与治疗大庆油城中医院消化科大庆油城中医院消化科作者:作者:田可可田可可 幽门螺旋杆菌的发现实际上,怀疑胃、十二指肠疾患的发生与某种细菌的感染有联系却已经有100多年的历史了。1875年,德国的解剖学家发现了胃黏膜有螺旋样细菌存在。1893年,意大利的Giulio Bizzozero博士也观察到胃黏膜表面有一种螺旋状的细菌存在。1979年,澳大利年,澳大利亚42岁的病理学家的病理学家Robin Warren发现50%左右的病人的胃腔下半部分附左右的病人的胃腔下半部分附生着生着许多微小的弯曲的多微小的弯曲的细菌。菌。1981年,他邀年,他邀请当年只有当年只有3
2、0岁的年的年轻的澳大利的澳大利亚内科医生内科医生Barry Marshall合作。合作。幽幽门螺杆菌是螺杆菌是1982年由澳大利年由澳大利亚医医师B Marshall在一个在一个带有偶然性的机会下分离培养出有偶然性的机会下分离培养出来的,至今已来的,至今已35年了。年了。油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科1984年,Marshall和Warren在柳叶刀发表了那篇石破天惊的论文“胃炎和消化性溃疡患者胃部发现的不明弯曲杆菌”。同年,Marshall又一次参加学会,发表幽门螺杆菌学说。午餐时间,他听到周围一群各国消化科医生均嘲笑讽刺,说一个澳大利亚医生荒谬的认为有细菌
3、可以在胃液存活且导致胃溃疡,真可笑。Marshall一怒之下,回到澳洲,拿起一大杯含大量幽螺菌的培养液就喝。几天后,他开始腹痛呕吐。5天后,他清晨被痛醒。10天后胃镜证实了胃炎和大量幽门螺杆菌的存在。他此时才告诉他被吓坏了的妻子,他在自己身上做了实验。1985年,他俩将这一勇敢行为发表在澳大利亚医学杂志上。不可思议的是,仍然没有得到应得的重视。这篇文章沉默了近10年。在这沉默的十年间,Marshall于1986年移民到了美国。美国媒体,如读者文摘,开始以“豚鼠医生用自己做实验,治愈了溃疡“做题目开始报道。Marshall的知名度开始上升,受到越来越多的关注。1989年,这个细菌被正式命名为幽门
4、螺杆菌。终于,NIH和美国FDA开始接受并宣传这种新的观点。到了1993至1996年间,全美的医学界开始转变观念。Marshall和Warren的名字开始见诸世界媒体。1994年,美国NIH发表了新的指南,承认大多数再发性消化性溃疡可能因幽门螺杆菌所致,建议使用抗菌素治疗。2005年,Marshall和Warren因为这一发现获得了诺贝尔医学奖。幽门螺旋杆菌的发现的故事油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科2005年10月3月,瑞典卡罗林斯卡医院宣布,把2005年诺贝尔生理学或医学奖授予澳大利亚科学家Barry JMarshall和和JRobin Warren,表彰发
5、现了导致胃炎和胃溃疡的细菌幽门螺旋杆菌。诺贝尔奖委员会在授奖词中说,由于Barry JMarshall和和 JRobin Warren的发现使得原本慢性的、使得原本慢性的、经常无常无药可救的胃可救的胃溃疡变成成了只需了只需抗生素和一些其他抗生素和一些其他药物短期就可治愈的疾病物短期就可治愈的疾病20052005年获得了诺贝尔医学奖年获得了诺贝尔医学奖油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科 幽幽 门门 螺螺 旋旋 杆杆菌菌是一种革兰氏阴性杆菌是一种革兰氏阴性杆菌螺旋形螺旋形微需氧微需氧其丝状的鞭毛宛如螺旋推进器其丝状的鞭毛宛如螺旋推进器能够分泌多种酶类(尿素酶、过氧化物
6、歧化酶和过氧化氢酶)能够分泌多种酶类(尿素酶、过氧化物歧化酶和过氧化氢酶)常见于人的胃窦和幽门部位常见于人的胃窦和幽门部位幽门螺杆菌快速识别和定植胃部轻微受伤的部位,幽门螺杆菌快速识别和定植胃部轻微受伤的部位,在那些受伤部位几乎立即就可以干扰愈合,在那些受伤部位几乎立即就可以干扰愈合,因此推动了胃部持续损害。因此推动了胃部持续损害。幽幽门螺旋杆菌螺旋杆菌对生生长条件要求十分苛刻,是目前所知能条件要求十分苛刻,是目前所知能够在人胃中生存的唯一微生物种在人胃中生存的唯一微生物种类。油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科LOGOHPylori的致病机制的致病机制HPylor
7、i定植运动毒素(毒力因子)引起的粘膜损害宿主的免疫介导的粘膜损害HPylori感染后胃泌素和生长抑素调节失衡所致胃酸分泌异常油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科鞭毛和螺旋状运动粘附因子血凝素内皮素样蛋白、Lewis血型抗原连接粘附素粘附素质蛋白胃酸抑制蛋白、热休克蛋白避免免疫反应 紧密附着表面抗原表达紧密附着 表面抗原表达 幽门螺杆菌的定植与分布幽门螺杆菌的定植与分布油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科幽幽门门螺螺杆杆菌菌的的定定植植与与分分布布定植方式选择性定植 幽门螺杆菌优先在损伤的溃疡部位定植胃部组织,同时干扰损伤组织的愈合。选择性
8、定植需要细菌运动性和趋化性,“就像是一个竞技比赛,趋化机械引导幽门螺旋杆菌进入损伤部位进行定植,然后由其它致病因素接管,以保证该部位长期因任何损伤缓慢修复只是一直保持原状。幽门部幽门部十二指肠:十二指肠冠部上皮中十二指肠:十二指肠冠部上皮中胃部胃部 :体下部小弯、上部大弯:体下部小弯、上部大弯 胃腺化生的食管上皮胃腺化生的食管上皮(Barrertt食管)和胃腺化生的,但不存在于肠腺化生上皮中。食管)和胃腺化生的,但不存在于肠腺化生上皮中。口腔口腔分布部位分布部位存在于较深层的碱性粘液中1聚集在胃上皮细胞表层的一些特殊部位周围2分胃粘膜中胃粘膜中两种两种分布形式分布形式油城中医院消化科油城中医院
9、消化科油城中医院消化科油城中医院消化科(一)HP 的 微 生 物 及 免 疫 学 特 征幽门螺旋杆菌特异地定植在胃型上皮表面。胃黏膜胃黏膜胃型上皮 有胃化生的十二指有胃化生的十二指肠黏膜黏膜胃状上皮胃状上皮胃状上皮胃状上皮胃状上皮胃状上皮胃状上皮胃状上皮定植定植消失消失HP 在胃内的定植分布油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科抗幽门螺杆菌、质抗幽门螺杆菌、质子泵抑制剂治疗后子泵抑制剂治疗后细菌可发生位移细菌可发生位移呈灶状分布呈灶状分布呈灶状分布呈灶状分布呈灶状分布呈灶状分布呈灶状分布呈灶状分布细菌密度菌密度胃窦胃体细菌密度菌密度胃体胃窦油城中医院消化科油城中医院消
10、化科油城中医院消化科油城中医院消化科 HP诱发抗体产生血清抗体血清抗体检测,用于用于诊断幽断幽门螺螺旋杆菌感染旋杆菌感染油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科LOGO油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科 HP HP可以从粪便排出可以从粪便排出可以从粪便排出可以从粪便排出 细菌随上皮细胞更新细菌随上皮细胞更新细菌随上皮细胞更新细菌随上皮细胞更新脱落,失去定植而从粪脱落,失去定植而从粪脱落,失去定植而从粪脱落,失去定植而从粪便排出。便排出。便排出。便排出。粪便幽便幽门螺旋杆菌抗原螺旋杆菌抗原检测传染源传染源传染源传染源LOGO油城中医院消化科油
11、城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科 HP 含有丰富的尿素酶在细菌周围形成在细菌周围形成在细菌周围形成在细菌周围形成“氨云氨云氨云氨云”抵御胃酸抵御胃酸抵御胃酸抵御胃酸 快速尿素快速尿素酶试验基于尿素基于尿素酶 的的检测方法方法 尿素呼气尿素呼气试验 损失胃黏膜上皮细胞损失胃黏膜上皮细胞损失胃黏膜上皮细胞损失胃黏膜上皮细胞尿素酶尿素酶尿素酶尿素酶尿素尿素尿素尿素氨氨氨氨油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科幽幽门门螺旋杆菌螺旋杆菌在牙菌斑上在牙菌斑上-附着寄生附着寄生布满牙菌斑的牙齿此时幽门螺旋杆菌此时幽门螺旋杆菌有机可乘附着并寄生有机可乘附着并寄生健康的牙
12、齿出现牙菌斑油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科幽幽门门螺旋杆菌螺旋杆菌在牙菌斑上在牙菌斑上-附着寄生附着寄生为了我们的身体健康保持口腔卫生养成良好的刷牙习惯发现幽门螺旋杆菌应尽快根除避免交叉感染 幽门螺旋杆菌的传播途径幽门螺旋杆菌的传播途径共餐共餐-是得幽是得幽门螺旋杆菌的重要途径之一。螺旋杆菌的重要途径之一。幽幽门螺旋杆菌可在牙菌斑和螺旋杆菌可在牙菌斑和龋齿上生上生长繁殖。繁殖。幽幽门螺旋杆菌是胃病的高螺旋杆菌是胃病的高发因素因素-生吃膳食。生吃膳食。刺刺 激激 性食物容易刺激胃粘膜,致使胃的抵抗性食物容易刺激胃粘膜,致使胃的抵抗 力低下力低下-幽幽门螺旋杆菌的
13、入侵。螺旋杆菌的入侵。接吻研究表明,唾液中也可以显示到幽门螺杆菌.如果情侣深度接吻,幽门螺旋杆菌的传播将自然畅通无阻,所以接吻是感染幽门螺旋杆菌最直接的途径望情侣们慎重 就像感冒一就像感冒一样“一人生一人生病全家吃病全家吃药”的的现象十象十分普遍分普遍很多人早上刷牙很多人早上刷牙都是草草了事都是草草了事油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科(1)基于检测原理分类)基于检测原理分类2.HP检测的主要方法检测的主要方法油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科微生物学方法-细菌分离培养形态学方法-组织病理染色尿素酶依赖的方法-UBT和RUT血清学方法
14、-ELISA等分子检测方法-胃黏膜、胃液、粪便等(2)基于有无侵入性的分类法基于有无侵入性的分类法 HP检测的主要方法检测的主要方法油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科非侵入性非侵入性检测方法方法13/14C-尿素呼气尿素呼气实验(UBT)血清学方法(血清学方法(lg gG,lg gA A)唾液或唾液或粪便的便的PCR检测、抗、抗原原检测侵入性侵入性检测方法方法直镜检查快速尿素酶试验RUT组织学检查细菌培养/药敏试验DNA探针检测/平常人/芯片/测序 侵侵 入入 性性 检检 测测 方方 法法油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科内内镜方法方
15、法内内镜特征特征敏感性敏感性特异性特异性局限性局限性标准内镜胃窦结节状32.0%96.0%敏感性低放大镜胃小凹汇集静脉63.9%-93.2%96.2%-100%缺乏统一诊断标准NBI上皮下毛细血管网95.2%82.2%光强度低,需放大A 内镜下观察内镜下观察诊断准确率欠高诊断准确率欠高需要专门训练需要专门训练需要相应设备需要相应设备检测费时长检测费时长不宜作为常不宜作为常规检测方法规检测方法油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科B快速尿素酶试验尿素酶尿素酶尿素酶尿素酶Hp有丰富的尿素酶有丰富的尿素酶特异性相对较高特异性相对较高尿素尿素pH指示剂指示剂pH缓冲剂缓冲剂尿
16、素尿素 氨氨 pH上升上升 pH指示剂指示剂 颜色改变颜色改变油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科室温下观察;显著阳性者5-10分钟就能作出判断;30分钟才能作出阴性初步判断;阴性者尽可能观察至24小时.数分钟至数分钟至24小时变红色,均为阳性小时变红色,均为阳性1224小时直至20小时不变色,才可判断为阴性。24小时阳性的是假阳性油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科严重萎缩严重萎缩/肠化生:不利细菌定植肠化生:不利细菌定植胆汁、血液抑制细菌,干扰检测胆汁、血液抑制细菌,干扰检测抗生素、铋剂或抗生素、铋剂或PPI等抑制细菌等抑制细菌12油
17、城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科活检部位活检块数活检大小观察时温度:低观察时间:不够 胃胃胃胃窦窦/胃体各胃体各胃体各胃体各1 1块块 标标本足本足本足本足够够大大大大105细菌 保温在保温在保温在保温在20-3720-37 观观察至少察至少察至少察至少3030分分分分钟钟3 检测检测前停前停前停前停药药或用其他方法或用其他方法或用其他方法或用其他方法检测检测 RUT假阴性原因及对策油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科尿素尿素pH指示剂指示剂pH缓冲剂缓冲剂 如如如如试剂质试剂质量可靠,假阳性罕量可靠,假阳性罕量可靠,假阳性罕量可靠,假
18、阳性罕见见。假阳性的主要原因是低酸。假阳性的主要原因是低酸。假阳性的主要原因是低酸。假阳性的主要原因是低酸或无酸或无酸或无酸或无酸时时,胃内非幽,胃内非幽,胃内非幽,胃内非幽门门螺杆菌螺杆菌螺杆菌螺杆菌产产尿素尿素尿素尿素酶细酶细菌所致。菌所致。菌所致。菌所致。Uotani TUotani T,Graham DY.Ann Transl Med,2015.3.9Graham DY.Ann Transl Med,2015.3.9 RUT假阳性原因及对策影响试剂质量的因素:影响试剂质量的因素:未含抗菌素未含抗菌素pH缓冲强度不合适缓冲强度不合适pH指示剂浓度过高指示剂浓度过高油城中医院消化科油城中医
19、院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科 RUT适用范围及要求Maastricht-5 共共 识识 观观 点点若无活检禁忌,应将作为若无活检禁忌,应将作为诊断诊断HP感染的首先感染的首先检查检查,以便立即进行治疗。,以便立即进行治疗。不推荐不推荐用于治疗后用于治疗后评估评估HP是否根除是否根除。推荐胃窦和胃体各取推荐胃窦和胃体各取1块,可放入同一孔中。块,可放入同一孔中。C 组织学方法检测组织学方法检测(1)H&EGiemsaWarthin-Starry免疫免疫组化化敏感性(敏感性(%)83626297-100特异性特异性(%)1009798100油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化
20、科油城中医院消化科多数情况下常规HE染色切片诊断HP胃炎已足够HE染色检出HP依赖个人经验可同时观察组织结构,作用相应病理诊断胃黏膜病理显示慢性活动性炎症,常规HE染色术观察到HP,推荐联合检测胃窦和胃体同时活检可提高HP检出率油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科C 组织学方法检测组织学方法检测(2)油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科 D.HP 培养 培养的作用培养的作用诊断幽门螺杆菌诊断幽门螺杆菌药敏实验药敏实验细菌学研究细菌学研究 幽门螺杆菌培养诊断幽门螺杆菌有一定的技术幽门螺杆菌培养诊断幽门螺杆菌有一定的技术要求,敏感性低(特异性
21、高)。不推荐单纯用于幽要求,敏感性低(特异性高)。不推荐单纯用于幽门螺杆菌感染的诊断。门螺杆菌感染的诊断。E.HP的分子生物学方法检测诊断感染诊断感染耐药基因检测耐药基因检测细菌学研究细菌学研究毒力基因检测毒力基因检测判断再感染判断再感染油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科 侵侵入入性性诊诊断断方方法法比比较较方法方法初初查复复查敏感性敏感性/特异性特异性优点点局限性局限性组织学学60-86%/98%可同可同时行行组织学学检查检查者者间判断判断差异大、差异大、费时免疫免疫组化化()()()()97%/1
22、00%敏感性和特异性均高敏感性和特异性均高费用高、用高、费时快速尿素快速尿素酶()()80-95%/97-99%廉价、廉价、简单、快速、快速检测需要的菌需要的菌量高量高培养培养60%/100%可行可行药敏、敏、细菌学研究菌学研究技技术要求高要求高PCR()()()()可达可达100%可达可达100%可行耐可行耐药、细菌学研究菌学研究易易污染、染、费用用高、高、获得性低得性低有括弧者:少用;有括弧者:少用;代表准确性代表准确性非侵入性的检测方法非侵入性的检测方法油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科A.HP粪便抗原检测试验经过验证的单克隆抗体检测试剂具有较好的敏感性和特
23、异性操作安全、简便快速不需要口服任何试剂,适用于所有年龄和类型患者油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科B.HP血清学试验(1)用幽门螺杆菌抗原检测血清抗体 IgGgG单份检测单份检测 多份检测多份检测油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科不同试剂盒检测准确度差异较大不同试剂盒检测准确度差异较大HP根除或消失后抗体可维持几个月或者几年,一般根除或消失后抗体可维持几个月或者几年,一般不作为现症感染证据,不能用于治疗否复查。不作为现症感染证据,不能用于治疗否复查。主要用于流行病学调查主要用于流行病学调查油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消
24、化科油城中医院消化科优点:优点:检测结果不受近期用药和胃内局部病变影响检测结果不受近期用药和胃内局部病变影响消化性溃疡出血消化性溃疡出血胃胃MALT淋巴瘤淋巴瘤胃严重肠生化胃严重肠生化/萎缩萎缩其他方法其他方法检测检测阴性阴性血清学检测血清学检测 阳阳 性性现症感染B.HP血清学试验(2)油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科油城中医院消化科C.毒力基因毒力基因 cag gA A最主要毒力基因最主要毒力基因“西方型菌株西方型菌株”部分缺乏部分缺乏cagAgA基因基因“东方型菌东方型菌株株”多有多有cagAgA基因基因cagAgA:cytotoxinassociatedgenecyto
25、toxinassociatedgeneAA 细胞毒相关基因细胞毒相关基因SuerbaumS.etalNEng glJMed2002,347;1175-1186fettelra RM etal.Bett Pes Clin Gattroenterol2014;28:1003-15H.pylori strain 26695 genome(1,667,867 bp)幽门螺旋杆菌全基因组幽门螺旋杆菌全基因组cacagg致病致病岛岛cacagpathologenecityisolandgpathologenecityisoland(37,000bp)(37,000bp)含有含有30多个与毒力相关的因素多个
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