微生物的培养与利用.pptx
《微生物的培养与利用.pptx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《微生物的培养与利用.pptx(54页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、微生物的培养与利用微生物的培养与利用微生物的微生物的培养与分离培养与分离某种微生物数量的某种微生物数量的测定测定培养基对微生物的培养基对微生物的选择选择作用作用利用微生物进行利用微生物进行发酵发酵来生产特定的产物来生产特定的产物发酵过程中发酵过程中亚硝酸盐亚硝酸盐含量的测定含量的测定微生物微生物 原核生物界原核生物界 原生生物界原生生物界真菌界真菌界病毒界病毒界一、微生物的类群一、微生物的类群(细菌、放线菌、蓝藻细菌、放线菌、蓝藻)(酵母菌、霉菌、大型真菌酵母菌、霉菌、大型真菌)(草履虫、变形虫、衣藻草履虫、变形虫、衣藻)(噬菌体、艾滋病毒噬菌体、艾滋病毒)特点:结构都相当特点:结构都相当简单
2、简单,个体多数十分个体多数十分微小微小.通通常要用常要用光学显微镜或电子显微镜光学显微镜或电子显微镜才能看到,有才能看到,有的甚至没有细胞结构的甚至没有细胞结构.类群类群结构特点结构特点遗传物质遗传物质繁殖方式繁殖方式举例举例病毒病毒原核原核生物界生物界真菌界真菌界原生原生生物界生物界无细胞结构无细胞结构原核原核(细胞细胞壁、膜、质壁、膜、质)真核真核(细胞壁、细胞壁、膜、质、核膜、质、核)真核真核(细胞膜、细胞膜、质、核质、核)噬菌体噬菌体烟草花叶病烟草花叶病毒毒流感病毒流感病毒细菌细菌(形状形状菌菌)放线菌放线菌霉菌、蘑霉菌、蘑菇、酵母菇、酵母菌菌衣藻、草衣藻、草履虫、变履虫、变形虫形虫D
3、NADNA或或RNARNADNADNADNADNADNADNA增殖:吸附增殖:吸附注入注入合合成成装配装配释放释放分裂生殖分裂生殖(二分裂二分裂)孢子生殖孢子生殖出芽生殖出芽生殖分裂生殖分裂生殖有性生殖有性生殖拟核,大型环状拟核,大型环状DNADNA质粒质粒(含抗生素抗药性,固氮基因含抗生素抗药性,固氮基因)其成分为其成分为肽聚糖肽聚糖芽孢芽孢细菌的细菌的休眠体休眠体,对,对恶劣的环境有抵抗力恶劣的环境有抵抗力细菌的营养细菌的营养异养型异养型自养型自养型蓝藻蓝藻 硝化细菌等硝化细菌等寄生寄生腐生腐生菌落菌落可作为菌可作为菌种鉴定的重要种鉴定的重要依据依据细菌的代谢细菌的代谢自养自养硝化细菌、铁
4、细菌、硫细菌等。硝化细菌、铁细菌、硫细菌等。异养异养大肠杆菌、乳酸菌、枯草杆菌等。大肠杆菌、乳酸菌、枯草杆菌等。枯草杆菌、硝化细菌、铁细菌、根瘤菌等。枯草杆菌、硝化细菌、铁细菌、根瘤菌等。破伤风杆菌、乳酸菌等。破伤风杆菌、乳酸菌等。需氧型:需氧型:厌氧型:厌氧型:二、培养基:二、培养基:培养基(培养液)是培养基(培养液)是由人工方法配制而成的,由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。液。、概念:、概念:、营养成份:、营养成份:营养成份:水、碳源、氮源、无机盐营养成份:水、碳源、氮源、无机盐其它:、特殊营养物质、氧气(其它:、特殊营养物质、氧气(
5、15)3 3、培养基的类型和用途、培养基的类型和用途(1 1)按物理状态来分:)按物理状态来分:固体培养基固体培养基和和液体培养基液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。(2 2)按功能来分,可分为)按功能来分,可分为选择培养基选择培养基和和鉴别培养基鉴别培养基。(3 3)按成分来分,可分为)按成分来分,可分为天然培养基天然培养基和和合成培养基合成培养基。(4 4)选择培养基的常见用途)选择培养基的常见用途加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基 分离金黄色
6、葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基 分离固氮微生物分离固氮微生物不加含碳有机物的无碳培养基不加含碳有机物的无碳培养基 分离自养型微生物分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基加入青霉素等抗生素的培养基 分离导入了目的基因的受体细胞分离导入了目的基因的受体细胞1 1、伊红美蓝培养基为常用鉴别培养基、伊红美蓝培养基为常用鉴别培养基 2 2、刚果红与纤维素等多糖类物质反应形成红色复合刚果红与纤维素等多糖类物质反应形成红色复合物,添加物,添加刚果红刚果红的培养基呈的培养基呈红色红色,接种的微生物若能,接种的微生物若能够分解纤维素,就会在其菌落的周围形成够分解纤维素,就
7、会在其菌落的周围形成透明圈透明圈 (5)鉴别培养基4、培养基配制的操作步骤:、培养基配制的操作步骤:三、无菌技术操作三、无菌技术操作 无菌操作泛指无菌操作泛指在培养微生物的操作中,在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。所有防止杂菌污染的方法。定义常用方法微生物培养和组培的应用消毒使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分菌体,但不伤及活组织煮沸玻璃仪器紫外线实验室、操作台、衣物等酒精溶液手、外植体等次氯酸钠溶液等外植体灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有菌体、芽孢和孢子高压蒸汽培养基、玻璃仪器、棉塞、牛皮纸等灼烧接种环、涂布器等干热玻璃仪器四、微生物的纯化培养:四、微生物的
8、纯化培养:自然环境中,微生物混在一起生长,要想纯自然环境中,微生物混在一起生长,要想纯化培养,首先要将单个细胞与其他细胞分离开,化培养,首先要将单个细胞与其他细胞分离开,进而培养成可见的群体。进而培养成可见的群体。包括培养基的制备和纯化微生物两个阶段,包括培养基的制备和纯化微生物两个阶段,纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。释涂布平板法。(一)(一).微生物实验室培养的基本操作程序微生物实验室培养的基本操作程序1 1、器具的灭菌、器具的灭菌2 2、培养基的配制、培养基的配制3 3、培养基的灭菌、培养基的灭菌4 4、倒平板、倒平板5
9、5、微生物接种、微生物接种6 6、恒温箱中培养、恒温箱中培养7 7、菌种的保存、菌种的保存1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算计算称量称量溶化溶化灭菌灭菌倒平板倒平板(1)、)、溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热?可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于水中可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于水中,减少误差减少误差。(2)、加琼脂的目的是什么)、加琼脂的目的是什么?作为凝固剂作为凝固剂(二)、纯化大肠杆菌(二)、纯化大肠杆菌计算计算称量称量溶化溶化灭菌灭菌倒平板倒平板3、在灭菌前在灭菌前,用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养用牛皮纸、旧
10、报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么?基的锥形瓶的目的是什么?在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞,在取出培在取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中杂菌污染的作用养基锥形瓶时也起到隔绝空气中杂菌污染的作用。4、培养皿能否用高压蒸汽灭菌?培养皿能否用高压蒸汽灭菌?不能不能,因为培养皿要保持干燥因为培养皿要保持干燥,应该用干热灭菌应该用干热灭菌。(一)(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基5、倒平板、倒平板(二)纯化大肠杆菌(二)纯化大肠杆菌(一)(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基三、纯化大肠杆菌三、纯化大肠杆菌(二)纯化大
11、肠杆菌(二)纯化大肠杆菌1、接种最常用方法有:、接种最常用方法有:(一)(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基三、纯化大肠杆菌三、纯化大肠杆菌(二)纯化大肠杆菌(二)纯化大肠杆菌1、接种最常用方法有:、接种最常用方法有:平板划线法和稀释涂布平板法平板划线法和稀释涂布平板法(一)(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基三、纯化大肠杆菌三、纯化大肠杆菌(二)纯化大肠杆菌(二)纯化大肠杆菌1、接种最常用方法有:、接种最常用方法有:平板划线法和稀释涂布平板法平板划线法和稀释涂布平板法2、平板划线法、平板划线法(一)(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固
12、体培养基三、纯化大肠杆菌三、纯化大肠杆菌划线接种的基本步骤和说明:序列序列 操作步骤操作步骤分析说明分析说明1 1将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红将接种环灭菌,避免污染菌种将接种环灭菌,避免污染菌种2 2在火焰旁冷却接种环,拔除盛有菌液的试管棉塞在火焰旁冷却接种环,拔除盛有菌液的试管棉塞避免杂菌污染菌种避免杂菌污染菌种3 3将试管口通过火焰将试管口通过火焰灼烧灭菌,防止试管口菌体污染培养基灼烧灭菌,防止试管口菌体污染培养基4 4将已冷却的接种环伸入菌液中,沾取菌液将已冷却的接种环伸入菌液中,沾取菌液冷却接种环可避免杀死菌种冷却接种环可避免杀死菌种5
13、5将试管口通过火焰,并塞上棉塞将试管口通过火焰,并塞上棉塞避免试管口杂菌污染菌种避免试管口杂菌污染菌种6 6左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖。注意不要划破培养基皿盖。注意不要划破培养基初步接种。划破培养基不利于后续的继初步接种。划破培养基不利于后续的继续划线,长出的菌落不标准续划线,长出的菌落不标准7 7灼烧接种环,冷却后从第一区划线的末端向第二灼烧接种环,冷却后从第一区划线的末端向第二区划线。重复以上操作,在第三、四、五区划线。区划线。重复以上操作,在第
14、三、四、五区划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连注意不要将最后一区的划线与第一区相连从上个区域的末端向下个区域划线从上个区域的末端向下个区域划线,可逐可逐步分离出单个菌体,从而实现微生物的步分离出单个菌体,从而实现微生物的纯化纯化8 8将平板倒置,放入培养箱中培养将平板倒置,放入培养箱中培养倒置平板防止水分蒸发,也方便拿放倒置平板防止水分蒸发,也方便拿放1、接种最常用方法有:、接种最常用方法有:平板划线法和稀释涂布平板法平板划线法和稀释涂布平板法2、平板划线法、平板划线法3、稀释涂布法、稀释涂布法(1)系列稀释操作系列稀释操作:(二)纯化大肠杆菌(二)纯化大肠杆菌(一)(一)制备牛肉膏蛋
15、白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基三、纯化大肠杆菌三、纯化大肠杆菌(1)系列稀释操作:1、接种最常用方法有:、接种最常用方法有:平板划线法和稀释涂布平板法平板划线法和稀释涂布平板法2、平板划线法、平板划线法3、稀释涂布法、稀释涂布法(1)系列稀释操作系列稀释操作:(二)纯化大肠杆菌(二)纯化大肠杆菌(一)(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基三、纯化大肠杆菌三、纯化大肠杆菌(2)涂布平板操作涂布平板操作(2)涂布平板操作1、接种最常用方法有:、接种最常用方法有:2、平板划线法、平板划线法3、稀释涂布法、稀释涂布法(二)纯化大肠杆菌(二)纯化大肠杆菌(一)(一)制备牛肉
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 微生物 培养 利用
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【a199****6536】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【a199****6536】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。