生化组习题(配答案)(1).doc

生化测试一 氨基酸
一、填空题
1.氨基酸的结构通式为 。
2.氨基酸在等电点时，主要以 兼性/两性 离子形式存在，在pH>pI的溶液中，大部分以 阴离子形式存在，在pH<pI的溶液中，大部分以 阳 离子形式存在。
3.生理条件下（pH7.0左右），蛋白质分子中的 Arg 侧链和 Lys 侧链几乎完全带正电荷，但His 侧链带部分正电荷。
4.测定蛋白质紫外吸收的波长，一般在 280nm ，主要由于蛋白质中存在着 Phe、Trp、Tyr氨基酸残基侧链基团。
5.皮肤遇茚三酮试剂变成 蓝紫 色，是因为皮肤中含有 蛋白质（氨基酸）所致。
6.Lys的pk1（—COOH）=2.18，pk2（—）=8.95，pk3（—）=10.53，其pI为 9.74。在pH=5.0的溶液中电泳，Lys向 负 极移动。
7.Henderson—Hasselbalch方程为pH=pKa+lg[质子受体]/ [质子受体]。
8.实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应，然后用碱（NaOH）来滴定 上放出的 NH3+/氨基。
9.一个带负电荷的氨基酸可牢固地结合到阴离子交换树脂上，因此需要一种比原来缓冲液pH值 小 和离子强度 高 的缓冲液，才能将此氨基酸洗脱下来。
10.用 N-溴代琥珀酰亚胺 试剂可区分丙氨酸和色氨酸。
二、选择题
1.区分极性氨基酸和非极性氨基酸是根据 （C）
A. 所含的羧基和氨基的极性 B. 所含氨基和羧基的数目
C. 所含的R基团为极性或非极性 D. 脂肪族氨基酸为极性氨基
2.下列哪一种氨基酸不属于人体必需氨基酸 （D）
A. 亮氨酸 B. 异亮氨酸 C. 苯丙氨酸 D. 酪氨酸
3.下列哪一组氨基酸为酸性氨基酸： （D）
　A. 精氨酸，赖氨酸 B. 谷氨酸，谷氨酰胺
　C. 组氨酸，精氨酸 D. 谷氨酸，天冬氨酸
4.含硫的必需氨基酸是 （B）
A. 半胱氨酸 B. 蛋氨酸 C. 苏氨酸 D. 亮氨酸
5.芳香族必需氨基酸包括 （D ）
A. 蛋氨酸 B. 酪氨酸 C. 亮氨酸 D. 苯丙氨酸
6.含四个氮原子的氨基酸是 （B）
A. 赖氨酸 B. 精氨酸 C. 酪氨酸 D. 色氨酸
7.蛋白质中不存在的氨基酸是下列中的哪一种？（D）
A. 赖氨酸 B. 羟赖氨酸 C. 酪氨酸 D.鸟氨酸
8.在蛋白质中不是L-氨基酸的是（B）
A. 苏氨酸 B. 甘氨酸 C. 半胱氨酸 D. 谷氨酰胺
9.谷氨酸的PK值为2.19, 4.25, 9.76; 赖氨酸的PK值为2.18, 8.95, 10.53; 则它们的PI值分别为（B）
A. 2.19和10.53 B. 3.22和9.74 C. 6.96和5.56 D. 5.93和6.36
10.从赖氨酸中分离出谷氨酸的可能性最小的方法是（D）
A. 纸层析 B. 阳离子交换层析 C. 电泳 D. 葡萄糖凝胶过滤
11.用于确定多肽中N-末端氨基酸的是（C）
A. Sanger试剂 B. Edman试剂 C. 两者均可 D. 两者均不可
12.有一蛋白质水解物,在PH6时,用阳离子交换柱层析,第一个被洗脱的氨基酸是（C）
A. Val (PI5.96) B. Lys (PI9.74) C. Asp (PI2.77) D. Arg (PI10.76)
13.下列那种氨基酸属于非编码氨基酸？（D）
A. 脯氨酸 B. 精氨酸 C. 酪氨酸 D. 羟赖氨酸
14.可使二硫键氧化断裂的试剂是（C）
A. 尿素 B. 巯基乙醇 C. 过甲酸 D. SDS
15.没有旋光性的氨基酸是（C）
A. Ala B. Pro C. Gly D. Glu
16. Sanger试剂是（B）
A.苯异硫氰酸酯 B. 2,4—二硝基氟苯 C. 丹磺酰氯 D.β-巯基乙醇
17.酶分子可逆共价修饰进行的磷酸化作用主要发生在哪一个氨基酸上 （B）
A. Ala B. Ser C. Glu D. Lys
18.当含有Ala,Asp,Leu,Arg的混合物在pH3.9条件下进行电泳时，哪一种氨基酸移向正极(+)（B）
A. Ala B. Asp C. Leu D. Arg
19.下列哪种氨基酸溶液不使平面偏振光发生偏转（B）
A. Pro B. Gly C. Leu D. Lys
20.对哺乳动物来说，下列哪种氨基酸是非必需氨基酸（C）
A. Phe B. Lys C. Tyr D. Met
21.一个谷氨酸溶液，用5ml的1M的NaOH来滴定，溶液中的PH从1.0上升到7.0，下列数据中哪一个接近于该溶液中所含谷氨酸的毫摩尔数为 （B）
A. 1.5 B. 3.0 C. 6.0 D. 12
22.下列AA中含氮量最高的是（A）
A. Arg B.His C.Gln D. Lys
23.下列在280nm具有最大光吸收的基团是（A）
A.色氨酸的吲哚环 B.酪氨酸的酚环 C.苯丙氨酸的苯环 D.半胱氨酸的硫原子
24.在生理pH值条件下，具有缓冲作用的氨基酸残基是（C）
A. Tyr B. Trp C. His D. Lys
25.下列关于离子交换树脂的叙述哪一个是不正确的？（D）
A.是人工合成的不溶于水的高分子聚合物 B.阴离子交换树脂可交换的离子是阴离子 C.有阳离子交换树脂和阴离子交换树脂两类 D.阳离子交换树脂可交换的离子是阴离子
26.下列哪种氨基酸可使肽链之间形成共价交联结构（D）
A.Met B. Ser C. Glu D. Cys
27.下列氨基酸中哪个含有吲哚环？（C）
A.Met B. Tyr C. Trp D. His
三、名词解释
1. α-氨基酸：是含有氨基的羧酸，氨基连接在α-碳上。α-氨基酸是蛋白质的构件分子。
2. 必需氨基酸：机体自身不能合成、必须从外界摄入的氨基酸种类。
3. 层析：层析技术又称色谱技术，是一种根据被分离物质的物理、化学及生物学特性的差异，使它们在某种基质中移动速度不同而进行分离和分析的方法。
4. 纸层析：利用滤纸作为层析载体，按照混合物在移动相和固定相之间分配比例的不同，将混合成分分开的技术。
5. 离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术。
6. 氨基酸的等电点：在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，在电场中既不向阳极也不向阴极移动。此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。
四、问答题（课后题6，7，14，15）
生化测试二 蛋白质
一、填空题
1. 决定多肽或蛋白质分子空间构像能否稳定存在，以及以什么形式存在的主要因素是由 一级结构 决定的。
2. 用于测定蛋白质溶液构象的各种方法中，测定主链构象的方法有 圆二色性 和 拉曼光谱, 测定侧链构象的方法有 紫外差光谱 和荧光和荧光偏振，能测定主链和侧链构象的有 核磁共振。
3. 测定蛋白质中二硫键位置的经典方法是 对角线电泳 。
4. 从混合蛋白质中分离特定组分蛋白质的主要原理是根据它们之间的 溶解度、分子量/分子大小、带电性质、吸附性质、生物亲和力。
5. 血红蛋白与氧结合是通过 变构 效应实现的.由组织产生的CO2扩散到细胞,从而影响Hb和O2的亲合力,这称为 波尔效应。
6. 蛋白质二级结构和三级结构之间还存在 超二级结构 和 结构域 两种组合体。
7. 蛋白质多肽链主链构象的结构单元包括 α-螺旋、 β-折叠 、β-转角,，维系蛋白质二级结构的主要作用力是 氢 键。
8. 三肽val-tyr-ser的合适名字是 缬氨酰酪氨酰丝氨酸。
9. 蛋白质的-螺旋结构中，3.6 个氨基酸残基旋转一周，每个氨基酸沿纵轴上升的高度为 0.15 nm，旋转 100 度。
10.凡能破坏蛋白质 水化层 和 电荷层 的因素，均可使蛋白从溶液中沉淀出来。
11.变性蛋白质同天然蛋白质的区别是 生物活性丧失，紫外吸收增加，溶解度降低，易被酶消化。
12.聚丙烯酰胺凝胶电泳的分辨力之所以很高,是因为它具有 电荷效应、分子筛效应、浓缩效应 三种效应。
13.交换层析分离蛋白质是利用了蛋白质的 带电/解离 性质。阴离子交换层析在层析柱内填充的交换剂上带 正 电荷，可吸引带 负 电荷的蛋白质，然后用带 负 电荷的溶液洗柱将蛋白质洗脱下来。
14.当蛋白质分子中的一个亚基与其配体结合后，能影响此寡聚体中另一个亚基与配体的结合能力，此效应称为 协同效应。当Hb的第一个亚基与O2结合后，对其他三个亚基与O2的结合具有 促进 作用，这种效应称为 正协同效应。其氧解离曲线呈 S型。
15. 胰岛素原由 1 条肽链组成。
二、选择题
1. 下列描述中哪些叙述对一直链多肽Met-Phe-Leu-Thr-Val-Ile-Lys是正确的（ AC ）
A. 能与双缩脲试剂形成紫红色化合物 B. 由七个肽键连接而成
C. 胰凝乳蛋白酶水解 D. 含有-SH
2. _D__是一种去垢剂,常用在凝胶电泳中,以测定蛋白质的分子量（ ）
A. β-巯基乙醇 B.盐酸胍 C.碘乙酸 D.十二烷基硫酸钠
3. 以下氨基酸中哪一种可能会改变多肽链的方向和阻断a－螺旋（D）
A. Phe B. Cys C. Trp D. Pro
4. 免疫球蛋白分子中二重链之间，以及重链与轻链之间，均以如下一种键的形式相连（C）
A. 氢键 B. 疏水相互作用 C. 二硫键 D. 离子键
5. 蛋白质分子中α螺旋的特点是（C）
A.肽键平面完全伸展 B.靠盐键维持稳定 C.多为右手螺旋 D.螺旋方向与长轴垂
6. 为从组织提取液中沉淀出活性蛋白最有可能的方法是加入（A）
A. 硫酸铵 B. 三氯乙酸 C. 对氯汞苯甲酸 D. 氯化汞 E. NH4Cl
7. 下述哪种分离方法可得到不变性的蛋白质制剂（D）
A.苦味酸沉淀 B.硫酸铜沉淀 C.常温下乙醇沉淀 D.硫酸钠沉淀 E.加热
8. 有一个肽用胰蛋白酶水解得：①H-Met-Glu-Leu-Lys-OH②H-Ser-Ala-Arg-OH③H-Gly-Tyr-OH三组片段，用BrCN处理得：④H-Ser-Ala-Arg-Met-OH⑤H-Glu-Leu-Lys-Gly-Tyr-OH两组片段，按肽谱重叠法推导出该九肽的序列应为（C）
A. 3+2+1 B.5+4 C.2+1+3 D.2+3+1 E.1+2+3
9. 蛋白质变性后，不发生下列哪种改变（C）
A.生物活性丧失　　B.易被降解 　C.一级结构改变　D.空间结构改变 E.次级键断裂
10. 两个不同蛋白质中有部分的一级结构相同 （B）
A.这部分的二级结构一定相同 B.这部分的二级结构可能不同 C.它们的功能一定相同
D.它们的功能一定不同 E.这部分的二级结构一定不同
11. 带电颗粒在电场中的泳动度首先取决于下列哪项因素（C）
A. 电场强度 B. 支持物的电渗作用 C. 颗粒所带净电荷数及其大小，形状
D. 溶液的pH值 E. 溶液的离子强度
12.关于离子交换色谱的描述下列哪一项不正确（CD）
A.离子交换剂通常不溶于水 B.阳离子交换剂常中离解出带正电的基团
C.阴离子交换剂常可离解出带正电的基团 D.阳离子交换剂常可离解出带负电的基团
E.可用于分离纯化等电点等于7的蛋白质
13. 对于蛋白质的溶解度，下列叙述中哪一条是错误的（B）
A.可因加入中性盐而增高 B.在等电点时最大 C.可因加入中性盐降低
D.可因向水溶液中加入酒精而降低 E.可因向水溶液中加入丙酮降低
14. 向血清中加入等容积的饱和硫酸铵溶液，可使 （E）
A. 白蛋白沉淀 B. 白蛋白和球蛋白都沉淀 C. 球蛋白原沉淀
D. 纤维蛋白原沉淀 E. 只有球蛋白沉淀
15. 下列蛋白质中，具有四级结构的是（D）
A. 胰岛素 B. 细胞色素C C. RNA酶 D. 血红蛋白 E. 肌红蛋白
16.下列哪种蛋白质不含铁原子（E）
A. 肌红蛋白 B. 细胞色素C C.过氧化氢酶 D.过氧化物酶 E. 胰蛋白酶
17.下列各项不符合纤维状蛋白理化性质的是（B ）
A. 长轴与短轴在比值大于10 B.易溶于水 C.不易受蛋白酶水解
D.不适合用分子筛的方法测其相对分子质量 E.其水溶液黏度高
18. 血红蛋白的氧合曲线向右移动是由于（AC）
A. O2分压的减少 B. CO2分压的减少 C. CO2分压的增加
D. N2分压的增加 E. pH的增加
19. 关于蛋白质三级结构的描述，下列哪项是正确的（A）
A.疏水基团位于分子内部 B. 亲水基团位于分子内部
C.羧基多位于分子内部 D.二硫键位于分子表面
20.镰刀型贫血病患者，Hb分子中氨基酸的替换及位置是（D）
A.α链第六位Val换成Glu B.β链第六位Val换成Glu
C. α链第六位Glu换成Val D. β链第六位Glu换成 Val
21.下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时，最先被洗脱的是（D）
A.牛胰岛素（分子量5700） B. 肌红蛋白（分子量16900）
C.牛β乳球蛋白（分子量35000） D.马肝过氧化物酶（分子量247500）
22.每分子血红蛋白可结合氧的分子数是（D）
A．1 B．2 C．3 D．4
23.免疫球蛋白是一种什么蛋白（A）
A．糖蛋白 B．脂蛋白 C．铁蛋白 D．核蛋白
24.特殊的羟-Pro和羟-Lys存在于下列哪种蛋白质中 （A）
A. 胶原 B. 角蛋白 C. 肌球蛋白 D. 微管蛋白
三、是非题
1. 蛋白质分子的一级结构决定其高级结构，最早的实验证据是蛋白质的可逆变性（√）。
2. 原胶原纤维中参与产生共价交联的是羟脯氨酸残基。（×）
3. a-螺旋中Glu出现的概率最高,因此poly(Glu)可以形成最稳定的a-螺旋。(×)
4. 用重金属盐沉淀蛋白质时，溶液的PH值应稍大于蛋白质的等电点。（√）
5. phe-leu-ala-val-phe-leu-lys是一个含有7个肽键的碱性七肽。（×）
6. pH8条件下,蛋白质与SDS充分结合后平均每个氨基酸所带电荷约为0.5个负电荷。(√)
7. 在Hb分子中，其F8His和E7His都分别以第五和第六位与血红素中的Fe配位相结合。（×）
8. 在蛋白质分子进化过程中，其空间结构的变化要比序列的变化更为保守。（√ ）
9. 使亚基间缔合成一个蛋白质的主要作用力是次级键，而其中又以疏水基团之间的作用力最为普遍。（√）
10.二硫键和蛋白质的三级结构密切有关，因此没有二硫键的蛋白质就只有一级和二级结构。（×）
11. 任何一个蛋白质的紫外吸收的峰值都在280nm附近。(×)
四、名词解释
1. 蛋白质变性：蛋白质在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。
2. 结构域：指多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区，它是相对独立的紧密球状实体，称为结构域。
3. 同源蛋白质: 来自不同种类生物的序列和功能类似的蛋白质。
4. Edman降解 ：是一种用来测定多肽和蛋白质氨基酸序列的方法。用苯异硫氰酸酯与多肽的N末端的氨基酸反应，从多肽链的N末端切下第一个氨基酸残基，用层析法可以测定在和这个被切下的氨基酸残基。余下的多肽链（少了一个氨基酸残基），再进行下一轮Edman降解循环，切下N末端的第二个氨基酸残基，并测定。重复循环过程，直到测出整个多肽的氨基酸序列。
5.β-转角：多肽链中常见的二级结构，连接蛋白质分子中的二级结构（α-螺旋和β-折叠），使肽链走向改变的一种非重复多肽区。常见的β-转角含有四个氨基酸残基，第一个残基的C=O与第四个残基的N-H氢键键合形成一个紧密的环，第二个残基大都是脯氨酸。此结构多处在蛋白质分子的表面。
6. 蛋白质的超二级结构：也称之模序（motif），在蛋白质中由若干相邻的二级结构单元组合在一起，彼此相互作用，形成的有规则、在空间上能辨认的二级结构组合体。
7. 肽平面：肽键具有一定程度的双键性质，参与肽键的六个原子C、H、O、N、Cα1、Cα2不能自由转动，位于同一平面，此平面就是肽平面。
四、问答题
1.某八肽的氨基酸组成是2Lys, Asp, Tyr, Phe, Gly, Ser和Ala。此八肽与FDNB反应、酸水解后释放出DNP—Ala。用胰蛋白酶水解该八肽，得到两个三肽及一个二肽，其三肽的氨基酸组成分别为Lys, Ala, Ser和Gly, Phe, Lys。用胰凝乳蛋白酶（糜蛋白酶）水解该八肽，释放出游离的Asp及一个四肽和一个三肽，四肽的氨基酸组成是Lys,Ser, Phe, Ala, 三肽与FDNB反应后，经酸水解释放出DNP—Gly。根据上述结果分析，写出该八肽的氨基酸排列顺序，并简述分析过程。（分析过程写在反面）
Ala-Ser- Lys- Phe- Gly- Lys- Tyr- Asp
题1,胰蛋白酶、糜蛋白酶水解后氨基酸后“分别为”给人的感觉有歧义,好像是构成一个顺序一样.仔细分析一下题,显然从题意来看水解的片段组成没顺序.
DNS-Ala不用说N端第一个氨基酸Ala确定了.胰蛋白酶切割左边精、赖氨酸位点,糜蛋白酶切割左边phe、trp、tyr位点.
糜蛋白酶水解产生游离的ASP 不用说八肽C端-phe-ASP顺序确定了.产物四肽含有phe,phe一定在四肽的C末端确定了.
胰蛋白酶水解产物Lys, Ala, Ser,显然Lys一定在C末端,这三肽顺序就确定ala-ser-Lys.又由于四肽包含了三肽Lys, Ala, Ser.显然四肽顺序为Ala-ser-Lys-Phe
现在只剩下2个氨基酸顺序没确定,又胰蛋白酶另一个水解三肽为Gly, Phe, Lys,而这个三肽中的phe又是必定和ASP相连,Gly和Lys被两个phe夹着,要保证胰蛋白酶水解3,3,2的结果,故八肽顺序为：Ala-ser-Lys-Phe-Gly-Lys-Phe-Asp
2.试考虑一个由ala,arg2,glu2,asp2,gly,lys,ser,thr组成的十一肽，用Sanger试剂DNFB处理确定其N-末端为谷氨酸，经部分酸水解后得到下列各肽段： (asp,glu)、 (glu,gly)、(asp,glu,gly)、(ala,asp)、 (ala,asp,ser)、 (asp,glu,lys)、(ser,thr)、(asp,lys)、(arg,thr)、(arg2,thr)、(ala,asp,gly)、(arg,lys)，请直接写出此十一肽的氨基酸全顺序。（注：给出的12个小肽段只表示氨基酸组成，而非顺序）
glu-gly-asp-ala-ser-thr-arg- arg- lys –asp- glu 或 反向序列
N末端为Glu而十一肽.Lys只有1个,其为突破口(asp,lys) (arg,lys) 可知Lys必然被夹着,又(asp,glu,lys) 故glu-ASP-Lys-Arg, 当然N C末端还无法确定
由(ser,thr)(arg,thr)可知Thr只有一个也必然被夹着又由于(arg2,thr) 可知为Ser-Thr-Arg-Arg.2个Arg已确定故：glu-Asp-Lys-Arg-Arg-Thr-Ser.又(ala,asp,ser)(ala,asp,gly)可知Ser连接(ala,asp）然后和Gly相连,又(asp,glu,gly)可以确定gly和Asp相连故Ser-Ala-Asp-Gly.又(asp,glu,gly)
可以确定整个顺序Glu-Asp-Lys-Arg-Arg-Thr-Ser-Ala-Asp-Gly-Glu
推到出来两头都有Glu,此题似乎信息无法确定哪端是N端哪端是C端?

生化测试三 酶
一、填空题
1. 酶的活性中心有 结合部位 和 催化部位 两个功能部位，其中 结合部位 直接与底物结合，决定酶的专一性，催化部位 是发生化学变化的部位，决定催化反应的性质。
2. 温度对酶活性的影响有以下两个方面，一方面 随着温度的升高酶活性增加，另一方面 过高的温度会使酶蛋白变性。
3. 酶活力是指 酶催化一定化学反应的能力，一般用 单位时间内酶催化反应产物的增加量 表示。
4. 磺胺类药物可以抑制 二氢叶酸合成酶 ，从而抑制细菌生长繁殖。
5. 全酶有 酶蛋白 和 辅助因子 组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中 酶蛋白 决定专一性和效率，辅助因子 起传递电子、原子或化学基团的作用。
6. 酶活性的快速调节方式包括 变构调节 和 可逆修饰。
7. 酶促反应的特点为 专一性、高效性、催化条件温和活性可调节。
二、选择题
1. 竞争性可逆抑制剂的抑制程度与下列哪种因素无关 （A）
A.作用时间 B.抑制剂浓度 C.底物浓度 D. 酶与抑制剂亲和力的大小
E. 酶与底物亲和力的大小
2. 哪种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度 （B）
A.不可逆抑制作用 B.竞争性可逆抑制作用 C.非竞争性可逆抑制作用
D.反竞争性可逆抑制作用 E.无法确定
3. 酶的竞争性可逆抑制剂可以使 （C）
A. Vmax减小，Km减小 B. Vmax增加， Km增加 C. Vmax 不变，Km增加
D. Vmax 不变，Km减小 E. Vmax 减小，Km增加
4. 下列常见抑制剂中，除哪个外都是不可逆抑制剂 （E）
A.有机磷化物 B.有机汞化物 C.有机砷化物 D.氰化物 E.磺胺类药物
5. 溶菌酶在催化反应时，下列因素中除哪个外，均与酶的高效率有关 （D）
A.底物形变 B.广义的酸碱催化 C.邻近效应与轨道定向 D.共价催化 E.无法确定
6. 在一酶反应体系中，若有抑制剂I存在时，最大反应速度为V’max，没有抑制剂时的最大反应速度为Vmax，若V’max=Vmax（E0-I0）/E0，则I 为 （D）
A.竞争性可逆抑制剂 B.非竞争性可逆抑制剂 C.反竞争性可逆抑制剂
D.不可逆抑制剂 E.不确定
7. 关于变构酶下列哪一种说法是错的 （C）
A.变构效应剂多为酶的底物或产物 B.存在催化与调节两个活性部位
C.反应符合米-曼氏方程式 D.反应曲线呈S形 E.一般由多个亚基组成
8. 酶的活化和去活化过程中，酶的磷酸化和去磷酸化的位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上（D）
A.天冬氨酸 B.脯氨酸 C.赖氨酸 D.丝氨酸 E甘氨酸
9. 以Hill系数判断，具有负协同效应的别构酶 （C）
A．n>1 B. n=1 C. n<1 D. n大于等于1 E. n小于等于1
10．酶的抑制剂 （B）
A.由于引起酶蛋白变性而使酶活性下降 B.使酶活性下降而不引起酶蛋白变性
C.只引起酶蛋白变性而可能对酶活性无影响 D.一般为强酸，强碱 E.都和底物结构相似
11．关于变构调节，正确的是 （B）
A.所有变构酶都有一个调节亚基，一个催化亚基
B.变构酶的动力学特点是酶促反应与底物浓度的关系呈s形而不呈双曲线形
C.变构激活和酶被激活剂激活的机制相同 D.变构抑制与非竞争抑制相同
12．同工酶的叙述，正确的是 （C）
A.结构相同来源不同 B.由不同亚基组成 C. 电泳迁移率往往不同 D.对同一底物具有不同专一性
13．丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响属于 （C）
A反馈抑制 B底物抑制 C竞争性可逆抑制 D非竞争性可逆抑制 E反竞争性可逆抑制
14．下列叙述哪一种是正确的 （C）
A所有辅酶都包含有维生素组分 B所有的维生素都可以作为辅酶的成分
C所有的B族维生素都可以作为辅酶的成分 D只有B族维生素可以作为辅酶的成分
E只有一部分B族维生素可以作为辅酶的成分。
15. 关于酶的必需基团的错误描述是 （E）
A.可催化底物发生化学反应 B.可与底物结合 C.可维持酶活性中心的结构
D.可存在于酶的活性中心以外 E.只存在于酶的活性中心
16. 某一符合米曼氏方程的酶,当[S]=2Km时,其反应速度V等于 （B）
A.Vmax B.2/3Vmax C.3/2Vmax D.2Vmax E.1/2Vmax
17. 酶的非竞争性抑制作用的特点是 （D）
A.抑制剂与酶的活性中心结构相似 B.抑制剂与酶作用的底物结构相似
C.抑制作用强弱与抑制剂浓度无关 D.抑制作用不受底物浓度的影响
E.动力学曲线中Vmax不变,Km值变小
18. 关于修饰酶的错误描述是 （C）
A.酶分子可发生可逆的共价修饰 B.这种修饰可引起其活性改变
C.修饰反应可在各种催化剂催化下进行 D.磷酸化和脱磷酸是常见的修饰反应
E.绝大多数修饰酶都具有无活性和有活性两种形式
19. 有关全酶的描述下列哪一项不正确（D）
A.全酶由酶蛋白和辅助因子组成 B.通常一种酶蛋白和辅助因子结合
C.而一种辅助因子则可与不同的酶蛋白结合 D.酶促反应的特异性取决于辅助因子
E.酶促反应的高效率取决于酶蛋白
20..酶的竞争性抑制作用的特点是（B）
A.抑制剂与酶的活性中心结构相似 B.抑制剂与酶作用的底物结构相似
C.抑制作用强弱与抑制剂浓度无关 D.抑制作用不受底物浓度的影响
E.动力学曲线中Km值不变，Vmax变小
21.下列哪个过程是酶原的激活过程 （B）
A.前胶原→原胶原 B.胰岛素原→胰岛素 C.凝血因子I→Ia
D.凝血因子II→IIa E.糖原合成D→I
22. 已知两种酶互为同工酶（D）
A.它们的Km的值一定相同 B.它们的等电点相同 C.它们的分子结构一定相同
D.它们所催化的化学反应相同 E.它们的辅基一定相同
23. 酶促反应的最适温度 （E）
A.随时间延长而升高 B.是酶的特征性常数 C.在人体内为50℃ D.都不超过50℃
E.是在某条件下，酶促反应速度最大时的温度
三、是非题
1. Km是酶的特征常数，只与酶的性质有关，与酶的底物无关。 （×）
2. 酶的最适PH值是一个常数，每一个酶只有一个确定的最适PH值。 （×）
3. 金属离子作为酶的激活剂，有的可以相互取代，有的可以相互拮抗。 （√）
4. 竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。 （×）
5. 正协同效应使酶促反应速度对底物浓度变化越来越敏感。 （√）
6. 从鼠脑分离的己糖激酶可作用于葡萄糖（Km=6X10-6mol/l）或果糖（Km=2X10-3mol/l），则该酶对果糖的亲和力更高。 （×）
7. 判断一个纯化酶的方法优劣的主要依据是酶的比活力和总活力。 （√）
8. 蛋白激酶对蛋白质磷酸化的部位除了Ser，Thr和Tyr外，还有His，Cys，Asp等。（√）
四、名词解释
1. 酶的变构调节: 酶在效应物的作用下发生构象改变，同时引起酶的活性变化的调节方式。是一种可逆的快速调节方式。
2. 酶的活性中心：酶分子中少数几个氨基酸残基组成的特定空间结构，包括结合部位和催化部位。
3. 酶的活力单位: 是指规定条件（最适条件）下一定时间内催化完成一定化学反应量所需的酶量。是衡量酶活力大小的计量单位。有国际酶学会标准单位和习惯单位。
4. 比活力: 每单位（一般是mg）蛋白质中的酶活力单位数（酶单位/mg蛋白），可以表示酶的纯度。
五、计算题
1. 测定一种酶的活性得到下列数据：底物的初浓度：1nmol/10ml；反应时间：10分钟 ；产物生成量：50nmol/10ml；蛋白质浓度：10mg/10ml；反应速度至少在10分钟内与酶活性呈正比，试问此酶的比活力（specific activity）是多少？
把酶的活力单位定义为：在标准的测定条件下，1分钟内生成1摩尔产物所需的酶量。
则此酶的比活力为：50×10-9÷10÷10=5×10-10活力单位/ mg蛋白质
（注意要先根据题意定义酶的活力单位或说明使用国际单位）
2. 焦磷酸酶可以催化焦磷酸水解成磷酸，它的分子量为120000，由6个相同的亚基组成，纯酶的Vmax为2800单位/毫克酶。一个活力单位规定为：在标准的测定条件下，37℃，15分钟内水解10微摩尔焦磷酸所需的酶量。问：
（1）毫克酶在每秒钟内水解了多少摩尔底物？
（2）毫克酶中有多少摩尔的活性中心（假定每个亚基上有一个活性中心）
（3）酶的转换数为多少？
1）根据Vmax为2800单位/毫克酶以及活力单位的规定可得：
2800×10÷（15×60）=31.1μmol= 3.1×10-5mol
2）根据酶的分子量为120000，由6个相同的亚基组成，并假定每个亚基上有一个活性中心，可得：
6×(1÷120000) = 0.00005mmol= 5×10-8mol
3）转换数定义为：每秒钟每摩尔酶（活性中心）催化中心转换底物的摩尔数。则：
Kcat = （3.1×10-5 ）÷（5×10-8）=622 S-1

生化测试四 核酸化学
一、填空题
1．碱基 和 核糖 构成核苷，核苷和 磷酸 构成核苷酸，核苷酸残基之间以 3’-5’磷酸二酯 键相连。
2．tRNA的二级结构呈 三叶草型 ，三级结构呈 倒L 型。
3．稳定DNA双螺旋结构的作用力有 碱基堆积力、氢键 和 静电作用力（盐键）。
4． DNA的稀盐溶液加热至某个特定温度，可使其物化性质发生很大改变，如 紫外吸收增加 和 黏度降低，这种现象叫做 变性。其原因是由于 由于DNA的空间结构被破，内部碱基暴露。
5．Watson－Crick提出的双螺旋结构中，核糖和磷酸 处于分子外边，碱基 处于分子中央，螺旋每上升一圈bp数为10 。
6．mRNA 分子指导蛋白质合成，tRNA 分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。
7．核酸可分为DNA 和RNA 两大类，其中DNA 主要存在于 细胞核中，而 RNA 主要存在于 细胞质中。
8．双链DNA中若 G、C 含量多，则Tm值高。
9．双链DNA螺距为3.4nm，每匝螺旋的碱基数目为10，这是 B型的DNA。
10．DNA双螺旋的熔解温度Tm与GC含量、均一性 和 离子强度 有关。
11．变性DNA的复性和许多因素有关，包括 DNA浓度，DNA长度，均一性，GC含量和 离子强度等。
12．核酸在260nm附近有强吸收，这是由于 碱基环的共轭双键具有紫外吸收的能力。
二、选择题
1．DNA和RNA两类核酸分类的主要化学依据是（D）
A.空间结构不同 B.所含碱基不同 C.核苷酸之间连接方式不同
D.所含戊糖不同 E.在细胞存在的部位不同
2．m G的中文名称是（C）
A. N2，N2 —二甲基鸟嘌呤 B. N2，N2 —二甲基鸟苷
C. C2，C2 —二甲基鸟苷 D. 2’— 甲基鸟苷 E. C2’，C2’ —二甲基鸟苷
3．DNA受热变性，下列叙述正确的是（D）
A. 在260nm波长处的吸光度下降 B. 多核苷酸键断裂成寡核苷酸键
C. 碱基对可形成共价连接 D. 加入互补RNA链并复性，可形成DNA-RNA杂交分子
4．在一个DNA分子中，若A占摩尔比为32.8%，则G摩尔比为（C）
A. 67.2% B.32.8% C. 17.2% D.65.6% E. 16.4%
5．tRNA在发挥其功能时的两个重要部位是（E）
A.反密码子臂和反密码子环 B.氨基酸臂和D环 C.TΨC环和可变环
D. TΨC环和反密码子环 E. 氨基酸臂和反密码子环
6．对于tRNA的叙述，下列哪一项是错误的？（D）
A.细胞内有多种Trna B. tRNA通常由70—80个核苷酸组成
C.参与蛋白质的生物合成 D.相对分子质量一般比mRNA小
E. 每种氨基酸都只有一种tRNA与之对应
7．RNA经NaOH水解，其产物是（E）
A. 5’-核苷酸 B. 2’-核苷酸 C. 3’-核苷酸 D. 2’和3’-核苷酸 E. 2’，3’和5 ’-核苷酸
8．对DNA片段作物理图谱分析，需要用（E）
A.核酸外切酶 B.Dnase I C.DNA连接酶 D.DNA聚合酶 I E.限制性内切酶
9．下列哪一股RNA能够形成局部双螺旋？（B）
A. AACCGACGUACACGACUGAA B. AACCGUCCAGCACUGGACGC
C. GUCCAGUCCAGUCCAGUCCA D. UGGACUGGACUGGACUGGAC
E. AACCGUCCAAAACCGUCAAC
10．Western bootting是用于下列杂交技术中的哪一个（D）
A. DNA-DNA B. RNA-RNA C. DNA-RNA D. 抗体-抗原结合
11．下列关于核酸结构的叙述，那一项是错误的？（B）
A.在双螺旋中，碱基对形成一种近似平面的结构 B.G和C是两个氢键相连
C. 双螺旋中每10对碱基对可使螺旋上升一圈 D. 双螺旋中大多数为右手螺旋，但也有左手螺旋
E. 双螺旋中碱基的连接是非共价结合
12．下列几种不同碱基组成比例的DNA分子，哪一种DNA分子的Tm值最高？（A）
A. A+T=15% B. G+C=25% C. G+C= 40% D. A+T=80% E. G+C= 35%
13．单链DNA：5’—pCpGpGpTpA— 3’，能与下列哪一种RNA单链分子进行杂交？（C）
A. 5-pGpCpCpTpA- 3’ B. 5’-pGpCpCpApU-3’ C. 5’-pUpApCpCpG- 3’
D. 5’-pTpApGpGpC- 3’ E. 5’-pTpUpCpCpG- 3’
14．核酶（ribozgme）的底物是 （B）
A. DNA     B. RNA     C. 核糖体     D. 细胞核膜      E. 核蛋白
15．有关PCR的描述下列哪项不正确:（D）
A.是一种酶促反应 B.引物决定了扩增的特异性 C.扩增的产量按Y=m(1+X)n
D.扩增的对象是氨基酸序列 E.扩增的对象是DNA序列
16.原核生物和真核生物核糖体上都有（B）
 A.18S rRNA     B. 5S rRNA     C. 5.8S rRNA       D. 30S rRNA       E. 28S rRNA  
三、是非题
1．生物信息的流向只能由DNA→RNA，而决不能由RNA→DNA。（×）
2．在生物体内存在的DNA分子多为负超螺旋。（√）
3．若双链DNA中的一条链碱基顺序为pCpTpGpGpApC，则另一条链的顺序为pGpApCpCpTpG。（×）
4．用碱水解核酸，可以得到2’与3’-核苷酸的混合物。（√）
5．tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要标志。（√）
6．导致RNA化学性质更活泼的关键是RNA中的核糖含有2'-OH。（√）
7．核酸内切酶是指能切断磷酸二