微生物培养和应用.pptx
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1、 微生物的类群微生物的类群原生生物:原生生物:原核生物原核生物:真菌真菌:病毒病毒:如酵母菌、霉菌如酵母菌、霉菌单细胞的动植物单细胞的动植物如草履虫、单细胞藻类等如草履虫、单细胞藻类等微生物微生物一般个体微小,包含了除植物界和动物界一般个体微小,包含了除植物界和动物界以外的所有生物以外的所有生物无细胞结构无细胞结构真核细胞真核细胞细菌、蓝藻等细菌、蓝藻等原核细胞原核细胞一、微生物的培养基一、微生物的培养基 1 1、培养基定义:、培养基定义:培养基(培养液)是为培养基(培养液)是为人工培养微生物而制人工培养微生物而制备备的,提供适合微生物生长、繁殖或积累代谢产的,提供适合微生物生长、繁殖或积累代
2、谢产物的营养基质。物的营养基质。思考:微生物细胞的元素组成是什么?思考:微生物细胞的元素组成是什么?2 2、培养基的类型、培养基的类型(1 1)按物理状态分:)按物理状态分:固体培养基固体培养基 液体培养基、液体培养基、半固体培养基半固体培养基。区别区别:加入琼脂的量决定培养基的物理状态。:加入琼脂的量决定培养基的物理状态。琼脂的性质琼脂的性质:熔点:熔点:9696度度凝固点:凝固点:4040度度注意:一般细菌不能利用琼脂。注意:一般细菌不能利用琼脂。单个或者少数微生物在固体培养基表面生长繁单个或者少数微生物在固体培养基表面生长繁殖殖,可以形成肉眼可见子细胞的群体可以形成肉眼可见子细胞的群体菌
3、落菌落固体培养基用途固体培养基用途:用于微生物:用于微生物纯化、计数、鉴定纯化、计数、鉴定菌落菌落细菌的菌落特征细菌的菌落特征因种而异。因种而异。菌落特征菌落特征是微生是微生物鉴定的重要依物鉴定的重要依据据菌苔:菌落连成菌苔:菌落连成片片 液体培养基:工业生产液体培养基:工业生产表面生长表面生长均匀混浊生长均匀混浊生长沉淀生长沉淀生长半固体培养基:观察运动半固体培养基:观察运动无动力无动力 有动力有动力(弥散弥散)(2 2)按成分分:)按成分分:天然培养基、天然培养基、合成培养基合成培养基 半半合成培养基合成培养基。(3 3)按功能分:)按功能分:基础培养基、基础培养基、选择培养基选择培养基
4、鉴别培养基。鉴别培养基。基础培养基基础培养基:含有微生物生长所需的基本物质。:含有微生物生长所需的基本物质。选择培养基选择培养基:培养基:培养基加入加入某种物质或某种物质或缺少缺少某种营养物某种营养物质而质而抑制不需要的微生物生长抑制不需要的微生物生长促进需要的微生物生长。促进需要的微生物生长。举例说明:加链霉素培养基或者加青霉素培养基抑制举例说明:加链霉素培养基或者加青霉素培养基抑制细菌和放线菌的生长,筛选真菌。细菌和放线菌的生长,筛选真菌。无氮培养基抑制非固氮菌生长,筛选固氮菌无氮培养基抑制非固氮菌生长,筛选固氮菌鉴别培养基鉴别培养基:区别微生物:区别微生物 伊红伊红美蓝培养基美蓝培养基
5、产气杆菌菌落大、灰棕色产气杆菌菌落大、灰棕色 大肠杆菌菌落小、绿色金属光泽大肠杆菌菌落小、绿色金属光泽选择培养基和鉴别培养基的比较选择培养基和鉴别培养基的比较种类种类用途用途例例选择培选择培养基养基鉴别培鉴别培养基养基从众多微生物从众多微生物中分离中分离所需所需的的微生物微生物鉴别不同种鉴别不同种类的微生物类的微生物加入青霉素分离得加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌到酵母菌和霉菌伊红伊红美篮培养基美篮培养基使大肠杆菌的菌落使大肠杆菌的菌落呈深紫色,可以鉴呈深紫色,可以鉴别大肠杆菌别大肠杆菌几种选择培养基:加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食
6、盐的培养基加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物分离自养型微生物二、微生物生长需要条件二、微生物生长需要条件 1 1、夏天为什么食物容易腐败?、夏天为什么食物容易腐败?如何处理可以防止腐败?如何处理可以防止腐败?2 2、为什么真空包装的食品不容易腐败?、为什么真空包装的食品不容易腐败?3 3、醋酸是否具有杀菌作用?、醋酸是否具有杀菌作用?以上反应了微生物生长受到哪些条件影响?以上反应了微生物生长受到哪些条件影响?细菌细菌303037 37 霉
7、菌霉菌252528 28 放线菌放线菌25252828 1 12d 34d 57d2d 34d 57d大肠杆菌大肠杆菌 乳酸菌乳酸菌 破伤风杆菌破伤风杆菌 大多数细菌为好氧型大多数细菌为好氧型霉菌霉菌 5.05.06.0 6.0 细菌细菌6.56.57.5 7.5 放线菌放线菌 7.57.58.58.5三、三、培养基的营养物质培养基的营养物质1 1、水水2 2、碳源碳源(提供碳元素的物质)(提供碳元素的物质)3 3、氮源氮源(提供氮元素的物质)(提供氮元素的物质)4 4、无机物无机物(无机盐)(无机盐)5 5、生长因子生长因子(微生物生长不可缺少的微量(微生物生长不可缺少的微量有机物。如维生素
8、、含氮碱基)有机物。如维生素、含氮碱基)碳源碳源可作为碳源的物质有可作为碳源的物质有:a.a.含碳无机物含碳无机物:b.b.含碳有机物:含碳有机物:蛋白质蛋白质脂肪酸脂肪酸不同微生物所利用的碳源不同不同微生物所利用的碳源不同a.异养型微生物异养型微生物的碳源为的碳源为b.自养型微生物自养型微生物的碳源为的碳源为碳酸盐碳酸盐 碳酸氢盐碳酸氢盐二氧化碳二氧化碳糖类(主要)糖类(主要)含碳有机物(有机碳)含碳有机物(有机碳)含碳无机物(无机碳)含碳无机物(无机碳)氮源氮源可作为氮源的物质有可作为氮源的物质有:a.a.含氮无机物:含氮无机物:b.b.含氮有机物:含氮有机物:蛋白胨蛋白胨牛肉膏牛肉膏尿素
9、尿素氮气氮气氨气氨气硝酸盐硝酸盐铵盐铵盐注意:蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、麦芽汁等天然营养物质中既含有碳源又同时含有氮源、生长因子等营养要素1 1、下列细菌中,能利用含碳无机物作碳源的是、下列细菌中,能利用含碳无机物作碳源的是 A A 光合细菌光合细菌 B B 根瘤菌根瘤菌 C C 硝化细菌硝化细菌 D D 乳酸菌乳酸菌2 2、培养大肠杆菌的培养基中,必需含有的碳源和氮源是、培养大肠杆菌的培养基中,必需含有的碳源和氮源是 A A 糖、有机酸等糖、有机酸等 B B 二氧化碳、碳酸盐二氧化碳、碳酸盐 C C 蛋白质蛋白质 D D 无机氮化物无机氮化物A.CA.C 下表关于四种生物的能源、碳源、氮源、新
10、陈代谢的类型,描述正确的是硝化细菌硝化细菌乳酸细菌乳酸细菌根瘤菌根瘤菌衣藻衣藻能源NH3乳糖固定N2光能碳源CO2糖类糖类CO2氮源NH3N2N2NO2-新陈代谢类型自养需氧型 异养厌氧性 异养厌氧性 自养需氧型1000mL1000mL牛肉膏蛋白胨固体培养基配方牛肉膏蛋白胨固体培养基配方牛肉膏蛋白胨固体培养基配方牛肉膏蛋白胨固体培养基配方培养基组分培养基组分提供的主要营养提供的主要营养牛肉膏牛肉膏牛肉膏牛肉膏 5.0g5.0g碳源、氮源、磷酸盐和维生碳源、氮源、磷酸盐和维生素素蛋白胨蛋白胨蛋白胨蛋白胨 10.0g10.0g 氮源和维生素氮源和维生素NaCl 5.0gNaCl 5.0g 无机盐无
11、机盐HH2 2O O 定容至定容至定容至定容至1000ml1000ml 氢元素、氧元素氢元素、氧元素(2 2)特殊营养:)特殊营养:生长因子生长因子 细菌生长必需,而往往自身不能合成的细菌生长必需,而往往自身不能合成的化合物,如化合物,如维生素、某些氨基酸、碱基维生素、某些氨基酸、碱基等等(3 3)pHpH、氧气等要求、氧气等要求四:营养基配制的原则1:目的要明确目的要明确 配制培养基要根据配制培养基要根据 培养的微生物、培养培养的微生物、培养的目的、培养基的用途来确定培养基的化的目的、培养基的用途来确定培养基的化学成分、物理状态。学成分、物理状态。2:营养要协调营养要协调3:PH要适宜要适宜
12、 五、五、培养基的配制过程培养基的配制过程(一)、细菌培养基的配制(一)、细菌培养基的配制1.1.计算计算:100ml:100ml蒸馏水中各物质的量。蒸馏水中各物质的量。2.2.称量称量:注意牛肉膏的粘稠度大。:注意牛肉膏的粘稠度大。3.3.溶化溶化:牛肉膏连同称量纸一同放入牛肉膏连同称量纸一同放入 不断搅拌不断搅拌4.4.调节调节PH:PH:7.07.27.07.2思考:判断该培养基的作用是什么?思考:判断该培养基的作用是什么?加热、溶化 5.5.分装:分装:培养基高培养基高度度1/51/5 不要污染不要污染试管口试管口 棉塞塞紧棉塞塞紧6 6、包扎包扎 3-5 3-5支支试管扎成试管扎成一
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