微生物检验G球菌.pptx
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1、二、临床意义致病物质:致病物质:酶酶 血浆凝固酶血浆凝固酶 耐热核酸酶耐热核酸酶毒素毒素 葡萄球菌溶素葡萄球菌溶素 杀白细胞素杀白细胞素 肠毒素肠毒素 表皮剥脱毒素表皮剥脱毒素 毒性休克综合征毒素毒性休克综合征毒素金黄色葡萄球菌所致疾病 感染类型感染类型 所致疾病所致疾病侵袭性侵袭性局部感染:疖、痈、毛囊炎、局部感染:疖、痈、毛囊炎、伤口化脓、内脏器官感染伤口化脓、内脏器官感染全身感染:败血症、脓毒血症全身感染:败血症、脓毒血症毒素性毒素性假膜性肠炎、食物中毒假膜性肠炎、食物中毒凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)所致疾病1、CoNS是人体皮肤黏膜正常菌群之一,是医院感是人体皮肤黏膜正常菌群之一,是
2、医院感染的主要病原菌。染的主要病原菌。2、表皮葡萄球菌:人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管、表皮葡萄球菌:人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、血管移植物感染和人感染、腹膜透析性腹膜炎、血管移植物感染和人工关节感染等。工关节感染等。3、腐生葡萄球菌:女性尿路感染的重要病原菌。、腐生葡萄球菌:女性尿路感染的重要病原菌。1.菌体形态:球形,葡萄串状,无鞭毛,无芽菌体形态:球形,葡萄串状,无鞭毛,无芽胞,体外培养无荚膜。革兰染色阳性球菌。胞,体外培养无荚膜。革兰染色阳性球菌。2.培养特性:兼性厌氧,易培养,在普通平培养特性:兼性厌氧,易培养,在普通平板、板、血平板上生长良好。大部分菌落产生血
3、平板上生长良好。大部分菌落产生有色素:金黄色、白色、有色素:金黄色、白色、柠檬色。柠檬色。有些菌溶血,产生透明的有些菌溶血,产生透明的溶血环。溶血环。三、生物学特性3.生化反应和抗原构造生化反应和抗原构造触酶阳性触酶阳性多数菌分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖,产酸多数菌分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖,产酸不产气。不产气。4.抵抗力抵抗力对外界因素的抵抗力强于其他无芽胞菌。对外界因素的抵抗力强于其他无芽胞菌。干燥脓汁、痰液中可存活干燥脓汁、痰液中可存活23个月。个月。耐盐性强,能在耐盐性强,能在10%15%NaCl培养基中生长。培养基中生长。易产生耐药性,对青霉素易产生耐药性,对青霉素G的耐药性已达的耐药性已
4、达90%以上,尤以上,尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA已经成为医院内已经成为医院内感染最常见的致病菌。感染最常见的致病菌。病原性葡萄球菌一般分布在人的皮肤和鼻咽部,带菌病原性葡萄球菌一般分布在人的皮肤和鼻咽部,带菌率达率达20%50%,医务人员带菌率达,医务人员带菌率达70%,是医院内交,是医院内交叉感染的重要传染源。叉感染的重要传染源。(一)标本采集(一)标本采集根据感染的部位,采集不同的标本。根据感染的部位,采集不同的标本。该属细菌广泛分布在人体皮肤和黏膜,采取时避免病该属细菌广泛分布在人体皮肤和黏膜,采取时避免病灶周围正常菌群污染。灶周围正常菌群污染。四
5、、微生物检验(二)检验程序(二)检验程序(三)标本直接检查(三)标本直接检查无菌体液如脑脊液和穿刺液可直接涂片、革兰染色无菌体液如脑脊液和穿刺液可直接涂片、革兰染色后直接显微镜检查,查见细菌具有重要临床价值。后直接显微镜检查,查见细菌具有重要临床价值。其他体液标本如同时伴有炎性细胞时则直接显微镜其他体液标本如同时伴有炎性细胞时则直接显微镜检查结果也具有参考价值。检查结果也具有参考价值。涂片检查发现有形态相似的革兰阳性球菌,则可初涂片检查发现有形态相似的革兰阳性球菌,则可初步报告步报告“查见类似葡萄球菌属革兰阳性球菌查见类似葡萄球菌属革兰阳性球菌”,并,并进一步进行分离和鉴定予以证实。进一步进行
6、分离和鉴定予以证实。(四)分离培养与鉴定(四)分离培养与鉴定脓液、分泌物等接种于血琼脂平板脓液、分泌物等接种于血琼脂平板有污染的标本如粪便等应接种在选择平板上,如甘露醇有污染的标本如粪便等应接种在选择平板上,如甘露醇高盐平板、哥伦比亚多粘菌素奈啶酸平板高盐平板、哥伦比亚多粘菌素奈啶酸平板血液标本则用肉汤增菌培养基血液标本则用肉汤增菌培养基 1.菌落与菌体形态菌落与菌体形态 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌直径直径68mn,金黄色或橙色,菌落周围出现或不出现透明溶血环,金黄色或橙色,菌落周围出现或不出现透明溶血环表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌直径为直径为56mm,某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面,无色或
7、白,某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面,无色或白色色溶血葡萄球菌溶血葡萄球菌直径直径59mm,不透明,无色素或奶油色、黄色,不透明,无色素或奶油色、黄色里昂葡萄球菌里昂葡萄球菌直径直径47mm,边缘整齐稍扁,奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似,边缘整齐稍扁,奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌直径直径58mm,白色或柠檬色,白色或柠檬色 注意注意:菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实,甘露醇高盐平板:菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实,甘露醇高盐平板上金黄色葡萄球菌菌落为黄色。上金黄色葡萄球菌菌落为黄色。2凝固酶试验凝固酶试验 玻片法玻片法-测定结合型凝固酶测定结合型凝固酶
8、试管法试管法-测定分泌型凝固酶测定分泌型凝固酶金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌呈金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌呈现阳性反应现阳性反应 3耐热核酸酶试验耐热核酸酶试验 大多数金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、大多数金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌、猪葡萄球菌能产生耐热中间葡萄球菌、猪葡萄球菌能产生耐热核酸酶。核酸酶。表皮葡萄球菌、模仿葡萄球菌、肉葡萄表皮葡萄球菌、模仿葡萄球菌、肉葡萄球菌含微弱耐热核酸酶。球菌含微弱耐热核酸酶。4磷酸酶试验磷酸酶试验 大多数的表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球大多数的表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌和猪菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌和猪葡萄球菌
9、为阳性。葡萄球菌为阳性。将待测菌种点种在加有硝基酚磷酸盐的将待测菌种点种在加有硝基酚磷酸盐的pH5.66.8 MH琼脂上,孵育琼脂上,孵育1824h,菌落周围出现黄色为阳性。菌落周围出现黄色为阳性。定义:定义:凡对甲氧西林、苯唑西林、头孢凡对甲氧西林、苯唑西林、头孢西丁耐药,或西丁耐药,或PBP2aPBP2a阳性、阳性、mecAmecA基因基因阳性的葡萄球菌定义为耐甲氧西林葡阳性的葡萄球菌定义为耐甲氧西林葡萄球菌(萄球菌(MRSMRS)。)。耐甲氧西林葡萄球菌*耐甲氧西林葡萄球菌(耐甲氧西林葡萄球菌(耐甲氧西林葡萄球菌(耐甲氧西林葡萄球菌(MRSAMRSAMRSAMRSA、MRSEMRSEMR
10、SEMRSE)的含义)的含义)的含义)的含义:1.1.对所有对所有对所有对所有 -内酰胺类内酰胺类内酰胺类内酰胺类(青霉素类,头孢菌素类,碳青霉素类,头孢菌素类,碳青霉素类,头孢菌素类,碳青霉素类,头孢菌素类,碳青霉烯类青霉烯类青霉烯类青霉烯类)抗生素耐药。抗生素耐药。抗生素耐药。抗生素耐药。2.2.对绝大多数的大环内酯类、氨基糖苷类、氟喹对绝大多数的大环内酯类、氨基糖苷类、氟喹对绝大多数的大环内酯类、氨基糖苷类、氟喹对绝大多数的大环内酯类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、四环素类、磺胺类也耐药。诺酮类、四环素类、磺胺类也耐药。诺酮类、四环素类、磺胺类也耐药。诺酮类、四环素类、磺胺类也耐药。3.3.万
11、古霉素万古霉素万古霉素万古霉素、替考拉宁和替考拉宁和替考拉宁和替考拉宁和利奈唑胺敏感。利奈唑胺敏感。利奈唑胺敏感。利奈唑胺敏感。第二节第二节 链球菌属链球菌属(Streptococcus)传统分类传统分类Lancefield抗原血清分型抗原血清分型种系分类法种系分类法溶血现象溶血现象丙型(丙型()链球菌)链球菌甲型(甲型()溶血性链球菌)溶血性链球菌乙型(乙型()溶血性链球菌)溶血性链球菌血清群与溶血特性没有相关性血清群与溶血特性没有相关性 遗传学和血清学分型不能统一遗传学和血清学分型不能统一 一、分类不溶血不溶血D群链球菌:牛链球菌群链球菌:牛链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性
12、链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌草绿色链球菌草绿色链球菌A、C、G群群B群:无乳链球菌群:无乳链球菌化脓、马、似马链球菌化脓、马、似马链球菌米勒链球菌米勒链球菌二、临床意义酶:链激酶、链道酶、透明质酸酶酶:链激酶、链道酶、透明质酸酶脂磷壁酸脂磷壁酸化化脓脓性性链链球球菌菌 肺肺炎炎链链球球菌菌致病物质致病物质所致疾病所致疾病毒素:链球菌溶素毒素:链球菌溶素O和和S、红疹毒素、红疹毒素M蛋白蛋白致病物质:荚膜、溶血素、神经氨酸酶致病物质:荚膜、溶血素、神经氨酸酶 所致疾病:大叶性肺炎、支气管炎、中耳炎、乳突炎、所致疾病:大叶性肺炎、支气管炎、中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症。鼻窦炎、脑膜炎和菌血
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