果蝇培养麻醉及雌雄鉴别.pptx

实验四实验四 果蝇培养、麻醉及雌雄鉴别果蝇培养、麻醉及雌雄鉴别一一一一 实验目的实验目的实验目的实验目的 通过实验掌握人工饲养果蝇的方法，了解果蝇的通过实验掌握人工饲养果蝇的方法，了解果蝇的通过实验掌握人工饲养果蝇的方法，了解果蝇的通过实验掌握人工饲养果蝇的方法，了解果蝇的生活史，学会鉴别果蝇的雌雄，从而熟悉遗传学上广生活史，学会鉴别果蝇的雌雄，从而熟悉遗传学上广生活史，学会鉴别果蝇的雌雄，从而熟悉遗传学上广生活史，学会鉴别果蝇的雌雄，从而熟悉遗传学上广泛使用的材料，为以后运用果蝇进行遗传试验作好准泛使用的材料，为以后运用果蝇进行遗传试验作好准泛使用的材料，为以后运用果蝇进行遗传试验作好准泛使用的材料，为以后运用果蝇进行遗传试验作好准备。备。备。备。二二 预备知识预备知识果蝇是双翅目昆虫，具有生活史短，繁殖率高、饲养果蝇是双翅目昆虫，具有生活史短，繁殖率高、饲养简便等特点，是研究遗传学的经典好材料简便等特点，是研究遗传学的经典好材料。果蝇的生活史：卵果蝇的生活史：卵幼虫幼虫蛹蛹成虫，最适温度成虫，最适温度2025。从卵到成虫约。从卵到成虫约10天，在天，在25 时成虫约活时成虫约活15天。连续天。连续30 以上的温度能使果蝇不孕或死亡。以上的温度能使果蝇不孕或死亡。卵：果蝇卵约长卵：果蝇卵约长0.5毫米，外围是一层由细胞组成的六角毫米，外围是一层由细胞组成的六角形小格的包膜的卵壳，在背面的前端伸出一对触丝，使卵形小格的包膜的卵壳，在背面的前端伸出一对触丝，使卵生产在柔软的食物不致下沉。生产在柔软的食物不致下沉。幼虫期：幼虫从卵中孵化出来要经过两次脱皮，所以幼幼虫期：幼虫从卵中孵化出来要经过两次脱皮，所以幼 虫包括三个阶段（龄）。虫包括三个阶段（龄）。蛹化：当幼虫准备准备化蛹时，它们从培养基中爬出来蛹化：当幼虫准备准备化蛹时，它们从培养基中爬出来蛹化：当幼虫准备准备化蛹时，它们从培养基中爬出来蛹化：当幼虫准备准备化蛹时，它们从培养基中爬出来 附在较干燥的表面，果蝇在末附在较干燥的表面，果蝇在末附在较干燥的表面，果蝇在末附在较干燥的表面，果蝇在末龄龄幼虫的皮中化蛹，幼虫的皮中化蛹，幼虫的皮中化蛹，幼虫的皮中化蛹，起初白、软，后渐色深、硬，最后发育成一个有起初白、软，后渐色深、硬，最后发育成一个有起初白、软，后渐色深、硬，最后发育成一个有起初白、软，后渐色深、硬，最后发育成一个有成虫体型与器官的个体，这些转变完成以后，成成虫体型与器官的个体，这些转变完成以后，成成虫体型与器官的个体，这些转变完成以后，成成虫体型与器官的个体，这些转变完成以后，成体就从蛹壳的前端强挤出来。体就从蛹壳的前端强挤出来。体就从蛹壳的前端强挤出来。体就从蛹壳的前端强挤出来。果蝇图片果蝇图片雌蝇雌蝇雄蝇雄蝇长翅果蝇长翅果蝇短翅果蝇短翅果蝇白眼白眼红眼果蝇红眼果蝇三三 实验材料实验材料 果蝇果蝇果蝇果蝇 1818野生型（野生型（野生型（野生型（5 5组）；组）；组）；组）；2222白眼（白眼（白眼（白眼（6 68 8组）；组）；组）；组）；6 6短短短短翅白眼；翅白眼；翅白眼；翅白眼；e e黑檀体黑檀体黑檀体黑檀体四四 实验仪器及用具实验仪器及用具 双筒解剖镜，广口瓶、解剖针、标签、天平，双筒解剖镜，广口瓶、解剖针、标签、天平，双筒解剖镜，广口瓶、解剖针、标签、天平，双筒解剖镜，广口瓶、解剖针、标签、天平，量筒、棉花、纱布、玻璃棒、电炉、烧杯量筒、棉花、纱布、玻璃棒、电炉、烧杯量筒、棉花、纱布、玻璃棒、电炉、烧杯量筒、棉花、纱布、玻璃棒、电炉、烧杯五五 药品和试剂药品和试剂 琼脂、玉米粉、蔗糖、酵母、乙酸、乙醚琼脂、玉米粉、蔗糖、酵母、乙酸、乙醚琼脂、玉米粉、蔗糖、酵母、乙酸、乙醚琼脂、玉米粉、蔗糖、酵母、乙酸、乙醚六、实验步骤六、实验步骤1 1 培养瓶的准备：培养瓶的准备：培养瓶的准备：培养瓶的准备：无色透明的广口瓶，用自来水洗净，倒置滤水备用。用无色透明的广口瓶，用自来水洗净，倒置滤水备用。用无色透明的广口瓶，用自来水洗净，倒置滤水备用。用无色透明的广口瓶，用自来水洗净，倒置滤水备用。用棉花、外包纱布，做成与瓶口大小相等的棉塞，棉花、外包纱布，做成与瓶口大小相等的棉塞，棉花、外包纱布，做成与瓶口大小相等的棉塞，棉花、外包纱布，做成与瓶口大小相等的棉塞，气消毒。气消毒。气消毒。气消毒。2 2 果蝇培养基的配制：果蝇培养基的配制：果蝇培养基的配制：果蝇培养基的配制：n n水琼脂蔗糖玉米粉丙酸水琼脂蔗糖玉米粉丙酸水琼脂蔗糖玉米粉丙酸水琼脂蔗糖玉米粉丙酸 酵母酵母酵母酵母n n100ml 1.2-1.5g100ml 1.2-1.5g 10-13g 10-13g 10 g10 g 0.5 ml0.5 ml 0.5 g0.5 g1 1）配制时先将）配制时先将）配制时先将）配制时先将1/21/2的水把琼脂放入烧杯中溶解。的水把琼脂放入烧杯中溶解。的水把琼脂放入烧杯中溶解。的水把琼脂放入烧杯中溶解。2 2）用剩余）用剩余）用剩余）用剩余1/21/2水将玉米粉调成糊状，加入烧杯中煮沸，最后加水将玉米粉调成糊状，加入烧杯中煮沸，最后加水将玉米粉调成糊状，加入烧杯中煮沸，最后加水将玉米粉调成糊状，加入烧杯中煮沸，最后加糖煮沸数分钟即可，滴入乙酸即可。糖煮沸数分钟即可，滴入乙酸即可。糖煮沸数分钟即可，滴入乙酸即可。糖煮沸数分钟即可，滴入乙酸即可。3 3）待培养基稍凉，每个广口瓶倒入）待培养基稍凉，每个广口瓶倒入）待培养基稍凉，每个广口瓶倒入）待培养基稍凉，每个广口瓶倒入10-30mL10-30mL的培养基，冷却后的培养基，冷却后的培养基，冷却后的培养基，冷却后加入少量酵母粉。加入少量酵母粉。加入少量酵母粉。加入少量酵母粉。3果蝇的麻醉：果蝇的麻醉：n n将所需麻醉的果蝇引入一新瓶中，以乙醚作将所需麻醉的果蝇引入一新瓶中，以乙醚作为麻醉剂（三滴左右），在其棉塞上滴上数为麻醉剂（三滴左右），在其棉塞上滴上数滴乙醚，制成麻醉瓶。瓶内果蝇全部跌落不滴乙醚，制成麻醉瓶。瓶内果蝇全部跌落不动时，即可进行观察。动时，即可进行观察。5 果蝇的雌雄鉴别：果蝇的雌雄鉴别：将麻醉的果蝇置于载波片，在显微镜下（将麻醉的果蝇置于载波片，在显微镜下（4倍倍或或10倍）鉴别雌雄果蝇。倍）鉴别雌雄果蝇。1 1）体型体型体型体型：雌果蝇体型较大，雄的较小。：雌果蝇体型较大，雄的较小。：雌果蝇体型较大，雄的较小。：雌果蝇体型较大，雄的较小。2 2）腹部末端腹部末端腹部末端腹部末端：雌果蝇腹部椭圆末端稍尖，雄果蝇末端钝圆。：雌果蝇腹部椭圆末端稍尖，雄果蝇末端钝圆。：雌果蝇腹部椭圆末端稍尖，雄果蝇末端钝圆。：雌果蝇腹部椭圆末端稍尖，雄果蝇末端钝圆。3 3）腹部背面腹部背面腹部背面腹部背面：雌果蝇有明显：雌果蝇有明显：雌果蝇有明显：雌果蝇有明显5 5条黑色条纹，雄果蝇的有条黑色条纹，雄果蝇的有条黑色条纹，雄果蝇的有条黑色条纹，雄果蝇的有3 3条，前条，前条，前条，前2 2条细，后条细，后条细，后条细，后1 1条宽，延至腹面，肉眼可见腹部末端有一明显黑点。条宽，延至腹面，肉眼可见腹部末端有一明显黑点。条宽，延至腹面，肉眼可见腹部末端有一明显黑点。条宽，延至腹面，肉眼可见腹部末端有一明显黑点。4）腹部腹面腹部腹面：雌果蝇有较明显的雌果蝇有较明显的6个腹片，雄果蝇个腹片，雄果蝇有有4个腹片。个腹片。5）性梳性梳：雄果蝇第一节足底侧最上部附足前端表：雄果蝇第一节足底侧最上部附足前端表面有黑色鬃毛性梳。面有黑色鬃毛性梳。雌雄果蝇图片雌雄果蝇图片6 原种培养原种培养n n1）先检查，看果蝇有没有混杂。）先检查，看果蝇有没有混杂。n n2）每瓶接种）每瓶接种3-4对，空瓶在上面，自己会飞对，空瓶在上面，自己会飞上去，再数数雌雄数目。上去，再数数雌雄数目。n n3）贴上标签，注明品名，日期，培养人。贴上标签，注明品名，日期，培养人。n n作业：作业：简述果蝇的雌雄区别。简述果蝇的雌雄区别。观察到的性梳可以画下来。观察到的性梳可以画下来。