第四章药物的杂质检查.pptx

第四章第四章 药物的杂质检查药物的杂质检查第一节第一节 概述概述第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法第三节第三节 特殊杂质特殊杂质的的检查方法检查方法 指药物纯净的程度指药物纯净的程度.是反映药品质是反映药品质量的一项重要指标量的一项重要指标.1 1）评价：综合考虑药物的外观性状、理化常）评价：综合考虑药物的外观性状、理化常数、数、杂质检查杂质检查和含量测定和含量测定.综合评定药物的纯度综合评定药物的纯度.杂质检查杂质检查 是药物纯度评价的一项重要内容是药物纯度评价的一项重要内容.（一）药物的纯度（一）药物的纯度第一节第一节概述概述杂质杂质是指：任何影响药品纯度的物质。是指：任何影响药品纯度的物质。1.1.有毒副作用的物质有毒副作用的物质 如：砷盐和重金属如：砷盐和重金属 2.2.本本身身无无毒毒副副作作用用，但但影影响响药药物物的的稳稳定定性性和疗效的物质和疗效的物质 如：水分（青霉素钾盐）如：水分（青霉素钾盐）3.3.本身无毒副作用，也不影响药物的稳定本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，性和疗效，但可用于考核生产工艺和生产控制但可用于考核生产工艺和生产控制是否正常是否正常指示性杂质（信号杂质）指示性杂质（信号杂质）如：如：Cl-SO42-药物纯度的认识药物纯度的认识防病、治病的实践防病、治病的实践分析检测技术的提高分析检测技术的提高新的杂质新的杂质加强对药品生产工艺过程控制加强对药品生产工艺过程控制不断提高药品的纯度要求不断提高药品的纯度要求例如：例如：阿片阿片1848年年盐酸罂粟碱盐酸罂粟碱1981年年发现发现合成合成1985年年Ch.P(1985)目视比色法检查目视比色法检查吗啡吗啡进一步研究合成的盐酸罂粟碱进一步研究合成的盐酸罂粟碱TLC、IR新的未知杂质新的未知杂质Ch.P(1990)有关物质有关物质生产原料的改变生产原料的改变生产工艺的改进生产工艺的改进生产方法的改进生产方法的改进限量要求限量要求杂质检查的项目杂质检查的项目改变或提高改变或提高2）药物纯度与试剂纯度）药物纯度与试剂纯度 共同点共同点：均规定所含杂质的：均规定所含杂质的种类种类和和限量限量。不同点：不同点：a.药物纯度药物纯度主要从用药安全、有效和对药物稳主要从用药安全、有效和对药物稳定性等方面考虑，只有定性等方面考虑，只有合格品和不合格品合格品和不合格品.b.b.化学试剂的纯度化学试剂的纯度是只考虑杂质可能引起的是只考虑杂质可能引起的化学变化对使用目的的影响，而未考虑杂质对生化学变化对使用目的的影响，而未考虑杂质对生物体的生理作用及毒副作用物体的生理作用及毒副作用.例如：硫酸钡（例如：硫酸钡（BaSO4）试剂规格试剂规格 对可溶性钡盐不做检查对可溶性钡盐不做检查.检查：检查：氯化物、铁、灼烧失重等氯化物、铁、灼烧失重等药用规格药用规格 如存在可溶性如存在可溶性钡盐则导致钡盐则导致 医疗事故医疗事故.检查：检查：酸溶性钡盐、重金属、砷盐等酸溶性钡盐、重金属、砷盐等 化学试剂不能代替药品使用化学试剂不能代替药品使用（一）、杂质的来源（一）、杂质的来源 1.1.生产过程中引入生产过程中引入 a a 原料、反应中间体及副产物原料、反应中间体及副产物 b b 药物在制成制剂的过程中也能产生药物在制成制剂的过程中也能产生 新的杂质新的杂质 c c 试剂、溶剂、催化剂类试剂、溶剂、催化剂类 d d 生产中所用金属器皿、装置以及其生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质 e e 生物活性与有效成分有很大差异的生物活性与有效成分有很大差异的无效，低效异构体或晶型。无效，低效异构体或晶型。二二.杂质的来源与种类杂质的来源与种类例：例：阿司匹林由水杨酸乙酰化制得阿司匹林由水杨酸乙酰化制得+乙酰化不完全乙酰化不完全水杨酸水杨酸(杂质杂质)盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸苯胺苯胺制备过程中加热灭菌制备过程中加热灭菌进一步脱羧进一步脱羧氧化氧化有色物有色物注射液变黄，注射液变黄，疗效降低，毒性增加疗效降低，毒性增加制剂过程中可能产生新物质制剂过程中可能产生新物质肾上腺素肾上腺素注射液注射液焦亚硫酸钠焦亚硫酸钠EDTA-2Na肾上腺素肾上腺素亚硫酸根亚硫酸根肾上腺素磺酸肾上腺素磺酸（无生理活性、无光学活性）（无生理活性、无光学活性）肾上腺素磺酸肾上腺素磺酸D异构体异构体贮存期贮存期肾上腺素肾上腺素华法林钠华法林钠结晶结晶异丙醇异丙醇地塞米松磷酸钠地塞米松磷酸钠大量的大量的甲醇甲醇大量的大量的丙酮丙酮胆影酸胆影酸（可能引入铁盐可能引入铁盐）铁铁还原硝基还原硝基扑米酮和卡托普利扑米酮和卡托普利锌粉锌粉盐酸盐酸（可能引入锌盐可能引入锌盐）在药物生产过程中，所用的试剂、溶剂、还原剂可能会在药物生产过程中，所用的试剂、溶剂、还原剂可能会残留在产品中成为杂质残留在产品中成为杂质例如：例如：维生素维生素K1合成中往往会产生一些无生理合成中往往会产生一些无生理活性的顺式异构体；活性的顺式异构体；肾上腺素为左旋体，其右旋体的升压作肾上腺素为左旋体，其右旋体的升压作用仅为左旋体的用仅为左旋体的1/12；无味氯霉素存在多晶型现象，其中无味氯霉素存在多晶型现象，其中B晶型晶型易被酯酶水解而吸收，为有效晶型，而易被酯酶水解而吸收，为有效晶型，而A晶型则不易被酯酶水解，活性很低。晶型则不易被酯酶水解，活性很低。(1)保管不善或贮存时间过长保管不善或贮存时间过长(2)包装不当包装不当2 2 贮藏过程中引入贮藏过程中引入例例1:麻醉乙醚在日光、空气及湿气作用下麻醉乙醚在日光、空气及湿气作用下,易氧化分解为易氧化分解为醛醛及有毒的及有毒的过氧化物过氧化物.CH3CH2OCH2CH3CH3CHO+CH3CH(OH)-O-O-CH(OH)CH3（二羟乙基过氧化二羟乙基过氧化物物）药典规定药典规定:起封后起封后24小时内小时内使用使用例例2：四环素在酸性条件下可发生差向异构四环素在酸性条件下可发生差向异构化反应化反应,生成差向四环素生成差向四环素(毒性高、活性低毒性高、活性低)（二）、杂质的分类（二）、杂质的分类 药物中的杂质按药物中的杂质按来源来源分为分为 1.1.一般杂质：指在自然界中分布较广泛，在一般杂质：指在自然界中分布较广泛，在多种药物多种药物的的生产和贮藏过程中容易引入的杂质。生产和贮藏过程中容易引入的杂质。如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质其检查碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质其检查方法收载在方法收载在中国药典的附录中国药典的附录中。中。2.2.特殊杂质：指特殊杂质：指特定药物特定药物的生产或贮藏过程中引入的杂的生产或贮藏过程中引入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检查方法收载在甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检查方法收载在中中国药典正文国药典正文各药品的质量标准中。各药品的质量标准中。按照来源的不同还可以将杂质分为：按照来源的不同还可以将杂质分为：1.工艺杂质（包括合成中未反应完全的反应工艺杂质（包括合成中未反应完全的反应物及试剂、中间体、副产物等）物及试剂、中间体、副产物等）2.降解产物降解产物3.从反应物及试剂中混入的杂质等从反应物及试剂中混入的杂质等 杂质按杂质按结构结构分为：分为：无机杂质：无机杂质：氯化物，硫酸盐，硫化物，重金属氯化物，硫酸盐，硫化物，重金属有机杂质：有机杂质：有机药物中引入的原料，中间体，副有机药物中引入的原料，中间体，副产物，分解产物，产物，分解产物，异构体，残留溶剂。异构体，残留溶剂。杂质按其杂质按其性质性质分为：分为：信号杂质：信号杂质：本身一般无害，但其含量多少可以反本身一般无害，但其含量多少可以反映出药物的纯度水平。（氯化物，硫酸盐）映出药物的纯度水平。（氯化物，硫酸盐）有害杂质：有害杂质：对人体有毒害，在质量标准中应严格对人体有毒害，在质量标准中应严格加以控制，以保证用药的安全有效。（重金属，加以控制，以保证用药的安全有效。（重金属，砷盐，氰化物）砷盐，氰化物）a a 具具有有立立体体异异构构体体的的药药物物,其其生生物物活活性性有很大差异有很大差异;如如：肾肾上上腺腺素素为为左左旋旋体体,其其升升压压作作用用是是右旋体的右旋体的1212倍倍.b b 异异构构体体中中,其其顺顺式式体体与与反反式式体体的的生生物物活性也不相同活性也不相同;如：如：V VA A以全反式的生物活性为最高以全反式的生物活性为最高.无效或低效杂质无效或低效杂质 c c 药物的晶型不同、其理化常数、药物的晶型不同、其理化常数、溶解性、溶解性、稳定性、体内的吸收和疗效也有差异稳定性、体内的吸收和疗效也有差异.如：驱虫药甲苯咪唑如：驱虫药甲苯咪唑,有有A A、B B、C C三种晶型三种晶型.其中其中C C晶型的驱虫率晶型的驱虫率90%,B,B晶型的驱虫率晶型的驱虫率4060%,A,A晶型的驱虫率小于晶型的驱虫率小于20%.必须重视异构体和多晶型对药物有效必须重视异构体和多晶型对药物有效性和安全性的影响性和安全性的影响.控制药物中低效、无控制药物中低效、无效以及具有毒性的异构体和多晶型效以及具有毒性的异构体和多晶型.三三 杂质的限量检查杂质的限量检查（一）、杂质限量（一）、杂质限量对于药物中的杂质，在不影响疗效、不产生对于药物中的杂质，在不影响疗效、不产生毒性和保证药物质量的原则下，综合考虑杂毒性和保证药物质量的原则下，综合考虑杂质的安全性、生产的可行性与产品的稳定性，质的安全性、生产的可行性与产品的稳定性，允许药物中含有一定量的杂质。允许药物中含有一定量的杂质。药物中所含药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质的限量。杂质的最大允许量，叫做杂质的限量。杂质量杂质量 杂质限量杂质限量 杂质量杂质量药品合格药品合格药品不合格药品不合格通常用通常用百分之几或百万分之几百分之几或百万分之几（ppm）来表示）来表示（partspermillion)（二二）杂杂质质限限量量的的控控制制方方法法定量测定定量测定限量测定法限量测定法（limittest）对照法对照法灵敏度法灵敏度法比较法比较法 1.1.对照法对照法 取一定量被检杂质的标准溶液与一定量供取一定量被检杂质的标准溶液与一定量供试品溶液在相同条件下处理后，比较反应结试品溶液在相同条件下处理后，比较反应结果，果，以确定杂质含量是否超过限量。以确定杂质含量是否超过限量。注意：平行原则注意：平行原则特点特点：不需知道杂质的准确含量不需知道杂质的准确含量管管1（样品管）（样品管）管管2（对照管）（对照管）药物中所含杂质的最大药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质的限允许量，叫做杂质的限量。量。由于供试品（由于供试品（S）中所含杂质的最大允许量）中所含杂质的最大允许量可以通过杂质标准溶液的浓度（可以通过杂质标准溶液的浓度（C）和体积）和体积（V）的乘积来表达，所以杂质限量（）的乘积来表达，所以杂质限量（L）的）的计算为：计算为：若用若用ppm表示杂质限量则：表示杂质限量则：注意注意:单位是否统一单位是否统一供试品是否有稀释供试品是否有稀释表示方法表示方法%或或ppm2.2.灵敏度法灵敏度法 系系指指在在供供试试品品溶溶液液中中加加入入试试剂剂，在在一一定定反反应应条条件件下下，不不得得有有正正反反应应出出现现，即即以以该该检检测测条条件下反应的灵敏度来控制杂质限量。件下反应的灵敏度来控制杂质限量。特点特点：不需对照品：不需对照品 如：纯化水中氯化物的检查如：纯化水中氯化物的检查Cl-0.2mg/50mL 4g/mL 3.3.比较法比较法 取供试品一定量依法检查，测定特定待检杂质取供试品一定量依法检查，测定特定待检杂质的参数（如吸光度等）与规定的限量比较，不的参数（如吸光度等）与规定的限量比较，不得更大。得更大。例：肾上腺素中肾上腺酮的检查例：肾上腺素中肾上腺酮的检查 供试品液供试品液(2.0mg/ml)盐酸溶液盐酸溶液样品样品 (0.05mol/L)A A310nm310nm规定：规定：A A310nm310nm0.050.05C酮体酮体AE1cm1%=0.054351 1001 100=1.1510-5C样品样品0.2100=0.210-3(g/ml)(g/ml)L(%)=C酮体酮体C样品样品=1001.1510-52.010-3100=0.6例例1.对乙酰氨基酚中氯化物的检查对乙酰氨基酚中氯化物的检查对照品溶液对照品溶液:标准标准NaCl溶液溶液(10 gCl-/ml)方法方法：取：取5.0ml同法操作比较同法操作比较,浊度不得更大浊度不得更大.计算计算：氯化物限量是多少：氯化物限量是多少(%)？杂质限量检查法计算举例：杂质限量检查法计算举例：规定：含重金属规定：含重金属 百万分之五百万分之五(5ppm)计算：应取标准铅溶液计算：应取标准铅溶液(10 gPb/ml)多少多少ml？例例2.葡萄糖中重金属的检查葡萄糖中重金属的检查方法方法：例例3.溴化钠中砷盐检查溴化钠中砷盐检查S=x106 =0.5gC.VL2.0X1/1064方法：中国药典规定：取标准砷溶液方法：中国药典规定：取标准砷溶液2.0mL(每每1mL相当于相当于1g砷砷)制备砷斑制备砷斑规定：含砷量不得超过规定：含砷量不得超过4ppm计算：应取供试品量计算：应取供试品量(g)？例四：卡比马唑片（规格：例四：卡比马唑片（规格：5mg）中甲巯咪唑的检查）中甲巯咪唑的检查取本品取本品20片，研细，加三氯甲烷适量，研磨使卡比片，研细，加三氯甲烷适量，研磨使卡比马唑溶解，滤过，用三氯甲烷洗涤滤器，合并滤液马唑溶解，滤过，用三氯甲烷洗涤滤器，合并滤液与洗液，置与洗液，置10ml量瓶中，加三氯甲烷稀释至刻度，量瓶中，加三氯甲烷稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取甲巯咪唑对照品，甲摇匀，作为供试品溶液；另取甲巯咪唑对照品，甲三氯甲烷制成每三氯甲烷制成每1ml中含中含100 g的溶液，作为对照品的溶液，作为对照品溶液，分别吸取上述两溶液各溶液，分别吸取上述两溶液各10 l,l,分别点于同一硅分别点于同一硅胶胶G G薄层板上，以三氯甲烷丙酮（薄层板上，以三氯甲烷丙酮（4 4：1 1）为展开剂，）为展开剂，展开后，晾干，喷以稀碘化铋钾试液使显色。供试品展开后，晾干，喷以稀碘化铋钾试液使显色。供试品溶液如显与对照品相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液如显与对照品相应的杂质斑点，其颜色与对照品主斑点比较，不得更深，求其杂质限量。主斑点比较，不得更深，求其杂质限量。C杂质杂质C样品样品杂质限量杂质限量1001005201000101001.0第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法一般杂质检查规则一般杂质检查规则药品检验操作标准药品检验操作标准规定：规定：1.1.遵循遵循平行操作平行操作原则原则（1 1）仪仪器器的的配配对对性性 如如纳纳氏氏比比色色管管应应配配对对，刻刻度线高低相差不超过度线高低相差不超过2mm2mm（2 2）对对照照品品与与供供试试品品的的同同步步操操作作：反反应应时时间间，反反应温度，所加入的试剂等应温度，所加入的试剂等2.2.正确的取样及供试品的称量范围正确的取样及供试品的称量范围 1g1g不不超过超过2%2%，1g1g不超过不超过1%1%3.3.正确的比色（白色背景下）、比浊方法正确的比色（白色背景下）、比浊方法（黑色背景，从比色管上向下）。（黑色背景，从比色管上向下）。4.4.检查结果不符合规定或在限度边缘时应对检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份供试管和对照管各复查二份 一、氯化物检查法一、氯化物检查法（一）原理（一）原理 对照法对照法药物中微量的氯化物在药物中微量的氯化物在硝酸硝酸酸性溶液中与硝酸银酸性溶液中与硝酸银试液作用试液作用,生成氯化银白色浑浊液生成氯化银白色浑浊液,与一定量标准与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较较,判断供试液中氯化物是否符合限度规定。判断供试液中氯化物是否符合限度规定。供供试试溶溶液液的的制制备备：除除另另有有规规定定外外，取取各各药药品品项项下下规规定定量量的的供供试试品品，加加水水溶溶解解使使成成25ml25ml，再再加加稀稀硝硝酸酸10m110m1；置置50ml50ml纳纳氏氏比比色色管管中中，加加水水使使成成约约40m140m1，摇摇匀匀，即即得得供供试试溶液溶液。（二）检查方法（二）检查方法 药典附录药典附录对照溶液的制备：对照溶液的制备：另取各药品项下规定量另取各药品项下规定量的的标准氯化钠（标准氯化钠（Cl 1010 g/ml)g/ml)溶液，置溶液，置50ml50ml纳氏比色管中，加纳氏比色管中，加稀硝酸稀硝酸10m110m1，加水使成，加水使成40m140m1，摇匀，即得，摇匀，即得对照溶液对照溶液。于供试溶液与对照溶液中，分别加入于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银硝酸银试液试液1.0m11.0m1，用水稀释使成，用水稀释使成50m150m1，摇匀，在，摇匀，在暗处放置暗处放置5 5分钟，分钟，同置黑色背景上，从比色同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较，即得管上方向下观察，比较，即得黑色的背景上黑色的背景上 自上而下的观察自上而下的观察（三）测定条件（三）测定条件 1.1.标准标准NaClNaCl溶液溶液 10 10 g Clg Cl /ml/ml，在测定的，在测定的条件下，条件下，50ml50ml溶液中含溶液中含50508080 g g的的ClCl 所显所显浑浊浑浊梯度明显梯度明显，便于比较，相当于标准，便于比较，相当于标准NaClNaCl溶液溶液5 58ml8ml。2.2.反应需在反应需在硝酸酸性硝酸酸性条件下进行，且以条件下进行，且以50ml50ml供供试溶液中含稀硝酸试溶液中含稀硝酸10 ml10 ml为宜，为宜，过多会增大氯化过多会增大氯化银的溶解度银的溶解度,使浊度降低。使浊度降低。（1 1）加速）加速AgClAgCl浑浊的形成；浑浊的形成；（2 2）产生较好的乳浊；）产生较好的乳浊；（3 3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。银沉淀的形成。3.3.稀释到稀释到40ml40ml后加硝酸银试液的目的后加硝酸银试液的目的使产生的使产生的AgClAgCl浑浊均匀浑浊均匀.硝酸银加得过早硝酸银加得过早,由于氯化物浓度过大产生由于氯化物浓度过大产生AgClAgCl沉淀而影响比浊沉淀而影响比浊.4.4.避光、暗处放置避光、暗处放置5 5分钟后比浊，因氯化银见分钟后比浊，因氯化银见光易分解。光易分解。5.5.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。察。6.6.平行操作原则平行操作原则 为了保证样品管与对照管的反应条件一致为了保证样品管与对照管的反应条件一致,要求样品管与对照管要平行操作要求样品管与对照管要平行操作平行试验平行试验.（四）干扰及排除（四）干扰及排除1.1.供试品溶液如不澄清供试品溶液如不澄清供试品溶解后溶液不澄清供试品溶解后溶液不澄清,应过滤应过滤,过滤时过滤时的滤纸要先用含的滤纸要先用含硝酸硝酸的水溶液的水溶液(1100)(1100)洗涤洗涤,除去滤纸中含有的氯化物除去滤纸中含有的氯化物.2.2.若供试品有色，需经处理后方可检查。若供试品有色，需经处理后方可检查。（1 1）内消色法（倍量法）内消色法（倍量法）如枸橼酸铁铵中氯如枸橼酸铁铵中氯化物的检查化物的检查.（2 2）外消色法）外消色法（根据其化学性质，设计其他（根据其化学性质，设计其他的排除方法）的排除方法）如如高锰酸钾中氯化物高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。适量，使其还原褪色后再依法检查。内消色法：内消色法：取两份供试品溶液取两份供试品溶液VV稀硝酸稀硝酸硝酸银试液硝酸银试液氯化银浑浊氯化银浑浊过滤过滤滤液滤液标准氯化钠溶液标准氯化钠溶液氯化银浑浊氯化银浑浊硝酸银试液硝酸银试液稀硝酸稀硝酸氯化银浑浊氯化银浑浊暗处放置暗处放置5 5分钟、观察、比较分钟、观察、比较 3.3.当当有有其其它它干干扰扰物物质质存存在在时时，必必需需在在检检查查前除去前除去（1 1）碘化物中氯化物的检查）碘化物中氯化物的检查 A A 加加入入一一定定量量的的酸酸和和过过氧氧化化氢氢，加加热热煮煮沸沸，使氧化产物碘挥发。使氧化产物碘挥发。Cl的氧化电位高的氧化电位高(1.35)不能被氧化为不能被氧化为Cl2I-的氧化电位低的氧化电位低(0.53)B B 加加入入氨氨试试液液，碘碘化化银银稳稳定定，而而氯氯化化银银和和溴溴化化银在氨试液中溶解，除去碘化物的干扰。银在氨试液中溶解，除去碘化物的干扰。（2 2）碘碘中中氯氯化化物物的的检检查查（在在水水中中研研磨磨，滤滤过过，于滤液中加锌粉使碘还原成碘化物）于滤液中加锌粉使碘还原成碘化物）反应原理反应原理:根据氨中溶解度不同根据氨中溶解度不同AgCl(溶解溶解)AgBr(微溶微溶)AgI(不溶不溶)4.4.不溶于水的有机药物不溶于水的有机药物（1 1）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。（2 2）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。）加热，放冷，过滤，取滤液进行检查。（3 3）溶于有机溶剂如）溶于有机溶剂如:稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇、丙酮，可加 稀乙醇或丙酮溶解后进行检查。稀乙醇或丙酮溶解后进行检查。5.5.有机氯杂质，可根据杂质结构，将有机氯杂质，可根据杂质结构，将有机氯转变为离子状态，再依法检查有机氯转变为离子状态，再依法检查A.A.如果有机氯为氯代脂烃或氯在环如果有机氯为氯代脂烃或氯在环的侧链上，可在碱性溶液中加热使的侧链上，可在碱性溶液中加热使水解生成氯离子。水解生成氯离子。B.B.如果杂质中的氯原子连接在环上，如果杂质中的氯原子连接在环上，则需先对其进行有机破坏，使分解则需先对其进行有机破坏，使分解后再检查后再检查例例1.1.中中国国药药典典 （20052005年年版版）规规定定，检检查查氯氯化化物物杂杂质质时时，一一般般取取用用标标准准氯氯化化钠钠溶溶液液（1010gClgCl/ml/ml）5 58ml8ml的原因是的原因是 A.A.使检查反应完全使检查反应完全 B.B.药物中含氯化物的量均在此范围药物中含氯化物的量均在此范围 C.C.加速反应加速反应 D.D.所产生的浊度梯度明显所产生的浊度梯度明显 E.E.避免干扰避免干扰 例例2.2.采采用用硝硝酸酸银银试试液液检检查查氯氯化化物物时时，加加入硝酸使溶液酸化的目的是入硝酸使溶液酸化的目的是 A A加速生成氯化银浑浊反应加速生成氯化银浑浊反应 B B消除某些弱酸盐的干扰消除某些弱酸盐的干扰 C C消除碳酸盐干扰消除碳酸盐干扰 D D消除磷酸盐干扰消除磷酸盐干扰 E E避免氧化银沉淀生成避免氧化银沉淀生成例例3.3.当当采采用用比比浊浊法法检检查查氯氯化化物物杂杂质质时时，若若药药物物本本身身有有颜颜色色而而干干扰扰检检查查的的话话，应应该该选用的处理方法为选用的处理方法为 A A内消色法内消色法B B外消色法外消色法C C比色法比色法D D差示可见分光法差示可见分光法 例4.若要进行高锰酸钾中氯化物的检查，最佳方法是 A.加入一定量氯仿提取后测定B.氧瓶燃烧C.倍量法D.加入一定量乙醇E.以上都不对例5.下列哪些条件为药物中氯化物检查的必要条件A.所用比色管需配套B.稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C.避光放置5分钟D.在白色背景下观察 二、硫酸盐检查法二、硫酸盐检查法（一）原理（一）原理 对照法对照法药物中存在的微量硫酸盐与氯化钡在药物中存在的微量硫酸盐与氯化钡在盐酸盐酸酸性酸性条件下生成硫酸钡白色浑浊条件下生成硫酸钡白色浑浊,与一定量标准硫酸与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下生成的浑浊比较钾溶液在相同条件下生成的浑浊比较,判断供判断供试品中硫酸盐是否符合限度规定试品中硫酸盐是否符合限度规定.（二）测定条件（二）测定条件1.1.标准标准K K2 2SOSO4 4溶液溶液0.1mg/ml0.1mg/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含0.10.10.5mg0.5mg的硫酸根离子所显浑浊梯度明显，相当的硫酸根离子所显浑浊梯度明显，相当于标准于标准K K2 2SOSO4 4溶液溶液1 15ml5ml。2.2.反应需在反应需在盐酸酸性盐酸酸性条件下进行，可以防止碳酸条件下进行，可以防止碳酸钡或磷酸钡等沉淀的生成。酸度过大可使硫酸钡或磷酸钡等沉淀的生成。酸度过大可使硫酸钡溶解，灵敏度下降，应注意控制，以钡溶解，灵敏度下降，应注意控制，以50ml50ml供供试溶液中含稀盐酸试溶液中含稀盐酸2ml2ml为宜为宜 。3.3.试剂：氯化钡，中国药典采用试剂：氯化钡，中国药典采用25%25%的氯化钡的氯化钡溶液，呈现的浑浊度较稳定。加入氯化钡试液后，溶液，呈现的浑浊度较稳定。加入氯化钡试液后，应立即充分振摇，防止局部过浓而影响产生浑浊应立即充分振摇，防止局部过浓而影响产生浑浊的程度。的程度。4.4.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。若供试品有色，也可用内消色法即倍若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。量法处理。（三）干扰及排除（三）干扰及排除如果供试品不澄清，应先用加盐酸使如果供试品不澄清，应先用加盐酸使成酸性的水洗净滤纸中的硫酸盐，再过成酸性的水洗净滤纸中的硫酸盐，再过滤滤(3)若供试品在水中不易溶解，可加入适若供试品在水中不易溶解，可加入适量的有机溶剂将药物溶解后再依法检查，量的有机溶剂将药物溶解后再依法检查，例如硫酸普拉睾酮钠中硫酸盐的检查，先例如硫酸普拉睾酮钠中硫酸盐的检查，先用丙酮水（用丙酮水（1 1：1 1）溶解样品后进行检查）溶解样品后进行检查例例：药药物物中中硫硫酸酸盐盐检检查查时时，所所用用的的标标准准对照液是对照液是A.A.标准氯化钡标准氯化钡B.B.标准醋酸铅溶液标准醋酸铅溶液C.C.标准硝酸银溶液标准硝酸银溶液D.D.标准硫酸钾溶液标准硫酸钾溶液 E.E.以上都不对以上都不对 1.1.原理原理 对照法对照法 铁盐在铁盐在盐酸酸性溶液盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成中与硫氰酸铵生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子红色可溶性硫氰酸铁配位离子,再与一再与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈的颜定量标准铁溶液用同法处理后所呈的颜色进行比较色进行比较,颜色不得更深颜色不得更深.三、铁盐检查法三、铁盐检查法（一）硫氰酸盐法（一）硫氰酸盐法 ChPChP（20052005）、）、USPUSP（2929）方法：方法：除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成水溶解使成25ml25ml，移置，移置50ml50ml纳氏比色管，纳氏比色管，加稀盐酸加稀盐酸4ml4ml与过硫酸铵与过硫酸铵50mg50mg，加水稀释至约，加水稀释至约35ml35ml后，加后，加3030硫氰酸铵硫氰酸铵溶液溶液3ml3ml，再加水适量使成，再加水适量使成50ml50ml，摇匀；，摇匀；如显色，如显色，立即与标准铁溶液（立即与标准铁溶液（1010 g Fe/ml)g Fe/ml)一定量一定量按相同方法制成的对照溶液比较按相同方法制成的对照溶液比较。2.测定条件 （1 1）用）用FeNHFeNH4 4(SO(SO4 4)2 212H12H2 2O O（硫酸铁铵）配制标准铁（硫酸铁铵）配制标准铁贮备液（加入硫酸防止贮备液（加入硫酸防止FeFe3+3+的水解），标准铁溶液临用的水解），标准铁溶液临用前稀释而成，标准铁溶液前稀释而成，标准铁溶液1010 g Feg Fe3+3+/ml/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含10105050 g g的的FeFe3+3+显色梯度明显，一般取显色梯度明显，一般取标准铁溶液标准铁溶液1.01.05.0ml5.0ml。（2 2）反应需在）反应需在盐酸酸性盐酸酸性条件下进行，防止条件下进行，防止FeFe3+3+的水的水解，经试验，以解，经试验，以50ml50ml供试溶液中含稀盐酸供试溶液中含稀盐酸4ml4ml为宜为宜。（3 3）试剂：该反应为一可逆反应，）试剂：该反应为一可逆反应，加过量硫氰加过量硫氰酸铵：酸铵：A A 增加生成的配位离子的稳定性增加生成的配位离子的稳定性,提高反应的灵提高反应的灵敏度。敏度。B B 消除因消除因ClCl-、SOSO4 42-2-、POPO4 43-3-、枸橼酸根等与铁盐枸橼酸根等与铁盐形成配位化合物引起的干扰。形成配位化合物引起的干扰。（4 4）铁盐检查时，加氧化剂过硫酸铵。）铁盐检查时，加氧化剂过硫酸铵。A A 加过硫酸铵可氧化加过硫酸铵可氧化FeFe2+2+为为FeFe3+3+，B B 同同时时可可防防止止光光线线使使硫硫氰氰酸酸铁铁还还原原或或分解褪色。分解褪色。某某些些药药物物（如如葡葡萄萄糖糖、糊糊精精和和硫硫酸酸镁镁等等）在在检检查查过过程程中中需需加加硝硝酸酸处处理理，则则不不再再加加过过硫硫酸酸铵铵；另另外外因因为为硝硝酸酸中中可可能能含含亚亚硝硝酸酸，它它能能与与硫硫氰氰酸酸根根离离子子作作用用生生成成红红色色的的亚亚硝硝酰酰硫硫氰氰化化物物，影影响响比比色色，所所以以剩剩余余的的硝酸必须加热煮沸除去。硝酸必须加热煮沸除去。（5 5）比色方法：同置于）比色方法：同置于白色背景上，白色背景上，自上向下观察。自上向下观察。3.3.干扰及排除干扰及排除（1 1）为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，）为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，可用正丁醇或异戊醇提取后，分取醇层比色。可用正丁醇或异戊醇提取后，分取醇层比色。（2 2）具环状结构的有机药物，需经破坏处理后再检查。）具环状结构的有机药物，需经破坏处理后再检查。（3 3）干扰离子的影响）干扰离子的影响:(Cl:(Cl-,SO,SO4 42-2-)等酸根阴离子。等酸根阴离子。A A 适当增加酸度适当增加酸度 B B 增加增加硫氰酸铵的加入量硫氰酸铵的加入量 C C 用正丁醇提取后比色用正丁醇提取后比色 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因（二）巯基醋酸法（二）巯基醋酸法（BP)反应原理反应原理:巯基醋酸还原巯基醋酸还原FeFe3+3+为为FeFe2+2+,在氨碱性在氨碱性溶液中进一步与溶液中进一步与FeFe2+2+反应生成红色配位离子反应生成红色配位离子,与一定量标准铁溶液经同法处理后产生的颜与一定量标准铁溶液经同法处理后产生的颜色进行比较色进行比较.1 1 加巯基醋酸前，应先加入加巯基醋酸前，应先加入20%20%枸橼酸枸橼酸2ml2ml，使枸橼酸与铁离子形成配位离子，以免在氨使枸橼酸与铁离子形成配位离子，以免在氨碱性溶液中形成氢氧化铁沉淀。碱性溶液中形成氢氧化铁沉淀。2 2 本法灵敏度较高，但试剂较贵本法灵敏度较高，但试剂较贵 讨论讨论例例1.中中国国药药典典（2005年年版版）规规定定铁铁盐盐的的检检查查方方法为法为A.硫氰酸盐法硫氰酸盐法B.巯基醋酸法巯基醋酸法C.普鲁士蓝法普鲁士蓝法D邻二氮菲法邻二氮菲法E.水杨酸显色法水杨酸显色法例例2.2.中中国国药药典典（20052005年年版版）规规定定，硫硫氰氰酸酸铵铵法法检查铁盐时，加入过硫酸按的目的是检查铁盐时，加入过硫酸按的目的是 A.A.使药物中铁盐都转变为使药物中铁盐都转变为FeFe3+3+B.B.防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色 C.C.使产生的红色产物颜色更深使产生的红色产物颜色更深 D D防止干扰防止干扰 E E便于观察、比较便于观察、比较 例例3.3.中国药典收载的铁盐检查，主要是检查中国药典收载的铁盐检查，主要是检查 A.FeA.Fe B.Fe B.Fe2+2+C.Fe C.Fe3+3+D.Fe D.Fe2+2+和和FeFe3+3+E.E.以上都不对以上都不对 四、重金属检查法四、重金属检查法重金属指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化重金属指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质，如银，铅，汞等。钠作用显色的金属杂质，如银，铅，汞等。以以铅为代表，以铅的限量表示重金属限度。铅为代表，以铅的限量表示重金属限度。中国药典（中国药典（20052005年版）共收载四法。年版）共收载四法。重金属影响药物的稳定性及安全性重金属影响药物的稳定性及安全性（一）第一法 硫代乙酰胺法1.1.原原理理 对对照照法法硫硫代代乙乙酰酰胺胺在在酸酸性性条条件件下下水水解解,产产生生硫硫化化氢氢,与与微微量量重重金金属属离离子子生生成成黄黄色色至至棕棕黑黑色色的的硫硫化化物物均均匀匀混混悬悬液液,与与一一定定量量标标准准铅铅溶溶液液经经同同法法处处理理后后所所呈呈颜颜色色比比较较,判判断断供供试试品品中中的的重重金属是否符合限量规定金属是否符合限量规定方法：除另有规定外，取方法：除另有规定外，取25ml25ml纳氏比色管纳氏比色管两支，甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸两支，甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液（盐缓冲液（pH3.5pH3.5）2ml2ml后，加水或各药品后，加水或各药品项下规定的溶剂稀释成项下规定的溶剂稀释成25ml25ml，乙管加入按，乙管加入按各药品项下规定方法制成的供试液各药品项下规定方法制成的供试液25ml;25ml;再再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2ml2ml，摇匀，放置，摇匀，放置2min,2min,同置白纸上，自上向同置白纸上，自上向下透视，乙管中显示的颜色与甲管比较，下透视，乙管中显示的颜色与甲管比较，不得更深。不得更深。2.2.测定条件测定条件 （1 1）用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防）用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防止止PbPb2+2+水解），标准铅溶液临用前稀释而成，标水解），标准铅溶液临用前稀释而成，标准硝酸铅溶液准硝酸铅溶液1010 g Pbg Pb2+2+/ml/ml，适宜比色范围为，适宜比色范围为27ml27ml溶液中含溶液中含10102020 g g的的PbPb2+2+，相当于标准铅相当于标准铅1 12ml2ml。（2 2）硫代乙酰胺试液硫代乙酰胺试液H H2 2S S试液：恶臭和毒性试液：恶臭和毒性；不稳定；易被空不稳定；易被空气氧化而析出硫；浓度难以控制。气氧化而析出硫；浓度难以控制。改用硫代乙酰胺为显色剂改用硫代乙酰胺为显色剂（9595版药典）版药典）硫硫代乙酰胺在实验条件下水解产生代乙酰胺在实验条件下水解产生H H2 2S,S,与重金属与重金属离子反应离子反应.（3 3）本法用）本法用2ml2ml，pH3.5pH3.5的醋酸盐缓冲液控制的醋酸盐缓冲液控制 溶液溶液pHpH值为值为3.03.03.53.5。pHpH在在3.03.0 3.53.5时时,呈色较完全呈色较完全.酸度增大酸度增大,呈色变浅甚至不呈色呈色变浅甚至不呈色.（1 1）供试品如有色，需经处理后方可检查。）供试品如有色，需经处理后方可检查。A.A.外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液他无干扰的有色溶液,与供试品颜色一致后再进与供试品颜色一致后再进行比较。行比较。3.3.干扰及排除干扰及排除 .稀焦糖溶液调节稀焦糖溶液调节 .指示剂调节指示剂调节 B.B.内消色法内消色法C.C.改用第四法，微孔滤膜过滤法改用第四法，微孔滤膜过滤法与氯化物检查时的处理方法类似与氯化物检查时的处理方法类似（2 2）若若供供试试品品中中有有微微量量FeFe3+3+存存在在，会会氧氧化化硫硫化化氢氢生生成成单单质质硫硫，干干扰扰比比色色，加加入入抗抗坏坏血血酸酸或或盐盐酸酸羟羟胺胺（0.50.51.0g1.0g）还还原原FeFe3+3+为为FeFe2+2+，可消除干扰可消除干扰如：葡萄糖酸亚铁中重金属的检查如：葡萄糖酸亚铁中重金属的检查.（3 3）若供试品为铁盐，可在盐酸中